細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程培訓課件

細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程細菌性食源性疾病其主要臨床特征兩個案例沙門氏菌金黃色葡萄球菌細菌性食源性疾病概述

01病原學檢驗規(guī)程02兩種種常見病原菌的檢測03細菌性食源性疾病及其病原學檢驗規(guī)程現(xiàn)場調查、采樣、送檢樣品處理及檢測結果判定及報告檢驗樣品處置及檢出菌種保存2細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程細菌性食源性疾病由細菌通過攝食而進入人體的，使人體患感染性或中毒性的一類疾病。屬食源性疾病范疇，主要包括細菌性腸道傳染病和細菌性食物中毒3細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程細菌性腸道傳染病屬我國法定傳染病，主要包括霍亂、痢疾、傷寒、副傷寒及新近參照傳染病管理的由腸出血性大腸埃希菌O157引起的出血性腸炎4細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程細菌性食物中毒人體攝入了被細菌或其毒素污染的食品后所出現(xiàn)的非傳染性急性、亞急性疾病如：沙門氏菌（除傷寒、甲、乙、丙、副傷寒沙門菌）、副溶血弧菌、變形桿菌、致瀉性大腸埃希氏菌（除O157）、葡萄球菌（腸毒素）、空腸彎曲菌、單增李斯特菌等5細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程細菌性食源性疾病有關癥狀與病原學檢驗項目、檢驗樣品關系

6細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程廣州大學城食物中毒事件廣州中醫(yī)藥大學大學城校區(qū)第二飯?zhí)迷?006年4月12日發(fā)生的食物中毒事件，累計有258名學生及員工到醫(yī)院就診，實際符合中毒的病例有206人。截至4月18日上午，全部就診患者治愈出院。7細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程事件原因經(jīng)調查，此事件被確認為由沙門氏菌引起的食物中毒。造成食物中毒的主要原因是廣州中醫(yī)藥大學大學城校區(qū)第二飯?zhí)檬⒀b食品的容器、分切熟食的菜板等工具沒有按規(guī)定進行消毒。4月10和11日這兩天恰逢廣州氣溫高，細菌繁殖快，4月11日向學生供應的午餐、晚餐中，飯?zhí)檬称肥艿搅巳萜骱筒税迳夏c炎沙門氏菌的污染。番禺區(qū)衛(wèi)生監(jiān)督所對這一飯?zhí)米龀隽说蹁N衛(wèi)生許可證和罰款5萬元的處理。8細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程肉毒梭菌

新疆察布查爾地區(qū)是我國肉毒梭菌中毒多發(fā)地區(qū)，以該地區(qū)為例，其土壤中該菌檢出率為22.2％，未開墾荒地該菌檢出率為28.25％，該地區(qū)糧谷、豆類經(jīng)厭氧條件的發(fā)酵制品該菌檢出率分別為12.6％和14.88％。

青海省1960～1995年間共發(fā)生肉毒中毒45起，主要分布在牧區(qū)，中毒食品是動物性食品主要是密封越冬牛肉，食用方式以生食為主。9細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程細菌性食源性疾病檢驗規(guī)程1.現(xiàn)場調查2.檢驗程序3.采樣及送檢4.樣品處理及檢驗5.結果判定及報告6.檢驗樣品處置及檢出菌種保存10細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程現(xiàn)場調查根據(jù)患者的臨床癥狀，核實診斷，初步判斷是否屬食物中毒或食源性疾病現(xiàn)場流行病學個案調查衛(wèi)生學調查確定常見細菌性食源性疾病和食物中毒的樣品采集種類與范圍和相關檢驗項目

11細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程檢驗程序樣品采集及送檢分離培養(yǎng)全面鑒定純培養(yǎng)初篩試驗初步檢測直接鏡檢（涂片→染色→鏡檢涂片→染色→鏡檢）活菌數(shù)增菌培養(yǎng)和直接平板培養(yǎng)12細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程樣品采集無菌采樣方法采集及時做好樣品標記，完整填寫采樣送檢申請單詳細填明檢樣名稱、來源、送檢時間、中毒情況、患者主要臨床癥狀、檢驗項目等

13細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程樣品采集注意事項采樣用的試管、瓶子、盛器、剪刀、鑷子、棉拭等均應無菌采樣用的生理鹽水、培養(yǎng)基及有關試劑等都應該滿足新鮮、無菌的要求，同時應符合采樣所需要的試劑量采樣量須滿足必須開展的檢驗項目的要求，食品采樣應盡量多于25g（ml）以上采樣的同時，應及時做好樣品標記，完整填寫采樣單。立即將檢樣送檢驗室，并有交接手續(xù)

14細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程樣品送檢檢樣采取后立即由專人在3小時內送區(qū)縣疾病預防控制中心或（和）市疾病預防控制中心實驗室檢驗送檢檢樣時，應附送采樣送檢申請單，并按要求注意冷藏樣品送檢人員應與實驗室收樣或檢驗人員履行樣品交接手續(xù)15細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程細菌性食源性疾病的檢驗宗旨竭盡全力盡快找到病原體快速、準確可與傳統(tǒng)方法不一定完全相同

16細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程

初步檢測

按國標菌落總數(shù)測定方法進行，以了解可疑食品被污染情況

直接涂片染色鏡檢觀察存在于檢品中特種形態(tài)的細菌如霍亂弧菌、彎曲菌，為進一步的檢驗提供有用的信息一般活菌數(shù)的測定17細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程分離培養(yǎng)檢樣的處理非病源檢樣包括可疑食物、水樣及環(huán)節(jié)樣品等最好按1∶10的比例用胰大豆胨肉湯（TSB）37℃預增菌4～6h以保護和放大目的病原菌病源檢樣因含較多病原菌而一般無須做預增菌處理，但若病源檢樣為服過抗生素后采集的或是從業(yè)人員帶菌查源的檢樣應按檢驗項目要求而進行預增菌處理（直接插入2mlTSB管37℃預增菌4～6h）18細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程直接培養(yǎng)將處理后的非病源檢樣及無須做增菌處理的病源檢樣按檢驗項目要求直接接種于各相應培養(yǎng)基

19細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程增菌培養(yǎng)及接種將預增菌處理后的非病源檢樣、服過抗生素后采集的病源檢樣及從業(yè)人員帶菌查源的檢樣按檢驗項目要求接種各相應增菌液培養(yǎng)

增菌培養(yǎng)后接種于各相應培養(yǎng)基

20細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程

金葡bp金葡血平板22細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程初篩試驗克氏雙糖/三糖鐵/腸道綜合發(fā)酵管1、管2沙門TSI23細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程

PCRVIDAS24細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程可疑菌的鑒定

全面生化試驗（API、ATB、VETIK、IDS、SWF、手工鑒定等）噬菌體試驗血清分型毒素或毒素基因測試

25細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程檢驗結果的判定應以找到病原體或其毒素為最終結論，在此之前所有的快速檢驗方法如PCR、VIDAS等得到的結果僅供參考

應注意非病源檢樣與病源檢樣檢出的病原體的統(tǒng)一性

26細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程檢驗結果報告

檢驗技術人員應在收到食源性細菌性突發(fā)事件采樣送檢申請單后立即進行樣品檢驗，并在5日內出具檢驗結果報告。特殊情況需延長出具檢驗報告時限的，應報相應衛(wèi)生行政部門批準一旦檢驗結果確定后，在檢驗報告還未完成前可先向有關部門電話報告檢驗結果檢驗報告送達單位：市、區(qū)、縣疾控中心實驗室完成樣品檢驗結果，將檢驗報告送達樣品送檢單位27細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程檢驗樣品的處置

市、區(qū)、縣疾控中心在未完成細菌性食源性疾病和食物中毒的樣品檢驗工作前，所有采集的樣品應在合適的條件下保存，其中對經(jīng)檢驗確屬陰性的或已經(jīng)檢測出病原菌并鑒定的樣品完成檢驗報告后即可消毒銷毀；對經(jīng)檢驗為可疑的、暫時無法確認和需要復測的標本應予保留

28細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程檢出病原菌的保存

區(qū)縣疾控中心完成對細菌性食源性疾病和食物中毒樣品檢驗后，對檢到的細菌性食源性疾病和食物中毒病原菌菌株應在3日內由專人送市疾控中心，由市疾控中心菌毒種保藏中心統(tǒng)一保存；市疾控中心對細菌性食源性疾病和食物中毒標本中檢到的病原菌，移交市疾控中心菌毒種保藏中心統(tǒng)一保存

29細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程細菌檢驗重要篩檢試驗氧化酶試驗接觸酶試驗30細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程氧化酶試驗用于分辨G-桿菌中腸桿菌科及弧菌科兩類細菌革蘭氏陰性桿菌陽性反應

弧菌科陰性反應腸桿菌科31細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程接觸酶試驗用于分辨G+球菌中葡萄球菌及鏈球菌革蘭氏陽性球菌陽性反應葡萄球菌陰性反應鏈球菌接觸酶接觸酶+32細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程細菌性食源性疾病食品、水樣、環(huán)節(jié)樣品檢驗常規(guī)程序33細菌性食源性疾病和其病原學檢驗規(guī)程兩種常見病原菌的檢測沙門氏菌1mLEB10mLTTB/MM42℃過夜金黃色葡萄球菌0.1mLEB10mLSC/SF37℃過夜