陽極損毀海馬腹側(cè)下托可減少成癮大鼠的條件位置偏愛

1、陽極損毀海馬腹側(cè)下托可減少成癮大鼠的條件位置偏愛【關(guān)鍵詞】條件位置偏愛；海馬；電解損毀；嗎啡依賴；藥物渴求【Abstract 】 AIM: To investigate whether the ventral subiculum(VSUB) lesi ons can release the drug crav ing from drug addicted rats. METHODSiemale SD rats were trained to acquire the morphine conditioned pl ace p refere nee (CPP). After the p refer

2、e nee was established, the rats were divided to 3 groups. The lesi on group (n=20) received the electrolytic lesi ons of VSUB, the sham lesi on group (n=10) received the sameoperation to the lesion group but no current passed, and the control group (n=10) received no op erati on. After 5 d recovery,

3、 the 3 groups underwent the CPPtesting again to observe the extent of drug craving. RESULTS: A histological test was p erformed on po stlesi on rats after a behavioral test, and the lesions were found confined to the VSUB.The time that the lesi on group spent in the drug paired side was sig nifica n

4、t decreased ( ±) s pared with both sham group ( ±) s and control group ( ±) s . (P100 s則認(rèn)為動物產(chǎn)生了明顯的偏愛，低于此值者不入選 樣本.穿越次數(shù)低于20次的動物，說明運(yùn)動不活躍，CPF測量值誤差較大，該 動物剔除出樣本.動物分組將已經(jīng)建立地點偏愛的大鼠完全隨機(jī)分配至三個試驗組.損 毀組（20只）；假手術(shù)組（10只），只將電極插入，不做損毀；空白對照組（10 只），不做任何處理，籠養(yǎng)5 d.陽極損毀大鼠10 g/L戊巴比妥鈉腹內(nèi)注射（50 mg/kg），麻醉后固定于 立體定向儀

5、上，門齒桿位于耳間線下方 mm雙側(cè)VSUB顱骨表面投影點鉆孔，將 損毀電極依照大鼠腦立體定位圖譜下至靶點，雙側(cè)坐標(biāo)以Bregma為原點，AP-mm, ML ± mm, DV - mm 5，通直流電進(jìn)行損毀，電極接直流電源陽極，電流 （1 mA），通電時間30 s，完成后取出電極，縫合.全部手術(shù)均保證無菌操作， 防止動物發(fā)生感染.動物術(shù)后恢復(fù)5 d，之后進(jìn)行行為測試.術(shù)后地點偏愛測試與前述的地點偏愛測試方法相同，分別測試每只大鼠在A, C兩箱的停留時間，記錄成表.組織學(xué)檢查測試完成后，損毀組及假手術(shù)組大鼠在戊巴比妥鈉深度麻醉 下以生理鹽水，10 g/L多聚甲醛混合10 g/L亞鐵氰化鉀

6、，40 g/L多聚甲醛PBS 溶液的順序依次灌注，取腦，做冰凍切片（冠狀，片厚60卩m）,尼氏染色觀察損傷范圍.統(tǒng)計學(xué)處理：CPP測量結(jié)果以訓(xùn)練前后以及手術(shù)前后的白箱時間改變值 作為統(tǒng)計量，數(shù)據(jù)處理使用軟件，采用配對 t檢驗及單因素方差分析（Oneway ANOVA）顯著性水平取 a =2結(jié)果組織學(xué)評定采用雙盲法，由第三人在顯微鏡下觀察神經(jīng)缺損范圍，將損 毀位置不準(zhǔn)確或損毀區(qū)域過大過小的個體從樣本中去除 .損毀位置組織學(xué)觀察： 損毀組損毀范圍較準(zhǔn)確的局限于雙側(cè) VSUB%域內(nèi)，損毀區(qū)內(nèi)神經(jīng)元及周圍組織 包括路過的纖維均已變性壞死，形成空洞，空洞周圍組織鏡下未見異常.這樣的 損傷在以Bregma

7、為原點，AP mm mm范圍內(nèi)均能被觀察到.假手術(shù)組僅見針 道附近輕微損傷，VSUBX域除針道外并無明顯改變（圖1）.圖1腹側(cè)海馬下托損毀范圍組織學(xué)檢查各組大鼠在白箱停 在手術(shù)損毀VSUB后, （±） S,而假手術(shù)組測試大鼠在7 d的訓(xùn)練完成后，測定一次術(shù)前偏愛， 留時間增加值為（±） S,經(jīng)檢驗，PV,說明CPP已經(jīng)形成. CPP時間較術(shù)前有明顯改變.損毀組白箱停留時間減少值為的伴藥側(cè)停留時間減少值為（± ） S，空白對照組伴藥側(cè)停留時間減少值為（±） S. 經(jīng)單因素方差分析，各組間有顯著差異，F(xiàn)= P= 以LSDt檢驗再作組間兩兩比 較，損毀組與假手

8、術(shù)組（PV）,損毀組與空白對照組（PV）均有顯著差異，而假 手術(shù)組與空白對照組（P=）沒有顯著差異.以上結(jié)果說明陽極損毀 VSU列以降 低大鼠對嗎啡的條件位置偏愛.3討論本實驗觀察到手術(shù)損毀VSUB寸于抑制嗎啡成癮大鼠的位置偏愛有著明 顯的作用，并且從另一個角度支持邊緣系統(tǒng)的谷氨酸能神經(jīng)元在復(fù)吸表達(dá)中的重 要作用.條件位置偏愛是用來衡量藥物獎賞作用的一項指標(biāo)2.藥物心理依 賴的形成過程，是給藥-激活獎賞環(huán)路-產(chǎn)生欣快感-形成頑固記憶的過程.VSUB是海馬重要的輸入輸出結(jié)構(gòu)，與許多腦區(qū)既有傳入又有傳出纖維的，這些 腦區(qū)有些與獎賞環(huán)路關(guān)系密切，有些則是大鼠感受外界信息的主要傳入部位.Vorel等1

9、發(fā)現(xiàn)刺激VSUB可誘發(fā)大鼠的藥物渴求，在本實驗中損毀 VSUB 區(qū)會使大鼠對伴藥側(cè)的偏愛程度明顯減輕，提示VSUB在藥物渴求的產(chǎn)生中起著重要作用.另外Meyers等6發(fā)現(xiàn)損傷海馬的背側(cè)可以抑制 CPP的形成，而損 傷腹側(cè)則作用不明顯，說明海馬的背側(cè)相對于腹側(cè)更多參與了藥物成癮的獲得過 程.上述研究提示海馬作為學(xué)習(xí)記憶環(huán)路中的一環(huán)，不管是在藥物渴求的形成過程還是藥物渴求的發(fā)生中，都起著極其重要的作用.&n bsp;對于防止復(fù)吸而言，阻止藥物渴求的表達(dá)是關(guān)鍵.阻止渴求表達(dá)有兩種途徑， 一是去除有關(guān)渴求的記憶內(nèi)容，另一個就是阻斷渴求記憶的提取表達(dá)過程.實驗 雖然證明了大腦是將用藥感受的記憶和

10、對藥物的渴求單獨存放在一個區(qū)域的，但對藥物渴求的記憶究竟存儲在哪里？它是與其他記憶混合存放還是單獨儲存？ 現(xiàn)在都還沒有很確實的研究結(jié)論，所以第一種途徑就無法實現(xiàn)7.而環(huán)境暗 示所誘發(fā)的渴求的表達(dá)，海馬及 VSU列能參與其中.損毀這個環(huán)節(jié)，使渴求無 法提取并表達(dá)，就能起到阻止復(fù)吸，戒除心理依賴的效果.普通遺忘是因為大腦 提取機(jī)制暫時失效引起的，而損毀VSUB阻止渴求表達(dá)卻是永久的，不可恢復(fù)的. 相對于平時的遺忘，這種損毀所引起的結(jié)果對于消除渴求防止復(fù)吸來說正是我們 希望得到的.當(dāng)然，對于VSUB勺功能，一定不僅僅限于是藥物渴求的提取通路，我 們的實驗所能說明的可能只是其許多功能中的一種.鑒于海馬

11、在學(xué)習(xí)記憶中的 重要作用和不可替代的位置，單純觀察損毀 VSUB寸藥物渴求的影響是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的.損毀VSUB會有較嚴(yán)重的副作用么？這種損傷究竟對大腦功能有多大影響？ 這種影響相對于濫用藥物引起的危害究竟誰輕誰重，還需要進(jìn)一步深入探討，也 是決定該方法能否作為一種治療方法的關(guān)鍵.這些問題我們將在今后的工作中 進(jìn)一步研究.【參考文獻(xiàn)】1 Vorel SR, Liu XH.hippocampal theta burst stimulationRela pse to coca in eseek ing afterJ: . Scienee, 20XX,292:1175-1178.2 Bardo MT,Be

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