營(yíng)養(yǎng)微生物課件-第04章病毒

一、病毒的發(fā)現(xiàn)和研究歷史1935年，WMStanley首次提純并結(jié)晶了煙草花葉病毒；

Bawden等證明煙草花葉病毒的本質(zhì)為核蛋白；1940年，Kausche首先用電鏡觀察到煙草花葉病毒顆粒；二、病毒的定義與特點(diǎn)P711、特性1）個(gè)體微小，在電子顯微鏡下才能看見(jiàn)；2）不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，其主要成分為核酸和蛋白質(zhì)，故稱為“分子生物”；3）一種病毒只含有DNA或RNA一種類型的核酸；4）絕對(duì)的細(xì)胞內(nèi)寄生，在細(xì)胞外不能增殖：既無(wú)產(chǎn)能酶系，也無(wú)蛋白質(zhì)和核酸合成酶系，只能利用宿主活細(xì)胞內(nèi)現(xiàn)成的代謝系統(tǒng)合成自身的核酸和蛋白質(zhì)；5）沒(méi)有個(gè)體生長(zhǎng)，不能像原核和真核生物一樣進(jìn)行細(xì)胞分裂，以核酸復(fù)制和蛋白質(zhì)合成、然后裝配的實(shí)現(xiàn)其大量繁殖；7）對(duì)大多數(shù)抗生素不敏感，對(duì)干擾素敏感。6）在離體條件下，以無(wú)生命的生物大分子狀態(tài)存在，并保持其侵染性；（與細(xì)胞型微生物的區(qū)別）

病毒是一類既具有化學(xué)大分子屬性，又具有生物體基本特征；既具有細(xì)胞外的感染性顆粒形式，又具有細(xì)胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨(dú)特生物類群。超顯微的、沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的、專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的生物病毒分兩個(gè)階段（以兩種形式）存在：胞外階段：“毒?！毙问酱嬖冢傻挚箮缀跛忻傅那忠u，但不能獨(dú)立于活細(xì)胞增殖；胞內(nèi)階段：主要以正在復(fù)制的核酸形式存在，誘導(dǎo)宿主細(xì)胞合成病毒組分；非細(xì)胞生物至少含核酸和蛋白質(zhì)二種組分亞病毒真病毒類病毒擬病毒朊病毒只含有不具侵染性的RNA組分只含蛋白質(zhì)組分只含具侵染性的RNA組分本章主要介紹真病毒分類依據(jù)核酸的特征、殼體的對(duì)稱形式、有無(wú)包膜、宿主的種類、引起的疾病種類、復(fù)制和釋放方式等。四、病毒的培養(yǎng)和純化同微生物學(xué)其他學(xué)科分支一樣，病毒學(xué)的進(jìn)步完全得益于研究方法和技術(shù)手段的發(fā)展。通過(guò)病毒的分離與純化獲得純化的、有感染性的病毒制備物是病毒學(xué)研究和實(shí)踐的基本技術(shù)。1、病毒的培養(yǎng)二元培養(yǎng)物法1）噬菌體的培養(yǎng)噬菌體細(xì)菌培養(yǎng)物培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板細(xì)菌培養(yǎng)液變清亮細(xì)菌平板成為殘跡平板

噬菌體樣本經(jīng)適當(dāng)稀釋，再接種細(xì)菌平板，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間培養(yǎng)，在細(xì)菌菌苔上可形成圓形局部透明區(qū)域，即噬菌斑（plague）。

噬菌斑的外觀常因噬菌體而異。

形成的噬菌斑也可用于對(duì)噬菌體的數(shù)目進(jìn)行估算。噬菌斑（plaque）：

將少量噬菌體與大量宿主細(xì)胞混合后，在合適條件下培養(yǎng)一定時(shí)間后，在平板表面布滿宿主細(xì)胞的菌苔上，出現(xiàn)一個(gè)個(gè)肉眼可見(jiàn)的透明小圓斑。（“負(fù)菌落”）p78設(shè)0.10mL稀釋度為10-6的病毒懸液可產(chǎn)生75個(gè)噬菌斑，則樣品的噬菌斑形成單位為：PFU/mL=（75PFU/0.10mL）（106）=7.5×108若標(biāo)本經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋進(jìn)行接種并輔以染色處理，病毒可在培養(yǎng)的細(xì)胞單層上形成肉眼可見(jiàn)的局部病損區(qū)域，即蝕斑（plaque）或稱空斑。多數(shù)動(dòng)物病毒能引起宿主細(xì)胞和組織微觀或宏觀的變化和異常，稱為致細(xì)胞病變效應(yīng)（cytopathiceffect,CPE），如細(xì)胞聚集成團(tuán)、腫大、圓縮、脫落，細(xì)胞融合形成多核細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)包涵體（inclusionbody），乃至細(xì)胞裂解等。包涵體（inclusionbody）：

在某些感染病毒的宿主細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)，出現(xiàn)光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)的大小、形狀和數(shù)量不等的小體。多數(shù)位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，如如痘病毒、狂犬病毒少數(shù)位于細(xì)胞核內(nèi)，如：皰疹病毒和腮腺炎病毒有的既可在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，又可在細(xì)胞核內(nèi)，如：麻疹病毒不同病毒包含體的大小、形狀、組分及在宿主細(xì)胞中的部位不同——病毒快速鑒別和某些病毒疾病診斷指標(biāo)多角體：昆蟲(chóng)細(xì)胞內(nèi)形成的多角形包涵體，可作為病毒殺蟲(chóng)劑。核型多角體病毒（NPV）：棉鈴蟲(chóng)、粘蟲(chóng)桑毛蟲(chóng)完成中國(guó)棉鈴蟲(chóng)單核衣殼核型多角體病毒基因組全序列的測(cè)定，是我國(guó)自主研究并應(yīng)用于農(nóng)業(yè)實(shí)踐的第一個(gè)病毒殺蟲(chóng)劑。3）植物病毒的培養(yǎng)植物病毒敏感植物葉片被感染部位的細(xì)胞快速死亡而形成局部壞死斑，或稱枯斑

蛋白質(zhì)提純方法（鹽析、等電點(diǎn)沉淀、有機(jī)溶劑沉淀、凝膠層析、離子交換等）2、病毒純化標(biāo)準(zhǔn)純化的病毒制備物應(yīng)保持其感染性病毒是有感染性的生物體病毒具有化學(xué)大分子的屬性純化的病毒制備物的理化性質(zhì)應(yīng)具有均一性方法主要化學(xué)組成為蛋白質(zhì)具有一定的大小、形狀和密度差速離心梯度離心（超速離心）第二節(jié)病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成毒粒(virion)：指結(jié)構(gòu)完整的、有感染性的單個(gè)病毒。（病毒的細(xì)胞外顆粒形式，也是病毒的感染性形式）一、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)1、病毒的形狀和大小個(gè)體?。y(cè)量單位nm），必需在電鏡下觀察；不同病毒的毒粒大小差別很大（10~400nm）；（1）大小痘病毒：300~450nm×170~260nm（最大）雙粒病毒：直徑18~20nm（最?。?/p>

核衣殼

核心：DNA或RNA

衣殼：蛋白質(zhì)

包膜：脂蛋白或類脂糖蛋白

刺突

基本構(gòu)造：非基本構(gòu)造2.病毒的結(jié)構(gòu)和衣殼（capsid）的對(duì)稱性1）病毒的結(jié)構(gòu)病毒的蛋白質(zhì)殼體和病毒核酸（核心）構(gòu)成的復(fù)合物。核衣殼（nucleocapsid）：包膜（envelope）：有些病毒核衣殼包裹著的一層脂蛋白膜，它是病毒以出芽方式成熟時(shí)，由細(xì)胞膜衍生而來(lái)的。有維系毒粒結(jié)構(gòu)，保護(hù)病毒核殼的作用。特別是病毒的包膜糖蛋白，具有多種生物學(xué)活性，是啟動(dòng)病毒感染所必需的。有包膜的病毒2）病毒衣殼（capsid）的對(duì)稱性

衣殼：包圍著病毒核酸的蛋白質(zhì)外殼。由大量衣殼蛋白單體分子，即蛋白質(zhì)亞單位通過(guò)次級(jí)鍵、按對(duì)稱的形式、有規(guī)律地排列而成。（自我裝配）衣殼結(jié)構(gòu)類型復(fù)合對(duì)稱衣殼螺旋對(duì)稱衣殼二十面體對(duì)稱衣殼殼體外形如中空的蛋白質(zhì)圓管，呈堅(jiān)硬或柔韌狀。由2130個(gè)相同的蛋白質(zhì)亞基（158個(gè)氨基酸）以逆時(shí)針?lè)较蚵菪隣钆帕?，形成一個(gè)長(zhǎng)300nm，內(nèi)徑4nm，外徑15nm的剛直中空柱。ssRNA盤(pán)繞在殼體內(nèi)面由亞基形成的溝內(nèi)，與蛋白質(zhì)亞基通過(guò)弱鍵結(jié)合。螺旋對(duì)稱殼體病毒：代表：TMV二十面體對(duì)稱殼體病毒：衣殼由鈴形或按鈕形的形態(tài)學(xué)單位（稱為衣殼粒，capsomers）構(gòu)成。每個(gè)衣殼粒一般由5或6個(gè)原體組成：五聚體含5個(gè)亞基，位于二十面體的頂上；六聚體含6個(gè)亞基，形成二十面體的棱和三角面。因?yàn)槲寰垠w和六聚體各與5個(gè)和6個(gè)其它的衣殼粒相鄰，所以又分別稱做五鄰體和六鄰體衣殼有20個(gè)等邊三角形面，12個(gè)頂角。在低分辨率的電鏡下呈球形。（參見(jiàn)P74）其殼體由頭部和尾部組成。通常頭部呈二十面體對(duì)稱，尾部呈螺旋對(duì)稱。線狀dsDNA折疊盤(pán)繞于頭部的核心。復(fù)合對(duì)稱衣殼病毒：代表：大腸桿菌的T偶數(shù)噬菌體3、病毒的包膜結(jié)構(gòu)

動(dòng)物病毒的包膜來(lái)自宿主細(xì)胞的核膜或質(zhì)膜（病毒包膜的基本結(jié)構(gòu)與生物膜相似，是脂雙層膜），其脂類或糖類為宿主細(xì)胞組分，包膜蛋白由病毒基因編碼。在包膜形成時(shí)，細(xì)胞膜蛋白被病毒的包膜糖蛋白取代。包膜：二、病毒（毒粒）的化學(xué)組成毒粒化學(xué)組成核酸；蛋白質(zhì)；脂類；碳水化合物；基本化學(xué)組成病毒顆粒在化學(xué)上表現(xiàn)為核蛋白

一種病毒的毒粒只含有一種核酸：DNA或是RNA；病毒核酸類型多樣單鏈DNA（ssDNA）；雙鏈DNA（dsDNA）；單鏈RNA（ssRNA）；雙鏈RNA（dsRNA）；除dsRNA外，其它各類核酸均有線狀和環(huán)狀形式4種類型動(dòng)物病毒這4種類型都有；植物病毒通常含有ssRNA；噬菌體通常為dsDNA，但也有一些噬菌體為ssDNA或ssRNA。小DNA病毒的基因組為單鏈DNA，如φX174，M13；大多數(shù)DNA病毒的基因組為雙鏈DNA。大多數(shù)RNA病毒基因組為單鏈RNA，少數(shù)病毒為雙鏈RNA基因組，它們均為分段基因組。RNA基因組有很多是分段基因組（segmentedgenomes），即基因組被分割成單獨(dú)的幾個(gè)節(jié)段，每一個(gè)節(jié)段編碼一種蛋白質(zhì)。通常所有節(jié)段被包圍在同一個(gè)殼體中。單鏈病毒核酸有正鏈（+）和負(fù)鏈（–）之分某些病毒的RNA是雙意（ambisense），即部分為正極性、部分為負(fù)極性。

正鏈核酸：與病毒mRNA同義的RNA鏈（可作為mRNA直接翻譯）或DNA鏈負(fù)鏈核酸：與病毒mRNA反義（或互補(bǔ)）的RNA鏈或DNA鏈病毒mRNA被規(guī)定為正病毒核酸的特征豐富：

粘性末端（λ

噬菌體）；循環(huán)排列（T2）；末端冗余（T4）；5’端有7-甲基鳥(niǎo)嘌呤核苷帽子結(jié)構(gòu)（動(dòng)物和植物病毒的+RNA）

3’端有poly-A尾巴(所有動(dòng)物病毒的+RNA)含稀有堿基（T偶數(shù)噬菌體：5-羥甲基胞嘧啶）許多RNA病毒存在片段基因組末端冗余（末端重復(fù)）：指DNA分子的一端具有與另一端相重復(fù)的堿基對(duì)序列。λ

噬菌體線狀dsDNA存在12個(gè)核苷酸組成的粘性末端，粘性末端配對(duì)可使DNA環(huán)化。粘性末端：雙鏈DNA分子的兩個(gè)5’端的單鏈部分，具有堿基互補(bǔ)的核苷酸序列。病毒結(jié)構(gòu)蛋白的主要生理功能：1）構(gòu)成蛋白質(zhì)外殼，保護(hù)病毒核酸免受核酸酶及其它理化因子的破壞；2）決定病毒感染的特異性，與易感細(xì)胞表面存在的受體具特異性親和力，促使病毒粒子的吸附和入侵；3）決定病毒的抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體；4）構(gòu)成毒粒酶，或參與病毒對(duì)宿主細(xì)胞的入侵（如T4噬菌體的溶菌酶，流感病毒刺突中的唾液酸苷酶等），或參與病毒復(fù)制過(guò)程中所需要病毒大分子的合成（如逆轉(zhuǎn)錄酶）；一般來(lái)說(shuō)，病毒是不具酶或酶系極不完全的，所以一旦離開(kāi)宿主就不能獨(dú)立進(jìn)行代謝和繁殖。病毒的增殖：

病毒感染敏感宿主細(xì)胞后，病毒核酸進(jìn)入細(xì)胞，通過(guò)其復(fù)制與表達(dá)產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由這些新合成的病毒組分裝配（assembly）成子代毒粒，并以一定方式釋放到細(xì)胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復(fù)制（replication）。是病毒基因組復(fù)制與表達(dá)的結(jié)果，它完全不同于其他生物的繁殖方式，又稱為病毒的復(fù)制。一、病毒的復(fù)制周期（replicativecircle）

自病毒吸附于細(xì)胞開(kāi)始，到子代病毒從感染細(xì)胞釋放到細(xì)胞外的過(guò)程，稱病毒的復(fù)制周期或復(fù)制循環(huán)。一般分為5個(gè)階段：①吸附；②侵入與脫殼；③病毒大分子的合成，包括病毒基因組的表達(dá)與復(fù)制；④裝配；⑤釋放；病毒吸附蛋白（viralattachmentpotein,VAP）:

亦稱“反受體”能夠特異性地識(shí)別細(xì)胞受體并與之結(jié)合的病毒表面的結(jié)構(gòu)蛋白無(wú)包膜病毒的VAP往往是衣殼的組成部分，如：T-偶數(shù)噬菌體的尾絲蛋白；有包膜病毒的VAP為包膜糖蛋白，如：流感病毒包膜表面的刺突；植物病毒：通過(guò)因人為地或自然的機(jī)械損傷所形成的微傷口進(jìn)入細(xì)胞；或者靠攜帶有病毒的媒介，主要靠是有吮吸式口器的昆蟲(chóng)取食將病毒帶入細(xì)胞。植物病毒一旦進(jìn)入細(xì)胞后，增殖產(chǎn)生的子代病毒或病毒核酸可通過(guò)病毒編碼的運(yùn)動(dòng)蛋白（movementprotein）與胞間連絲的相互作用從受染細(xì)胞進(jìn)入鄰近細(xì)胞。脫殼：脫殼是病毒侵入后，病毒的包膜和/或殼體除去而釋放出病毒核酸的過(guò)程。脫殼是病毒基因組進(jìn)行功能表達(dá)所必需的感染事件。T-偶數(shù)噬菌體脫殼與侵入是一起發(fā)生的動(dòng)物病毒存在不同的結(jié)構(gòu)類型和不同的侵入方式，其脫殼過(guò)程也較復(fù)雜。病毒的毒粒消失，失去原有的感染性，進(jìn)入潛隱期。（1）核酸的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄根據(jù)病毒核酸的類型、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄方式的不同，可分為6類：4.病毒的裝配與釋放病毒的釋放標(biāo)志病毒復(fù)制周期結(jié)束大多數(shù)噬菌體都是以裂解細(xì)胞方式釋放

絲桿噬菌體（如M13或fd）不殺死細(xì)胞，子代毒粒以分泌方式不斷從受染細(xì)胞中釋放，并同時(shí)完成毒粒的組裝。

有包膜的動(dòng)物病毒是在從宿主細(xì)胞核芽出或細(xì)胞質(zhì)膜芽出的過(guò)程中裹上包膜而形成包膜病毒。二、一步生長(zhǎng)曲線（onestepgrowthcurve）研究病毒復(fù)制的一個(gè)實(shí)驗(yàn)，定量描述烈性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的曲線。反映3個(gè)參數(shù)：1）潛伏期；2）裂解期；3）裂解量1939年，MaxDelbruck&EmoryEllis：E.coli/bacteriopage1、用噬菌體的稀釋液感染高濃度的宿主細(xì)胞；2、數(shù)分鐘后，加入抗噬菌體的抗血清（中和未吸附的噬菌體）；3、將上述混合物大量稀釋，終止抗血清的作用和防止新釋放的噬菌體感染其它細(xì)胞；4、保溫培養(yǎng)并定期檢測(cè)培養(yǎng)物中的噬菌體效價(jià)（對(duì)噬菌體含量進(jìn)行計(jì)數(shù)）；5、以感染時(shí)間為橫坐標(biāo)，病毒的感染效價(jià)為縱坐標(biāo)，繪制出病毒特征性的繁殖曲線；該實(shí)驗(yàn)標(biāo)志著分子病毒學(xué)、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的建立MaxDelbruck因此榮獲1969年NobelPrize（參見(jiàn)P72）一步生長(zhǎng)曲線（onestepgrowthcurve）噬菌體復(fù)制（裂解周期）分為三個(gè)階段：1、潛伏期從噬菌體吸附到細(xì)胞到釋放出新噬菌體的最短時(shí)期。1）隱晦期：無(wú)成熟的噬菌體粒子。2）胞內(nèi)積累期。2、裂解期隨著宿主細(xì)胞迅速裂解，溶液中噬菌體粒子數(shù)目急劇增加，直到最高值的一段時(shí)間。

3、平穩(wěn)期指感染后的宿主已全部裂解，溶液中噬菌體效價(jià)達(dá)到最高點(diǎn)后的時(shí)期。效價(jià)（titre）或噬菌斑形成單位（plaque-formingunit,pfu）每毫升試樣中所含有的噬菌體粒子數(shù)。（p77）效價(jià)的測(cè)定方法雙層平板法：下層：固體培養(yǎng)基上層：敏感菌+噬菌體+半固體培養(yǎng)基形成噬菌斑（計(jì)平板上的噬菌斑數(shù)量）p78液體稀釋管法：接菌接噬菌體液體培養(yǎng)基：清混清

（以不長(zhǎng)菌的最高稀釋度來(lái)計(jì)算效價(jià)）一步生長(zhǎng)曲線裂解量：每個(gè)受染細(xì)胞所產(chǎn)生的子代病毒顆粒的平均數(shù)目。其值等于潛伏期受染細(xì)胞的數(shù)目除以平穩(wěn)期受染細(xì)胞所釋放的全部子代病毒數(shù)目，即等于穩(wěn)定期病毒效價(jià)與潛伏期病毒效價(jià)之比。一步生長(zhǎng)曲線是研究病毒復(fù)制的一個(gè)經(jīng)典試驗(yàn)，最初是為研究噬菌體的復(fù)制而建立，以后推廣到動(dòng)物病毒和植物病毒的復(fù)制研究中。以適量的病毒接種于標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)的高濃度的敏感細(xì)胞，待病毒吸附后，離心除去未吸附的病毒，或以抗病毒抗血清處理病毒—細(xì)胞培養(yǎng)物以建立同步感染，然后繼續(xù)培養(yǎng)并定時(shí)取樣測(cè)定培養(yǎng)物中的病毒效價(jià)，并以感染時(shí)間為橫坐標(biāo)，病毒的感染效價(jià)為縱坐標(biāo)，繪制出病毒特征性的繁殖曲線，即一步生長(zhǎng)曲線。不同病毒的潛伏期長(zhǎng)短不同，噬菌體以分鐘計(jì)；動(dòng)物病毒和植物病毒以小時(shí)或天計(jì)。潛伏期：噬菌體的裂解量一般為幾十到上百個(gè)；植物病毒和動(dòng)物病毒可達(dá)數(shù)百至上萬(wàn)個(gè)。裂解量：區(qū)別：內(nèi)裂解：宿主細(xì)胞內(nèi)大量噬菌體分泌酶引起的細(xì)胞裂解，釋放大量噬菌體。自外裂解：胞外噬菌體分泌酶引起的細(xì)胞裂解，沒(méi)有子代噬菌體的釋放。第四節(jié)噬菌體與宿主的關(guān)系1.烈性噬菌體（virulentphage）：

感染宿主細(xì)胞后能在細(xì)胞內(nèi)正常復(fù)制并引起宿主細(xì)胞迅速裂解的噬菌體。2.溫和噬菌體（temperatephage）：

感染宿主細(xì)胞后，噬菌體基因組長(zhǎng)期存在于宿主細(xì)胞內(nèi)（整合于宿主的基因組上或以質(zhì)粒形成獨(dú)立存在），并隨宿主基因組的復(fù)制而同步復(fù)制，沒(méi)有成熟噬菌體產(chǎn)生，不引起宿主細(xì)胞裂解的噬菌體。

這種噬菌體與宿主之間的關(guān)系稱為溶源性（lysogeny）。凡能引起溶源性的噬菌體稱為溫和噬菌體，其宿主稱為溶源菌。溫和噬菌體的存在形式有3種：游離態(tài)；前噬菌體所攜帶的遺傳信息由于受噬菌體本身編碼的一種特異阻遏物的阻遏作用而得不到表達(dá)，因此不進(jìn)行DNA復(fù)制和蛋白質(zhì)合成。但隨宿主菌基因組的復(fù)制而同步復(fù)制。營(yíng)養(yǎng)態(tài)；整合態(tài)；指成熟后被釋放并有侵染性的游離噬菌體粒子已整合到宿主基因組上的噬菌體核酸，稱為前噬菌體（prophage

）。指前噬菌體經(jīng)外界理化因子誘導(dǎo)后，脫離宿主核基因組而處于積極復(fù)制、合成和裝配的狀態(tài)λ噬菌體的的溶源性反應(yīng)：進(jìn)入宿主后線狀基因組依靠粘性末端環(huán)化λ噬菌體以大腸桿菌K12為宿主了解最充分的一種溫和噬菌體，dsDNA，頭部為二十面體，非收縮性長(zhǎng)尾。λ噬菌體的溶源性反應(yīng)：通過(guò)特定位點(diǎn)（att位點(diǎn)）以線狀形式整合進(jìn)大腸桿菌半乳糖操縱子和生物素操縱子之間，成為原噬菌體。對(duì)于溶源性來(lái)說(shuō)，整合并非絕對(duì)需要。大腸桿菌噬菌體P1在溶源菌中以獨(dú)立的環(huán)狀DNA分子存在，并與宿主染色體同步復(fù)制。3.溶源菌（lysogen或lysogenicbacteria）含有溫和噬菌體的宿主細(xì)胞，稱為溶源菌。（或：在核基因組上整合有前噬菌體并能正常生長(zhǎng)繁殖而不被裂解的宿主細(xì)胞。）表示：E.coliK12(λ)溶源菌的檢測(cè)方法：

法1：少量溶源菌+大量敏感指示菌+肉湯瓊脂培養(yǎng)基

特殊噬菌斑（中央溶源菌菌落，周圍透明）法2：溶源菌經(jīng)uv照射，進(jìn)一步培養(yǎng)，濾去培養(yǎng)物中活細(xì)菌，將濾液與敏感菌混合培養(yǎng)，形成透明噬菌斑。溶源菌的特性：6）溶源轉(zhuǎn)變(