實驗實訓(xùn)指導(dǎo)-原種、栽培種培育

1、實訓(xùn)五 原種、栽培種的培育一、實訓(xùn)目的能制作適宜培養(yǎng)料，獨立完成接種前的準(zhǔn)備工作，用無菌操作法準(zhǔn)確進(jìn)行原種、栽培種的接種。并通過培養(yǎng)觀察，分析自己的接種結(jié)果。二、實訓(xùn)材料與用具1. 材料 棉籽殼、麩皮、蔗糖、石灰粉、過磷酸鈣、母種、原種等。2器具 菌種瓶、棉塞、打孔棒、菌種袋、接種耙、大鑷子、酒精燈、火柴、酒精棉球、標(biāo)簽、高壓滅菌鍋、接種箱、消毒藥品等。三、實訓(xùn)內(nèi)容1、培養(yǎng)料的配制2、菌種瓶及菌種袋的分裝3、原種的接種4、栽培種的接種 四、方法步驟兩菌種的生產(chǎn)過程基本相同，主要區(qū)別在于接種時取接的菌種不一樣。1. 培養(yǎng)基的配制（1）配方與配制 顆粒培養(yǎng)基（麥粒、玉米粒等） 配方：糧食粒98.5

2、%，石膏粉1%，碳酸鈣0.5%。 配制：將洗凈的糧食粒洗凈，用1%石灰水泡脹，文火煮沸1520min(熟而不爛，勿破皮)，撈出晾至無明水后拌入余料。原種多使用顆粒培養(yǎng)基。棉籽殼麥麩培養(yǎng)基 配方：棉籽殼87%，麥麩10%，白糖1%，石灰1%，過磷酸鈣1%。配制：將棉籽殼、麥麩、石灰混合為主料，余料溶解于少量水后澆入主料中。邊加清水邊翻拌至含水量達(dá)60%65%（緊握料的指縫中有水泌出而不下滴）。 （2）分裝 原種培養(yǎng)基裝入菌種瓶（或其他大口瓶），裝量約占瓶高的1/2（非顆粒培養(yǎng)基可裝至瓶肩，用錐形棒打一料孔），瓶口擦凈，堵棉塞后外包牛皮紙或雙層報紙。栽培種培養(yǎng)基一般裝入聚丙烯菌種袋，上端套頸圈后如

3、同瓶口包扎法。兩端開口的菌種袋可將兩端扎活結(jié)。要求裝地外緊內(nèi)松，培養(yǎng)料需緊貼瓶壁或袋壁。松散的培養(yǎng)料會導(dǎo)致菌絲斷裂及影響對養(yǎng)分、水分的吸收。2. 培養(yǎng)基的滅菌原種栽培種培養(yǎng)基的容器大、裝量多，應(yīng)增加滅菌壓力及滅菌時間。高壓蒸汽滅菌，一般在152kpa壓力（1.5kg/cm2）、溫度約128.1條件下，保持滅菌時間12h。若采用常壓滅菌，需保持最高溫度10h左右，再悶1天或1晚。3. 接種滅菌后的原種及栽培種培養(yǎng)基及時運送至無菌環(huán)境中，待料溫降至約30，進(jìn)行搶溫接種。（1）接原種 用接種耙取蠶豆大母種（連同培養(yǎng)基），放于瓶中培養(yǎng)料的孔口處（1支母種約接58瓶原種）。斜面尖端及原來的母種塊勿接入。

4、（2）接栽培種 用大鑷子、接種鏟或接種匙取棗大原種，放于瓶或袋中料面上（若兩端扎活結(jié)的菌種袋，每端都要接入原種）。1瓶原種約接60瓶或25袋栽培種。去棄表面老化菌絲及老種塊。堵棉塞或用線繩扎袋口。貼標(biāo)簽，注明菌種名稱和接種日期。4.培養(yǎng) 接種后，將種瓶（袋）置于適溫下培養(yǎng)。菌種瓶初放時，應(yīng)直立于床架上，當(dāng)菌絲吃料后，再將其橫放。菌種袋根據(jù)氣溫可單層或多層疊放。隔45天轉(zhuǎn)動或調(diào)換位置，以利于受溫一致，并避免培養(yǎng)料水分的沉積。常檢查：及時去除出現(xiàn)雜色、粘液及菌種死亡的瓶或袋。逐漸降溫：當(dāng)菌絲長至料深的1/2時，降溫23，以免料溫升高，并有壯絲作用。注意菌齡： 原種約3040天、栽培種約2030天菌絲長滿，再繼續(xù)培養(yǎng)710天是使用的最好菌齡。五、作業(yè)1.記錄實驗結(jié)果，并對出現(xiàn)的異常現(xiàn)象進(jìn)行原因分析？2.比較原種與栽培種生產(chǎn)過程的異同點3.顆粒為何要進(jìn)行泡和煮？4.菌種的表面有一塊殘留的瓊脂塊，證明該菌種是哪級菌