細(xì)菌的血清學(xué)及分子生物學(xué)檢測(cè)

1、細(xì)菌的血清學(xué)及分子生物學(xué)檢測(cè)主要方法v免疫學(xué)檢測(cè)v分子生物學(xué)檢測(cè)v細(xì)菌毒素檢測(cè)v動(dòng)物實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)檢測(cè) Ag+Ab AgAb 用已知抗體或抗原來檢測(cè)未知抗原抗體抗體檢測(cè)v已知抗體檢測(cè)未知抗原：效價(jià)（或滴度）的升高v診斷血清多價(jià)血清單價(jià)血清因子血清抗原檢測(cè)v凝集試驗(yàn)玻片凝集試驗(yàn)乳膠凝集試驗(yàn)反向間接凝集試驗(yàn)SPA協(xié)同凝集試驗(yàn)v免疫熒光技術(shù)vELISA含含A A蛋白蛋白的金葡菌的金葡菌IgGIgG類抗體類抗體結(jié)合結(jié)合IgGIgG的金的金葡菌葡菌抗抗 原原凝集凝集協(xié)同凝集試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)細(xì)菌毒素的檢測(cè)u內(nèi)毒素的檢測(cè)：G-細(xì)菌感染u外毒素的檢測(cè)：待檢菌的鑒定，并區(qū)分產(chǎn)毒株與非產(chǎn)毒株動(dòng)物實(shí)驗(yàn)v分離和鑒定病原微

2、生物v測(cè)定細(xì)菌的毒力v制備免疫血清v建立致病動(dòng)物模型v取動(dòng)物的血清配制培養(yǎng)基v用于生物制品或一些藥物的安全、毒性、療效檢驗(yàn)細(xì)菌感染的分子生物學(xué)檢測(cè)分子診斷極大的節(jié)約時(shí)間針對(duì)傳染病的分子診斷技術(shù)被國際權(quán)威的自然、科學(xué)雜志列為改善發(fā)展中國家人民健康的十大生物技術(shù)之首！細(xì)菌感染的分子生物學(xué)檢測(cè)v核酸雜交v聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）v生物芯片技術(shù)核酸雜交v核酸探針：帶有標(biāo)記物的、能與特定核酸序列發(fā)生特異性互補(bǔ)的已知序列核酸片段。v核酸雜交方法： 1.斑點(diǎn)雜交 2.菌落原位雜交 印跡 印跡核酸雜交在臨床微生物檢測(cè)中的應(yīng)用v細(xì)菌分類鑒定v細(xì)菌快速鑒定v細(xì)菌耐藥性的檢測(cè)v細(xì)菌毒素的檢測(cè)v細(xì)菌流行病學(xué)調(diào)查聚合酶鏈

3、反應(yīng)（polymerase chain reaction,PCR）PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析v凝膠電泳分析法v斑點(diǎn)雜交法v酶譜分析法v序列分析法PCR在臨床微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用v細(xì)菌的快速檢測(cè)v細(xì)菌毒素的檢測(cè)v細(xì)菌的耐藥性的檢測(cè)v細(xì)菌流行病學(xué)調(diào)查基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)最早的生物芯片概念源于計(jì)算機(jī)芯片基本原理：微陣列技術(shù)，核苷酸固定到固體支持物上，將處理好的樣品與其進(jìn)行雜交，以實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)樣品基因的大規(guī)模檢驗(yàn)。特點(diǎn)：高通量、高集成、微型化、平行化、多樣化和自動(dòng)化1998年度世界10大科技進(jìn)展之一發(fā)展迅速，應(yīng)用日益廣泛基因芯片應(yīng)用存在的問題基因芯片應(yīng)用存在的問題不同實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的比較芯片價(jià)格，實(shí)驗(yàn)成本微陣列

4、質(zhì)量控制MAQC蛋白質(zhì)芯片的強(qiáng)勢(shì)挑戰(zhàn)自身存在的技術(shù)缺陷蛋白質(zhì)芯片技術(shù)蛋白質(zhì)芯片技術(shù)雙向凝膠電泳(2-DE)和質(zhì)譜(MS)分析鑒定技術(shù)為蛋白質(zhì)組學(xué)研究的兩大核心技術(shù)蛋白質(zhì)芯片是指以蛋白質(zhì)分子作為配基,將其固定在固相載體的表面,形成的蛋白質(zhì)微陣列分類：生物化學(xué)型芯片、化學(xué)型芯片和縮微芯片蛋白質(zhì)芯片技術(shù)是繼基因芯片之后，被稱為橫掃生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)界的一次“迷你”革命分子診斷的質(zhì)量控制分子診斷的質(zhì)量控制v標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（SOP)v標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室v室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)The FDA is Coming!方法原理、實(shí)驗(yàn)步驟、使用指征、報(bào)告格式，結(jié)果、標(biāo)本、臨床有效性等因素v傳統(tǒng)方法目前不可替代傳統(tǒng)方法目前不可替代v快速簡(jiǎn)便的分子診斷技術(shù)越來越普及快速簡(jiǎn)便的分子診斷技術(shù)越來越普及Jan Weile & Cornelius Knabbe；Current applications and future trends of molecular diagnostics in clinical bacteriology；Anal Bioanal Chem (2009) 394:731742本章要求掌握的內(nèi)容v細(xì)菌感染的病原學(xué)診斷方法有哪些