臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收要求和要點(diǎn)

臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收要求和要點(diǎn) 寧夏回族自治區(qū)人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)診斷中心杜宗孝2016 08 2 臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室申報(bào)及驗(yàn)收程序 二級以上醫(yī)院 填寫 臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置申請書 省衛(wèi)計(jì)委醫(yī)政處 相應(yīng)的衛(wèi)生行政部門 省臨床檢驗(yàn)中心初步技術(shù)審核 合格者開始試運(yùn)行 三個(gè)月 同時(shí)報(bào)省衛(wèi)計(jì)委備案 驗(yàn)收合格后 授予驗(yàn)收合格證書 證書有效期五年 省級醫(yī)療機(jī)構(gòu) 地 市 縣 級醫(yī)療機(jī)構(gòu) 3 驗(yàn)收依據(jù) 醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法 衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā) 2010 194號臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室 血站核酸檢測 工作導(dǎo)則 臨床基因擴(kuò)增檢測實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收報(bào)告 4 為什么要進(jìn)行驗(yàn)收 方法敏感技術(shù)要求高存在問題多假陰性 假陽性不規(guī)范人員素質(zhì) 5 驗(yàn)收要達(dá)到的目的 保證檢測質(zhì)量防止實(shí)驗(yàn)室污染建立LAB內(nèi)部質(zhì)量管理模式嘗試強(qiáng)制性實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可 6 7 質(zhì)量管理的內(nèi)涵 寫你所做的做你所寫的記錄你已做的分析你已做的 8 PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)計(jì)原則 原則上應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域 試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū) 標(biāo)本制備區(qū) 擴(kuò)增區(qū) 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 這4個(gè)區(qū)域在物理空間上必須是完全相互獨(dú)立的 各區(qū)域無論是在空間上還是在使用中 應(yīng)當(dāng)始終處于完全的分隔狀態(tài) 不能有空氣的直接相通 根據(jù)使用儀器的功能 區(qū)域可適當(dāng)合并 例如使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀 擴(kuò)增區(qū) 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并 采用樣本處理 核酸提取及擴(kuò)增檢測為一體的自動(dòng)化分析儀 則標(biāo)本制備區(qū) 擴(kuò)增區(qū) 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并 9 PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向 臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的空氣流向可按照試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū) 標(biāo)本制備區(qū) 擴(kuò)增區(qū) 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)進(jìn)行 防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域 可按照從試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū) 標(biāo)本制備區(qū) 擴(kuò)增區(qū) 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進(jìn)行 可通過安裝排風(fēng)扇 負(fù)壓排風(fēng)裝置或其他可行的方式實(shí)現(xiàn) 10 PCR實(shí)驗(yàn)室工作基本原則 進(jìn)入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行各工作區(qū)域必須有明確的標(biāo)記 不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備 物品不得混用 不同工作區(qū)域使用不同的工作服 例如不同的顏色 工作人員離開各工作區(qū)域時(shí) 不得將工作服帶出 實(shí)驗(yàn)室的清潔應(yīng)當(dāng)按試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū) 標(biāo)本制備區(qū) 擴(kuò)增區(qū) 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進(jìn)行 不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具以防止交叉污染 PCR實(shí)驗(yàn)室工作基本原則 工作結(jié)束后 必須立即對工作區(qū)進(jìn)行清潔 實(shí)驗(yàn)臺表面應(yīng)可耐受次氯酸鈉等化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用 實(shí)驗(yàn)臺表面的紫外照射應(yīng)當(dāng)方便有效 由于紫外照射的距離和能量對去污染的效果非常關(guān)鍵 因此可使用可移動(dòng)紫外燈 254nm波長 在工作完成后調(diào)至實(shí)驗(yàn)臺上60 90cm內(nèi)照射 由于擴(kuò)增產(chǎn)物僅幾百或幾十堿基對 bp 對紫外線損傷不敏感 因此紫外照射擴(kuò)增片段必須延長照射時(shí)間 最好是照射過夜 實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序 所有操作符合 實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求 GB19489 2008 12 PCR實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收內(nèi)容 實(shí)驗(yàn)室設(shè)置和設(shè)備設(shè)施和環(huán)境人員設(shè)備管理和質(zhì)控物檢測過程 標(biāo)本管理記錄報(bào)告質(zhì)量控制抱怨 等十章共三十七條 附件1臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收表 本片來自李金明教授 臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室設(shè)置的一般原則 各區(qū)獨(dú)立注意風(fēng)向因地制宜方便工作 十六字口訣 本圖來自李金明教授15 理想的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)置A 16 理想的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)置B 本圖來自李金明教授 17 本圖來自李金明教授 18 本圖來自李金明教授 本圖來自李金明教授 本圖來自李金明教授 A B 錯(cuò)誤的設(shè)置 21 臨床標(biāo)本的接收 應(yīng)在四個(gè)測定區(qū)域之外的地方或適合的地方 接收的標(biāo)本應(yīng)收集在原始容器中 不能接收從其它檢測如生化 免疫檢驗(yàn)等分出來的標(biāo)本在核酸提取時(shí) 由基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室人員將標(biāo)本帶入至標(biāo)本制備區(qū) 23 試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū) 功能 貯存試劑的制備 試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的準(zhǔn)備 以及離心管 吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備 試劑準(zhǔn)備區(qū)的儀器設(shè)備主要有冰箱 微量加樣器 混勻器 可移動(dòng)紫外燈 專用工作服和鞋 消耗品 帶濾芯吸頭 一次性手套等 專用記錄本和記錄筆 加樣器應(yīng)定期校準(zhǔn) 24 標(biāo)本制備區(qū) 功能 核酸 RNA DNA 提取 貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管 對于涉及臨床樣本的操作 應(yīng)符合生物安全二級實(shí)驗(yàn)室防護(hù)設(shè)備 個(gè)人防護(hù)和操作規(guī)范的要求 25 標(biāo)本制備區(qū) 標(biāo)本制備區(qū)內(nèi)的儀器設(shè)備主要有生物安全柜 加樣器 高速臺式冷凍離心機(jī) 水浴箱和 或加熱模塊 混勻器 冰箱 可移動(dòng)紫外燈 專用工作服和鞋 消耗品 帶濾芯吸頭 一次性手套等 專用記錄本和記錄筆 加樣器應(yīng)定期校準(zhǔn) 如需處理大分子DNA 應(yīng)當(dāng)具有超聲波水浴儀 加熱模塊和水浴應(yīng)使用已經(jīng)校準(zhǔn)的溫度計(jì)定期對所設(shè)置的溫度進(jìn)行校準(zhǔn) 27 擴(kuò)增區(qū) 功能 cDNA合成 DNA擴(kuò)增及檢測 擴(kuò)增區(qū)的主要儀器就是核酸擴(kuò)增熱循環(huán)儀 該儀器需進(jìn)行校準(zhǔn) 28 產(chǎn)物分析區(qū) 功能 擴(kuò)增片段的進(jìn)一步分析測定 如雜交 酶切電泳 變性高效液相分析 測序等 本區(qū)是唯一能打開擴(kuò)增后反應(yīng)管的地方 由于本工作區(qū)應(yīng)設(shè)置為負(fù)壓狀態(tài) 空氣流向?yàn)橛赏庀騼?nèi) 以防止擴(kuò)增產(chǎn)物氣溶膠流出 故本區(qū)可無緩沖間 本區(qū)所使用的儀器設(shè)備可能有酶標(biāo)儀 洗板機(jī) 加樣器和水浴箱 測序儀等 酶標(biāo)儀應(yīng)定期校準(zhǔn) 洗板機(jī)每次使用完都應(yīng)進(jìn)行清洗 其它如加樣器和水浴箱可按有關(guān)方法進(jìn)行校準(zhǔn) 核酸擴(kuò)增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣 如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法 放射性核素標(biāo)記或非放射性核素標(biāo)記 直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳 聚丙烯酰胺凝膠電泳 Southern轉(zhuǎn)移 核酸測序方法 質(zhì)譜分析等 本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源 因此必須注意避免通過本區(qū)的物品及工作服將擴(kuò)增產(chǎn)物帶出 在使用PCR ELISA方法檢測擴(kuò)增產(chǎn)物時(shí) 必須使用洗板機(jī)洗板 廢液必須收集至1mol LHCl中 并且不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傾倒 而應(yīng)當(dāng)至遠(yuǎn)離PCR實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉 用過的吸頭也必須放至1mol LHCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理 如焚燒 30 規(guī)定應(yīng)具有的SOP 儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)程序 儀器設(shè)備的校準(zhǔn)程序 儀器設(shè)備的操作程序 臨床標(biāo)本的收集程序 臨床標(biāo)本的處理 核酸純化 程序 臨床標(biāo)本的保存程序 核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析檢測的操作程序 試劑的質(zhì)檢操作程序 消耗品購置驗(yàn)收質(zhì)檢程序 廢棄物的處理程序 內(nèi)務(wù)管理程序 室內(nèi)質(zhì)量控制程序 抱怨處理程序 31 實(shí)驗(yàn)室設(shè)置和設(shè)備檢查重點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化分區(qū)及相應(yīng)標(biāo)識儀器設(shè)備及在用標(biāo)識保持實(shí)驗(yàn)室空氣流向的措施各區(qū)物品的專用標(biāo)識 實(shí)驗(yàn)室清潔SOP要點(diǎn) 目的 為了使實(shí)驗(yàn)室臺面 地面和儀器設(shè)備在使用后 處于潔凈和無感染性狀態(tài) 以防止出現(xiàn)因儀器設(shè)備不潔影響檢測或儀器使用壽命 防止因?qū)嶒?yàn)室臺面 地面和儀器設(shè)備的生物傳染危險(xiǎn)性造成實(shí)驗(yàn)室人員感染 以及防止實(shí)驗(yàn)室交叉污染而出現(xiàn)假陽性結(jié)果等 適用范圍應(yīng)包括實(shí)驗(yàn)室地面 臺面和儀器設(shè)備等的清潔 按實(shí)驗(yàn)室臺面 地面和儀器設(shè)備分開來寫各自的具體清潔方法 要具體而又有可操作性 應(yīng)規(guī)定工作人員在清潔時(shí) 必須按試劑準(zhǔn)備區(qū) 標(biāo)本制備區(qū) 擴(kuò)增 及產(chǎn)物分析 區(qū)方向進(jìn)行 不得逆行規(guī)定每一工作區(qū)域的清潔必須使用專用的清潔用具 不得混用規(guī)定有潛在生物傳染危險(xiǎn)性材料濺出時(shí)的消毒清潔方法 34 檢測技術(shù)人員要求 人員培訓(xùn)及能力評估 培訓(xùn) 符合資質(zhì)的人員還要接受實(shí)驗(yàn)室生物安全以及廠家的上崗前儀器設(shè)備操作 維護(hù)及校準(zhǔn)等的培訓(xùn) 技術(shù)培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)覆蓋工作人員所涉及的所有工作范疇 培訓(xùn)的評估結(jié)果是確定人員是否適合其崗位的依據(jù) 能力評估 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立操作人員能力評估機(jī)制 每年至少實(shí)施一次人員的能力評估 以評估其臨床基因擴(kuò)增檢測工作的勝任程度 參照評估結(jié)果制定人員持續(xù)培訓(xùn)計(jì)劃 操作人員的操作誤差分析 檢測過程變更可作為培訓(xùn)需求納入培訓(xùn)活動(dòng) 需記錄人員的能力評估過程 35 應(yīng)有培訓(xùn)和能力評估的記錄 37 設(shè)備管理 所有設(shè)備應(yīng)得到正確維護(hù) 應(yīng)有設(shè)備維護(hù)程序文件 加樣器 溫度計(jì) 擴(kuò)增儀等設(shè)備應(yīng)有明顯標(biāo)識表明其校準(zhǔn)狀態(tài) 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存每一臺儀器設(shè)備的檔案材料 對檔案材料的具體內(nèi)容作詳細(xì)規(guī)定 檢測系統(tǒng)的確認(rèn) 運(yùn)行與維護(hù) 檢測系統(tǒng)的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室必須實(shí)施檢測系統(tǒng)的確認(rèn)活動(dòng) 確認(rèn)活動(dòng)包括檢測系統(tǒng)購置前的設(shè)計(jì)確認(rèn) 使用前的安裝確認(rèn) 運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn) 檢測系統(tǒng)使用后的性能監(jiān)控及再確認(rèn) 除應(yīng)提供廠商的安裝確認(rèn)報(bào)告之外 實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)對每個(gè)檢測系統(tǒng)進(jìn)行分析靈敏度 重復(fù)性等性能進(jìn)行驗(yàn)證 38 性能驗(yàn)證 按檢測系統(tǒng) 包括試劑 說明書進(jìn)行各指標(biāo)的復(fù)現(xiàn) 40 檢測方法 標(biāo)準(zhǔn)操作程序 SOP 儀器設(shè)備操作和校準(zhǔn)程序 標(biāo)本收集處理程序 擴(kuò)增檢測工作程序 儀器試劑的選購和質(zhì)檢程序 消耗性材料的購買 驗(yàn)收 質(zhì)檢和貯存程序 必須使用經(jīng)國家有關(guān)部門批準(zhǔn)的試劑和儀器 SOP應(yīng)現(xiàn)行有效及便于使用 41 儀器設(shè)備的維護(hù)和校準(zhǔn)SOP 責(zé)任人維護(hù)和校準(zhǔn)的基本方面 光路 濾光片 波長 加熱模塊的清潔 具體的校準(zhǔn)點(diǎn)選擇 如加樣器的校準(zhǔn)體積點(diǎn)選擇 溫度計(jì)的校準(zhǔn)溫度點(diǎn)選擇等 維護(hù)和校準(zhǔn)的具體方法 校準(zhǔn)合格的判斷標(biāo)準(zhǔn)維護(hù)和校準(zhǔn)的間隔時(shí)間 42 試劑和消耗品的質(zhì)檢SOP 試劑質(zhì)檢的基本方面 如試劑的抗干擾能力 主要是針對提取試劑 即對溶血 脂血標(biāo)本擴(kuò)增抑制作用的了解 可通過自行制備含已知量病毒核酸的不同程度溶血或脂血的標(biāo)本進(jìn)行質(zhì)檢 如為定量檢測試劑 還應(yīng)包括檢測的重復(fù)性 線性范圍等的質(zhì)檢 如為定性檢測試劑 則應(yīng)重點(diǎn)考察測定下限 可用系列稀釋的含已知量靶核酸的血清標(biāo)本進(jìn)行 核酸提取用離心管質(zhì)檢的基本方面 帶濾心吸頭的質(zhì)檢主要是濾心的密封性和抑制反應(yīng)的因素 44 標(biāo)本管理 本章包括五條 建立唯一編號識別系統(tǒng) 避免標(biāo)本混淆 標(biāo)本接收時(shí)的狀態(tài)記錄 標(biāo)本的適用性和充分性 標(biāo)本貯存的標(biāo)準(zhǔn)操作程序及貯存溫度控制措施 標(biāo)本接收及安全處置程序 維護(hù)實(shí)驗(yàn)室誠實(shí)性的必要措施 臨床標(biāo)本的采集 運(yùn)送 接收和保存SOP 特定標(biāo)本采集的具體方法步驟明確規(guī)定標(biāo)本的采集容器要求明確標(biāo)本的采集量明確標(biāo)本采集后送到實(shí)驗(yàn)室檢測所能容許的最大時(shí)間間隔 亦即標(biāo)本采集后 應(yīng)在多長時(shí)間內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室明確標(biāo)本采集后 在送至實(shí)驗(yàn)室檢測前的保存方式和條件明確標(biāo)本從采集處運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室過程中所要求的運(yùn)送條件明確標(biāo)本接收時(shí) 簽收的程序 拒收的標(biāo)準(zhǔn)和標(biāo)本唯一編號的規(guī)則規(guī)定標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的短期 應(yīng)有具體時(shí)間 和長期 應(yīng)有具體時(shí)間 保存條件和要求 46 47 實(shí)驗(yàn)記錄及其管理SOP 日常檢驗(yàn)過程中應(yīng)記錄的基本內(nèi)容的規(guī)定 如儀器設(shè)備操作 維護(hù)和校準(zhǔn)過程及有關(guān)數(shù)據(jù) 檢驗(yàn)試劑來源和批號 檢驗(yàn)標(biāo)本的來源和唯一編號 試劑的配制 實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件的控制記錄 實(shí)驗(yàn)室清潔的記錄 質(zhì)控的記錄 原始檢測數(shù)據(jù)及其推導(dǎo)記錄等對實(shí)驗(yàn)記錄者的簽名方式的規(guī)定和要求實(shí)驗(yàn)記錄管理的基本方面 指定專門的管理人 有專門的保存處如柜子等 記錄的登記歸檔方法 記錄的借閱及銷毀記錄 記錄保存的時(shí)間 電子記錄的備份保存具體方法及保存時(shí)間等 報(bào)告 檢測結(jié)果的報(bào)告應(yīng)準(zhǔn)確 清晰和客觀 定性測定報(bào)告 陰性 或 陽性 定量測定則以拷貝數(shù) ml或IU ml報(bào)告 避免二者之間的混淆 每份報(bào)告應(yīng)包括以下信息 標(biāo)題 唯一標(biāo)識 檢測標(biāo)本說明 標(biāo)本特性和狀態(tài) 標(biāo)本接收日期和檢測日期 檢測方法 檢測和校核人員簽字及發(fā)出日期 參考結(jié)果或范圍 如對報(bào)告有效性有疑問 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)立即通知臨床相關(guān)科室予以改正 用電話 傳真 電子郵件報(bào)告結(jié)果時(shí)的保密原則 50 報(bào)告 通常報(bào)告存在的問題 唯一標(biāo)識 標(biāo)本特性和狀態(tài) 標(biāo)本接收日期 檢測方法 校核人員簽字 51 52 室內(nèi)質(zhì)量控制SOP 明確室內(nèi)質(zhì)控物 陽性和陰性 的來源及濃度明確所選用的質(zhì)控方法明確失控的判斷標(biāo)準(zhǔn)或所采用的失控規(guī)則明確失控后的分析及處理措施 參加室間質(zhì)量評價(jià)SOP 明確規(guī)定室間質(zhì)評樣本的接收記錄方式 保存條件及實(shí)驗(yàn)編號規(guī)則明確室間質(zhì)評樣本的檢測流程 要強(qiáng)調(diào)的是 室間質(zhì)評樣本應(yīng)以與臨床標(biāo)本相同的方式處理和檢測明確室間質(zhì)評樣本的報(bào)告流程 即填寫 復(fù)核和簽發(fā)如何進(jìn)行 由誰負(fù)責(zé)明確對返回結(jié)果的分析流程和責(zé)任人明確室間質(zhì)評檢測失敗的原因分析流程明確如果測定準(zhǔn)確性出現(xiàn)問題后 如何針對性采取措施的流程 54 55 56 57 投訴處理SOP 明確投拆第一接觸人對投拆的處理流程 即如何記錄 如何針對相關(guān)投訴的進(jìn)一步處理程序 是否需要報(bào)告和如何報(bào)告 以及如何向投拆人返回處理意見等 可將投訴分為不同類如對檢驗(yàn)結(jié)果正確性 服務(wù)態(tài)度 報(bào)告單填寫錯(cuò)誤等分別編寫處理流程投拆有效時(shí)的如何改進(jìn)和采取何種措施的具體流程 應(yīng)非常具體并具有可操作性 58 實(shí)驗(yàn)室的日常工作管理 工作項(xiàng)目核查點(diǎn)水浴箱 微量恒溫器 加熱模塊 校準(zhǔn)及記錄溫度次氯酸鈉溶液 新鮮配制生物安全柜 先起動(dòng)運(yùn)行30分鐘后再開始工作室內(nèi)質(zhì)控弱陽性質(zhì)控 定性 有低 中 高濃度質(zhì)控 定量 有陰性質(zhì)控 原樣本 有經(jīng)歷提取過程的空管 有僅含擴(kuò)增反應(yīng)混合液管 有實(shí)驗(yàn)臺面 使用后用次氯酸鈉溶液消毒 再用70 乙醇清潔 紫外照射加樣器 離心機(jī) 使用后用次氯酸鈉溶液消毒 再用70 乙醇清潔實(shí)驗(yàn)室各區(qū) 遵循單一工作流向 紫外照射 59 臨床PCR檢驗(yàn)流程記錄表檢驗(yàn)日期檢驗(yàn)項(xiàng)目 擴(kuò)增儀中保存文件名 使用說明 1 本記錄表須嚴(yán)格遵循試劑準(zhǔn)備區(qū) 標(biāo)本制備區(qū) 擴(kuò)增區(qū) 產(chǎn)物分析區(qū) 單一流向移動(dòng) 嚴(yán)禁逆向移動(dòng) 2 各項(xiàng)工作執(zhí)行后 在相應(yīng)敘述前的 內(nèi)打 3 本記錄表最后與相應(yīng)的標(biāo)本接收記錄等歸檔保存于擴(kuò)增區(qū)的專用文件柜內(nèi) 以備查找 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備 試劑在有效期內(nèi) 擴(kuò)增儀 加樣器和溫度計(jì)在校準(zhǔn)的有效1期內(nèi) 生物安全柜的濾膜在使用有效期內(nèi) 消毒溶液在有效期內(nèi) 沖眼器內(nèi)無菌生理鹽水在有效期內(nèi) 離心管 帶濾心吸頭質(zhì)檢合格操作者 60 試劑準(zhǔn)備區(qū) 1區(qū) 實(shí)驗(yàn)前 打開通風(fēng)設(shè)備 實(shí)驗(yàn)臺面清潔 水或70 酒精擦拭 冰箱溫度 冷藏室 2 8 冷凍室 18 2 實(shí)驗(yàn)室溫度 允許范圍 10 30 相對濕度 允許范圍 30 70 PCR試劑來源 可直接列出有關(guān)廠家名稱 批號 檢驗(yàn)項(xiàng)目 本次實(shí)驗(yàn)用量 人份 剩余量 人份 其他有關(guān)試劑配制 按XXX 將有關(guān)SOP編號列出 SOP配制1 含氯消毒液毫升 按XXX 將有關(guān)SOP編號列出 SOP配制4 NaOH溶液毫升 按XXX 將有關(guān)SOP編號列出 SOP配制0 1 焦磷酸二乙酯毫升 按XXX 將有關(guān)SOP編號列出 SOP配制毫升 其他 儀器設(shè)備使用 離心機(jī) 正常 不正常振蕩器 正常 不正常實(shí)驗(yàn)后 按XXX 將有關(guān)SOP編號列出 SOP清潔實(shí)驗(yàn)室臺面 地面 加樣器和離心機(jī) 并進(jìn)行紫外照射30分鐘以上 按XXX 將有關(guān)SOP編號列出 SOP處理實(shí)驗(yàn)廢棄物 操作者 61 標(biāo)本制備區(qū) 2區(qū) 實(shí)驗(yàn)前 打開通風(fēng)設(shè)備 實(shí)驗(yàn)臺面清潔 水或70 酒精擦拭 冰箱 柜 溫度 冷藏室 2 8 冷凍室 18 2 實(shí)驗(yàn)室溫度 允許范圍 10 30 相對濕度 允許范圍 30 70 陽性室內(nèi)質(zhì)控物來源 濃度及批號 擴(kuò)增位置 陰性室內(nèi)質(zhì)控物來源 批號 擴(kuò)增位置 所取理的標(biāo)本 對應(yīng)標(biāo)本接收的唯一編號 及擬擴(kuò)增位置 1917252101826311192741220285132129614223071523318162432核酸提取及加樣過程 按XXX 列出編號 SOP進(jìn)行 儀器設(shè)備使用 生物安全柜 正常 不正常恒溫儀溫度校準(zhǔn) 離心機(jī) 正常 不正常振蕩器 正常 不正常實(shí)驗(yàn)后 按XXX 將有關(guān)SOP編號列出 SOP清潔實(shí)驗(yàn)室臺面 地面及儀器設(shè)備 按XXX 將有關(guān)SOP編號列出 SOP處理實(shí)驗(yàn)廢棄物 操作者 62 63 64 姓名性別病歷號采集時(shí)間接收時(shí)間標(biāo)本特性拒收原因 男 女月日時(shí)月日時(shí) 全血 列出原因號 男 女月日時(shí)月日時(shí) 全血 列出原因號 男 女月日時(shí)月日時(shí) 全血 列出原因號 標(biāo)本拒收原因 1 患者姓名不符 2 標(biāo)本容器為非不含任何添加劑的真空采血管 3 采血量低于2ml 4 標(biāo)本采用肝素抗凝 5 容器破損 6 標(biāo)本采集后送檢時(shí)間超過6小時(shí) 7 標(biāo)本重度溶血 8 標(biāo)本脂血 9 標(biāo)本不正確 10 其他 臨床PCR實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本拒收記錄 65 分析你已做的 每次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析表象與真象多次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的綜合分析趨勢的內(nèi)在含義儀器設(shè)備的使用情況分析維護(hù)與校準(zhǔn)周期的有效性 66 技術(shù)驗(yàn)收的其它內(nèi)容 就有關(guān)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理方面與具體工作有關(guān)的內(nèi)容進(jìn)行口試和 或筆試 現(xiàn)場測試多為已知HBVDNA和 或HCVRNA血清盤 看實(shí)際檢測和結(jié)果報(bào)告 67 驗(yàn)收基本程序 材料初審 實(shí)驗(yàn)室設(shè)置 人員 儀器設(shè)備 試劑 標(biāo)準(zhǔn)操作程序 SOP 文件驗(yàn)收準(zhǔn)備 給擬委派專家發(fā)出技術(shù)驗(yàn)收任務(wù)書 被驗(yàn)收單位發(fā)出驗(yàn)收通知 由省臨床檢驗(yàn)中心協(xié)調(diào) 現(xiàn)場驗(yàn)收 68 實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員資格審定 衛(wèi)生技術(shù)人員資格證書有資質(zhì)單位培訓(xùn)證書 69 70 實(shí)驗(yàn)室的日常工作管理 工作項(xiàng)目核查點(diǎn)水浴箱 微量恒溫器 加熱模塊 校準(zhǔn)及記錄溫度次氯酸鈉溶液 新鮮配制生物安全柜 先起動(dòng)運(yùn)行30分鐘后再開始工作室內(nèi)質(zhì)控弱陽性質(zhì)控 定性 有低 中 高濃度質(zhì)控 定量 有陰性質(zhì)控 原樣本 有經(jīng)歷提取過程的空管 有僅含擴(kuò)增反應(yīng)混合液管 有實(shí)驗(yàn)臺面 使用后用次氯酸鈉溶液消毒 再用70 乙醇清潔 紫外照射加樣器 離心機(jī) 使用后用次氯酸鈉溶液消毒 再用70 乙醇清潔實(shí)驗(yàn)室各區(qū) 遵循單一工作流向 紫外照射 71 驗(yàn)收原則 抽樣 對實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員采用抽樣問詢對實(shí)驗(yàn)室的記錄采取抽樣檢查的方法進(jìn)行抽取有代表性的部份進(jìn)行檢查 抽樣存在有不全面的風(fēng)險(xiǎn) 72 驗(yàn)收方法 觀察 實(shí)驗(yàn)室設(shè)置 儀器設(shè)備 環(huán)境和實(shí)驗(yàn)操作等是否規(guī)范 審核文件 實(shí)驗(yàn)室SOP的規(guī)范和可操作性 詢問 考核實(shí)驗(yàn)室工作人員對實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范化的熟悉程度 或筆試 現(xiàn)場筆試 現(xiàn)場實(shí)驗(yàn) 要求其按常規(guī)檢測臨床標(biāo)本的程序進(jìn)行 看其是否按實(shí)驗(yàn)室所制定的程序進(jìn)行和記錄 73 觀察 實(shí)驗(yàn)室設(shè)置實(shí)驗(yàn)室環(huán)境儀器 用具實(shí)驗(yàn)操作制度措施落實(shí)等 74 審核 文件 制度程序 包括SOP 檔案記錄 75 詢問 溝通 有關(guān)硬件有關(guān)軟件 76 考核 口試或筆試 對實(shí)驗(yàn)室制度 程序等熟悉程度 如有患者家屬要求電話告知XXX丙肝的PCR檢測結(jié)果 你會(huì)怎樣去做 對實(shí)驗(yàn)技術(shù)的熟悉程度 如為什么在HCVRNA檢測中要加水對照 77 現(xiàn)場實(shí)驗(yàn) 考核過程考核結(jié)果 78 現(xiàn)場驗(yàn)收核心 實(shí)驗(yàn)室設(shè)置及儀器設(shè)備配備的科學(xué)性 合理性和充分性 文件制定的科學(xué)性 合理性和