第32章 肝炎病毒ppt

第第 32章章 肝炎病毒肝炎病毒 l 肝炎病毒是引起病毒性肝炎的病原體。病毒性肝炎是危害人類健康最嚴(yán)重的疾病之一。迄今為止發(fā)現(xiàn)的肝炎病毒有甲、乙、丙、丁、戊、己、庚型 肝炎病毒。l l 第一節(jié) 甲型肝炎病毒l 甲型肝炎病毒（ hepatitis A virus，HAV） 是引起甲型肝炎的病原體。 一、一、 生物學(xué)特性生物學(xué)特性l HAV屬小 RNA病毒科 ，病毒體呈球形，直徑 27 32nm， 20面體立體對稱，無包膜?；蚪M為單股正鏈 RNA， 含 7 478個核苷酸。HAV只有一個血清型 。l 黑猩猩和狨猴對 HAV易感 。經(jīng)口或靜脈注射可使動物發(fā)生肝炎，并能在肝細(xì)胞漿中檢l 出 HAV。 HAV可在培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)增殖，但不引起細(xì)胞裂解。 l HAV對乙醚、酸均有抵抗力。 60 1h不被滅活，如有 MgCl存在則可耐受 80 。 20可存活多年， 100 5min滅活 。過氧乙酸（ 2， 4h）、 甲醛 (0.35 37 ， 72h)等均可消除其傳染性。二、二、 致病性與免疫性致病性與免疫性l （一） 傳染源與傳播途徑l 甲型肝炎的 主要傳染源是患者 ，尤其是無黃疽型肝炎患者。潛伏期為 15 45d, 平均 30d 。主要經(jīng) 糞一口途徑傳播 ，傳染性極強，病毒若污染食物及水源可引起甲型肝炎暴發(fā)流行。l （二） 致病機制與免疫l HAV 口 人體 口咽部或唾液腺增殖 消 化道 肝細(xì)胞 甲型肝炎。l HAV感染后約 3周，患者血清開始出現(xiàn) HAV IgM類抗體，可持續(xù) 2個月左右， HAVIgG類抗體出現(xiàn)稍遲，但可在體內(nèi)維持多年，對病毒的再感染有免疫力。三、三、 微生物學(xué)檢查微生物學(xué)檢查病人血清病人血清 HAV IgM檢測可用于甲型肝炎的檢測可用于甲型肝炎的 早期診斷。常用酶聯(lián)免疫吸附試驗（早期診斷。常用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ ELISA） 和和 放射免疫測定（放射免疫測定（ RIA）。）。 也可用也可用 PCR法或核酸雜法或核酸雜交檢測病毒。交檢測病毒。四、四、 防治原則防治原則與患者有接觸史的兒童或在流行期間與患者有接觸史的兒童或在流行期間 注射丙種注射丙種蛋白或胎盤球蛋白可作為緊急預(yù)防蛋白或胎盤球蛋白可作為緊急預(yù)防 ？ 在在 特異性預(yù)特異性預(yù)防方面我國試用減毒甲肝活疫苗防方面我國試用減毒甲肝活疫苗 H2株，對人體有株，對人體有保護(hù)作用。目前甲肝基因工程疫苗正在研制中保護(hù)作用。目前甲肝基因工程疫苗正在研制中 。第二節(jié)第二節(jié) 乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒 l 乙型肝炎病毒（ hepatitis B virus， HBV） 是乙型肝炎的病原體。 HBV傳染性強，估計全世界有乙肝患者及病毒攜帶者 2億多人，其中 1億在我國。 HBV感染機體易發(fā)展成慢性肝炎，部分可引起肝硬化及肝細(xì)胞癌。l (二 )基因結(jié)構(gòu)與復(fù)制方式l HBV的基因是未閉合的環(huán)狀雙股 DNA結(jié)構(gòu) 。一股為長股（負(fù)股 L ）， 另一股為短股（正股S ）。 負(fù)股 DNA核苷酸序列含有 4個開放讀碼框架（ ORF） ， 分別 稱為 S、 C、 P和 X區(qū) 。 S區(qū)中有 S基因、前 S1和前 S2基因，分別編碼病毒的外衣殼蛋白（ HBs-Ag、 PreS1抗原、 PreS2抗原）。 C區(qū)中有 C基因及前 C基因，編碼 HBcAg和 HBeAg 。 P區(qū)最長，編碼 DNA多聚酶 等。 X區(qū)編碼的蛋白稱 HBxAg， 可反激活一些細(xì)胞的癌基因及病毒基因等，與肝癌的發(fā)生有關(guān)。l HBV DNA的復(fù)制方式 與其他 DNA病毒有所不同，它以 L DNA為模板先轉(zhuǎn)錄合成互補RNA，（ cRNA）， 再以 cRNA為模板，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成子代 L DNA， 再以 LDNA為模板復(fù)制出互補的子代 S RNA。l乙肝病毒基因結(jié)構(gòu)圖（三）（三） 抗原組成抗原組成 l 1. 外衣殼 l （ 1） 乙肝表面抗原 （ HBsAg ） Dene顆粒、小球形顆粒及管型顆粒表面均含有該蛋白。HBsAg具有共同抗原決定簇 a， 還有兩種互相排斥的抗原決定族 d/y和 w r。 按不同形式組合成不同的亞型，有 adr、 adw、 ayr、 ayw四個亞型，我國漢族以 adr為主，少數(shù)民族以 ayw為主。l （ 2） 前 S2抗原 （ PreS2-Ag ） 是附加在 HBsAg N末端前的抗原決定簇。其免疫原性較 HBsAg強 ,它具有聚合人血清白蛋白受體（ PHSA-R） , 也是吸附肝細(xì)胞受體的決定簇。l （ 3） 前 S1抗原 PreS1-Ag 可增強 HBsAg的免疫原性，也有助于 HBV吸附到肝細(xì)胞表面。l 2. 內(nèi)衣殼l （ 1） 核心抗原 （ HBcAg）： 存在于內(nèi)衣殼上，一般在血清中很難檢出 HBcAg。 但用免疫組化法在組織切片上可檢測到。 HBcAg能刺激機體產(chǎn)生抗 HBc， 可在血清中持續(xù)多年。抗HBc增高可提示 HBV在體內(nèi)復(fù)制。l （ 2） e抗原 （ HBeAg）： 由 PreC及 C基因編碼，整體轉(zhuǎn)錄及翻譯后成為 HBeAg。 HBeAg存在于病毒體核心結(jié)構(gòu)的表面，當(dāng) HBV內(nèi)衣殼裂解時釋放入血。因 HBeAg的消長與病毒體及 DNA多聚酶的消長基本一致，故 HBeAg可作為體內(nèi)有 HBV復(fù)制及血清具有強感染性的一個指標(biāo)。由 e抗原刺激機體產(chǎn)生的抗 HBe對 HBV感染有一定保護(hù)作用 ? （四）（四） 組織培養(yǎng)及動物模型組織培養(yǎng)及動物模型l 黑猩猩是 HBV最敏感的動物， HBV至今仍未能在細(xì)胞培養(yǎng)中分離成功。目前采用的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)是 病毒 DNA轉(zhuǎn)染系統(tǒng) 。將病毒 DNA導(dǎo)人肝癌等細(xì)胞后，病毒核酸可被整合到細(xì)胞的核酸上，并在細(xì)胞中復(fù)制表達(dá) HBsAg、 HBcAg并分泌 HBeAg。 有些細(xì)胞株還可持續(xù)產(chǎn)生 Dane顆粒。若用 S基因轉(zhuǎn)染一些細(xì)胞系（如中國地鼠卵巢細(xì)胞），可分泌 HBsAg而不含其他病毒蛋白，已用于制備疫苗。（五）（五） 抵抗力抵抗力 l HBV對外界環(huán)境抵抗力很強。 對低溫、干燥、紫外線及一般消毒劑均有耐受性。 70乙醇不能滅活病毒。高壓滅菌121 20min 、 100 10min、 0.5過氧乙酸、 3含氯石灰溶液等可滅活病毒。二、二、 致病性與免疫性致病性與免疫性l （一） 傳染源l 乙型肝炎患者和無癥狀 HBsAg攜帶者是 HBV主要的傳染源 。潛伏期較長（ 45 160d）， 不論在潛伏期、急性期或慢性活動早期，患者血清都有傳染性。 無癥狀的 HBV 攜帶者 ，血液中長期含有 HBV， 是更危險的傳染源。l (二 )傳播途徑l 1.血液及血制品傳播 人對 HBV極為易感 ，故極微量污染血進(jìn)入體內(nèi)即可造成感染。輸血、手術(shù)、注射、針刺、拔牙等均可傳播。使用公用牙刷、剃刀、皮膚粘膜的微小損傷均可導(dǎo)致感染。吸血昆蟲通過叮咬，也可傳播 HBV。l l 2.母嬰間傳播 主要是圍產(chǎn)期感染，即分娩時嬰兒經(jīng)產(chǎn)道通過微小傷口受到母體病毒感染。有些胎兒在宮內(nèi)已被感染，出生后 HBsAg即為陽性。哺乳也被人們認(rèn)為是傳播 HBV的途徑。人群中 HBV攜帶者 50來自母嬰傳播，他們是乙型肝炎的穩(wěn)定傳染源。l 3.性行為（三）（三） 致病性與免疫性致病性與免疫性l 乙型肝炎發(fā)病機制主要是與 HBV的基因變異及病毒引起的機體免疫病理損傷有關(guān)。l 1.自身免疫應(yīng)答引起的病理損害 HBV感染肝細(xì)胞后，引起肝細(xì)胞膜自身抗原發(fā)生改變，暴露出 肝特異性脂蛋白抗原（ LSP） ， 可誘導(dǎo)機體產(chǎn)生對肝細(xì)胞成分的免疫應(yīng)答，通過 CTL的殺傷作用及淋巴因子的作用損害肝細(xì)胞，也可由相應(yīng)抗體與細(xì)胞膜上抗原結(jié)合，通過 ADCC效應(yīng)引起肝細(xì)胞損傷。l 2.免疫復(fù)合物引起的病理損傷 HBsAg與抗HBs形成免疫復(fù)合物 , 可沉積于腎小球基底膜、關(guān)節(jié)滑膜等，導(dǎo)致 型變態(tài)反應(yīng)，出現(xiàn)肝外器官損害。若免疫復(fù)合物沉積于肝內(nèi)，可使肝毛細(xì)血管栓塞，腫瘤壞死因子增多，導(dǎo)致急性肝壞死。3、 HBV基因與肝細(xì)胞基因整合 目前雖無 HBV致肝癌的直接證據(jù)，但人群流行病學(xué)調(diào)查表明 , HBsAg 攜帶者較無 HBV感染者，發(fā)生肝癌的危險性高 217倍。 肝癌組織中檢測，可發(fā)現(xiàn) HBV DNA的整合 ，l 50左右含有負(fù)股 DNA 5末端片段，即含有 X基因片段。因 X蛋白（ HBx Ag）可反式激活癌基因 , 導(dǎo)致肝癌的發(fā)生。 4. 細(xì)胞介導(dǎo)的免疫損傷 感染 HBV的肝細(xì)胞表面可表達(dá) HBsAg 、 HBeAg、或HBcAg, 激活 T細(xì)胞（ CTL） 攻擊帶有病毒抗原的肝細(xì)胞。l 5.病毒基因變異 HBV的 PreC基因變異可使病毒不能轉(zhuǎn)譯出 HBeAg， 逃逸機體已形成的抗 HBe及細(xì)胞免疫的清除作用。此外， HBV PreC及 C區(qū)變異株可引起重型肝炎。l 6.病毒致機體免疫應(yīng)答低下 研究發(fā)現(xiàn)HBV感染后， IL 2產(chǎn)生減少，肝細(xì)胞誘生干擾素降低，且 HLA I類抗原表達(dá)低下，可使免疫應(yīng)答減弱，這與病毒在體內(nèi)長期存在有關(guān)。三、微生物學(xué)檢查三、微生物學(xué)檢查 l （一） HBV抗原抗體檢測l 目前常用較為敏感的放射免疫法和酶聯(lián)免疫吸附法檢測 HBsAg、 抗 HBs、 HBeAg、 抗 HBe及抗 HBc， 俗稱 “兩對半 ”（表 33 1）。該系統(tǒng)檢測可用于 乙肝的診斷 判斷傳染性 判斷預(yù)后及檢查接種效果 篩選獻(xiàn)血員 流行病學(xué)調(diào)查等。l （二） HBV DNA檢測l 應(yīng)用核酸雜交法或 PCR法檢測血清中 HBV DNAl （ 三） 電鏡觀測血液中 HBV顆粒l四 、 防治原則l 1注射 HBV疫苗 (HBsAg)是預(yù)防乙肝 的有效措施。l 2 高效價抗 HBs的人免疫球蛋白（HBIG） 制劑可用于乙肝的緊急預(yù)防。第三節(jié)第三節(jié) 丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒l 丙型肝炎病毒 （ hepatitis C， HCV） 是丙型肝炎的病原體， 1991年被歸屬于黃病毒科。丙型肝炎的特點是：呈世界性分布， 極易慢性化，且與肝硬化和原發(fā)性肝癌關(guān)系密切 。丙型肝炎在輸血性肝炎中占 78 94。我國自 1993年 7月 1日起對獻(xiàn)血者必須檢查乙肝和丙肝。l （一） 生物學(xué)特性l HCV為 RNA病毒，基因型可分為 、 、 、 、 、 型， 我國以 型為主 。 在血液中含量很少。 HCV的病毒體呈球形，大小為 30 60nm。 對氯仿、乙醚等有機溶劑敏感。l （二） 致病性與免疫性l 大多數(shù)丙肝患者不出現(xiàn)癥狀，發(fā)病時已呈慢性過程。 約 20的人可發(fā)展為肝硬化或肝癌 。l （三） 微生物學(xué)檢查l 1.檢查病毒核酸l 目前常用 PCR 熒光法檢測 HCV RNA， 此法不但可以定性，亦可定量。l 2.檢查血清抗體l 用酶聯(lián)免疫法檢測抗體，可作為丙肝的快速診斷和篩選獻(xiàn)血員的重要依據(jù)。l （四） 防治原則 切斷傳播途徑第四節(jié)第四節(jié) 丁型肝炎病毒丁型肝炎病毒 l 丁型肝炎病毒 （ hepatitis D virus ，HDV） 是 1977年在慢性乙型肝炎患者的肝細(xì)胞核內(nèi)發(fā)現(xiàn)的一種新的肝炎病毒。當(dāng)時稱為 因子，后證實 這是一種缺陷病毒，該病毒必須在 HBV或其他嗜肝 DNA病毒輔助下才能復(fù)制，現(xiàn)已正式命名為丁型肝炎病毒。l l HDV呈球形，直徑 35 37nm， 基因組為一單負(fù)鏈環(huán)狀 RNA， 長僅為 1.7kb， 是已知動物病毒中最小的基因組 ， HDV基因可編碼一種HDV抗原（ HD Ag）， 該抗原能刺激機體產(chǎn)生抗 HDV抗體，故可自感染者血清中檢測抗 HDV。l HDV與 HBV傳播途徑相似， 主要通過輸血或血液制品傳播，也可通過密切接觸或通過l 母嬰垂直傳播 ，高危人群為多次受血者和注射藥癮者。 HDV的致病機制及免疫性還不清楚。l 丁型肝炎病毒和乙型肝炎病毒重疊感染常導(dǎo)致原有感染癥狀加重或病情惡化。故 臨床在重癥l 肝炎時應(yīng)注意是否有 HDV重疊感染 。第五節(jié)第五節(jié) 戊型肝炎病毒戊型肝炎病毒 l (一 )生物學(xué)特性l 戊型肝炎病毒 （ hepatitis E virus，HEV） 為單股正鏈 RNA病毒，基因組約為 7.5kb， 5末端編碼非結(jié)構(gòu)蛋白，而 3末端編碼結(jié)構(gòu)蛋白。從患者及感染動物糞便中可查到 27 34nm直徑的病毒體，無包膜，迄今未培養(yǎng)成功。l （二） 致病性l HEV的傳染源是患者，傳播途徑為糞口途徑，可引起爆發(fā)流行 。潛伏期平均為 40d， 多數(shù)患者起病急，病情較重，但很少轉(zhuǎn)為慢性。少數(shù)患者可表現(xiàn)為