促甲狀腺激素TSH定量試劑盒化學(xué)發(fā)光法

【概述】促甲狀腺素(TSH)是垂體前葉分泌的一種糖蛋白激素，其主要作用是調(diào)控甲狀腺的功能活動(dòng)。測(cè)定血清中TSH的濃度是判斷甲狀腺功能是否正常的首選指標(biāo)，也是研究下丘腦—垂體—甲狀腺軸反饋調(diào)節(jié)機(jī)制等的重要參數(shù)，臨床上多用于甲狀腺功能亢進(jìn)(甲亢)和減退(甲減)的診斷、原發(fā)與繼發(fā)性甲減的鑒別診斷、監(jiān)測(cè)甲亢和甲減的療效、亞臨床甲亢的診斷、新生兒甲低的篩查以及垂體TSH瘤的實(shí)驗(yàn)室診斷等。【測(cè)定原理】本試劑盒采用雙抗夾心法測(cè)定血清中TSH水平，用兩株不同的單克隆抗體分別與TSH分子上不同的抗原決定簇發(fā)生反應(yīng)。用一株單抗包被微孔板制成固相抗體，用另一株單抗標(biāo)記酶制成酶標(biāo)抗體。在包被板微孔中加入校準(zhǔn)品或待測(cè)血清及酶標(biāo)抗體，溫育后即形成固相抗體—抗原—酶標(biāo)抗體的復(fù)合物，充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液，于30—90分鐘內(nèi)測(cè)定其發(fā)光強(qiáng)度(RLU),根據(jù)校準(zhǔn)曲線即可算出樣品中TSH的含量，樣品的RLU值隨TSH濃度的增加而升高。【試劑組成和配制】數(shù)量包被板1塊48孔/塊96孔/塊校準(zhǔn)品7瓶0.5ml/瓶0.5ml/瓶濃度0、0.1、0.5、2.5、10、40、120ulU/ml酶標(biāo)記物1瓶3ml/瓶6ml/瓶化學(xué)發(fā)光底物液1瓶3ml/瓶6ml/瓶濃縮洗滌液1瓶30ml/瓶30ml/瓶使用時(shí)用蒸餾水稀釋20倍(水應(yīng)為新鮮制備的去離子水或蒸餾水)說(shuō)明書(shū)1份1張/份1張/份封板膜1份【樣本要求】病人標(biāo)本無(wú)需特殊處理，采用正確醫(yī)用技術(shù)收集全血標(biāo)本，離心分離后吸取血清用于檢測(cè)。待測(cè)血清如在24小時(shí)之內(nèi)使用，可于請(qǐng)不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本?！緶y(cè)定方法】自4·C冰箱中取出試劑盒，室溫平衡15分鐘，然后按下表程序操作：TSH加樣測(cè)定程序表單位：ul包被板空白孔校準(zhǔn)孔樣品孔校準(zhǔn)品待測(cè)樣品酶標(biāo)記物用微量震蕩器充分振蕩混勻，用封板膜封板37C溫育2小時(shí)。用稀釋后的洗滌液洗板5次，最后在干凈的吸水紙上扣千。發(fā)光底物液測(cè)量用微量震蕩器充分振蕩混勻，室溫(20—27·C)避光反應(yīng)30分鐘。必須于加化學(xué)發(fā)光底物液后的第30—90分鐘內(nèi)測(cè)量，在化學(xué)發(fā)光測(cè)量?jī)x上依序測(cè)量各孔的發(fā)光強(qiáng)度(RLU),測(cè)量時(shí)間1秒/孔。注：若室溫低于20·C,加入化學(xué)發(fā)光底物液后應(yīng)將微孔板置于20~30·C烘箱內(nèi)溫育30分鐘后再測(cè)量；加入化學(xué)發(fā)光底物液后其發(fā)光強(qiáng)度(RLU)在30—90分鐘之間比較穩(wěn)定，此段時(shí)間為可靠測(cè)量期。【適用儀器】微孔板光子計(jì)數(shù)分析儀，微孔板洗板機(jī)?！窘Y(jié)果計(jì)算】待測(cè)樣品的濃度按下方法計(jì)算：用化學(xué)發(fā)光測(cè)量?jī)x中的數(shù)據(jù)處理程序(擬合類(lèi)型：線性擬合，坐標(biāo)選擇：log(x)—log(Y),實(shí)驗(yàn)方法：夾心法)直接給出校準(zhǔn)曲線及樣品的濃度值?！菊⒖贾怠扛鲗?shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的臨床正常值，下列正常值范圍僅供參考。正常參考值：0.3—5.0ulU/ml【對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋】本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認(rèn)指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測(cè)指標(biāo)綜合判定。【方法的局限性】1、本試劑盒僅限用于血清樣本的測(cè)定，對(duì)于其它體液樣本測(cè)定的可靠性尚未得到充分的實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。2、本試劑盒準(zhǔn)確的測(cè)定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測(cè)定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、通過(guò)其它方法得到的TSH濃度值與本試劑盒的測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。【技術(shù)參數(shù)】1、靈敏度：≤0.02ulU/ml2、精密性：用本方法檢測(cè)低、中、高三組樣品(n=10)。頁(yè)碼：第5頁(yè)，共6頁(yè)【注意事項(xiàng)】1、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、操作前應(yīng)仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作程序進(jìn)行，不同批號(hào)的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時(shí)間和溫度。4、加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個(gè)加樣時(shí)間。5、每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡防止溶液濺出。6、以洗板機(jī)洗板時(shí)，每孔注液量不應(yīng)少于400ul,洗板次數(shù)不少于5次，浸泡時(shí)間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、以手工洗板時(shí)，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無(wú)紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專(zhuān)用，加樣吸頭應(yīng)確保干凈無(wú)污染，在加發(fā)光底物液的過(guò)程中應(yīng)避免加樣吸頭與板孔或手指接觸，以防底物愛(ài)到污染而造成本底升高。9、為防止樣品蒸發(fā)及避免污染，溫育時(shí)應(yīng)將反應(yīng)板放于密閉干凈的塑料袋內(nèi)或用不干膠覆蓋?！靖攀觥咳饧紫僭彼?T3)是含碘的氨基酸衍生物，由一個(gè)分子一碘酪氨酸和一個(gè)分子二碘酪氨酸偶聯(lián)而成，分子量651D。血循環(huán)中的T3有80%來(lái)自游離T4在外周組織脫去一個(gè)碘原子而成，直接來(lái)自甲狀腺的T3只占20%。血中的T3有99.7%與甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)等結(jié)合。血清T3濃度的測(cè)定對(duì)甲狀腺功能的評(píng)價(jià)和早期診斷甲亢很有價(jià)值，同時(shí)對(duì)甲亢的療效觀察及判定預(yù)后也有重要價(jià)值。【測(cè)定原理】本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定血清中T3水平。將T3抗體包被微孔板制成固相抗體，用酶標(biāo)記T3抗原制成酶標(biāo)抗原。在包被板微孔中加入校準(zhǔn)品或待測(cè)血清和酶標(biāo)記物，溫育后即形成固相抗體—非標(biāo)記抗原或酶標(biāo)記抗原復(fù)合物，充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液測(cè)定其發(fā)光強(qiáng)度(RLU),根據(jù)校準(zhǔn)曲線即可算出樣品中T3的含量，樣品的RLU值隨T3濃度的增加而降低?！驹噭┙M成和配制】校準(zhǔn)品6瓶1瓶1瓶11ml/瓶1瓶6ml/瓶1瓶6ml/瓶1瓶30ml/瓶說(shuō)明書(shū)1份1張/份1份2張/份【樣本要求】病人標(biāo)本無(wú)需特殊處理，采用常規(guī)醫(yī)用技術(shù)收集全血標(biāo)本，離心分離后吸取血清用于檢測(cè)。待測(cè)血清如在24小時(shí)之內(nèi)使用，可于請(qǐng)不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本?！緶y(cè)定方法】自4·C冰箱中取出試劑盒，室溫平衡15分鐘，然后按下表程序操作：校準(zhǔn)品待測(cè)樣品—用稀釋后的洗液洗板5次，最后在干凈的吸水紙上扣干。發(fā)光底物混合液用微量震蕩器充分振蕩混合均勻，室溫(20~27·C)避光反應(yīng)5分鐘。測(cè)量必須于加化學(xué)發(fā)光底物液后的第5~30·C分鐘內(nèi)測(cè)量，在化學(xué)發(fā)光測(cè)量?jī)x上依序測(cè)量各孔的發(fā)光強(qiáng)度(RLU),測(cè)量時(shí)間1秒/孔。【適用儀器】微孔板光子計(jì)數(shù)分析儀，微孔板洗板機(jī)?！窘Y(jié)果計(jì)算】待測(cè)樣品的濃度計(jì)算按下列方法進(jìn)行：用化學(xué)發(fā)光分析儀中的數(shù)據(jù)處理程序(擬合類(lèi)型：線性擬合，坐標(biāo)選擇：log(X)—logit(Y),實(shí)驗(yàn)方法：競(jìng)爭(zhēng)法)直接給出校準(zhǔn)曲線及樣品的濃度值?！菊⒖贾怠扛鲗?shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的正常參考值，下列正常值僅供參考。正常參考值：0.52—1.90ng/ml(單位換算：1nmol/L=0.651ng/mL)【對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋】本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認(rèn)指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測(cè)指標(biāo)綜合判定?！痉椒ǖ木窒扌浴?、本試劑盒僅限用于血清樣本的測(cè)定，對(duì)于其它體液樣本測(cè)定的可靠性尚未得到充分的實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。2、本試劑盒準(zhǔn)確的測(cè)定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測(cè)定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、通過(guò)其它方法得到的T3濃度值與本試劑盒的測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。4、待測(cè)血清中存在抗T3等自身抗體以及人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾測(cè)定結(jié)果。【技術(shù)參數(shù)】2、精密度：用本方法檢測(cè)低、中、高三組樣品(n=10)。分析內(nèi)4、特異性：與10ug/ml的T4交叉反應(yīng)率小于0.02%【注意事項(xiàng)】1、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、操作前應(yīng)仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作程序進(jìn)行，不同批號(hào)的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時(shí)間和溫度。4、加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個(gè)加樣時(shí)間。5、每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡防止溶液濺出。6、以洗板機(jī)洗板時(shí)，每孔注液量不應(yīng)少于400ul,洗板次數(shù)不少于5次，浸泡時(shí)間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、以手工洗板時(shí)，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無(wú)紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專(zhuān)用，加樣吸頭應(yīng)確保干凈無(wú)污染，在加發(fā)光底物液的過(guò)程中應(yīng)避免加樣吸頭與板孔或手指接觸，以防底物受到污染而造成本底升高。9、為防止樣品蒸發(fā)及避免污染，溫育時(shí)應(yīng)將反應(yīng)板放于密閉干凈的塑料袋內(nèi)或用不干膠覆蓋?！靖攀觥考谞钕偎?T4)是甲狀腺分泌的兩種主要激素之一，分子量777D,全部由甲狀腺產(chǎn)生。T4的主要作用是促進(jìn)合成和能量代謝，使基礎(chǔ)代謝和耗氧量增加，促進(jìn)生長(zhǎng)和發(fā)育。在血中的T4有99.97%與甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)及甲狀腺結(jié)合前蛋白(TBPA)結(jié)合。T4的合成和分泌主要受下丘腦及垂體的控制。T4是甲狀腺功能亢進(jìn)(甲亢)和減退(甲減)的診斷和療效評(píng)價(jià)的指標(biāo)之一?！緶y(cè)定原理】本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定血清中T4水平，用T4抗體包被微孔板制成固相抗體，用T4抗原標(biāo)記酶制成酶標(biāo)記物。在包被微孔中加入T4校準(zhǔn)品或待測(cè)血清和酶標(biāo)抗原，溫育后競(jìng)爭(zhēng)形成固相抗體—非標(biāo)記抗原或標(biāo)記抗原復(fù)合物，充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液于5—30分鐘內(nèi)測(cè)定其發(fā)光強(qiáng)度(RLU),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可算出樣品T4的含量，【試劑組成和配制】校準(zhǔn)品說(shuō)明書(shū)【樣本要求】分離后吸取血清用于檢測(cè)。待測(cè)血清如在24小時(shí)之內(nèi)使用，可于請(qǐng)不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本。【測(cè)定方法】包被板校準(zhǔn)品待測(cè)樣品酶工作液測(cè)量?jī)x上依序測(cè)量各孔的發(fā)光強(qiáng)度(RLU),測(cè)量時(shí)間1秒/孔?！具m用儀器】微孔板光子計(jì)數(shù)分析儀，微孔板洗板機(jī)?！窘Y(jié)果計(jì)算】用化學(xué)發(fā)光分析儀中的數(shù)據(jù)處理程序(擬合類(lèi)型：線性擬合，坐【正常參考值】各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的正常值，下列正常值僅供參考。正常參考值：男性4.4~10.8ug/dl;女性4.8~11.6ug/dl(單位換算1nmol/L=0.077ug/dL)【對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋】本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認(rèn)指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測(cè)指標(biāo)綜合判定?！痉椒ǖ木窒扌浴?、本試劑盒僅限用于血清樣本的測(cè)定，對(duì)于其它體液樣本測(cè)定的可靠性尚未得到充分的實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。2、本試劑盒準(zhǔn)確的測(cè)定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測(cè)定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、通過(guò)其它方法得到的T4濃度值與本試劑盒的測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。4、血清中存在抗T4等自身抗體以及人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾測(cè)【性能指標(biāo)】2、精密度：用本方法檢測(cè)低、中、高三組樣品(n=10)。3、線性相關(guān)系數(shù)絕對(duì)值|r|≥0.99004、特異性：與濃度為100ug/dL右旋三碘原氨酸交叉反應(yīng)率為1.5%,與濃度為100ug/dL的左旋三碘原氨酸交叉反應(yīng)率為3.0%?！咀⒁馐马?xiàng)】1、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、操作前應(yīng)仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作程序進(jìn)行，不同批號(hào)的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時(shí)間和溫度。4、加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個(gè)加樣時(shí)間。5、每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡防止溶液濺出。6、以洗板機(jī)洗板時(shí)，每孔注液量不應(yīng)少于400ul,洗板次數(shù)不少于5次，浸泡時(shí)間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、以手工洗板時(shí)，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無(wú)紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專(zhuān)用，加樣吸頭應(yīng)確保干凈無(wú)污染，在加發(fā)光底物液的過(guò)程中應(yīng)避免加樣吸頭與板孔或手指接觸，以頁(yè)碼：第6頁(yè)，共6頁(yè)防底物受到污染而造成本底升高。9、為防止樣品蒸發(fā)及避免污染，溫育時(shí)應(yīng)將反應(yīng)板放于密閉干凈的塑料袋內(nèi)或用不干膠覆蓋。【概述】三碘甲腺原氨酸(T3)是含碘的氨基酸衍生物，由一個(gè)分子一碘酪氨酸和一個(gè)分子二碘酪氨酸偶聯(lián)而成，分子量651D。血循環(huán)中的T3有80%來(lái)自游離T4在外周組織脫去一個(gè)碘原子而成，直接來(lái)自甲狀腺的T3只占20%。血中的T3有99.7%與甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)等結(jié)合。同TBG等蛋白質(zhì)結(jié)合的T3無(wú)生物活性，而0.3%未結(jié)合的T3即游離T3(FT3)的生物活性則比游離T4強(qiáng)5~10倍。因此測(cè)定血清FF3對(duì)于甲亢的診斷、療效和預(yù)后的判斷具有重要的臨床價(jià)值，對(duì)甲減的診斷也有一定的參考價(jià)值?！緶y(cè)定原理】本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定血清中FT3水平。用T3抗體包被微孔板制成固相抗體，酶標(biāo)記T3抗原制成酶標(biāo)記物，該酶標(biāo)記物不能夠與TBG和白蛋白結(jié)合。在包被板微孔中加入FT3校準(zhǔn)品或待測(cè)血清和酶標(biāo)記物，酶標(biāo)記物與樣品的FT3競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合出樣品中FT3的含量，樣品的RLU值隨FT3濃度的增加而降低。【試劑組成和配制】1塊校準(zhǔn)品6瓶1瓶1瓶1瓶1瓶說(shuō)明書(shū)1份1份【樣本要求】分離后吸取血清用于檢測(cè)。待測(cè)血清如在24小時(shí)之內(nèi)使用，可于可【測(cè)定方法】校準(zhǔn)品待測(cè)樣品— 測(cè)量?jī)x上依序測(cè)量各孔的發(fā)光強(qiáng)度(RLU),測(cè)量時(shí)間1秒/孔。【適用儀器】微孔板光子計(jì)數(shù)分析儀，微孔板洗板機(jī)?！窘Y(jié)果計(jì)算】用化學(xué)發(fā)光分析儀中的數(shù)據(jù)處理程序(擬合類(lèi)型：線性擬合，坐【正常參考值】各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的正常值，下列正常值僅供參考。正常參考值：正常成人1.4~4.2pg/mL;妊娠期：1.8~4.2pg/mL?！緦?duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋】本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認(rèn)指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測(cè)指標(biāo)綜合判定?！痉椒ǖ木窒扌浴?、本試劑盒僅限用于血清樣本的測(cè)定，對(duì)于其它體液樣本測(cè)定的可靠性尚未得到充分的實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。2、本試劑盒準(zhǔn)確的測(cè)定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測(cè)定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、通過(guò)其它方法得到的FT3濃度值與本試劑盒的測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。4、血中TBG含量的高低不會(huì)影響FT3的測(cè)定，但血清中存在抗T3等自身抗體以及人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾測(cè)定結(jié)果?！拘阅苤笜?biāo)】1、靈敏度：≤0.05pg/mL2、精密度：用本方法檢測(cè)低、中、高三組樣品(n=10)。3、線性相關(guān)系數(shù)絕對(duì)值|r|≥0.99004、特異性：與10ug/mLT4的交叉反應(yīng)率小于0.02%,與10ug/mLT3的交叉反應(yīng)率小于0.01%【注意事項(xiàng)】1、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、操作前應(yīng)仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作程序進(jìn)行，不同批號(hào)的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時(shí)間和溫度。4、加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個(gè)加樣時(shí)間。5、每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡防止溶液濺出。6、以洗板機(jī)洗板時(shí)，每孔注液量不應(yīng)少于400ul,洗板次數(shù)不少于5次，浸泡時(shí)間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、以手工洗板時(shí)，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無(wú)紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專(zhuān)用，加樣吸頭應(yīng)確保干凈無(wú)污染，在加發(fā)光底物液的過(guò)程中應(yīng)避免加樣吸頭與板孔或手指接觸，以頁(yè)碼：第6頁(yè)，共6頁(yè)防底物受到污染而造成本底升高。9、為防止樣品蒸發(fā)及避免污染，溫育時(shí)應(yīng)將反應(yīng)板放于密閉干凈的塑料袋內(nèi)或用不干膠覆蓋?！靖攀觥考谞钕偎?T4)是甲狀腺分泌的兩種主要激素之一，分子量777D,全部由甲關(guān)腺產(chǎn)生。T4的主要作用是促進(jìn)合成和能量代謝，使基礎(chǔ)代謝率和耗氧量增加，促進(jìn)生長(zhǎng)和發(fā)育。在血中的T4有99.97%與甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)及甲狀腺結(jié)合前蛋白(TBPA)結(jié)合，只有0.03%的T4呈游離狀態(tài)(FT4)。與蛋白結(jié)合的FT4無(wú)生物活性，只有FT4才具有生物學(xué)效應(yīng)。因此，測(cè)定血清中FT4無(wú)疑比總FT4對(duì)于甲狀腺疾病的診斷和療效判斷具有更重要的臨床意義。【測(cè)定原理】本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定血清中FT4水平。用T4抗體包被微孔和白蛋白結(jié)合。在包被板微孔中加入FT4校準(zhǔn)品或待測(cè)血清和酶標(biāo)記物，酶標(biāo)記物與樣品中的FT4競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合固定在微孔板上的有限數(shù)量的抗體結(jié)合位點(diǎn)。充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液測(cè)定其發(fā)光強(qiáng)度 (RLU),根據(jù)校準(zhǔn)曲線即可算出樣品中FT4的含量，樣品的RLU值隨【試劑組成和配制】校準(zhǔn)品說(shuō)明書(shū)【樣本要求】病人標(biāo)本無(wú)需特殊處理，采用常規(guī)醫(yī)用技術(shù)收集全血標(biāo)本，離心分離后吸取血清用于檢測(cè)。待測(cè)血清如在24小時(shí)之內(nèi)使用，可于可請(qǐng)不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本?！緶y(cè)定方法】自4·C冰箱中了出試劑盒，室溫平衡15分鐘，然后按下表程序操校準(zhǔn)品待測(cè)樣品 測(cè)量?jī)x上依序測(cè)量各孔的發(fā)光強(qiáng)度(RLU),測(cè)量時(shí)間1秒/孔。【適用儀器】微孔板光子計(jì)數(shù)分析儀，微孔板洗板機(jī)?！窘Y(jié)果計(jì)算】用化學(xué)發(fā)光分析儀中的數(shù)據(jù)處理程序(擬合類(lèi)型：線性擬合，坐【正常參考值】各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的正常值，下列正常值僅供參考。正常參考值：正常成人0.8~2.0ng/dL;妊娠期：(單位換算：1ng/dL×12.9=1pmol/L)【對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋】本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認(rèn)指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測(cè)指標(biāo)綜合判定?！痉椒ǖ木窒扌浴?、本試劑盒僅限用于血清樣本的測(cè)定，對(duì)于其它體液樣本測(cè)定的可靠性尚未得到充分的實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。2、本試劑盒準(zhǔn)確的測(cè)定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測(cè)定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、通過(guò)其它方法得到的FT3濃度值與本試劑盒的測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。4、血中TBG含量的高低不會(huì)影響FT3的測(cè)定，但血清中存在抗T3等自身抗體以及人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾測(cè)定結(jié)果?！拘阅苤笜?biāo)】1、靈敏度：≤0.05ng/dL2、精密度：用本方法檢測(cè)低、中、高三組樣品(n=10)。3、線性相關(guān)系數(shù)絕對(duì)值|r|≥0.99004、特異性：與100ug/mL右旋三碘甲腺原氨酸的交叉反應(yīng)率為0.015%,與100ug/mL的左旋三碘甲腺原氨酸的交叉反應(yīng)率為0.030%,與40ug/mL人血清白蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。【注意事項(xiàng)】1、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、操作前應(yīng)仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作程序進(jìn)行，不同批號(hào)的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時(shí)間和溫度。4、加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個(gè)加樣時(shí)間。5、每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡防止溶液濺出。6、以洗板機(jī)洗板時(shí)，每孔注液量不應(yīng)少于400ul,洗板次數(shù)不少于3次，浸泡時(shí)間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、以手工洗板時(shí)，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無(wú)紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專(zhuān)用，加樣吸頭應(yīng)確保干凈無(wú)污染，在加發(fā)光底物液的過(guò)程中應(yīng)避免加樣吸頭與板孔或手指接觸，以防底物受到污染而造成本底升高。9、為防止樣品蒸發(fā)及避免污染，溫育時(shí)應(yīng)將反應(yīng)板放于密閉干凈的塑料袋內(nèi)或用不干膠覆蓋。編制人；【概述】甲胎蛋白(AFP)是單鏈糖蛋白，590個(gè)氨基酸，含糖4%,MW為70000kDa。妊娠第6周在胎兒的未分化肝細(xì)胞、卵黃囊和胃腸道開(kāi)始合成AFP,第13周達(dá)到高峰后逐漸降低，出生后不久即至成人水平。正常人血清中AFP的含量很低。原發(fā)性肝細(xì)胞癌、肝炎和肝硬化等良性肝病及某些生殖細(xì)胞腫瘤等患者，AFP升高。血清中AFP含量的測(cè)定，是診斷原發(fā)性肝癌和判斷預(yù)后的重要指標(biāo)，通過(guò)測(cè)定母體血液和胎兒羊水中AFP的含量，對(duì)判斷胎兒畸形及先天性愚型有一定的【測(cè)定原理】本試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定血清中AFP水平。用一株單抗包被微孔板制成固相抗體，另一株單抗標(biāo)記酶制成酶標(biāo)抗體。在包被板微孔中加入AFP校準(zhǔn)品或待測(cè)血清及酶標(biāo)記物，溫育后即形成固相抗體—抗原—酶標(biāo)抗體的復(fù)合物，充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液，于30~90分鐘內(nèi)測(cè)定其發(fā)光強(qiáng)度(RLU),根據(jù)校準(zhǔn)曲線即可算出樣品中AFP的含量，樣品的RLU值隨AFP濃度的增加而升高。編制人；【試劑組成和配制】校準(zhǔn)品說(shuō)明書(shū)【樣本要求】病人標(biāo)本無(wú)需特殊處理，采用正確醫(yī)用技術(shù)收集全血標(biāo)本，離心分離后吸取血清用于檢測(cè)。待測(cè)血清如在24小時(shí)之內(nèi)使用，可于請(qǐng)不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本。編制人；【測(cè)定方法】自4·C冰箱中取出試劑盒，室溫平衡15分鐘，然后按下表程序校準(zhǔn)品待測(cè)樣品 用微量震蕩器充分振蕩混勻，用封板膜封板37·C溫育1小時(shí)。用稀釋后的洗滌液洗板5次，最后在干凈的吸水紙上扣干。測(cè)量必須于加化學(xué)發(fā)光底物液后的第30—90分鐘內(nèi)測(cè)量，在化學(xué)發(fā)光注：若室溫低于20·C,加入化學(xué)發(fā)光底物液后應(yīng)將微孔板置于20~30·C烘箱內(nèi)溫育30分鐘后再測(cè)量；加入化學(xué)發(fā)光底物液后其發(fā)光強(qiáng)度(RLU)在30—90分鐘之間比較穩(wěn)定，此段時(shí)間為可靠測(cè)量期?！具m用儀器】微孔板光子計(jì)數(shù)分析儀，微孔板洗板機(jī)?！窘Y(jié)果計(jì)算】待測(cè)樣品的濃度按下方法計(jì)算：用化學(xué)發(fā)光測(cè)量?jī)x中的數(shù)據(jù)處理程序(擬合類(lèi)型：線性擬合，坐標(biāo)選擇：log(x)—log(Y),實(shí)驗(yàn)方法：夾心法)直接給出校準(zhǔn)曲線及樣品的濃度值?！菊⒖贾怠扛鲗?shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的臨床正常值，下列正常值范圍僅供參考。正常參考值：<10ng/mL【對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋】本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認(rèn)指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測(cè)指標(biāo)綜合判定?！痉椒ǖ木窒扌浴?、本試劑盒僅限用于血清樣本的測(cè)定，對(duì)于其它體液樣本測(cè)定的可靠性尚未得到充分的實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。2、本試劑盒準(zhǔn)確的測(cè)定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測(cè)定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、通過(guò)其它方法得到的TSH濃度值與本試劑盒的測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。【技術(shù)參數(shù)】1、靈敏度：≤1.3ng/mL2、精密性：用本方法檢測(cè)低、中、高三組樣品(n=10)?！咀⒁馐马?xiàng)】1、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、操作前應(yīng)仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作程序進(jìn)行，不同批號(hào)的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、各試劑必須搖勻后