標本的采集與制作課件

實習四、標本的采集、

制作與保存湖南農業(yè)大學彭曉英一、實習目的

1、學會植物標本的采集方法；2、學會各類植物標本的制作方法；3、學會植物標本的保存方法。二、實習內容1、植物標本的采集；2、各類植物標本的制作；3、植物標本的保存。四、實習用品望遠鏡、照相機、調溫電熨斗、干燥箱、真空泵、真空干燥器、海拔儀、指南針；采集袋(箱)、標本夾和尼龍繩、小鎬和小掘鏟、枝剪和高枝剪、剪刀、放大鏡、浮游植物采集網、護腿和蛇藥、細砂、透明膠帶、白雞毛、乒乓球、木條；大培養(yǎng)皿、大廣口瓶、標本缸、玻璃片、玻璃；吸水紙、記錄本和鉛筆、標本號牌、臺紙、蓋紙、玻璃紙、馬糞紙、紙漿、白板紙、透明膠紙；樹膠；濃鹽酸、硼酸、亞硫酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氯化汞、食鹽、氯化鋅、硫酸銅、碳酸鈉；甘油、福爾馬林、酒精、石蠟、松香、乙醚、丙酮；曙紅、龍膽紫、顏料、油漆；硅膠、開水、蒸餾水等。五、方法步驟（一）植物標本的采集（二）植物標本的制作（三）植物標本的保存（一）植物標本的采集

1、采集標本應該攜帶的工具（1）采集袋(箱)：用來裝載采集的標本和各種小型采集工具。（2）標本夾和尼龍繩：供采集和壓制標本用。（3）吸水紙：用于壓制標本，吸收植物體內的水分。（4）小鎬和小掘鏟：用于挖掘深根、球莖和石縫中的草本植物和小灌木等。（5）枝剪和高枝剪：用來剪斷木本或有刺的植物。（6）放大鏡：用于觀察植物體各部分的形態(tài)。（7）浮游植物采集網：用于采集浮游藻類。（8）記錄本和鉛筆：用于記載標本的種名、土名，采集地點、生態(tài)、高度、花色和采集日期等。（9）標本號牌：掛在標本上，寫上編號，以防日后忘記和搞錯。（10）護腿和蛇藥：防止刺傷和蛇咬。（11）望遠鏡：用于了望遠處的植物和地形。（12）照相機：用于拍攝植物的生態(tài)環(huán)境和它們的生活容貌。（13）海拔儀：用于了解采集地點的海拔高度。（14）指南針：用于指示方向，避免迷路。2、采集的一般方法（1）把握時節(jié)，適時采集：（2）采集地點宜先近后遠（3）植物標本要力求完整（4）標本大小要長寬適度：“一般采集的植物多制作臘葉標本，而蠟葉標本所用的臺紙通常是八開的白板紙，因此采集的植物標本的大小不要超過臺紙的尺寸。如果遇到比較高大的草本植物，可以把它疊成“N”字形或“W”字形壓制。對于高大的草本植物，可選擇同一植株形態(tài)上有代表性的上、中、下三段進行壓制。（5）編號登記要及時、認真：“每采集到一種植物都要在中部套上個號簽。號簽用硬紙制成，上面只寫編號。如果是雌雄異株植物，應該分別編號，并注明兩者的特殊關系。標本編號以后，應該立即在標本記錄冊上記錄。標本記錄冊的項目見下表。（6）外出采集的注意事項①到果園、苗圃、菜園去采集植物，先要征得其主人同意，以免引起誤會。②到山林去采集植物，要注意防火，不能在林中吸煙和點火。同時要愛護自然資源，不可亂折濫采，對珍稀植物一定要“手下留情”，保護其種群。③上山過河，要注意安全，不要亂采食野果，以免誤食中毒。③換紙：壓制標本的紙最好用吸水紙（如果沒有，用舊報紙也可），疊成四開大小后即可使用。將整理好的標本平攤在紙上，蓋上幾張。將整理好的標本平攤在紙上，蓋上幾張吸水紙，紙上再平攤植物標本，這樣一層層疊起來，夾在標本夾里，標本夾用繩加壓捆緊，使吸水紙吸干植株里的水分。開始每天換紙兩次，以后逐漸減少次數，共換6-7次即可。換紙越勤，干得越快，越能保持原色。反之，會使標本發(fā)霉變黑脫落。換下的紙及時曬干或烘干后，以備下次換用。如果標本的嫩葉嫩莖能折斷，就說明植株已干透了。

⑤上臺紙：臘葉標本都要上臺紙。臺紙是一種厚而致密的白板紙，通常將整張白板紙裁成8開（38*27cm）即可。標簽大小為8*6cm，上面標明科名、種名、學名、采集地、日期、采集人等幾項，文字最好是打印或鉛印。標本裝幀時要注意將標本合理地安置在臺紙上，一是標本形態(tài)要自然；二是擺布要科學，有的植株要擺正（如帶枝葉花果的標本），有的則要偏斜（如纏繞植物等），若是比較標本，還要使各類根都能下垂；三要突出植物的特點，如蕨類植物，除選擇根、莖（根狀莖）、葉外，必須翻轉1-2片蕨葉，突出完整的孢子囊群的特點；四是布局要美觀，不能將臺紙擺得滿滿的，要空實互補，講究一點空白美，才能產生輕松感的效果。

標本定位后，右下角要空出貼標簽的地方。木本植物固定宜用白線縫，先從根莖下部開始，正面針跡要與莖垂直。草本植物固定可選擇薄而韌的道林紙，將其切成0.5cm寬、3cm長的小條。將標本在臺紙上擺好位置后，用鉛筆在需要固定的位置劃上線，然后拿下標本，用小尖刀在適當位置切出數對小縱口，將白紙條從切口部位穿入，再用手從背后捏住紙條的兩端，輕輕拉緊，然后用膠水粘在臺紙的背面。有些植物有纖細的花，易折掉的果、易散落的孢子等，則可用一小塊玻璃紙做局部粘封保護。附屬的樹皮、種子也可用乳膠粘貼或玻璃紙封貼。⑥為了保護標本，還可以在標本正面刷一薄層清漆，使標本色澤新鮮、富有生氣，并能起到加固作用。為防止標本磨損，應該在臺紙上面貼上蓋紙，若是柔軟纖細的植物（如藻類等），則可蒙上一層玻璃紙，這樣一份臘葉標本就算完成了。（2）電熨制作法

如果遇上陰雨天氣，為防止所采回的標本霉變，可采用此法來處理標本。①工具和用品：調溫電熨斗一個，剪刀，吸水紙，透明膠紙，臺紙，標簽等。②制作方法：整形和清洗：首先將標本按需要剪成適當的尺寸，用濕布抹干凈臟物。適當剪去一些過密花葉（要留少量的葉柄、花梗，以便顯示植物原來的形態(tài)），僅留下典型的枝葉。若果實較大，則摘下另做處理。熨燙脫水：將經過整形的標本平放在舊報紙上，上面覆蓋一層吸水紙，熨斗通電加熱（60-100℃）后，在吸水紙上來回運動，就像平常燙衣服一樣。如果葉片有褶皺，可翻過來再熨，待干燥、冷卻后葉就平展美觀了。燙熨時間要根據植株體內的含水量而定，一般在5-15分鐘即可。像洋蔥、馬鈴薯等，宜切成0.5-1cm厚的薄片，燙干脫水后，用膠水粘在臺紙上，然后將它們的植株“移居”其旁。這樣，一件標本的主要器官（根、莖、葉、花、果實、種子）都俱全了。③電熨制作法的優(yōu)點：不受氣候條件的限制，能及時方便的處理標本；因是高溫殺青，所以保色能力比臘葉標本強，更有“真實感”；不需要經常定時換紙和綁壓，減少程序，還可避免損壞柔軟的植物；操作簡單、迅速。（2）各種浸制方法①綠色標本浸漬法各種綠色果實、綠色枝條和幼苗應該用此法。具體做法：將硫酸銅20克、濃鹽酸2-3滴溶解在100毫升水中，將植物放入，加熱至95℃左右。半小時后，植物由綠變黃褐，又由黃褐變綠。取出后，在清水中洗凈，放入5%福爾馬林中保存。體積較大的果實不宜用加熱處理，可直接將其放入硫酸銅福爾馬林混合液（用硫酸銅飽和水溶液700毫升、35：40%濃福爾馬林50毫升和水250毫升配成）10-20天，取出標本后，用清水充分洗凈，再浸入5%福爾馬林水溶液保存。②紅色標本浸漬法櫻桃、辣椒、番茄等紅色果實可用此法。具體做法：將4毫升甲醛原液和3克硼酸溶解在400毫升清水中，配成處理液；再取20毫升10%亞硫酸和10克硼酸溶解在500毫升清水中，配成保存液。將洗凈的果實浸入處理液中，直到果實由紅色變成深褐色。取出果實，用注射器注入少量保存液于果實內，防止果實內部腐爛。注射后，將果實浸入保存液中，果實即會逐漸恢復紅色。③紫色果實浸漬法紫色的葡萄、茄子等采用此法。保存液：將40%福爾馬林50毫升、10%食鹽水溶液100毫升和870毫升水混合攪拌，沉淀，過濾后制成。先用注射器往標本里注射少量保存液，再把標本直接放入保存液里保存。④黃綠色標本保存法各種黃綠色果實即可采用此法。具體做法：先將洗凈的果實浸入5%硫酸銅溶液1-2天后，取出果實，在果實周圍用注射器注入少量保存液（在30毫升6%亞硫酸、30毫升甘油和30毫升95%酒精的混合液中加入900毫升水）。將注射過保存液的果實浸入保存液即可。⑤白色標本浸漬法將22.5g氯化鋅放入680ml水中，攪動，待全部溶解后，加入80-90%酒精90ml，澄清后保存標本。⑥黑色標本的浸漬法用福爾馬林45ml，酒精280ml，蒸餾水2000ml混合，待澄清后保存標本。⑦透明標本的浸制法材料：天竺葵花一盆，95%酒精，KOH，曙紅，甘油，甲醛，標本瓶等。方法：取材：剪取數條長10cm左右的天竺葵莖（也可帶2個葉片），用清水洗凈。處理：將洗凈的天竺葵嫩莖浸入95%的酒精內3天。剝皮：用解剖刀輕輕除去浸過的嫩莖表皮。除去葉綠素：將去掉表皮的嫩莖放入裝有酒精的燒杯里，隔水加熱，使葉綠素溶解在酒精里。腐蝕：將除去葉綠素的嫩莖放入5%的氫氧化鉀溶液中10-20天，即成半透明狀態(tài)。著色：為使莖內維管束更加清楚可見，可對嫩莖進行著色。為此，把嫩莖浸入用酒精配成的0.05%的曙紅溶液中3天。脫色：把已著色的嫩莖浸入5%氫氧化鉀溶液中2天，然后取出再浸入配制的5%的氫氧化鉀、4%甘油和4%甲醛混合液中約10天左右。保存：將脫色的嫩莖取出，用清水沖洗干凈，浸入裝有純甘油的標本瓶內密封保存。4、玻片標本（1）采集微小植物

根瘤菌要在開花期的豆科植物根上去采集，硫細菌則到礦泉或散布著硫化氫氣味的水中的灰色粘團中尋找，鐵細菌常集中在河沼水面上的棕色絮狀物或水底棕色絲狀物之中。（2）玻片標本制作

①微小植物裝片材料先在70%酒精中脫水2小時，再放入85%的酒精中2小時和95%酒精中1小時，取出風干一會即可封片。封片膠最好用加拿大樹膠。②微生物涂片將新的載玻片和蓋玻片用紗布蘸酒精擦干凈，將微生物涂布在載玻片的中央，自然干燥后，在酒精燈火焰上過幾次以利于固定。如果制細菌裝片，則用1%龍膽紫溶液染色10分鐘，清水洗去浮色，立在盒內，待自然干燥后封片。③組織解離裝片將植物的導管、篩管、木纖維和葉上的氣孔先用酒精（95%）與濃鹽酸混合液（1:1）浸泡5-10分鐘，水洗、染色、洗去浮色后，制成裝片。上述三種玻片標本都要貼上標簽，寫上標本名和制作人，并將標簽貼在玻片右端，使顯微鏡中物像與文字一致。

（3）石蠟永久裝片制作石蠟切片法是用石蠟作為包埋劑的一種顯微制片方法，是顯微技術中最重要最常用的方法之一。它的優(yōu)點是能夠切成薄而均勻的連續(xù)切片，便于進行器官的三維重構。此法多用手搖切片機切片。對于較硬的材料，也可以使用滑走切片機。石蠟切片法的操作程序包括：取材、固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、修塊、切片、粘片、染色和封片。5、干裝標本（1）哪些植物適宜作干裝標本各種植物的種子和干果、植物器官的比較（如直根系、須根系等）和某些植物（如地衣、靈芝等）的全株標本都宜作干裝標本。（2）干裝標本的選擇和加工對種子和果實標本，要精選有典型性狀、無病蟲、大而飽滿的種子和果實；對于果穗及全株標本，除注重特點外，盡量選擇小而成熟的個體。若是高莖植物，要折成“N”字形。為防止果穗落粒，可在上面涂少許清漆或乳膠。（3）化石標本的采集采集化石標本一般在砂巖、頁巖、石灰?guī)r、礫巖中可能采集到化石標本。其次，在河床、沖溝內，由于流水的作用，剝蝕速度較快，巖石出露好，也?？梢圆杉酱罅康幕?。（4）標本的封存①木底玻璃盒標本盒的大小和高度依標本而定。里面裱上墨綠色絨紙則用來裝淺色標本。將標本和標簽一一擺好，用乳膠粘牢，最后在盒內四角置樟腦丸，以防蟲蛀。②瓶裝干制標本用種子瓶或無色透明的小藥瓶裝種子或干果，將瓶口封嚴即可。③試管干制標本用試管裝干果、果穗、苔蘚等，試管口塞上軟木塞或棉花，將標簽裝入試管內即可。6、立體標本

立體標本有兩個優(yōu)點：（1）標本脫水后便于保存；（2）能保持標本新鮮時的立體形態(tài)，便于教學和展覽。其制作方法有兩種：（1）細砂埋藏法將采集的植株（要選用葉有革質或含水較少的植物）進行修剪，小心地將其根或莖插入盒內固定，放入干燥、潔凈的細砂（盒底的小孔堵?。?，使整個植株都埋在砂中，然后放在陽光下或火爐旁，大而多汁的標本一般需7-8天，小標本只需1-2天。然后將盒底的小孔打開，讓砂自然流出，再用軟毛筆將材料上的細砂刷去，為防止花瓣脫落，可在花的下部涂上膠水。最后將標本直立并固定在木座上，裝入倒立的大廣口瓶內或玻璃鐘罩內即可。（2）硅膠埋藏法事先準備好干燥箱、真空泵、真空干燥器和硅膠等。制作標本時，將干燥箱溫度控制在41-42℃。在真空干燥器的底部鋪上3cm厚的硅膠（硅膠事先要粉碎成小米粒大?。瑢⑿迈r植物標本立在真空干燥器里，把事先準備好的硅膠慢慢倒入，邊倒邊用鑷子整理植物，盡量保持原形。等到硅膠把整個植株掩埋后，在真空干燥器邊緣涂上凡士林，蓋好蓋子。再把真空干燥器放入事先調好溫度的干燥箱內，并將真空干燥器內的空氣抽完（約3小時），干燥器保持約4-5小時后，切斷電源，待干燥器內溫度下降到室溫后，把真空干燥器的閥門打開，慢慢將標本取出，并用噴霧器噴灑5%的石蠟甘油溶液。制好的標本放入體積相當的玻璃瓶內保存，并在玻璃瓶內放入少量硅膠。（3）生態(tài)景箱①材料：木條、玻璃、馬糞紙、紙漿、白板紙、藜、蒿、圓柏枝、白雞毛、顏料、油漆等。②制作方法：制木框：外框尺寸為70*40cm，邊寬3cm，厚10cm。鑲玻璃：先在玻璃內面四邊用淺灰漆涂上寬6cm的邊，再安放到木箱槽口內。從后面把玻璃與木框間的縫隙用紙條糊好，再加小木條將玻璃固定住。設計景觀，分解層次：森林生態(tài)系統(tǒng)可分為遠景（天空和遠山）、中景（山岡）、近景1（山坡上的林木）和近景2（樹干和枝頭）等幾個景片。用顏料在馬糞紙上繪出天空、白云、遠山等遼闊的遠景。中景片用白板紙繪畫，山頭林木虛虛實實，適當鏤空，制作中近景山坡是在馬糞紙上粘加塑料、紙漿和染色的鋸末，樹林則用藜、蒿等細枝染色后粘住。注意留點林間空地，使景色顯得開闊、深邃。近景中的樹干等用圓柏枝代替。組裝：先將遠景底片平放好。中景片后加2cm厚木條，粘在底片上。中近景片后加4cm厚木條，粘在底片上。近景樹木直接用紙漿、膠水等固定在木框上。最后將它們合在一起，用圖釘把馬糞紙按在木框上，周圍間隙用紙條糊好，防止灰塵進入。（三）植物標本的保存1、干制標本