DB13-T812-2006大豆及其制品蛋白質溶解度的測定

1、B 46DB13河北省地方標準DB13/T 8122006大豆及其制品蛋白質溶解度的測定2006-11-11 發(fā)布2006-11-20 實施河北省質量技術監(jiān)督局發(fā)布DB13/T 8122006I前言本標準由河北省畜牧獸醫(yī)局提出。本標準起草單位：河北農(nóng)業(yè)大學、河北省飼料工業(yè)辦公室、河北省飼料產(chǎn)品質量監(jiān)督檢驗站。本標準主要起草人：趙國先、王鈴、師校軍、米振杰、武英利、黃仁錄、李艷琴。DB13/T 8122006 PAGE 2大豆及其制品蛋白質溶解度的測定范圍本標準規(guī)定了大豆及其制品中蛋白質溶解度測定的原理、試劑、儀器設備和測定方法。本標準適用于飼料檢測單位、飼料企業(yè)、養(yǎng)殖場（戶）、大中專院校對大豆

2、及其制品加工質量的檢測和監(jiān)控。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB/T 6012002 化學試劑 標準滴定溶液的制備GB/T 64321994 飼料粗蛋白測定方法術語和定義下列術語和定義適用于本標準。蛋白質溶解度在一定的氫氧化鉀溶液中溶解的蛋白質質量占試樣中總蛋白質量的百分數(shù)。通常采用氮溶解指數(shù)（NSI）和蛋白質分散指數(shù)（PDI）來表示。原理用一定濃度的氫氧化

3、鉀溶液提取試樣中的可溶性蛋白質，在催化劑作用下用濃硫酸將提取液中可溶性蛋白質的氮轉化為硫酸銨。加入強堿進行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用鹽酸滴定測出試樣中可溶性蛋白質含量；同時，測定原始試樣中粗蛋白質含量，計算出試樣的蛋白溶解度。試劑氫氧化鉀（分析純），無水硫酸鉀、五水硫酸銅、氫氧化鈉、硼酸、甲基紅、溴甲酚綠、硫酸銨；濃硫酸、鹽酸（分析純）、95%乙醇、蒸餾水。儀器和設備感量為 0.0001 g 分析天平；磁力攪拌器；離心機；樣品粉碎機；60 目分析篩；電爐；100 ml 或 250 ml 凱氏燒瓶；凱氏蒸餾裝置；250 ml 錐形瓶；1 000 ml 容量瓶；微量滴定管。分析步驟試劑0.0

4、42 mol/L 氫氧化鉀溶液稱取 2.360 g 氫氧化鉀，加水溶解后，轉移至 1 000 ml 容量瓶中，用水定容至刻度?；旌洗呋瘎┓Q取 6 g 硫酸鉀和 0.4 g 硫酸銅，磨碎混勻。氫氧化鈉溶液稱取 400 g 氫氧化鈉，加水溶解后，轉移至 1 000 ml 容量瓶中，用水定容至刻度。硼酸溶液稱取 20 g 硼酸，加水溶解后，轉移至 1 000 ml 容量瓶中，用水定容至刻度。0.1 mol/L 鹽酸標準溶液量取 8.3 ml 濃鹽酸，注入 1 000 ml 水中混勻，按 GB/T 6012002 要求進行標定即可。混合指示劑稱取 1 g 甲基紅和 5 g 溴甲酚綠，加入乙醇溶解后，轉

5、移至 1 000 ml 容量瓶中，用乙醇定容至刻度。樣品制備取具有代表性的試樣用四分法縮減至 200 g，粉碎至 60 目，裝入密封容器中。操作步驟試樣處理稱取試樣 1.5 g（準確至 0.0002 g）置于 250 m 燒杯中，準確移入 0.042 M 氫氧化鉀溶液 75 m，磁力攪拌 20 min，然后將試樣轉移至離心管中，以 2700 r/min 的速度離心 10 min。測定吸取上清液 15 ml, 放入消化管中, 按照 GB/T 64321994 凱氏定氮法測定試樣中可溶性蛋白質的含量。同時，按照 GB/T 64321994 凱氏定氮法測定試樣中粗蛋白質的含量。分析結果計算試樣中蛋白質溶解度按照（1）式進行計算：式中：p試樣中蛋白質溶解度，%；p (%) P 100 M（1）P試樣中可溶性蛋白質的含量； M試樣中粗蛋白質的含量。重復性