維生素C含量測定方法綜述精學習教案

1、維生素維生素C含量含量(hnling)測定方法綜述精測定方法綜述精第一頁，共50頁。第1頁/共50頁第二頁，共50頁。第2頁/共50頁第三頁，共50頁。第3頁/共50頁第四頁，共50頁。CCCHOHOCHOOCHHOCH2OH第4頁/共50頁第五頁，共50頁。第5頁/共50頁第六頁，共50頁。第6頁/共50頁第七頁，共50頁。來測定維生素CCCOHOH第7頁/共50頁第八頁，共50頁。 原理原理(yunl)2，6-二氯靛酚是一種染料，其氧化型在酸性(sun xn)介質(zhì)中為紅色，堿性介質(zhì)中為藍色，與Vc反應后，生成無色的還原型酚亞胺，因此，在酸性(sun xn)條件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶

2、液顯玫瑰紅色，即為終點；無需另加指示劑。第8頁/共50頁第九頁，共50頁。方法方法(fngf)取本品適量（約相當于Vc50mg），用適量水溶解，置100ml量瓶中，加偏磷酸-醋酸(c sun)試液20ml,再用水稀釋置刻度，搖勻；精密量取稀釋液適量（約相當于Vc2mg）置50ml的錐形瓶中,加偏磷酸-醋酸(c sun)試液5ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液顯玫瑰紅色,并持續(xù)5s不褪；空白試驗：取偏磷酸-醋酸(c sun)試液5.5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。計算： (V-V0) F T WW 標示(bio sh)量 標示量%=反應摩爾比反應摩爾比100第9頁/共

3、50頁第十頁，共50頁。CCCHOHOCHOOCHHOCH2OHOClClNOHOHClClNOHCCOCHCOOOCHCH2OHHO 維生素C 2,6-二氯酚靛酚 維生素C 2,6-二氯酚靛酚（還原型） （氧化(ynghu)型，粉紅色） （氧化(ynghu)型） （還原型） + + = 第10頁/共50頁第十一頁，共50頁。第11頁/共50頁第十二頁，共50頁。222234622IS OIS O第12頁/共50頁第十三頁，共50頁。第13頁/共50頁第十四頁，共50頁。第14頁/共50頁第十五頁，共50頁。第15頁/共50頁第十六頁，共50頁。第16頁/共50頁第十七頁，共50頁。第17頁/

4、共50頁第十八頁，共50頁。第18頁/共50頁第十九頁，共50頁。HHHHHH第19頁/共50頁第二十頁，共50頁。第20頁/共50頁第二十一頁，共50頁。第21頁/共50頁第二十二頁，共50頁。第22頁/共50頁第二十三頁，共50頁。第23頁/共50頁第二十四頁，共50頁。原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果(ji gu)維生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有顯著差異，而片劑輔料旋光度保持不變差示旋光法消除輔料的影響，直接測出該制劑的含量討論討論與與第24頁/共50頁第二十五頁，共50頁。方法方法(fngf)TEXT1）標準溶液的配制準確稱取維生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸鈉

5、0.37g,置于100mL容量瓶中,用新沸冷卻(lngqu)的蒸餾水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的維生素C標準溶液。TEXT原理原理(yunl)方法方法結(jié)果結(jié)果討論討論與與第25頁/共50頁第二十六頁，共50頁。2）比旋光度與溶液pH值的關(guān)系量取10.0mL維生素C標準液于50mL量瓶中,用水稀釋至50mL。測定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批加入氫氧化鈉(qn yn hu n)固體(每次約50mg),每次溶解后,測定一次溶液的pH及其旋光度,得到維生素C溶液的pH及旋光度關(guān)系原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第26頁/共50頁第二十七頁，共50頁。選定

6、選定(xun dn)pH為為2.2和和6.2第27頁/共50頁第二十八頁，共50頁。2）差示旋光度與溶液濃度(nngd)關(guān)系吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的維生素C標準液各兩份,分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容；一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容，靜置3min后,用220mm測定管，以前者為空白，測定后者的差示旋光度(a)。文獻結(jié)果：線性方程為a=0 205*C+ 005，r=09964原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第28頁/共50頁第二十九頁，共50頁。3）輔料干擾試驗取混合(hnh)輔料20mg(淀粉、硬脂酸鎂、

7、EDTA、糊精等按處方比例混勻)兩份分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容,一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容,濾去不溶物,濾液在兩種pH值測定差示旋光度。文獻結(jié)果：輔料的差示旋光度為零，說明輔料對維生素C含量的測定不干擾。原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第29頁/共50頁第三十頁，共50頁。4）穩(wěn)定性試驗(shyn)同一測試樣品，在120min內(nèi)，每隔3min測定一次差示旋光度。文獻結(jié)果：差示旋光度基本不變原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第30頁/共50頁第三十一頁，共50頁。5）回收率試驗精密稱取維生素C精制品5

8、00.0mg兩份，分別(fnbi)置于50mL容量瓶中，各加入20mg輔料，分別(fnbi)用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液，測定差示旋光度。文獻結(jié)果：平均回收率為97.8，變異系數(shù)cv為1.03原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第31頁/共50頁第三十二頁，共50頁。方法方法(fngf)TEXT6）樣品測定(cdng)取維生素C片劑10片，稱重研碎后分別用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液(相當于含Vc 20mg/mL)，濾去不溶物，測定(cdng)濾液的差示旋光度，根據(jù)回歸方程計算其含量。TEXT原理原理(yunl)討論討論方法方法結(jié)果結(jié)果

9、與與第32頁/共50頁第三十三頁，共50頁。方法方法(fngf)TEXT1）維生素易被氧化,空氣及水中的氧均可使其氧化分解，配制溶液時使用新沸冷卻水,同時加人EDTA作為穩(wěn)定劑；2）樣品測定時，片劑部分物質(zhì)不能完全溶解，必須過濾除去(ch q)，然后測定濾液的差示旋光度。TEXT原理原理(yunl)討論討論方法方法結(jié)果結(jié)果與與第33頁/共50頁第三十四頁，共50頁。第34頁/共50頁第三十五頁，共50頁。第35頁/共50頁第三十六頁，共50頁。第36頁/共50頁第三十七頁，共50頁。第37頁/共50頁第三十八頁，共50頁。操作方法與結(jié)果（1）試紙的制備 2,6-二氯靛酚鈉 (DCP-Na)溶于

10、無水乙醇配成0.05%的DCP-Na乙醇溶液，濾紙在盛有DCP-Na乙醇溶液的展開缸中浸漬3min，邊浸邊搖展開缸，使濾紙均勻著色，充分被染料溶液所飽和。取出懸掛于暗處，晾干后，立即放入干燥器中避光保存(bocn)，備用。 第38頁/共50頁第三十九頁，共50頁。（2）緩沖溶液的配制(pizh) 稱取檸檬酸水合物10g，放入1000ml容量瓶中，加入1M 氫氧化鈉 420ml，并用蒸餾水稀釋至刻度，此溶液的pH應為3.5。否則，用酸或堿調(diào)整 pH值，保存于冰箱中。 第39頁/共50頁第四十頁，共50頁。3）掃描條件確定 在制備的染料試紙(shzh)上定量點上維生素C對照品進行掃描 ，維 生素

11、C在 290nm 處有最大吸收，420nm處無吸收，故選擇1=290nm， 2=420nm雙波長反射式鋸齒掃描。原理原理(yunl)方法方法結(jié)果結(jié)果討論討論與與第40頁/共50頁第四十一頁，共50頁。4）線性實驗）線性實驗 4.1）對照品溶液的配制）對照品溶液的配制 精密稱取維生素精密稱取維生素C標準品標準品100mg，用緩沖溶液配成，用緩沖溶液配成lmg/ml的標準的標準溶液。精密稱取維生素溶液。精密稱取維生素C標準溶液標準溶液1、2、3、4、5ml，分別置于，分別置于10ml容量瓶中，用緩沖溶容量瓶中，用緩沖溶液稀釋至刻度。液稀釋至刻度。4.2）測定）測定 用用5l定量毛細管，分別吸取上述

12、溶液各定量毛細管，分別吸取上述溶液各5 l，點于試紙上，點于試紙上 。點樣后晾干，并。點樣后晾干，并將試紙將試紙 固定在固定在20cm20cm玻璃板上，放入薄層掃描儀。測定玻璃板上，放入薄層掃描儀。測定A 的積分值的積分值 (峰面積峰面積)作作為縱坐標為縱坐標Y ，點樣量為橫，點樣量為橫 坐標坐標X，得一直線，得一直線(zhxin)方程方程 Y=15692X+130225，r= 09991 原理原理(yunl)方法方法結(jié)果結(jié)果討論討論與與第41頁/共50頁第四十二頁，共50頁。方法方法(fngf)TEXT5）樣品的含量測定 取維生素 C片10片，研細，精密稱取平均片重一片的粉末，放入100ml

13、容量瓶中，加入緩沖液至刻度，振搖，使維生 素 C溶解，放置、澄清，用吸液管取3ml 移至10ml容量瓶中，用緩沖液稀釋至刻度。用 5 l定量毛細管點樣品溶液與不同濃度(nngd)的標準液于同一試紙上 ，然后掃描 測定峰面積，由工作曲線法計算維生素C片中的維生素C含量。TEXT原理原理方法方法結(jié)果結(jié)果討論討論與與第42頁/共50頁第四十三頁，共50頁。6）回收率實驗 精密稱取維生素C對照(duzho)品20mg，其它原輔料適量，置 10ml容量瓶中，加緩沖液稀釋至刻度，振搖，濾過 ，棄初濾液。分別吸取續(xù)濾液與對照(duzho)品維生 素 C液各5 l點于同一試紙上，按上述條件進行掃描測定。第43頁/共50頁第四十四頁，共50頁。點樣時各點間距應大于10mm，掃描測不定期波長可做少量變