Waters_2695_型高效液相色譜儀操作方法

1、.Waters 2695 型高效液相色譜儀操作方法1 儀器組成及開機(jī) 1.1 儀器組成本儀器由 Waters 2695 分離單元、 2996型二極管陣列檢測器、色譜管理工作站和打印機(jī)組成。 2695 分離單元包括四元梯度洗脫的溶劑輸送系統(tǒng)，四通道在線真空脫氣機(jī)（或氦氣脫氣機(jī)），可容納 120 個樣品瓶的自動進(jìn)樣系統(tǒng)，柱溫箱，內(nèi)置的柱塞桿密封墊清洗系統(tǒng)，溶劑瓶托盤，液晶顯示器，鍵盤用戶界面及軟盤驅(qū)動器。 1.2 開機(jī)依次接通 2695 分離單元、檢測器、計算機(jī)和打印機(jī)的電源。接通 2695 分離單元后，約 20s 儀器開始自檢，約 1min 后，顯示主屏幕，此時繼續(xù)各部件的初始化，待主屏幕上方標(biāo)

2、題區(qū)出現(xiàn)“ Idle ”時，儀器進(jìn)入待命狀態(tài)。 2 溶劑管理系統(tǒng)的準(zhǔn)備 2.1 流動相脫氣確認(rèn)所有溶劑管路都充滿溶劑，按【 Menu/Status 】，進(jìn)入“ Status （ 1 ）”屏幕，光標(biāo)選“ Degasser ”，按【 Enter 】，顯示選項屏幕，光標(biāo)下移選“ Continuous ”，按【 Enter 】。 2.2 啟動溶劑管理系統(tǒng) 2.2.1 干啟動，當(dāng)溶劑的管路是干的或是需要更換溶劑時，在“ Status （ 1 ）”屏幕下，按【 Direct Function 】，光標(biāo)選“ Dry Prime ”，按【 Enter 】，顯示“ Dry Prime ”屏幕，按欲啟動的溶劑管路

3、的屏幕鍵，如【 OpenA 】，光標(biāo)選“ Duration ”，按數(shù)字鍵輸入 5min ，按【 Continue 】，待限定時間結(jié)束后，重復(fù)操作，使實驗所需的各溶劑管路均啟動、排氣并充滿流動相。 2.2.2 濕啟動在“ Status （ 1 ）”屏幕下，光標(biāo)選“ Compomtion ”中欲使用的流動相，輸入 10 0 ，按【 Direct Function 】，光標(biāo)選“ Wet Prime ”，按【 Enter 】，顯示“ Wet Prime ”屏幕，輸入 7.5Ml/min 和 6min ，按【 OK 】，待限定時間結(jié)束后，對每種流動相重復(fù)操作。 2.2.3 平衡真空脫氣機(jī)在“ Statu

4、s （ 1 ）”屏幕下，光標(biāo)選“ Composition ”，輸入流動相的組成，按【 Enter 】再用光標(biāo)選“ Degasser ”中的“ Normal ”，按【 Enter 】，按【 Direct Function 】，光標(biāo)選“ Wet Prime ”，輸入 0.000mL/min 和 10min. ，按【 OK 】。待限定時間結(jié)束后，按【 Abort Prime 】。 3 樣品管理系統(tǒng)的準(zhǔn)備 3.1 沖洗自動進(jìn)樣器在“ Status （ 1 ）”屏幕下，光標(biāo)選“ Composition ”，輸入流動相的組成。按【 Direct Function 】，光標(biāo)選“ PurgeInjector

5、”，按【 Enter 】，顯示“ Purge Injector ”屏幕，輸入“ Sample Loop Volumes 6.0 ” ，光標(biāo)下移“ Compression Check ”，按任意數(shù)字鍵，按【 OK 】。 3.2 沖洗進(jìn)樣針在主屏幕下，按【 Diag 】，顯示“ Diagnositcs ”屏幕，按【 Prime Ndl Wash 】，顯示“ Prime Needle Wash ”屏幕，按【 Start 】， 30s 內(nèi)應(yīng)見溶劑從廢液排放口流出。按【 Close】、【 Exit 】。 3.3 沖洗柱塞桿密封墊在主屏幕下，按【 Diag 】，顯示“ Diagnosities ”屏幕，按

6、 Prime Seal Wash ，顯示“ Prime Seal Wash ”屏幕，按【 Start 】，待排放口有水流出，按【 Halt 】、【 Close】、【 Exit 】。 3.4 裝入樣品與轉(zhuǎn)盤將樣品瓶插到樣品盤合適的位置，打開樣品倉門，顯示“ Door is Open ”屏幕，裝入樣品盤，按【 Next 】，直至所有樣品盤裝畢，關(guān)倉門。 4 編輯分析方法及執(zhí)行樣品分析表 在主屏幕下，按【 Develop Methods 】，顯示“ Methods ”屏幕。 4.1 編輯分析方法 4.1.1 建立新的分離方法在“ Method ”屏幕下，按【 New 】、【 Separation M

7、ethods 】，輸入方法名，按【 Enter 】，顯示分離方法屏幕，該屏幕共有 6 頁，通過按【 Next 】或【 Prev 】切換。如需設(shè)定梯度，在第（ 1 ）頁按【 Gradient 】，輸入后按【 Exit 】；如需設(shè)定色譜柱的溫度，在第（ 4 ）頁輸入后按【 Exit 】；在第（ 6 ）頁設(shè)定檢測器的種類，光標(biāo)選“ Absorbance Detector ”，按【 Enter 】，光標(biāo)選“ 48 6 2487 ” ，按 Abs （ 1 ）圖標(biāo)，設(shè)定檢測波長，按【 OK 】、【 Exit 】、【 Save 】。 4.1.2 編輯已建立的分離方法在“ Methods ”屏幕下，光標(biāo)選欲編

8、 輯 修改的分離方法的圖標(biāo)，按【 Edit 】，編輯 改各種分析參數(shù)，按【 Exit 】、【 Save 】。 4.2 編輯執(zhí)行樣品分析表 4.2.1 建立新的樣品組在“ Methods ”屏幕下，按【 New 】、【 Sample Set 】，輸入樣品組名，按【 Enter 】，顯示方法組屏幕，在樣品組表中輸入待分析樣品的信息。在“ Vial ”中輸入樣品放置的位置；在“ Function ”中光標(biāo)選擇“ Sandard ”或“ Sample”；在“ Method ”中選擇已建立的方法；在“ inj ”中輸入進(jìn)樣的次數(shù)；在“ L ”中輸入進(jìn)樣的體積；在“ min ”中輸入運(yùn)行時間。按【 Exi

9、t 】、【 Save 】。 4.2.2 編輯已建立的樣品組在“ Methods ”屏幕下，光標(biāo)選欲編 輯 修改的方法組的圖標(biāo)，按【 Edit 】，編 輯 修改待分析樣品的信息，按【 Exit 】、【 Save 】。 5 運(yùn)行樣品 5.1 在“ Status （ 1 ）”屏幕下，光標(biāo)選“ Method ”，按【 Enter 】，選已建立的分離方法；光標(biāo)選“ Flow ”，輸入流速，光標(biāo)選“ Composition ”，輸入流動相的組成。 5.2 在主屏幕下，按【 Run Samples 】， 光標(biāo)選已建立的樣品組， 按【 Run 】、【 Satrt 】。 6 報告打印 在主屏幕下，按【 Conf

10、ig 】，顯示“ Configuration ”屏幕，按【 Reports 】，在“ Report Options ”對話框中選擇欲輸出到打印機(jī)或軟盤的信息，按【 OK 】、【 Exit 】。 7 關(guān)機(jī) 7.1 使用完畢，按規(guī)定用適當(dāng)?shù)娜軇_洗色譜柱、系統(tǒng)管路、自動進(jìn)樣器、進(jìn)樣針和柱塞桿密封墊，確保 2695 分離單元已徹底沖洗干凈后，關(guān)閉電源開關(guān)。 7.2 數(shù)據(jù)采集完畢后，關(guān)閉檢測器電源開關(guān)。 7.3 處理數(shù)據(jù)并打印報告后，關(guān)閉計算機(jī)和打印機(jī)電源開關(guān)，并做使用登記。 附注： （ 1 ） 2695 分離單元除用上述的系統(tǒng)控制模式外，還可設(shè)置非交互模式和色譜工作站控制模式，詳見儀器使用說明書。

11、（ 2 ）色譜管理工作站 配置 安裝了數(shù)據(jù)處理軟件的計算機(jī)。 數(shù)據(jù)處理 如果使用Waters 的Millennium 色譜管理工作站控制2695分離單元分析測定樣品，當(dāng)工作站采集數(shù)據(jù)時，2695分離單元屏幕上方的標(biāo)題區(qū)出現(xiàn)“Remote”。色譜管理工作站的基本操作步驟為：設(shè)置一個含有 2695 分離單元的色譜系統(tǒng)，建立一個含有 2695 分離單元的儀器方法，用已獲得的儀器方法建立一個方法組，用已建立的方法組運(yùn)行樣品，處理并打印出色譜運(yùn)行所得到的數(shù)據(jù)。Waters 2695 HPLC操作注意事項：1、 配置好的流動相需進(jìn)行超聲脫氣（10-20min）。2、 當(dāng)流動相進(jìn)行更換或重新加入時，必須用Dry Prime排除管路中的空氣，使實驗所需的各溶劑管路均啟動、排氣并充滿流動相，再進(jìn)行流動相的平衡