血紅蛋白含量測(cè)定

1、血紅蛋白含量測(cè)定/、血紅蛋白是紅細(xì)胞的主要成分，在正常情況下，每個(gè)紅細(xì)胞均含有一定量的血紅蛋白。血紅蛋白是由珠蛋白和亞鐵血紅素組成的結(jié)合蛋白質(zhì)。血紅蛋白除能與氧結(jié)合形成氧合血紅蛋白外，尚能與某些物質(zhì)作用形成多 種血紅蛋白衍生物。它們具有特定的色澤和吸光譜，在臨床上，可用以診 斷某些變性血紅蛋白血癥和血紅蛋白的定量測(cè)定。血球分析儀器法儀器型號(hào)：Sysmex KX-21型多項(xiàng)目自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀器Sysmex XE-2100型多項(xiàng)目自動(dòng)血球分析裝置檢測(cè)原理：一、Sysmex KX-21在自動(dòng)檢測(cè)法中的血紅蛋白測(cè)量以富化正鐵血紅蛋白法或氧合血紅蛋白法為主流。但這種方法血紅蛋白轉(zhuǎn)化速度慢，其處理液應(yīng)進(jìn)行妥

2、善處理，以及環(huán)境方面的考慮，并不是一種令人滿意的測(cè)量法。無(wú)策HGBW量法與氧合血紅蛋白法相同，其血液中的血紅蛋白轉(zhuǎn)化成氧合血紅蛋白，且 不含劇毒物。另外，由于可以測(cè)量正鐵血紅蛋白，如質(zhì)控血那樣的含有正 鐵血紅蛋白的血液也可正確進(jìn)行測(cè)量。二、Sysmex XE-2100集中于富化高鐵血紅蛋白測(cè)定法和氧化血紅蛋白測(cè)定法的優(yōu)點(diǎn)，不使 用毒性物質(zhì)，使該方法成為自動(dòng)檢測(cè)的一個(gè)合適的方法。同時(shí)，由于該方 法可以用測(cè)量富化高鐵血紅蛋白，所以該方法也可以準(zhǔn)確的測(cè)量含有高鐵血紅蛋白的血液。試劑： Sysmex KX-21稀釋液WBC/HGB溶血?jiǎng)?%EDT鉀溶液二、Sysmex XE-2100 CELLPAC

3、KEPKSULFOLYSERSL0標(biāo)本吸入量：一、Sysmex KX-21:全血模式 50 片二、Sysmex XE-2100:手工模式 130內(nèi)自動(dòng)進(jìn)樣器模式200 q靜脈血采血方法：抽取病人靜脈血2ml,于EDTAE鉀抗凝的真空采血管中（1.5mgEDTA-K/ML 24小時(shí)室溫保存。操作步驟：一、Sysmex KX-21儀器在全血模式（WB下要在允許空白值內(nèi)：WBC RBC HGB PLT0.3 109/L 0.02 1012/L1g/L 10 109/L檢測(cè)質(zhì)控?cái)?shù)值合格。要在允許空白值內(nèi):WBCRBCHGBPLT90.3 10/L0.02 1012/L1g/L910 10/L檢測(cè)質(zhì)控?cái)?shù)

4、值合格。標(biāo)本的測(cè)量：標(biāo)本的測(cè)量：將待測(cè)標(biāo)本充分混均，然后將吸液管放進(jìn)待測(cè)標(biāo)本試 管中并按下開始鍵。蜂鳴器“笛笛”響兩聲之后，當(dāng)LCD畫面上顯示“正在測(cè)量”狀態(tài)時(shí)可將試管取下。結(jié)果顯示：標(biāo)本被吸入后儀器將進(jìn)行自動(dòng)測(cè)量，約 1分鐘左右測(cè)量 結(jié)束，被測(cè)標(biāo)本的結(jié)果自動(dòng)顯示出來(lái)。同時(shí) LCD畫面自動(dòng)切換至“準(zhǔn)備測(cè) 量”狀態(tài)，此時(shí)可進(jìn)行下一份標(biāo)本的測(cè)量。二、Sysmex XE-2100當(dāng)機(jī)器經(jīng)過(guò)電源接通和一系列自檢無(wú)誤后，在機(jī)器左上放狀態(tài)欄顯 示“READY及確認(rèn)“ READY LED （準(zhǔn)備狀態(tài)燈）呈綠色時(shí)，機(jī)器進(jìn)入準(zhǔn)備 測(cè)量狀態(tài)。手工模式：在準(zhǔn)備測(cè)量狀態(tài)下，按下屏幕最上一行 iMANUALj,利用 數(shù)

5、字鍵輸入標(biāo)本的編號(hào)，按 ENTERj確認(rèn)。將待測(cè)標(biāo)本充分混均，然后將 吸液管放進(jìn)待測(cè)標(biāo)本試管中并按下開始鍵。吸液管吸液完畢后聽到三聲報(bào) 警聲，將試管移開。進(jìn)樣器自動(dòng)模式：在準(zhǔn)備測(cè)量狀態(tài)下，按下屏幕最上一行 ManuA鍵, 利用數(shù)字鍵輸入標(biāo)本的編號(hào)，按 ENTERj確認(rèn)。將試管加放在自動(dòng)進(jìn)樣器 工作臺(tái)上。機(jī)器開始自動(dòng)混均、吸引和分析標(biāo)本。結(jié)果顯示：標(biāo)本被吸入后儀器將進(jìn)行自動(dòng)測(cè)量，被測(cè)標(biāo)本的結(jié)果自動(dòng)顯示出來(lái)。同時(shí)屏幕切換至“準(zhǔn)備測(cè)量”狀態(tài)，此時(shí)可進(jìn)行下一份標(biāo)本的測(cè)量。氧化高鐵血紋蛋白螂定法檢測(cè)原理：血紅蛋白被高鐵富化鉀氧化為高鐵血紅蛋白，再與富結(jié)合成穩(wěn)定的棕 紅色富化高鐵血紅蛋白，在規(guī)定的波長(zhǎng)和液

6、層厚度的條件下，具有一定的 吸光系數(shù)，根據(jù)吸光度，即可求得細(xì)胞蛋白濃度。試劑：富化高鐵血紅蛋白轉(zhuǎn)化液：富化鉀 0.05g、高鐵富化鉀0.2g、無(wú)水磷 酸二氫鉀0.14g、TritonX-100 （或其他非離子型表面活性劑）1.0ml、蒸儲(chǔ) 水加至1000ml。末梢血采集方法：采血部位必須無(wú)凍瘡、炎癥、水腫、充血及循環(huán)障礙。成人以無(wú)名 指為宜，半歲以上兒童手指為好，半歲以下嬰幼兒通常自拇指或足跟兩側(cè) 米血。輕輕按摩采血部位，使其自然充血，用75 %乙醇棉球消毒局部皮膚 待干。緊控刺血部位，用采血針穿刺取血，動(dòng)作應(yīng)迅速，深度約 2-3mm 稍加擠壓，以血液能流出為宜。用干棉球擦去第一滴血，毛細(xì)吸管吸血120內(nèi)于抗凝管中混均，6小時(shí)內(nèi)測(cè)定完畢。采血完畢，用干棉球壓住傷口，血止為止。標(biāo)本吸入量：末梢血模式20%*)*¥*抗凝管的制備：取上述EDTAC1鉀溶液10微升，加入小試管內(nèi)于70 c以下干燥備用。操作步驟：取轉(zhuǎn)化液5ml,加末梢血20囚，混均后靜置5min。已校正過(guò)波長(zhǎng)和靈 敏度的分光光度計(jì)，波長(zhǎng)540士 1nm,光徑1.000cm,譜帶寬度 1nm 20-25 C 杯溫等條件，轉(zhuǎn)化液為空白，測(cè)定其吸光度。計(jì)算：血紅蛋白 g/L= AH40N X 367.7正常參考范圍男：120 160g/L女：11