高考生物真題分項匯編 專題20 細胞工程與胚胎工程-：五年（2019-2023）高考生物真題分項匯編（全國）（原卷版）

專題20細胞工程與胚胎工程考點1動物細胞工程〖2023年高考真題〗1．（2023·北京·統(tǒng)考高考真題）甲狀旁腺激素（PTH）水平是人類多種疾病的重要診斷指標。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關制備過程的敘述不正確的是（）A．需要使用動物細胞培養(yǎng)技術B．需要制備用PTH免疫的小鼠C．利用抗原-抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞D．篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞2．（2023·海南·高考真題）某團隊通過多代細胞培養(yǎng)，將小鼠胚胎干細胞的Y染色體去除，獲得XO胚胎干細胞，再經過一系列處理，使之轉變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎?。下列有關敘述錯誤的是（

）A．營養(yǎng)供應充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細胞不會發(fā)生接觸抑制B．獲得XO胚胎干細胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C．XO胚胎干細胞轉變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎倪^程發(fā)生了細胞分化D．若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可用該法獲得有功能的卵母細胞用于繁育3．（2023·湖南·統(tǒng)考高考真題）某些植物根際促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用。回答下列問題：(1)若從植物根際土壤中篩選分解淀粉的固氮細菌，培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質包括水和。(2)現(xiàn)從植物根際土壤中篩選出一株解淀粉芽孢桿菌H，其產生的抗菌肽抑菌效果見表。據(jù)表推測該抗菌肽對的抑制效果較好，若要確定其有抑菌效果的最低濃度，需在μg·mL-1濃度區(qū)間進一步實驗。測試菌抗菌肽濃度/（μg?mL-1）55.2027.6013.806.903.451.730.86金黃色葡萄球菌-----++枯草芽孢桿菌-----++禾谷鐮孢菌-++++++假絲酵母-++++++注：“+”表示長菌，“-”表示未長菌。(3)研究人員利用解淀粉芽孢桿菌H的淀粉酶編碼基因M構建高效表達質粒載體，轉入大腸桿菌成功構建基因工程菌A。在利用A菌株發(fā)酵生產淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產條件未變，但某子代菌株不再產生淀粉酶M。分析可能的原因是（答出兩點即可）。(4)研究人員通過肺上皮干細胞誘導生成肺類器官，可自組裝或與成熟細胞組裝成肺類裝配體，如圖所示。肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及（答出兩點）等基本條件。肺類裝配體形成過程中是否運用了動物細胞融合技術（填“是”或“否”）。

(5)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是一種耐藥菌，嚴重危害人類健康。科研人員擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型，來探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對MRSA引起的肺炎有治療潛力。以下實驗材料中必備的是。①金黃色葡萄球菌感染的肺類裝配體

②MRSA感染的肺類裝配體

③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽

④生理鹽水

⑤青霉素（抗金黃色葡萄球菌的藥物）

⑥萬古霉素（抗MRSA的藥物）4．（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）某病毒對動物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴重。我國學者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術路線如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)與小鼠骨髓瘤細胞融合前，已免疫的脾細胞（含漿細胞）（填“需要”或“不需要”）通過原代培養(yǎng)擴大細胞數(shù)量；添加脂溶性物質PEG可促進細胞融合，該過程中PEG對細胞膜的作用是。(2)在雜交瘤細胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基），該培養(yǎng)基對和生長具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，其目的是。(4)構建重組質粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是?！?022年高考真題〗5．（2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題）二甲基亞砜（DMSO）易與水分子結合，常用作細胞凍存的滲透性保護劑。干細胞凍存復蘇后指標檢測結果見下表。下列敘述錯誤的是（

）凍存劑指標

合成培養(yǎng)基+DMSO合成培養(yǎng)基+DMSO+血清G1期細胞數(shù)百分比（%）65.7879.85活細胞數(shù)百分比（%）15.2941.33注：細胞分裂間期分為G1期、S期（DNA復制期）和G2期A．凍存復蘇后的干細胞可以用于治療人類某些疾病B．G1期細胞數(shù)百分比上升，導致更多干細胞直接進入分裂期C．血清中的天然成分影響G1期，增加干細胞復蘇后的活細胞數(shù)百分比D．DMSO的作用是使干細胞中自由水轉化為結合水6．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細胞跳動的視頻。下列相關敘述正確的是（

）A．培養(yǎng)心肌細胞的器具和試劑都要先進行高壓蒸汽滅菌B．培養(yǎng)心肌細胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳C．心肌細胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖D．心肌細胞在神經細胞發(fā)出的神經沖動的支配下跳動7．（2022·福建·統(tǒng)考高考真題）我國科研人員在航天器微重力環(huán)境下對多能干細胞的分化進行了研究，發(fā)現(xiàn)與正常重力相比，多能干細胞在微重力環(huán)境下加速分化為功能健全的心肌細胞。下列敘述錯誤的是（

）A．微重力環(huán)境下多能干細胞和心肌細胞具有相同的細胞周期B．微重力環(huán)境下進行人體細胞的體外培養(yǎng)需定期更換培養(yǎng)液C．多能干細胞在分化過程中蛋白質種類和數(shù)量發(fā)生了改變D．該研究有助于了解微重力對細胞生命活動的影響8．（2022·湖北·統(tǒng)考高考真題）某興趣小組開展小鼠原代神經元培養(yǎng)的研究，結果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經元生長緩慢，其原因不可能的是（）A．實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織 B．為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C．血清經過高溫處理后加入培養(yǎng)基 D．所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性9．（2022·湖北·統(tǒng)考高考真題）滅菌、消毒、無菌操作是生物學實驗中常見的操作。下列敘述正確的是（）A．動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行B．微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌D．可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌10．（2022·山東·高考真題）如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（

）A．雙抗可同時與2種抗原結合B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞C．篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原D．同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產雙抗的漿細胞11．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下圖表示利用細胞融合技術進行基因定位的過程，在人-鼠雜種細胞中人的染色體會以隨機方式丟失，通過分析基因產物進行基因定位。現(xiàn)檢測細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關敘述正確的有（

）A．加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合B．細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細胞C．芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上D．胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上12．（2022·浙江·統(tǒng)考高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）紅曲霉合成的紅曲色素是可食用的天然色素，具有防腐、降脂等功能。研究者進行了紅曲色素的提取及紅色素的含量測定實驗，流程如下：(1)取紅曲霉菌種斜面，加適量洗下菌苔，制成菌懸液并培養(yǎng)，解除休眠獲得菌種。經液體發(fā)酵，收集紅曲霉菌絲體，紅曲霉菌絲體與70%乙醇溶液混合，經浸提、，獲得的上清液即為紅曲色素提取液。為進一步提高紅曲色素得率，可將紅曲霉細胞進行處理。(2)紅曲色素包括紅色素、黃色素和橙黃色素等，紅色素在390nm、420nm和505nm波長處均有較大吸收峰。用光電比色法測定紅曲色素提取液甲的紅色素含量時，通常選用505nm波長測定的原因是。測定時需用作空白對照。(3)生產上提取紅曲色素后的殘渣，經處理后作為飼料添加劑或有機肥，這屬于廢棄物的無害化和處理。（二）我國在新冠疫情方面取得了顯著的成效，但全球疫情形勢仍然非常嚴峻、尤其是病毒出現(xiàn)了新變異株——德爾塔、奧密克戎，更是威脅著全人類的生命健康。(4)新冠病毒核酸定性檢測原理是：以新冠病毒的單鏈RNA為模板，利用酶合成DNA，經PCR擴增，然后在擴增產物中加入特異的，如果檢測到特異的雜交分子則核酸檢測為陽性。(5)接種疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制備技術要點是：將腺病毒的復制基因敲除；以新冠病毒的基因為模板合成的DNA插入腺病毒基因組，構建重組腺病毒。重組腺病毒在人體細胞內表達產生新冠病毒抗原，從而引發(fā)特異性免疫反應。在此過程中，腺病毒的作用是作為基因工程中目的基因的。將腺病毒復制基因敲除的目的是。(6)單克隆抗體有望用于治療新冠肺炎。單克隆抗體的制備原理是：取免疫陽性小鼠的細胞與骨髓瘤細胞混合培養(yǎng)，使其融合，最后篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞。與植物組織培養(yǎng)相比，雜交瘤細胞擴大培養(yǎng)需要特殊的成分，如胰島素和。13．（2022·福建·統(tǒng)考高考真題）美西螈具有很強的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬細胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細胞的作用機制，科研人員制備了抗巨噬細胞表面標志蛋白CD14的單克隆抗體，具體方法如下?；卮鹣铝袉栴}：（一）基因工程抗原的制備(1)根據(jù)美西螈CD14基因的核苷酸序列，合成引物，利用PCR擴增CD14片段。已知DNA聚合酶催化引物的3’—OH與加入的脫氧核苷酸的5’—P形成磷酸二酯鍵，則新合成鏈的延伸方向是（填“5’→3’”或“3’→5’”）。

(2)載體和CD14片段的酶切位點及相應的酶切抗性基因序列如圖1所示。用XhoI和Sal1分別酶切CD14和載體后連接，CD14接入載體時會形成正向連接和反向連接的兩種重組DNA．可進一步用這兩種限制酶對CD14的連接方向進行鑒定，理由是。培養(yǎng)能表達CD14蛋白的大腸桿菌，分離純化目的蛋白。（二）抗CD14單克隆抗體的制備流程如圖2所示：

(3)步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射和。(4)步驟②所用的SP2/0細胞的生長特點是。(5)吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中，根據(jù)抗原—抗體雜交原理，需加入①進行專一抗體檢測，檢測過程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細胞不能分泌抗CD14抗體，原因是②。(6)步驟⑥從中提取到大量的抗CD14抗體，用于檢測巨噬細胞。14．（2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題）某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過程中，需要表達N蛋白胞外段，制備相應的單克隆抗體，增加其對N蛋白胞外段特異性結合的能力。Ⅰ．N蛋白胞外段抗原制備，流程如圖1(1)構建重組慢病毒質粒時，選用氨芐青霉素抗性基因作為標記基因，目的是。用脂質體將重組慢病毒質粒與輔助質粒導入病毒包裝細胞，質粒被包在脂質體（填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間”）。(2)質粒在包裝細胞內組裝出由組成的慢病毒，用慢病毒感染海拉細胞進而表達并分離、純化N蛋白胞外段。Ⅱ．N蛋白胞外段單克隆抗體制備，流程如圖2(3)用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進行免疫后，取小鼠脾組織用酶處理，制成細胞懸液，置于含有混合氣體的中培養(yǎng)，離心收集小鼠的B淋巴細胞，與骨髓瘤細胞進行融合。(4)用選擇性培養(yǎng)基對融合后的細胞進行篩選，獲得雜交瘤細胞，將其接種到96孔板，進行培養(yǎng)。用技術檢測每孔中的抗體，篩選既能產生N蛋白胞外段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細胞株，經體外擴大培養(yǎng)，收集，提取單克隆抗體。(5)利用N蛋白胞外段抗體與藥物結合，形成，實現(xiàn)特異性治療。15．（2022·海南·統(tǒng)考高考真題）以我國科學家為主的科研團隊將OSNL（即4個基因Oct4／Sox2／Nanog／Lin28A的縮寫）導入黑羽雞胚成纖維細胞（CEFs），誘導其重編程為誘導多能干細胞（iPS），再誘導iPS分化為誘導原始生殖細胞（iPGCs），然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中，最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代，實驗流程如圖。回答下列問題。(1)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的，為了獲得單細胞懸液，雞胚組織剪碎后需用處理。動物細胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加等天然成分，以滿足細胞對某些細胞因子的需求。(2)體外獲取OSNL的方法有（答出1種即可）。若要在CEFs中表達外源基因的蛋白，需構建基因表達載體，載體中除含有目的基因和標記基因外，還須有啟動子和等。啟動子是識別和結合的部位，有了它才能驅動。(3)iPS細胞和iPGCs細胞的形態(tài)、結構和功能不同的根本原因是。(4)誘導iPS細胞的技術與體細胞核移植技術的主要區(qū)別是。(5)該實驗流程中用到的生物技術有（答出2點即可）?！?021年高考真題〗16．（2021·湖北·統(tǒng)考高考真題）自青霉素被發(fā)現(xiàn)以來，抗生素對疾病治療起了重要作用。目前抗生素的不合理使用已經引起人們的關注。下列關于抗生素使用的敘述，正確的是（

）A．作用機制不同的抗生素同時使用，可提高對疾病的治療效果B．青霉素能直接殺死細菌，從而達到治療疾病的目的C．畜牧業(yè)中為了防止牲畜生病可大量使用抗生素D．定期服用抗生素可預防病菌引起的腸道疾病17．（2021·山東·統(tǒng)考高考真題）一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機體產生一種抗體，由同一抗原刺激產生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內，可利用該小鼠的免疫細胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（）A．注入小鼠體內的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大B．單抗制備過程中通常將分離出的漿細胞與骨髓瘤細胞融合C．利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D．p72部分結構改變后會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況18．（2021·浙江·統(tǒng)考高考真題）下圖為動物成纖維細胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（）A．步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進行B．步驟②中用鹽酸溶解細胞間物質使細胞分離C．步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D．步驟④培養(yǎng)過程中不會發(fā)生細胞轉化19．（2021·重慶·高考真題）為了研究PDCD4基因對小鼠子宮內膜基質細胞凋亡的影響，進行了相關實驗。(1)取小鼠子宮時，為避免細菌污染，手術器具應進行處理；子宮取出剪碎后，用處理一定時間，可獲得分散的子宮內膜組織細胞，再分離獲得基質細胞用于培養(yǎng)。(2)培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質應有（填寫兩種）；培養(yǎng)箱中CO2濃度為5%，其主要作用是。(3)在含PDCD4基因的表達載體中，啟動子的作用是。為了證明PDCD4基因對基質細胞凋亡的作用，以含PDCD4基因的表達載體和基質細胞的混合培養(yǎng)為實驗組，還應設立兩個對照組，分別為。經檢測，實驗組中PDCD4表達水平和細胞凋亡率顯著高于對照組，說明該基因對基質細胞凋亡具有（填“抑制”或“促進”）作用。20．（2021·江蘇·高考真題）根據(jù)新冠病毒致病機制及人體免疫反應特征研制新冠疫苗，廣泛接種疫苗可以快速建立免疫屏障，阻擊病毒擴大。圖1為新冠病毒入侵細胞后的增殖示意圖，圖2為人體免疫應答產生抗體的一般規(guī)律示意圖。請據(jù)圖回答下列問題。(1)圖1中，新冠病毒通過S蛋白與細胞表面的ACE2受體結合，侵入細胞釋放出病毒的（+）RNA，在宿主細胞中經合成病毒的RNA聚合酶。(2)在RNA聚合酶的作用下，病毒利用宿主細胞中的原料，按照原則合成（-）RNA。隨后大量合成新的（+）RNA。再以這些RNA為模板，分別在大量合成病毒的N蛋白和S、M、E蛋白。(3)制備病毒滅活疫苗時，先大量培養(yǎng)表達的細胞，再接入新冠病毒擴大培養(yǎng)，滅活處理后制備疫苗。細胞培養(yǎng)時需通入CO2，其作用是。(4)制備S蛋白的mRNA疫苗時，體外制備的mRNA常用脂質分子包裹后才用于接種。原因一是人體血液和組織中廣泛存在，極易將裸露的mRNA水解，二是外源mRNA分子不易進入人體細胞產生抗原。(5)第一次接種疫苗后，人體內識別到S蛋白的B細胞，經過增殖和分化，形成的細胞可合成并分泌特異性識別的IgM和IgG抗體（見圖2），形成的細胞等再次接觸到S蛋白時，發(fā)揮免疫保護作用。(6)有些疫苗需要進行第二次接種，據(jù)圖2分析進行二次接種的意義是。21．（2021·湖南·統(tǒng)考高考真題）M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達?，F(xiàn)設計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術獲得M基因失活的轉基因克隆動物A，流程如圖所示。回答下列問題：（1）在構建含有片段F的重組質粒過程中，切割質粒DNA的工具酶是，這類酶能將特定部位的兩個核苷酸之間的斷開。（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是。（3）與胚胎細胞核移植技術相比，體細胞核移植技術的成功率更低，原因是。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為（答出兩點即可），功能上具有。（4）鑒定轉基因動物：以免疫小鼠的淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，篩選融合雜種細胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路?！?020年高考真題〗22．（2020·海南·統(tǒng)考高考真題）將人細胞與小鼠細胞融合得到的人-鼠雜種細胞進行長期培養(yǎng)，雜種細胞隨機丟失一部分人的染色體后，染色體數(shù)目會保持穩(wěn)定。選取三種雜種細胞，對編碼人的芳烴羥化酶（AHH）和磷酸甘油酸激酶（PGK）的基因進行染色體定位研究，結果如表（“+”表示有，“-”表示無）。雜種細胞人的染色體AHHPGK2號11號17號X甲－＋－＋－＋乙＋＋－－＋－丙－＋＋＋－＋下列有關敘述錯誤的是（

）A．聚乙二醇可誘導入細胞與小鼠細胞融合B．培養(yǎng)雜種細胞時，通常需在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素C．編碼AHH的基因在11號染色體上D．編碼PGK的基因在X染色體上23．（2020·北京·統(tǒng)考高考真題）人體感染新冠病毒后，機體會產生多種特異性抗體。我國科學家從康復者的漿細胞中克隆出針對病毒表面抗原的抗體基因相關序列，構建表達載體并在相應系統(tǒng)中表達，可制備出全人源單克隆抗體。以下表述錯誤的是（

）A．該單抗可直接用于新冠病毒的核酸檢測B．在該單抗制備過程中利用了基因工程技術C．該單抗可與新冠病毒相應蛋白特異性結合D．可用抗原-抗體反應檢測抗體基因表達產物24．（2020·天津·統(tǒng)考高考真題）在克隆哺乳動物過程中，通常作為核移植受體細胞的是去核的（

）A．卵原細胞B．初級卵母細胞C．次級卵母細胞D．卵細胞25．（2020·浙江·高考真題）下列關于病毒的敘述，錯誤的是（

）A．有的病毒經滅活處理后，可用于細胞工程中介導動物細胞的融合B．適當增加機體內參與免疫的細胞數(shù)量與活性，可提高對新型冠狀病毒的抵御能力C．在某人的分泌物中檢測到新型冠狀病毒，推測該病毒的增殖不依賴于宿主細胞D．用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質發(fā)生了熱變性26．（2020·江蘇·統(tǒng)考高考真題）新型冠狀病毒可通過表面的棘突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結合，侵入人體，引起肺炎。圖1為病毒侵入后，人體內發(fā)生的部分免疫反應示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：（1）圖1中人體內抗原遞呈細胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細胞表面，被細胞表面的受體識別后激活該細胞。（2）B細胞識別入侵的病毒后，在淋巴因子作用下，經過細胞的，形成細胞。（3）為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學檢查，檢測病毒的；采集血液樣本主要用于血清學檢查，檢測。（4）據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射免疫小鼠以激活小鼠的免疫細胞，再提取激活的B細胞與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得細胞。因為同一種抗原可能激活細胞，還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細胞株。27．（2020·全國·統(tǒng)考高考真題）為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學以小鼠甲為實驗材料設計了以下實驗流程?；卮鹣铝袉栴}：（1）上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是。（2）寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：。（3）為了得到能產生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于，使用該培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)的結果是。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是。（4）若要使能產生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可采用的方法有（答出2點即可）?！?019年高考真題〗30．（2019·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶（HGPRT-），在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是A．可用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合B．兩兩融合的細胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C．雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產D．細胞膜的流動性是細胞融合的基礎考點2植物細胞工程〖2023年高考真題〗1．（2023·山東·高考真題）利用植物細胞培養(yǎng)技術在離體條件下對單個細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是（

）A．利用該技術可獲得某些無法通過化學合成途徑得到的產物B．植物細胞體積小，故不能通過該技術進行其產物的工廠化生產C．次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應選擇產量高的細胞進行培養(yǎng)D．該技術主要利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件提高單個細胞中次生代謝物的含量2．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中常添加蔗糖，植物細胞利用蔗糖的方式如圖所示。

下列敘述正確的是（）A．轉運蔗糖時，共轉運體的構型不發(fā)生變化B．使用ATP合成抑制劑，會使蔗糖運輸速率下降C．植物組培過程中蔗糖是植物細胞吸收的唯一碳源D．培養(yǎng)基的pH值高于細胞內，有利于蔗糖的吸收3．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）人參皂苷是人參的主要活性成分。科研人員分別誘導人參根與胡蘿卜根產生愈傷組織并進行細胞融合，以提高人參皂苷的產率。下列敘述錯誤的是（

）A．細胞融合前應去除細胞壁B．高Ca2+—高pH溶液可促進細胞融合C．融合的細胞即為雜交細胞D．雜交細胞可能具有生長快速的優(yōu)勢4．（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）栽培稻甲產量高、品質好，但每年只能收獲一次。野生稻乙種植一次可連續(xù)收獲多年，但產量低。中國科學家利用栽培稻甲和野生稻乙雜交，培育出兼具兩者優(yōu)點的品系丙，為全球作物育種提供了中國智慧。下列敘述錯誤的是（）A．該成果體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值B．利用體細胞雜交技術也可培育出品系丙C．該育種技術為全球農業(yè)發(fā)展提供了新思路D．品系丙的成功培育提示我們要注重野生種質資源的保護5．（2023·海南·高考真題）基因遞送是植物遺傳改良的重要技術之一，我國多個實驗室合作開發(fā)了一種新型基因遞送系統(tǒng)（切—浸—生芽Cut-Dip-Budding，簡稱CDB法）。圖1與圖2分別是利用常規(guī)轉化法和CDB法在某植物中遞送基因的示意圖。

回答下列問題。(1)圖1中，從外植體轉變成愈傷組織的過程屬于；從愈傷組織到幼苗的培養(yǎng)過程需要的激素有生長素和，該過程還需要光照，其作用是。(2)圖1中的愈傷組織，若不經過共培養(yǎng)環(huán)節(jié)，直接誘導培養(yǎng)得到的植株可以保持植株A的。圖1中，含有外源基因的轉化植株A若用于生產種子，其包裝需標注。(3)圖1與圖2中，農桿菌侵染植物細胞時，可將外源基因遞送到植物細胞中的原因是。(4)已知某酶（PDS）缺失會導致植株白化。某團隊構建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因編輯載體（含有綠色熒光蛋白標記基因），利用圖2中的CDB法將該重組載體導入植株B，長出毛狀根，成功獲得轉化植株B．據(jù)此分析，從毛狀根中獲得陽性毛狀根段的方法是，圖2中，鑒定導入幼苗中的基因編輯載體是否成功發(fā)揮作用的方法是，依據(jù)是。(5)與常規(guī)轉化法相比，采用CDB法進行基因遞送的優(yōu)點是（答出2點即可）。6．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）賴氨酸是人體不能合成的必需氨基酸，而人類主要食物中的賴氨酸含量很低，利用生物技術可提高食物中賴氨酸含量?；卮鹣铝袉栴}：(1)植物細胞合成的賴氨酸達到一定濃度時，能抑制合成過程中兩種關鍵酶的活性，導致賴氨酸含量維持在一定濃度水平，這種調節(jié)方式屬于。根據(jù)這種調節(jié)方式，在培養(yǎng)基中添加，用于篩選經人工誘變的植物懸浮細胞，可得到抗賴氨酸類似物的細胞突變體，通過培養(yǎng)獲得再生植株。(2)隨著轉基因技術與動物細胞工程結合和發(fā)展，2011年我國首次利用轉基因和體細胞核移植技術成功培育了高產賴氨酸轉基因克隆奶牛。其基本流程為：①構建乳腺專一表達載體。隨著測序技術的發(fā)展，為獲取富含賴氨酸的酪蛋白基因（目的基因），可通過檢索獲取其編碼序列，用化學合成法制備得到。再將獲得的目的基因與含有乳腺特異性啟動子的相應載體連接，構建出乳腺專一表達載體。②表達載體轉入牛胚胎成纖維細胞（BEF）。將表達載體包裹到磷脂等構成的脂質體內，與BEF膜發(fā)生，表達載體最終進入細胞核，發(fā)生轉化。③核移植。將轉基因的BEF作為核供體細胞，從牛卵巢獲取卵母細胞，經體外培養(yǎng)及去核后作為。將兩種細胞進行電融合，電融合的作用除了促進細胞融合，同時起到了重組細胞發(fā)育的作用。④重組細胞的體外培養(yǎng)及胚胎移植。重組細胞體外培養(yǎng)至，植入代孕母牛子宮角，直至小牛出生。⑤檢測。DNA水平檢測：利用PCR技術，以非轉基因牛耳組織細胞作為陰性對照，以為陽性對照，檢測到轉基因牛耳組織細胞中存在目的基因。RNA水平檢測：從非轉基因牛乳汁中的脫落細胞、轉基因牛乳汁中的脫落細胞和轉基因牛耳組織細胞，提取總RNA，對總RNA進行處理，以去除DNA污染，再經逆轉錄形成cDNA，并以此為，利用特定引物擴增目的基因片段。結果顯示目的基因在轉基因牛乳汁中的脫落細胞內表達，而不在牛耳組織細胞內表達，原因是什么？。7．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）甲植物細胞核基因具有耐鹽堿效應，乙植物細胞質基因具有高產效應。某研究小組用甲、乙兩種植物細胞進行體細胞雜交相關研究，基本過程包括獲取原生質體、誘導原生質體融合、篩選融合細胞、雜種植株再生和鑒定，最終獲得高產耐鹽堿再生植株。回答下列問題：(1)根據(jù)研究目標，在甲、乙兩種植物細胞進行體細胞雜交前，應檢驗兩種植物的原生質體是否具備的能力。為了便于觀察細胞融合的狀況，通常用不同顏色的原生質體進行融合，若甲植物原生質體采用幼苗的根為外植體，則乙植物可用幼苗的為外植體。(2)植物細胞壁的主要成分為和果膠，在獲取原生質體時，常采用相應的酶進行去壁處理。在原生質體融合前，需對原生質體進行處理，分別使甲原生質體和乙原生質體的失活。對處理后的原生質體在顯微鏡下用計數(shù)，確定原生質體密度。兩種原生質體1∶1混合后，通過添加適宜濃度的PEG進行融合；一定時間后，加入過量的培養(yǎng)基進行稀釋，稀釋的目的是。(3)將融合原生質體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質體分散固定在平板中，并獨立生長、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細胞源于。下列各項中能說明這些愈傷組織只能來自于雜種細胞的理由是哪幾項？A．甲、乙原生質體經處理后失活，無法正常生長、分裂B．同種融合的原生質體因甲或乙原生質體失活而不能生長、分裂C．培養(yǎng)基含有抑制物質，只有雜種細胞才能正常生長、分裂D．雜種細胞由于結構和功能完整可以生長、分裂(4)愈傷組織經可形成胚狀體或芽。胚狀體能長出，直接發(fā)育形成再生植株。(5)用PCR技術鑒定再生植株。已知甲植物細胞核具有特異性DNA序列a，乙植物細胞質具有特異性DNA序列b；M1、M2為序列a的特異性引物，N1、N2為序列b的特異性引物。完善實驗思路：Ⅰ．提取純化再生植株的總DNA，作為PCR擴增的。Ⅱ．將DNA提取物加入PCR反應體系，為特異性引物，擴增序列a；用同樣的方法擴增序列b。Ⅲ．得到的2個PCR擴增產物經后，若每個PCR擴增產物在凝膠中均出現(xiàn)了預期的個條帶，則可初步確定再生植株來自于雜種細胞。〖2022年高考真題〗8．（2022·重慶·統(tǒng)考高考真題）植物體細胞通常被誘導為愈傷組織后才能表現(xiàn)全能性。研究發(fā)現(xiàn)，愈傷組織的中層細胞是根或芽再生的源頭干細胞，其在不同條件下，通過基因的特異性表達調控生長素、細胞分裂素的作用，表現(xiàn)出不同的效應（見如表）。已知生長素的生理作用大于細胞分裂素時有利于根的再生；反之，有利于芽的再生。下列推論不合理的是（

）條件基因表達產物和相互作用效應①WOX5維持未分化狀態(tài)②WOX5+PLT誘導出根③WOX5+ARR2，抑制ARR5誘導出芽A．WOX5失活后，中層細胞會喪失干細胞特性B．WOX5+PLT可能有利于愈傷組織中生長素的積累C．ARR5促進細胞分裂素積累或提高細胞對細胞分裂素的敏感性D．體細胞中生長素和細胞分裂素的作用可能相互抑制9．（2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題）藍莓細胞富含花青素等多酚類化合物。在藍莓組織培養(yǎng)過程中，外植體切口處細胞被破壞，多酚類化合物被氧化成褐色醌類化合物，這一過程稱為褐變。褐變會引起細胞生長停滯甚至死亡，導致藍莓組織培養(yǎng)失敗。下列敘述錯誤的是（

）A．花青素通常存在于藍莓細胞的液泡中B．適當增加培養(yǎng)物轉移至新鮮培養(yǎng)基的頻率以減少褐變C．在培養(yǎng)基中添加合適的抗氧化劑以減少褐變D．宜選用藍莓成熟葉片為材料制備外植體10．（2022·浙江·高考真題）下列關于菊花組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（

）A．用自然生長的莖進行組培須用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒B．培養(yǎng)瓶用專用封口膜封口可防止外界雜菌侵入并阻止瓶內外的氣體交換C．組培苗鍛煉時采用蛭石作為栽培基質的原因是蛭石帶菌量低且營養(yǎng)豐富D．不帶葉片的菊花幼莖切段可以通過器官發(fā)生的途徑形成完整的菊花植株11．（2022·浙江·統(tǒng)考高考真題）農作物秸稈的回收利用方式很多，其中之一是將秸稈碎化后作為食用菌的栽培基質。碎化秸稈中纖維所起的作用，相當于植物組織培養(yǎng)中固體培養(yǎng)基的（

）A．瓊脂+蔗糖 B．蔗糖+激素 C．激素+無機鹽 D．無機鹽+瓊脂12．（2022·重慶·統(tǒng)考高考真題）改良水稻的株高和產量性狀是實現(xiàn)袁隆平先生“禾下乘涼夢”的一種可能途徑。研究人員克隆了可顯著增高和增產的eui基因，并開展了相關探索。步驟I：步驟II：(1)花藥培養(yǎng)能縮短育種年限，原因是。在步驟I的花藥培養(yǎng)過程中，可產生單倍體愈傷組織，將其培養(yǎng)于含的培養(yǎng)基上，可促進產生二倍體愈傷組織。I中能用于制造人工種子的材料是。(2)步驟II中，eui基因克隆于cDNA文庫而不是基因組文庫，原因是；在構建重組Ti質粒時使用的工具酶有。為篩選含重組Ti質粒的菌株，需在培養(yǎng)基中添加。獲得的農桿菌菌株經鑒定后，應侵染I中的，以獲得轉基因再生植株。再生植株是否含有eui基因的鑒定方法是，移栽后若發(fā)育為更高且豐產的稻株，則可望“禾下乘涼”?！?021年高考真題〗13．（2021·江蘇·高考真題）植物組織培養(yǎng)技術常用于商業(yè)化生產：其過程一般為:無菌培養(yǎng)物的建立→培養(yǎng)物增殖→生根培養(yǎng)→試管苗移栽及鑒定。下列相關敘述錯誤的是（

）A．為獲得無菌培養(yǎng)物，外植體要消毒處理后才可接種培養(yǎng)B．組織培養(yǎng)過程中也可無明顯愈傷組織形成，直接形成胚狀體等結構C．提高培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的比值，有利于誘導生根D．用同一植株體細胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗不會出現(xiàn)變異14．（2021·福建·統(tǒng)考高考真題）科研人員利用植物體細胞雜交技術培育矮牽牛新品種，技術流程示意圖如下。下列敘述正確的是（）A．愈傷組織是幼嫩葉片通過細胞分化形成的B．獲得的雜種植株都能表現(xiàn)雙親的優(yōu)良性狀C．可用聚乙二醇誘導原生質體甲和乙的融合和細胞壁再生D．用纖維素酶和果膠酶處理愈傷組織以獲得原生質體15．（2021·湖北·統(tǒng)考高考真題）月季在我國享有“花中皇后”的美譽。為了建立月季某新品種的快速繁殖體系，以芽體為外植體，在MS培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA和IBA進行芽體增殖實驗，芽分化率（%）結果如表。6-BA/（mg·L-1）IBA/（mg·L-1）0．10．20．30．40．51．031635849412．040957669503．037756454414．025353130255．08211284關于上述實驗，下列敘述錯誤的是（

）A．6-BA濃度大于4．0mg·L-1時，芽分化率明顯降低B．6-BA與IBA的比例為10：1時芽分化率均高于其他比例C．在培養(yǎng)基中同時添加適量的6-BA和IBA，可促進芽分化D．2．0mg·L-16-BA和0．2mg·L-1IBA是實驗處理中芽分化的最佳組合16．（2021·北京·統(tǒng)考高考真題）研究者擬通過有性雜交的方法將簇毛麥（2n=14）的優(yōu)良性狀導入普通小麥（2n=42）中。用簇毛麥花粉給數(shù)以千計的小麥小花授粉，10天后只發(fā)現(xiàn)兩個雜種幼胚，將其離體培養(yǎng)，產生愈傷組織，進而獲得含28條染色體的大量雜種植株。以下表述錯誤的是（）A．簇毛麥與小麥之間存在生殖隔離B．培養(yǎng)過程中幼胚細胞經過脫分化和再分化C．雜種植株減數(shù)分裂時染色體能正常聯(lián)會D．雜種植株的染色體加倍后能產生可育植株17．（2021·浙江·統(tǒng)考高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）某環(huán)保公司從淤泥中分離到一種高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的細菌菌株，制備了固定化菌株。（1）從淤泥中分離細菌時常用劃線分離法或法，兩種方法均能在固體培養(yǎng)基上形成。對分離的菌株進行誘變、和鑒定，從而獲得能高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的菌株。該菌株只能在添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖。（2）固定化菌株的制備流程如下；①將菌株與該公司研制的特定介質結合；②用蒸餾水去除；③檢驗固定化菌株的。菌株與特定介質的結合不宜直接采用交聯(lián)法和共價偶聯(lián)法，可以采用的2種方法是。（3）對外，只提供固定化菌株有利于保護該公司的知識產權，推測其原因是。（二）三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對生長環(huán)境要求非常苛刻，以及生態(tài)環(huán)境的破壞和過度的采挖，目前我國野生三葉青已十分珍稀。（1）為保護三葉青的多樣性和保證藥材的品質，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利用技術，實現(xiàn)了三葉青的林下種植。（2）依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產生酚類化合物，誘導發(fā)根農桿菌質粒上vir系列基因表達形成和限制性核酸內切酶等，進而從質粒上復制并切割出一段可轉移的DNA片段（T-DNA）。T-DNA進入葉片細胞并整合到染色體上，T-DNA上rol系列基因表達，產生相應的植物激素，促使葉片細胞持續(xù)不斷地分裂形成，再分化形成毛狀根。（3）剪取毛狀根，轉入含頭孢類抗生素的固體培養(yǎng)基上進行多次培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是。最后取毛狀根轉入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進行懸浮培養(yǎng)，通過控制搖床的和溫度，調節(jié)培養(yǎng)基成分中的，獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分。〖2020年高考真題〗18．（2020·北京·統(tǒng)考高考真題）研究者以擬南芥根段作為組織培養(yǎng)材料，探討了激素誘導愈傷組織分化生芽的機制。（1）離體的擬南芥根段在適宜條件下可以培育出完整的植株，說明植物細胞具有。在組織培養(yǎng)過程中，根段細胞經過形成愈傷組織，此后調整培養(yǎng)基中細胞分裂素（CK）與生長素的比例可誘導愈傷組織分化。（2）在愈傷組織生芽過程中，CK通過ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。為探討A基因與W基因的關系，將A基因功能缺失突變體（突變體a）和野生型的愈傷組織分別置于CK與生長素比例高的（高CK）培養(yǎng)基中誘導生芽，在此過程中測定W基因的表達量。圖1中，野生型的W基因表達量與高CK誘導時間的關系是。分析圖1結果可得出的結論是：在高CK誘導下A基因促進W基因表達。得出結論的依據(jù)為：與野生型相比，。

（3）用轉基因方法在上述突變體a中過量表達W基因，獲得材料甲。將材料甲、突變體a和野生型三組愈傷組織在高CK培養(yǎng)基中培養(yǎng)，三組愈傷組織分化生芽的比例如圖2，由此能得出的結論包括。A．A基因在愈傷組織分化生芽的過程中起作用B．w基因的表達產物調控A基因的表達C．缺失A基因時W基因表達不能促進生芽D．過量表達W基因可使生芽時間提前19．（2020·北京·統(tǒng)考高考真題）為培育具有市場競爭力的無籽柑橘，研究者設計如下流程。相關敘述不正確的是（

）A．過程①需使用胰蛋白酶處理B．實現(xiàn)過程②依賴膜的流動性C．過程③需應用植物組培技術D．三倍體植株可產生無籽柑橘20．（2020·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下列敘述中與染色體變異無關的是（

）A．通過孕婦產前篩查，可降低21三體綜合征的發(fā)病率B．通過連續(xù)自交，可獲得純合基因品系玉米C．通過植物體細胞雜交，可獲得白菜-甘藍D．通過普通小麥和黑麥雜交，培育出了小黑麥21．（2020·山東·統(tǒng)考高考真題）兩種遠緣植物的細胞融合后會導致一方的染色體被排出。若其中一個細胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細胞融合后可能不會被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個細胞的染色體上而留存在雜種細胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強的中間偃麥草進行體細胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過程如下圖所示。下列說法錯誤的是（

）A．過程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細胞B．過程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C．過程③中常用滅活的病毒誘導原生質體融合D．耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段22．（2020·山東·統(tǒng)考高考真題）植物激素或植物生長調節(jié)劑在生產、生活中得到了廣泛的應用。下列說法錯誤的是（

）A．提高培養(yǎng)基中細胞分裂素與生長素間含量的比值可促進愈傷組織分化出根B．用適宜濃度的生長素類似物處理未受粉的番茄雌蕊，可獲得無子番茄C．用適宜濃度的赤霉素處理休眠的種子可促進種子萌發(fā)D．利用成熟木瓜釋放的乙烯可催熟未成熟的柿子23．（2020·天津·統(tǒng)考高考真題）某植物有A、B兩品種。科研人員在設計品種A組織培養(yǎng)實驗時，參照品種B的最佳激素配比（見下表）進行預實驗。品種B組織培養(yǎng)階段細胞分裂素濃度（μmol/L）生長素濃度（μmol/L）Ⅰ誘導形成愈傷組織m1n1Ⅱ誘導形成幼芽m2n2Ⅲ誘導生根m3n3據(jù)表回答：（1）Ⅰ階段時通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，原因是。（2）在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達的是階段。（3）為確定品種A的Ⅰ階段的最適細胞分裂素濃度，參照品種B的激素配比（m1>2．0），以0．5μmol/L為梯度，設計5個濃度水平的實驗，細胞分裂素最高濃度應設為μmol/L。（4）Ⅲ階段時，科研人員分別選用濃度低于或高于n3μmol/L的生長素處理品種A幼芽都能達到最佳生根效果，原因是處理幼芽時，選用低濃度生長素時的處理方法為，選用高濃度生長素時的處理方法為。（5）在階段用秋水仙素對材料進行處理，最易獲得由單個細胞形成的多倍體。24．（2020·浙江·高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與柑橘加工與再利用有關的問題：（1）柑橘果實經擠壓獲得果汁后，需用果膠酶處理，主要目的是提高果汁的。為確定果膠酶的處理效果，對分別加入不同濃度果膠酶的果汁樣品，可采用3種方法進行實驗：①取各處理樣品，添加相同體積的，沉淀生成量較少的處理效果好。②對不同處理進行離心，用比色計對上清液進行測定，OD值的處理效果好。③對不同處理進行，記錄相同體積果汁通過的時間，時間較短的處理效果好。（2）加工后的柑橘殘渣含有抑菌作用的香精油及較多的果膠等。為篩選生長不被香精油抑制且能高效利用果膠的細菌，從腐爛殘渣中分離得到若干菌株，分別用無菌水配制成，再均勻涂布在LB固體培養(yǎng)基上。配制適宜濃度的香精油，浸潤大小適宜并已的圓形濾紙片若干，再貼在上述培養(yǎng)基上。培養(yǎng)一段時間后，測量濾紙片周圍抑制菌體生長形成的透明圈的直徑大小。從直徑的菌株中取菌接種到含有適量果膠的液體培養(yǎng)基試管中培養(yǎng)，若有果膠酶產生，搖晃試管并觀察，與接種前相比，液體培養(yǎng)基的下降。（二）回答與基因工程和植物克隆有關的問題：（1）天然農桿菌的Ti質粒上存在著一段DNA片段（T-DNA），該片段可轉移并整合到植物細胞染色體上。為便于轉基因植物在組織培養(yǎng)階段的篩選，設計重組Ti質粒時，應考慮T-DNA中要有可表達的目的基因，還需要有可表達的。（2）結合植物克隆技術進行轉基因實驗，為獲得轉基因植株，農桿菌侵染的宿主一般要選用具有優(yōu)良性狀、較高的遺傳穩(wěn)定性、及易被農桿菌侵染等特點的植物材料。若植物材料對農桿菌不敏感，則可用的轉基因方法。（3）利用帶側芽的莖段獲得叢狀苗的過程與利用莖段誘導產生愈傷組織再獲得叢狀苗的過程相比，前者總培養(yǎng)時間，且不經歷過程，因而其遺傳性狀穩(wěn)定，是大多數(shù)植物快速繁殖的常用方法。（4）與發(fā)芽培養(yǎng)基相比，配制轉基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時，可根據(jù)實際情況適當添加，促進叢狀苗基部細胞分裂形成愈傷組織并進一步分化形成，最終形成根。還可通過改變MS培養(yǎng)基促進生根，如（A．提高蔗糖濃度B．降低培養(yǎng)基濃度C．提高大量元素濃度D．不添加瓊脂）。25．（2020·浙江·統(tǒng)考高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與泡菜制作有關的問題：（1）用蘿卜等根菜類蔬菜制作泡菜，用熱水短時處理，可抑制某些微生物產生，從而使成品泡菜口感較脆。同時，該處理也會使泡菜發(fā)酵時間縮短，其原因是。（2）泡菜發(fā)酵初期，由于泡菜罐加蓋并水封，會使菌被逐漸抑制。發(fā)酵中期，乳酸菌大量繁殖，會使菌受到抑制。發(fā)酵后期，乳酸生產過多，會使乳酸菌受到抑制。（3）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌，首先對經多次發(fā)酵的泡菜汁進行過濾，然后取濾液進行，再用的方法在某種含牛乳的專用的培養(yǎng)基中進行初步篩選。該培養(yǎng)基必須含有，以便于觀察是否產酸。（4）自然界中醋桿菌常與乳酸菌共同生長。若要篩選出醋桿菌，則其專用的培養(yǎng)基中應添加。（二）回答與基因工程和植物克隆有關的問題：（1）為了獲取某植物葉片無菌的原生質體，先將葉片經表面消毒并去除下表皮，再將其置于經處理的較高滲透壓的混合酶液中。酶解后，經多次離心獲得原生質體。然后測定該原生質體的活性，可采用的方法有（答出2點即可）。（2）若要獲得已知序列的抗病基因，可采用或PCR的方法。為了提高目的基因和質粒重組的成功率，選擇使用，對含目的基因的DNA片段進行處理，使其兩端形成不同的黏性末端，對質粒也進行相同的處理，然后用DNA連接酶連接形成重組質粒。通過在大腸桿菌中，以獲得大量的重組質粒，最終將其導入原生質體中。（3）原生質體在培養(yǎng)過程中，只有重新形成后，才可進行有絲分裂。多次分裂形成的小細胞團可通過或器官發(fā)生的途徑再生植株?！?019年高考真題〗26．（2019·上海·高考真題）下圖表示培養(yǎng)“落地生根”新植株的兩種方法，則遺傳信息相同的方法是（）A．僅①② B．僅②③ C．僅①③ D．①②③27．（2019·江蘇·統(tǒng)考高考真題）為探究矮牽牛原生質體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組的實驗過程如下圖。下列敘述正確的是A．過程①獲得的原生質體需懸浮在30%蔗糖溶液中B．過程②需提高生長素的比例以促進芽的分化C．過程③需用秋水仙素處理誘導細胞壁再生D．原生質體雖無細胞壁但仍保持細胞的全能性28．（2019·北京·統(tǒng)考高考真題）甲、乙是嚴重危害某二倍體觀賞植物的病害。研究者先分別獲得抗甲、乙的轉基因植株，再將二者雜交后得到F1，結合單倍體育種技術，培育出同時抗甲、乙的植物新品種，以下對相關操作及結果的敘述，錯誤的是A．將含有目的基因和標記基因的載體導入受體細胞B．通過接種病原體對轉基因的植株進行抗病性鑒定C．調整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得F1花粉再生植株D．經花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體29．（2019·全國·統(tǒng)考高考真題）植物組織培養(yǎng)技術在科學研究和生產實踐中得到了廣泛的應用?；卮鹣铝袉栴}。（1）植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術的特點有（答出2點即可）。（2）通過組織培養(yǎng)技術，可把植物組織細胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過人工種皮（人工薄膜）包裝得到人工種子（如圖所示），這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是。人工胚乳能夠為胚狀體生長提供所需的物質，因此應含有植物激素、和等幾類物質（3）用脫毒苗進行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的進行組織培養(yǎng)。（4）植物組織培養(yǎng)技術可與基因工程技術相結合獲得轉基因植株。將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是（用流程圖表示）。30．（2019·全國·統(tǒng)考高考真題）培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過程如圖所示。回答下列問題。（1）利用胡蘿卜根段進行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細胞可以培養(yǎng)成完整的植株，這是因為植物細胞具有。（2）步驟③切取的組織塊中要帶有形成層，原因是。（3）從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過細胞的過程，最終可形成試管苗。（4）步驟⑥要進行照光培養(yǎng)，其作用是。（5）經組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的，這種繁殖方式屬于繁殖?？键c3胚胎工程〖2023年高考真題〗1．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）科學家采用體外受精技術獲得紫羚羊胚胎，并將其移植到長角羚羊體內，使后者成功妊娠并產仔，該工作有助于恢復瀕危紫羚羊的種群數(shù)量。此過程不涉及的操作是（

）A．超數(shù)排卵 B．精子獲能處理C．細胞核移植 D．胚胎培養(yǎng)2．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）在家畜優(yōu)良品種培育過程中常涉及胚胎工程的相關技術。下列敘述錯誤的是（

）A．經獲能處理的精子才能用于體外受精 B．受精卵經體外培養(yǎng)可獲得早期胚胎C．胚胎分割技術提高了移植胚胎的成活率 D．胚胎移植前需對受體進行選擇和處理3．（2023·天津·統(tǒng)考高考真題）根據(jù)下圖，正確的是（

）

A．子代動物遺傳性狀和受體動物完全一致B．過程1需要MII期去核卵母細胞C．過程2可以大幅改良動物性狀D．過程2為過程3提供了量產方式，過程3為過程1、2提供了改良性狀的方式〖2022年高考真題〗4．（2022·北京·統(tǒng)考高考真題）將黑色小鼠囊胚的內細胞團部分細胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚發(fā)育為黑白相間的小鼠（Mc）。據(jù)此分析，下列敘述錯誤的是（）A．獲得Mc的生物技術屬于核移植B．Mc表皮中有兩種基因型的細胞C．注射入的細胞會分化成Mc的多種組織D．將接受注射的囊胚均分為二，可發(fā)育成兩只幼鼠5．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下列關于動物細胞工程和胚胎工程的敘述正確的是（

）A．通常采用培養(yǎng)法或化學誘導法使精子獲得能量后進行體外受精B．哺乳動物體外受精后的早期胚胎培養(yǎng)不需要額外提供營養(yǎng)物質C．克隆牛技術涉及體細胞核移植、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植等過程D．將小鼠桑葚胚分割成2等份獲得同卵雙胎的過程屬于有性生殖6．（2022·全國·高考真題）某牧場引進一只產肉性能優(yōu)異的良種公羊，為了在短時間內獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的大量后代，該牧場利用胚胎工程技術進行了相關操作?；卮鹣铝袉栴}，(1)為了實現(xiàn)體外受精需要采集良種公羊的精液，精液保存的方法是。在體外受精前要對精子進行獲能處理，其原因是；精子體外獲能可采用化學誘導法，誘導精子獲能的藥物是（答出1點即可）。利用該公羊的精子進行體外受精需要發(fā)育到一定時期的卵母細胞，因為卵母細胞達到時才具備與精子受精的能力。(2)體外受精獲得的受精卵發(fā)育成囊胚需要在特定的培養(yǎng)液中進行，該培養(yǎng)液的成分除無機鹽、激素、血清外，還含的營養(yǎng)成分有（答出3點即可）等。將培養(yǎng)好的良種囊胚保存?zhèn)溆谩?3)請以保存的囊胚和相應數(shù)量的非繁殖期受體母羊為材料進行操作，以獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的后代。主要的操作步驟是?！?021年高考真題〗7．（2021·江蘇·高考真題）下列關于哺乳動物胚胎工程和細胞工程的敘述，錯誤的是（

）A．細胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需要添加血清等物質B．早期胚胎需移植到經同期發(fā)情處理的同種雌性動物體內發(fā)育成個體C．猴的核移植細胞通過胚胎工程已成功地培育出了克隆猴D．將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經誘導后融合的細胞即為雜交瘤細胞8．（2021·遼寧·統(tǒng)考高考真題）下圖是利用體細胞核移植技術克隆優(yōu)質奶牛的簡易流程圖，有關敘述正確的是（）A．后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質共同決定B．過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體C．過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理D．過程③將激活后的重組細胞培養(yǎng)至原腸胚后移植9．（2021·浙江·統(tǒng)考高考真題）將蝌蚪腸細胞的細胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合子”發(fā)育成