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文檔簡介
Springsemester,2009MolecularBiology緒論
?什么是分子生物學(xué)?分子生物學(xué)是研究生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的一門學(xué)科。即在分子水平上闡述細(xì)胞在生長、發(fā)育、分化過程中,生物大分子的相互作用、細(xì)胞傳導(dǎo)、基因表達(dá)及調(diào)控的機(jī)制。廣義的講,一切從分子水平研究生命現(xiàn)象及規(guī)律的學(xué)科。
?分子生物學(xué)的基本原理:
1.構(gòu)成生物體的有機(jī)大分子的單體在不同生物體內(nèi)都是相同的;2.生物體內(nèi)一切有機(jī)大分子的建成都遵循共同的規(guī)律;3.某一特定生物體所擁有的核酸及蛋白質(zhì)決定了生物的屬性。
GENETICINFORMATION
DNARNAPROTEIN
DNA1.REPLICATION (DNASYNTHESIS)2.TRANSCRIPTION (RNASYNTHESIS)3.TRANSLATION (PROTEINSYNTHESIS)
研究對象:
?核酸遺傳信息的載體,決定生物性狀;穩(wěn)定遺傳,保證種的延續(xù),母代→子代;易于保存,易于操作。
?蛋白質(zhì)遺傳物質(zhì)的控制產(chǎn)物,功能的執(zhí)行者,生物性狀的表現(xiàn)形式。分子生物學(xué)與生物化學(xué)之間的關(guān)系與區(qū)別:分子生物學(xué)—研究生物大分子的結(jié)構(gòu)、功能及信息傳遞過程,從分子水平研究生命現(xiàn)象。生物化學(xué)—生物體內(nèi)的化學(xué)運(yùn)動(dòng),包括化學(xué)組成、變化、結(jié)構(gòu)與功能,生物分子間的物質(zhì)與能量轉(zhuǎn)換過程。現(xiàn)在通常將研究DNA的結(jié)構(gòu)及其表達(dá),了解生命現(xiàn)象的工作算作分子生物學(xué)的內(nèi)容,將生命物質(zhì)的組成及變化(代謝規(guī)律)歸為生物化學(xué)的范疇。
分子生物學(xué)≠生物化學(xué)分子生物學(xué)生物化學(xué)研究方向蛋白質(zhì)、核酸的結(jié)構(gòu)、功能及其相互作用。信息的傳遞與調(diào)節(jié)大分子的結(jié)構(gòu)與功能生物體中大小分子在生命活動(dòng)中的代謝過程。(糖酵解、TCA、脂肪氧化等)代謝轉(zhuǎn)化研究方法物理學(xué)(X-衍射)生物化學(xué)與遺傳學(xué)方法(電泳)生物化學(xué)與化學(xué)的方法解決分子轉(zhuǎn)化與能量轉(zhuǎn)換的問題分子生物學(xué)的相關(guān)學(xué)科:
1.生物化學(xué)
生物化學(xué)是分子生物學(xué)的基礎(chǔ),學(xué)好生化便于分子生物學(xué)的基本原理和方法的理解。2.微生物學(xué)
作為分子生物學(xué)研究的模型生物,分子生物學(xué)操作的一部分(基因擴(kuò)增、克隆、表達(dá))。3.遺傳學(xué)
研究生物的遺傳及變異規(guī)律,遺傳變異的本質(zhì)—DNA。4.細(xì)胞生物學(xué)
細(xì)胞是生命的基本功能單位,基因功能必須通過細(xì)胞來表現(xiàn),離開細(xì)胞,就沒有生命。?分子生物學(xué)的學(xué)科特征是生命科學(xué)的一門基礎(chǔ)學(xué)科,它服務(wù)于生命科學(xué)的任何一門學(xué)科,它可為基礎(chǔ)研究服務(wù),同時(shí)也是極有應(yīng)用前景的學(xué)科。是一種方法、技術(shù)和手段,目的是了解生命的本質(zhì),揭示生命規(guī)律,最終解決人類生存和發(fā)展問題。分子生物學(xué)的目標(biāo)及任務(wù)
目標(biāo):了解生命本質(zhì),揭示生命運(yùn)動(dòng)的規(guī)律
任務(wù):
1.分離克隆基因;(clone)
基因克隆—把確定某一性狀的基因(DNA片段)從整個(gè)基因組中找出來。
克隆(clone)這個(gè)單詞在英文中源于klōn,希臘語里“twig”的意思??寺【褪仟?dú)立細(xì)胞繁殖系,指后代完全由一個(gè)細(xì)胞復(fù)制,具有完全相同的遺傳物質(zhì)。
在生物學(xué)上,克隆通常用于兩個(gè)方面:克隆一個(gè)基因克隆一個(gè)物種,一個(gè)個(gè)體克隆一個(gè)基因是指從一個(gè)個(gè)體中獲取一段基因(例如通過PCR的方法),然后將其插入另外一個(gè)個(gè)體(通常是通過載體),再加以研究或利用??寺∮袝r(shí)候是指成功地鑒定出某種表現(xiàn)型的基因。所以當(dāng)某個(gè)生物學(xué)家說某某疾病的基因被成功地克隆了,就是說這個(gè)基因的位置和DNA序列被確定。2.確定基因的結(jié)構(gòu);(structure)
結(jié)構(gòu)基因——一級結(jié)構(gòu)調(diào)控基因——高級結(jié)構(gòu)3.基因的功能研究;(function)
生化功能:基因的直接活性及蛋白產(chǎn)物的活性(例如—與DNA的結(jié)合,信號因子,受體,運(yùn)輸?shù)鞍?,酶活性等)生理功能:基因表現(xiàn)出來的性狀,與生物個(gè)體的生存的關(guān)系。
生化功能是單個(gè)分子(基因)的作用或活性,生理功能是分子群的“集體”行為,是多個(gè)基因及環(huán)境共同作用的行為。
生化功能是生理功能的基礎(chǔ),生理功能是表現(xiàn),由于生物體基因表達(dá)的組織和發(fā)育階段的特異性等,生化功能相同生理功能并不一定相同。(同工酶就是生化功能相同,而生理功能不同)血紅蛋白生化功能:與O2和CO2結(jié)合;生理功能:將O2從肺→組織細(xì)胞,將CO2從組織細(xì)胞→肺;P53基因生化功能:DNA結(jié)合蛋白,與特異的DNA序列結(jié)合;生理功能:調(diào)節(jié)基因表達(dá),阻止細(xì)胞過度增殖,抑制腫瘤發(fā)生。p53signalingpathway4.基因表達(dá)調(diào)控研究(expresscontrol)
生物體內(nèi)的基因是按一定程序、有序的表達(dá),才有了生物的生長、發(fā)育、衰老、死亡。表達(dá)程序不同→不同的性狀,病變?;虮磉_(dá)存在時(shí)空差異,調(diào)控→多彩的世界。一個(gè)受精卵→一個(gè)植株、個(gè)體→分化出根、莖、葉、花?;虮磉_(dá)調(diào)控的主要控制點(diǎn)——基因轉(zhuǎn)錄(表達(dá)的第一步,轉(zhuǎn)錄已否及轉(zhuǎn)錄水平)分子生物學(xué)的邏輯學(xué)方法:1.效率論(能量節(jié)省原理,存在即有用)2.模型分析3.強(qiáng)烈推理分子生物學(xué)的發(fā)展和方向:
1.進(jìn)一步完善相關(guān)技術(shù)(分離、分析→微量化、自動(dòng)化、高通量)
2.技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化
3.學(xué)科的交叉
4.生物信息學(xué)
StudyContent1.DNAStructureandChemistry
2.GenomicDNAandGenes
3.DNAReplication,Mutation,Repair
4.GeneTranscriptionandPosttranscriptionalProcesses
5.ProteinSynthesisandProteinProcessing
6.RegulationofGeneExpression
7.DNARecombinantTechnology
TherevisedcentraldogmaRNAprocessingGeneregulationDNArepairandrecombination基因組的保持基因組的表達(dá)主要參考書:
1.《MolecularBiology》,RobertF.Weaver,McGraw-HillCompanies,Inc.,2000(北京:科學(xué)出版社)2.《分子生物學(xué)》,楊岐生編著,浙江大學(xué)出版社,20043.《現(xiàn)代分子生物學(xué)》(第二版),朱玉賢、李毅編著,高等教育出版社,20024.《分子生物學(xué)》,武漢大學(xué)出版社5.《分子生物學(xué)》,南開大學(xué)出版社6.《分子遺傳學(xué)》,孫乃恩等編著,南京大學(xué)出版社Iconsidermolecularbiologytobethestudyofgenesandtheiractivitiesatthemolecularlevel,includingtranscription,translation,DNAreplication,recombinationandtranslocation.MolecularBiology(McGraw-Hill)---RobertWeaver現(xiàn)代分子生物學(xué)
---朱玉賢、李毅2/E(2002)
分子生物學(xué)是研究核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的形態(tài)、結(jié)構(gòu)特征及其重要性、規(guī)律性和相互關(guān)系的科學(xué),是人類從分子水平上真正揭示生物世界的奧秘,由被動(dòng)地適應(yīng)自然界轉(zhuǎn)向主動(dòng)地改造和重組自然界的基礎(chǔ)學(xué)科。考試特點(diǎn)-多元化考核平時(shí)成績(10%):考勤,作業(yè),課間提問。文獻(xiàn)閱讀及報(bào)告(20%)期末考試(70%):知識(shí)掌握和綜合運(yùn)用能力。文獻(xiàn)閱讀及報(bào)告每人精讀一篇研究論文(英文),寫出中文提綱(摘要,實(shí)驗(yàn)方法,實(shí)驗(yàn)結(jié)果,討論,結(jié)論)(需附結(jié)果圖)文獻(xiàn)報(bào)告培養(yǎng)自信和交流能力提高閱讀文獻(xiàn)的能力知識(shí)架構(gòu)(framework)
基本知識(shí)融會(huì)貫通知識(shí)應(yīng)用與綜合課程知識(shí)體系要求70%30%Examscannotreflectallyourabilities,butcanhelpyoutobecomemorecompatible.從大到小先:先抓西瓜后抓芝麻從整體到個(gè)體:Cell-organelle-molecularmachinery-molecularevents-moleculestructureandfunction/interactionwiththeothers。即見點(diǎn)(深刻)又見面(系統(tǒng))。從共性到個(gè)性,從一般到特殊。學(xué)習(xí)小巧門
分子生物學(xué)發(fā)展史:1869 Miescher第一次分離了DNA;1941 Astbury獲得了第一張DNAX—衍射圖譜;1944 Avery細(xì)菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)成功,證實(shí)了DNA是遺傳物質(zhì)的載體;…1953 WatsonCrick提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型;1958 Crick提出遺傳信息傳遞的中心法則;…1961 Jacob和Monod提出操縱子學(xué)說——遺傳調(diào)節(jié)機(jī)理;1962 Arber證明限制性內(nèi)切酶存在;1967 Gellert發(fā)現(xiàn)DNA連接酶;1970 發(fā)現(xiàn)反轉(zhuǎn)錄酶;…1972~1973創(chuàng)建了DNA克隆技術(shù),DNA重組實(shí)驗(yàn)成功——開創(chuàng)了基因工程新紀(jì)元;…1982 Prusiner在倉鼠腦中發(fā)現(xiàn)了“朊病毒”(prion);1985 Saiki發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù));…1990 人類基因組計(jì)劃(HGP)全面正式啟動(dòng);1994 日本科學(xué)家發(fā)表了水稻基因組遺傳圖,Wilson完成了線蟲3號染色體連續(xù)2.2Mb的測定;——DNA序列測定時(shí)代到來…1997 Wilmut成功獲得克隆羊—Dolly誕生;1998 Renard克隆牛誕生(體細(xì)胞→個(gè)體);
…
2003人類基因組DNA測序完成;二十世紀(jì)是以核酸為研究核心,帶動(dòng)分子生物學(xué)向縱深發(fā)展:
50年代雙螺旋結(jié)構(gòu)
60年代操縱子學(xué)說
70年代DNA重組
80年代PCR技術(shù)
90年代DNA測序生命科學(xué)從宏觀→微觀→宏觀;由分析→綜合的時(shí)代。二十一世紀(jì)是分子生物學(xué)發(fā)展的世紀(jì),生命科學(xué)將進(jìn)入一個(gè)新的時(shí)代——后基因組時(shí)代post-genomics二十一世紀(jì)分子生物學(xué)發(fā)展的趨勢:1.功能基因組學(xué)functionalgenomics依附于對DNA序列的了解,應(yīng)用基因組學(xué)的知識(shí)和工具去了解影響發(fā)育和整個(gè)生物體的特征序列表達(dá)譜。
釀酒酵母16條染色體的全部序列于1996年完成。
5885個(gè)編碼Protein 基因組全長12,086Kb140個(gè)編碼rRNA 6340個(gè)基因 40個(gè)編碼snRNA 275個(gè)編碼tRNA
功能基因組學(xué)研究這6000個(gè)基因,在一定條件下(如孢子形成期)同時(shí)有多少基因協(xié)同表達(dá)(基因表達(dá)譜)。種群物種基因組尺寸
(百萬對)基因數(shù)序列測定
完成時(shí)間原核生物支原體Mycoplasma0.584701995大腸桿菌
E.colik124.64,3001997綠膿桿菌Pseudomonas
aeruginos
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