中藥提取的原理與實(shí)現(xiàn)

中藥提取的原理與實(shí)現(xiàn)

作為中醫(yī)學(xué)現(xiàn)代化的基本步驟和重要因素，該過(guò)程的成功及其對(duì)后續(xù)環(huán)節(jié)和最終治療效果的影響越來(lái)越受到重視。其主要評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)除了提取物收率高低、有效成分含量多少及表現(xiàn)出的療效強(qiáng)弱外,快速、節(jié)能、安全、方便和環(huán)保即成為最為重要的因素。其中的安全包括兩方面的內(nèi)容,即操作安全和成分不被破壞。傳統(tǒng)提取方法如煎煮法、回流法、連續(xù)回流法、浸漬法、滲漉法等已被人們熟知,超聲波提取法、微波提取法及超臨界萃取法等漸被人們接受,其優(yōu)缺點(diǎn)及應(yīng)用潛力正在經(jīng)受實(shí)踐的檢驗(yàn)。近年來(lái),最新用于研究的組織破碎提取法及閃式提取器經(jīng)過(guò)十余年的初步實(shí)踐已顯示出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。本文將對(duì)組織破碎提取法的創(chuàng)制與實(shí)踐進(jìn)行簡(jiǎn)要介紹,尤其是對(duì)其特性、優(yōu)缺點(diǎn)及發(fā)展前景作一較客觀的比較分析,以期對(duì)致力于中藥現(xiàn)代化研究的同行有所參考。植物組織破碎提取法作為中草藥化學(xué)及相關(guān)學(xué)科中一種科學(xué)的提取方法于1993年首次提出,當(dāng)時(shí)是利用日本岡山大學(xué)奧田拓男教授所贈(zèng)送的日本三菱JM-E31型混合器而完成的,這一儀器其實(shí)就是現(xiàn)今十分流行的家用果汁機(jī)。由于該儀器是專用于鮮果軟組織打碎混合的目的,所用材料也多不耐有機(jī)溶劑,所以當(dāng)時(shí)只能對(duì)植物葉類、部分鮮果、鮮根及非韌性全草進(jìn)行提取。通過(guò)試驗(yàn),取得了可喜的效果,尤其是提取速度和室溫進(jìn)行所體現(xiàn)的優(yōu)勢(shì)優(yōu)于所有方法。在河南省教委的支持下,與洛陽(yáng)工學(xué)院章琛教授等合作,自主研制出了首臺(tái)能用于硬組織破碎提取的樣機(jī)并用于實(shí)踐。之后,相繼試制數(shù)臺(tái)陸續(xù)被國(guó)內(nèi)部分學(xué)校及研究機(jī)構(gòu)所采用。但由于隨后技術(shù)升級(jí)、市場(chǎng)運(yùn)作及相關(guān)人員相繼出國(guó)而擱淺。毫無(wú)疑問(wèn)地說(shuō),如果沒(méi)有這一方法和與之呼應(yīng)的提取器,近十余年對(duì)花葉、訶子、柳蘭、鬼燈檠、千屈菜、桃金娘等中草藥中丹寧、多元酚類化合物的研究幾乎是不可能的。實(shí)踐不僅充分驗(yàn)證了這一方法和儀器在中草藥丹寧與多元酚類化合物研究方面的優(yōu)越性,同時(shí)還展示出了在其他多類化合物方面的潛在優(yōu)勢(shì)和與其他方法相比所顯示出的無(wú)可比擬的特性。為了能對(duì)組織破碎提取法和閃式提取器具有更好的了解和應(yīng)用,現(xiàn)將從其基本原理、基本結(jié)構(gòu)、優(yōu)勢(shì)分析及應(yīng)用實(shí)例作簡(jiǎn)要介紹。1溶劑、藥劑和提取在中草藥常用提取方法中,除了專屬性強(qiáng)的壓榨法、升華法和水蒸汽蒸餾法外,所有方法都與溶劑有關(guān),故又統(tǒng)稱為溶劑提取法,在溶劑提取法中影響提取效率的主要因素有溶劑(介質(zhì))的性質(zhì)、物料的性質(zhì)、外力的影響和介質(zhì)的溫度。無(wú)論是植物的初生代謝成分(糖類、脂類、蛋白、激素等)或次生代謝成分(生物堿、黃酮、苷類、萜類等)和異常次生代謝成分(如樹(shù)脂、樹(shù)膠等),在植物體內(nèi)多是以分子狀態(tài)存在于細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間的,少數(shù)以鹽的形式(如生物堿、有機(jī)酸)、結(jié)晶形式(如草酸鈣結(jié)晶)、分子團(tuán)形式(如五倍子丹寧)等存在,當(dāng)與其周圍的新鮮溶劑介質(zhì)相比,植物組織內(nèi)外濃度差無(wú)限大,此時(shí),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),溶劑將自動(dòng)向植物細(xì)胞內(nèi)滲透、充盈甚至破壞細(xì)胞膜而徹底打開(kāi)內(nèi)外通道,同時(shí)細(xì)胞內(nèi)的成分因溶劑分子的滲入、包圍而使細(xì)胞內(nèi)的原存狀態(tài)解離并開(kāi)始向低濃度的細(xì)胞組織外擴(kuò)散,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間即達(dá)到內(nèi)外平衡,此時(shí)過(guò)濾,即是前所述及的浸漬法。在這一過(guò)程中,溶劑的選擇極為重要?？梢韵胂?如果用水去浸泡花生、大豆中的油脂是幾乎不可能的,同樣用石油醚等非極性溶劑去提取各種植物中的多糖也是完全無(wú)效的。除了溶劑本身的滲透能力外,各種溶劑的溶解特性起關(guān)鍵性作用。對(duì)于通常所講的“相似相溶原理”可以用圖1更好地表現(xiàn)出來(lái),圖的中心代表中等極性溶劑,該類溶劑一般既可以溶解出極性成分,又可溶解出非極性成分。當(dāng)溶劑極性增強(qiáng)時(shí),所溶出成分的極性也增強(qiáng),同時(shí)極性成分增多,非極性成分減少,當(dāng)達(dá)到足夠強(qiáng)時(shí),將不再溶出非極性成分;同樣,當(dāng)溶劑極性減弱時(shí),所溶出成分的極性也減弱,同時(shí)非極性成分增多,極性成分減少,當(dāng)達(dá)到足夠弱時(shí),即完全非極性溶劑時(shí),將不再溶出任何極性成分。在所選溶劑的極性決定后,影響提取效率的因素就剩物料粒度、外力作用和介質(zhì)溫度了,其中介質(zhì)溫度影響的一般規(guī)律是溫度越高,分子運(yùn)動(dòng)速度加強(qiáng),從而使達(dá)到植物組織內(nèi)外平衡的時(shí)間縮短,即提高提取效率。如煎煮法、回流提取法即是這一原理。但值得注意的是,有些植物成分在一定溶劑中隨溫度升高而溶解度降低,如葛根素(puerarin)在甲醇溶劑中隨溫度升高而溶解度降低,這一現(xiàn)象在提取時(shí)應(yīng)引起注意。此外,有些成分在一定溶劑中受熱分解或變性,如含淀粉多的材料用水做溶劑提取時(shí),加熱可使淀粉糊化而阻礙一些成分的繼續(xù)溶出和影響過(guò)濾。加熱提取丹寧類化合物也易造成成分分解和氧化破壞。因此,利用加熱縮短平衡時(shí)間,提高提取效率的得失兼具,需依具體情況具體考慮。物料粒度和外力作用也是影響平衡時(shí)間和提取效率的關(guān)鍵因素,其中物料粒度雖然可通過(guò)粉碎來(lái)實(shí)現(xiàn),但實(shí)際應(yīng)用仍有不少限制與不便。如對(duì)于根、莖、葉、花果等不同質(zhì)地的藥材需要不同的粉碎方法,對(duì)新鮮藥材更需要特殊的粉碎方法。對(duì)于像熟地、玄參等的粉碎幾乎是不可能的。另外,粉碎過(guò)細(xì)又會(huì)對(duì)后期的過(guò)濾帶來(lái)很大麻煩,尤其是當(dāng)用水作溶劑時(shí)就更為突出。因此,靠粉碎來(lái)縮短平衡時(shí)間、提高提取效率的可行性十分有限。在溶劑和物料粒度決定之后,外力的作用即成為影響提取效率的關(guān)鍵因素。如前述的超聲波、微波、磁輻射、超臨界動(dòng)態(tài)連續(xù)萃取、高壓連續(xù)滲漉罐及通過(guò)進(jìn)一步改進(jìn)可實(shí)現(xiàn)的攪拌浸漬法、振動(dòng)浸漬法等,這些方法均在某些方面有一定改進(jìn),但均未實(shí)現(xiàn)重大突破,甚至是提取效率的顯著提高。此外,溶劑用量大小也是一個(gè)很矛盾的因素,溶劑用量小,顯然可很快達(dá)到組織內(nèi)外平衡,但同時(shí)也因過(guò)早飽和作用而影響提取收率,此時(shí),往往需要多次重復(fù)提取方可達(dá)到完全。如溶劑用量過(guò)大,一是造成直接浪費(fèi),二是達(dá)到平衡的時(shí)間顯著延長(zhǎng),同樣影響提取效率。因此,組織破碎提取法和閃式提取器方可以嶄新面貌面世并給中藥提取領(lǐng)域帶來(lái)革命性變化。2破碎顆粒尺寸對(duì)組織平衡的影響由上述對(duì)影響提取效率的因素進(jìn)行的分析即可看出,物料粒度越小,溶劑與被提取的成分極性越接近,適當(dāng)外力作用越突出,提取效率就會(huì)越高。組織破碎提取法通過(guò)閃式提取器的巧妙設(shè)計(jì),在適當(dāng)溶劑存在下,將物料高速粉碎至適當(dāng)粒度,同時(shí)伴有高速攪拌、振動(dòng)、負(fù)壓滲濾等外力,實(shí)現(xiàn)了這3種因素的最佳結(jié)合,達(dá)到了充分提高提取效率之目的。在這一過(guò)程中,為了在既能充分發(fā)揮粒度小易達(dá)到組織內(nèi)外平衡的優(yōu)勢(shì),又不至于因顆粒度太細(xì)而影響后期的過(guò)濾,故在破碎刀具的設(shè)計(jì)方面控制了破碎顆粒范圍在40～60目左右。由于這樣細(xì)小的顆粒與溶劑在一起,在高速攪拌與振動(dòng)下,組織內(nèi)外的化學(xué)成分在極短的時(shí)間內(nèi)即可達(dá)到平衡。因此,完成一次提取一般在1min之內(nèi)即可,藥渣在抽濾過(guò)程中略經(jīng)洗濾即可達(dá)到提取基本完全的目的。3動(dòng)物組織勻漿化根據(jù)前述組織破碎提取法的基本思想,閃式提取器由破碎刀具、動(dòng)力部分、升降系統(tǒng)、控制系統(tǒng)及物料容器所組成,其中破碎刀具和動(dòng)力部分為關(guān)鍵部件。破碎刀頭的設(shè)計(jì)充分吸收了用于動(dòng)物組織勻漿化的均質(zhì)器的優(yōu)點(diǎn),避免了普通組織搗碎機(jī)的單刀切碎,“欺軟怕硬”的不足。內(nèi)外刃之間保持0.5～1mm間隙,這一間隙的大小不僅決定了破碎顆粒度的大小,而且影響雙刃間的切割效率與鋒利性。雙刃通過(guò)精密的同心軸相連,外刃固定,內(nèi)刃在高速電機(jī)的帶動(dòng)下旋轉(zhuǎn),從而對(duì)被破碎的材料產(chǎn)生破碎作用(見(jiàn)圖2)。本儀器的動(dòng)力部分是由單相高速電機(jī)完成,根據(jù)破碎刀具的大小配置不同功率,電機(jī)通過(guò)電阻或電壓控制系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)無(wú)級(jí)連續(xù)變速或階梯檔位調(diào)速。物料容器采用配套且具密封裝置的耐有機(jī)溶劑材料制成,也可用適當(dāng)容器替代。4閃式提取器啟動(dòng)點(diǎn)完成一次提取一般在30s左右,其速度與任何傳統(tǒng)方法相比,可說(shuō)是眨眼功夫,因此被稱之為閃式提取器。對(duì)其進(jìn)行仔細(xì)剖析,不難發(fā)現(xiàn)整個(gè)過(guò)程包含了以下基本原理:4.1研磨對(duì)不同粒徑中草藥根、莖的研磨本儀器內(nèi)刃的轉(zhuǎn)速為15000～30000r·min-1?？梢韵胂?對(duì)于100g的中等脆性的中草藥根、莖等飲片,在普通研缽或碾槽中,手動(dòng)反復(fù)研磨15000遍,將會(huì)是如何細(xì)碎的程度,但達(dá)到這一目的即使在不停的情況下(2次/s),可能要花2h以上,而本儀器僅需不足1min。4.2外對(duì)于進(jìn)行攪拌在內(nèi)刃高速轉(zhuǎn)動(dòng)并與外刃間發(fā)生切割作用過(guò)程中,在內(nèi)刃中心形成強(qiáng)力渦流,并帶動(dòng)已粉碎的物料內(nèi)外翻動(dòng),從而產(chǎn)生劇烈攪拌作用,使整個(gè)體系處于快速的濃度變化之中。物料中被提取的物質(zhì)分子隨著破碎顆粒的變小而暴露于溶劑環(huán)境中并迅速轉(zhuǎn)移至溶劑中,提取溶劑與物料顆粒間化學(xué)成分的分布隨著破碎的進(jìn)行在平衡、不平衡之間快速交替進(jìn)行,最終達(dá)到徹底粉碎、完全平衡的提取。4.3渦流負(fù)壓的作用原理在工作狀態(tài),整個(gè)體系處在一個(gè)高速動(dòng)態(tài)體系之中,內(nèi)外刃之間不僅發(fā)生了對(duì)物料的剪切作用,同時(shí)借助內(nèi)刃旋轉(zhuǎn)、外刃固定而產(chǎn)生一種渦流負(fù)壓,在這種負(fù)壓的作用下,在外刃窗口的內(nèi)外發(fā)生分子滲透現(xiàn)象,即已通過(guò)剪碎而充分暴露的物質(zhì)分子(被提取成分)在負(fù)壓的作用下,被溶劑分子包圍、解離、替代,最后脫離藥材進(jìn)入溶劑中而實(shí)現(xiàn)提取的目的。4.4壞作用及對(duì)改變一種分散體系的作用超聲波對(duì)浸漬法的加速作用早已被公認(rèn),振動(dòng)對(duì)植物組織間結(jié)構(gòu)的破壞作用及對(duì)改變一種分散體系的作用也不言而喻。本儀器在高速旋轉(zhuǎn)中能夠產(chǎn)生相當(dāng)于超聲波1/60的振動(dòng),在這種振動(dòng)作用下,無(wú)疑對(duì)達(dá)到化學(xué)成分在被破碎物料顆粒內(nèi)外的溶解平衡起到強(qiáng)力促進(jìn)作用。5粉碎提取的必要性簡(jiǎn)單從表面來(lái)看,不難有這樣的疑問(wèn),即可以先用普通粉碎機(jī)把藥材粉碎,然后再用浸泡或攪拌浸泡的方法進(jìn)行提取。這種想法僅從一種因素考慮當(dāng)然可以適當(dāng)提高效率,但略作分析,二者本質(zhì)不同即不難看出:(1)從操作來(lái)看,就一般材料粉碎而言,至少需要一個(gè)適當(dāng)大小的粉碎機(jī),而這種粉碎機(jī)要同時(shí)適合軟、硬材料、新鮮材料、肉質(zhì)材料、韌性材料等的需要幾乎是不可能的。(2)對(duì)于易粉碎的材料,粉碎后往往形成大量細(xì)粉,而這種細(xì)粉無(wú)論再用什么溶劑提取都會(huì)對(duì)后期過(guò)濾帶來(lái)極大麻煩。(3)對(duì)粉碎后的物料提取如采用浸漬法,就必然再加上攪拌裝置,否則,被粉碎的物料要么漂浮在表面,要么沉在底部,靠自然力量實(shí)現(xiàn)藥材內(nèi)外被提取成分在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到濃度平衡是幾乎不可能的,至少失去了粉碎的意義。如果用于滲濾或回流提取,則前者極易域被細(xì)粉堵塞而滯留,后者則會(huì)因細(xì)粉沉底而爆沸甚至危險(xiǎn)。(4)從提取的時(shí)間效率來(lái)說(shuō),后者無(wú)論如何費(fèi)時(shí)都會(huì)比前者高數(shù)百倍以上,如果用于生產(chǎn),由時(shí)間與人力所造成的損失將為數(shù)倍至數(shù)百倍之多。(5)按后者最簡(jiǎn)單的操作程序來(lái)評(píng)價(jià),至少需要兩件動(dòng)力設(shè)備,即粉碎機(jī)和攪拌機(jī)。此外,尚需要各自的配套器具,而破碎提取器僅相當(dāng)于其一。(6)從環(huán)境保護(hù)分析,破碎提取占用空間小,設(shè)備簡(jiǎn)單,無(wú)粉塵污染,而后者與其則完全相反。6閃式提取器的優(yōu)越性能6.1在省級(jí)范圍內(nèi)在一定規(guī)模情況下,完成一次提取僅需30s左右。6.2在室溫下提取，沒(méi)有損壞本儀器一般在室溫條件對(duì)物料進(jìn)行提取,避免了任何不耐熱成分破壞的可能性。必要時(shí)可采用定制的加熱容器,或使用預(yù)熱的溶劑。6.3花種子本儀器可用于各種植物的根、莖、葉、花、果實(shí)、種子(細(xì)小的種子除外)等,一般在預(yù)粉碎至普通中藥飲片大小,新鮮材料、堅(jiān)硬材料、韌性材料等均可。6.4提取主要苷類成分根據(jù)成分的性質(zhì)不同,選用不同溶劑,如提取糖類、蛋白、多肽、氨基酸等可用水作溶劑,提取黃酮等各種苷類成分可用乙導(dǎo)或含水乙醇,提取丹寧及多元酚類成分可選用不同濃度丙酮進(jìn)行。6.5按安全注意事項(xiàng)常采用水、乙醇、甲醇、丙酮等槳它們的含水溶劑,一般以既能提取出所需成分,又適于后期過(guò)濾為宜。對(duì)于乙醚、乙酸乙酯等易燃有機(jī)溶劑一般不宜選用,必要時(shí)嚴(yán)格按易燃有機(jī)溶劑的使用注意事項(xiàng)在通風(fēng)、安全的地方進(jìn)行。提取生物堿需用酸水時(shí),應(yīng)先用常水破碎提取,然后再加入適量酸調(diào)至所需酸度,攪拌過(guò)濾即可,以免對(duì)刀頭產(chǎn)生腐蝕作用。6.6閃式提取的用量按提取100g中等硬度的根類藥材計(jì)算,用常規(guī)加熱回流提取,一般用500W電熱套或電爐作為熱源提取2次,每次1h,總耗電為1kW·h-1,即一度電。若用閃式提取器提取,可在20s完成,按800W功率計(jì)算,即20÷3600×0.8=0.004度,僅為前者的1/250,如果擴(kuò)大至中試規(guī)?；蛏a(chǎn)化規(guī)模,其節(jié)約程度將十分顯著。對(duì)于松散軟材料如葉、花、全草類,由于其質(zhì)輕而在常規(guī)提取中將浪費(fèi)巨大空間及相應(yīng)溶劑用量,而用閃式提取器則會(huì)在瞬間將其變?yōu)闈{粉,且可在提取過(guò)程中分次加料直至物料/溶劑比合適為止,從而可發(fā)揮出閃式提取器的巨大威力。比起超聲提取也要快數(shù)十倍之多。6.7避免了流提取中熱源的進(jìn)一步提取本儀器不僅是單人按鍵式操作,避免了回流提取中在燒瓶?jī)?nèi)裝掏藥渣的苦惱,也避免了煎煮法中熱源控制及長(zhǎng)時(shí)間看守的不便。但仍應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作。6.8閃式提取器主要特點(diǎn)前已述及,與先粉碎后提取相比,避免了空氣粉塵的污染;與回流提取法相比,掏取藥渣時(shí)有機(jī)溶劑易對(duì)人體造成一定傷害,且易在藥渣內(nèi)殘留大量溶劑對(duì)進(jìn)一步處理造成困難。用閃式提取器只需抽濾即可把大部分殘留有機(jī)溶劑除去,少量殘余可通過(guò)抽濾出提取液后用適量水抽洗即可?；境M溶劑在藥渣中的殘留。除凈溶劑的粉碎藥渣可視能否再利用情況參與自然生態(tài)循環(huán)。7功能性材料的選擇由于受提取容器大小、動(dòng)力的額定功率及破碎刀具臂長(zhǎng)的影響,對(duì)于目前市場(chǎng)上的JHBE-50S型閃式提取器單次提取量受一定限制。對(duì)于質(zhì)地硬脆、密度大的干果、根莖飲片類,一次可提取100～300g,但對(duì)于密度小、蓬松的葉、花及全草類,由于體積大,故單次加入藥材量就小。但無(wú)論什么材料,均可通過(guò)分次加入而達(dá)到所希望之目的。對(duì)于非飲片、質(zhì)地堅(jiān)硬的根及根莖、干果類等應(yīng)先加工成飲片大小或適當(dāng)打碎,否則因無(wú)法進(jìn)入內(nèi)外刃之間而使破碎無(wú)法進(jìn)行。有時(shí)會(huì)因使用不當(dāng)而造成刀頭被卡現(xiàn)象,此時(shí)應(yīng)立即停機(jī)按操作說(shuō)明及故障排除方法處理即可。當(dāng)用水作溶劑時(shí)往往會(huì)因水溶性成分太多、粘稠性增大及混懸、乳化現(xiàn)象等而使過(guò)濾困難,此時(shí)可依所需成分特性進(jìn)行處理,如先用紗布粗濾去藥渣再精濾,或用適當(dāng)有機(jī)溶劑如乙醇處理等。正像任一處方難包治百病一樣,閃式提取器尚無(wú)足夠證據(jù)或傾向完全替代目前的提取方法。對(duì)于各種復(fù)雜多變的情況應(yīng)靈活處理,更尚需長(zhǎng)時(shí)間的摸索檢驗(yàn)。8中低頻旋轉(zhuǎn)電機(jī)的價(jià)值前已述及,自從早期的家用果汁混合器、第一代試制的中低速旋轉(zhuǎn)電機(jī)到目前的標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品,曾對(duì)數(shù)10種中草藥進(jìn)行了實(shí)用性研究與試驗(yàn),下述部分實(shí)例將會(huì)對(duì)本法的優(yōu)勢(shì)及實(shí)用價(jià)值作以充分說(shuō)明。8.1提取方法比較花葉為金縷梅科木屬植物花或木(Loropetalumchinense)的干燥葉。具有清熱止瀉、活血止血的功效。用于治療暑熱泄痢、扭閃傷筋、創(chuàng)傷出血、目痛喉瘡等癥。HPLC初步分析表明,其中含有豐富的丹寧類化合物,為了闡明其丹寧及有關(guān)多元酚類化合物的結(jié)構(gòu)及生物活性,受國(guó)家青年科學(xué)基金資助對(duì)其進(jìn)行了較系統(tǒng)研究。由于丹寧類化合物的不穩(wěn)定性,首先對(duì)其提取方法進(jìn)行了摸索試驗(yàn),同時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)的還有芫花葉等6種材料。由于被試材料均為干燥葉類,故本研究采用了日本產(chǎn)三菱JN-E31型混合器,對(duì)所選用的6種植物材料分別用95%EtOH和70%Me2CO作溶劑進(jìn)行室溫破碎提取,同時(shí)選用回流提取法中的最佳條件進(jìn)行回流提取作為對(duì)照,將二法所得干燥提取物的收率和TLC行為等進(jìn)行比較分析,從而說(shuō)明破碎提取法的優(yōu)越性。所選用的6種試驗(yàn)材料分別為:(1)芫花葉(Daphnegenkwa),主要含有黃酮及綠原酸類化合物;(2)長(zhǎng)白瑞香葉(D.koreana),主要含有香豆素類化合物;(3)柳葉(Salixbabylonica)含有黃酮類化合物;(4)尖瓣瑞香(D.acutiloba)含香豆素類化合物;(5)木瓜葉(Chaenomelessinensis)含丹寧類化合物;(6)算盤子葉(Glochidionpuberum)含丹寧類化合物。研究結(jié)果表明:1)當(dāng)用70%Me2CO作溶劑時(shí),6種材料分別用兩法所得干燥提取物的收率幾乎一樣。由于破碎提取僅用1min完成,且不需加熱,而回流提取1次就需要2h,因此就等于提高效率100倍以上,且節(jié)約了大量能源。2)在2種方法中,70%Me2CO比95%EtOH對(duì)所用的6種材料及所含成分來(lái)說(shuō),具有更強(qiáng)的穿透性和溶解能力,收率遠(yuǎn)高于后者。因此,對(duì)于上述材料中成分的提取來(lái)說(shuō),以首選70%Me2CO為宜。3)將兩法所得各提取物進(jìn)行初步TLC比較分析,結(jié)果基本一樣。由于丹寧類成分即使受熱破壞也很難在普通TLC上顯示,但破碎提取法中由于避免了加熱,其安全性是十分可靠的。因此,對(duì)花葉中丹寧的提取主要采用了這種方法,效果十分滿意?？偺崛∥锸章蔬_(dá)到25%以上,HPLC分析顯示該提取物由大小不同的可水解丹寧分子組成,經(jīng)Toyop-earlHW-40和MCIgel反復(fù)分離純化,從中分離鑒定了30余個(gè)可水解丹寧及多元酚類化合物。尤其是從中分離到了由可水解丹寧單元體(如rugosinA等)、二聚體(如rugosinD等)和三聚體(rugosinG等)及具大環(huán)結(jié)構(gòu)的可水解丹寧(oenotheinB)等組成的一系列化合物。從所證明的結(jié)構(gòu)本身即可充分顯示該提取方法的安全性。8.2化學(xué)、機(jī)械化學(xué)成分訶子為使君子科(Combretaceae)訶子屬植物訶子(Terminaliachebula)和毛訶子(T.billerica)的干燥果實(shí),具有清熱解毒、收斂養(yǎng)血、調(diào)和諸藥的功效。作為國(guó)家九五攻關(guān)期間80味藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)容之一,我們?cè)鴮?duì)在廣西、云南等我國(guó)主要產(chǎn)地采集到的訶子樣品、各大藥材市場(chǎng)和部分院校收集到的樣品進(jìn)行了鑒定及成分分析,對(duì)廣西產(chǎn)的當(dāng)年干燥訶子進(jìn)行了系統(tǒng)化學(xué)成分研究。取干燥去核訶子4.5kg,用自行研制的閃式提取器和以含水丙酮作為溶劑進(jìn)行室溫破碎提取,提取液減壓濃縮至干后得總提取物1.5kg。對(duì)該提取物進(jìn)行的初步化學(xué)分析和HPLC分析勻顯示有豐富的丹寧及多元酚類成分。對(duì)其進(jìn)行DiaionHP-20,ToyopearlHW-40反復(fù)柱層分析,分離得到20余種成分,其中訶子酸(chebulinicacid)和訶黎勒酸(chebu-lagicacid)為其主要成分。同樣提取方法對(duì)其進(jìn)行HPLC定量分析表明,訶子酸和訶黎勒酸的含量分別為7.28%和13.06%。進(jìn)一步的總提取物的收率研究表明,對(duì)1.02g藥材用150mL70%丙酮進(jìn)行破碎提取,每次提取20s,提取液減壓抽干,4次所得提取物及收率分別為第1次0.387g(38.7%),第2次0.110g(11.0%),第3次0.021g(2.1%),第4次僅為0.004g(0.4%)。前3次的提取效率分別為74.7%,21.2%和4.1%。因此,從經(jīng)濟(jì)角度考慮,提取2次即可達(dá)到95%以上?？梢?jiàn)對(duì)于像訶子這樣極硬的藥材,破碎提取則更加顯示出其具大威力。8.3含水率丙酮ecg綠茶中主要化學(xué)成分多為水溶性或中等極性,這些成分包括多元酚、氨基酸、糖類、咖啡因等堿性成分及微量元素等,其中的多元酚即常所稱之的茶多酚主要由4種化合物組成,分別為表兒茶素(epicatechin,EC),表兒茶素沒(méi)食子酸酯(epicatechingallate,ECG),表沒(méi)食子酰兒茶素(epigallocatechin,EGC)和表沒(méi)食子酰兒茶素沒(méi)食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG),其中尤以EGCG含量最高,且為綠茶中防癌的主要成分。盡管這些成分都具有較好的水溶性,但考慮到對(duì)茶多酚提取更加充分和后期處理的方便,故采用了含水丙酮作為提取溶劑。本研究用普通信陽(yáng)毛尖綠茶作為原料進(jìn)行室溫組織破碎提取,3次提取收率的總和達(dá)50%以上,3次提取之間的比例基本為9∶3∶1,說(shuō)明2次提取即已基本完全,如在抽濾過(guò)程中再用適量新鮮溶劑沖洗,則會(huì)達(dá)到更好的效果。8.4元酚類化合物柳蘭為柳葉菜科(Onagraceae)植物柳蘭(Chamaenerionangustifolium)的干燥全草,具有治療乳汁不下、腸燥便秘、月經(jīng)不調(diào)、骨折及關(guān)節(jié)扭傷的作用。曾有報(bào)道其中含有的大分子多元酚類化合物具有抑制小鼠移植瘤生長(zhǎng)的作用。為了闡明其主要化學(xué)成分及可能的抗腫瘤作用,受國(guó)家自然科學(xué)基金資助對(duì)其進(jìn)行了系統(tǒng)研究。對(duì)采自湖北神農(nóng)架的該植物干燥地上部分2kg以含水丙酮和閃式提取器進(jìn)行破碎提取,減壓濃縮去除丙酮后直接進(jìn)行DiaionHP-20柱層析,對(duì)不同濃度甲醇洗脫部分再進(jìn)行ToyopearlHW-40和MCIgelCHP-20P反復(fù)柱層析,分離鑒定出包括黃酮苷、綠原酸、小分子酚類化合物及可水解丹寧單元體和二聚體的18種化合物,其中,woodfordinI在引起人白血病K562細(xì)胞凋亡方面顯示出非常好的作用,有望成為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)用于人CMLK562細(xì)胞的先導(dǎo)化合物。8.5治療冠心病疾病桃金娘(Rhodomyrtustomentosa)為桃金娘科藥用植物,主要分布于南方各省,其根(山稔根)具有祛風(fēng)除濕、止血、止痛的功效,主要用于治療肝炎、血崩、胃痛、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)痛、疝氣及傳染性肝炎等癥。受國(guó)家自然科學(xué)基金資助,對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)分離鑒定。對(duì)初步砸碎的桃金娘根用閃式提取器和含水丙酮進(jìn)行破碎提取,同前述方法共分離得到10余種C-苷可水解丹寧及其他黃酮、多元酚等類型成分,其中castalagin、casuarinin、tomentosin、楊梅素-3-O-葡萄糖苷(myricetin-3-O-glucoside)為其主要成分。8.6強(qiáng)調(diào)黃酮苷類活性成分的檢測(cè)芫花葉為瑞香科植物芫花(Daphnegenkwa)的干燥葉,在我們對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)化學(xué)成分研究過(guò)