微生物學(xué)藥學(xué)專業(yè)內(nèi)毒素致病菌

微生物學(xué)藥學(xué)專業(yè)內(nèi)毒素致病菌第一頁，共四十六頁，2022年，8月28日內(nèi)毒素內(nèi)毒素存在于菌體內(nèi)，是菌體的結(jié)構(gòu)成份。細(xì)菌在生活狀態(tài)時不釋放出來，只有當(dāng)菌體自溶或用人工方法使細(xì)菌裂解后才釋放，故稱內(nèi)毒素。大多數(shù)革蘭氏陰性都有內(nèi)毒素，如沙門氏菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、奈瑟氏球菌等第二頁，共四十六頁，2022年，8月28日內(nèi)毒素的作用內(nèi)毒素對組織細(xì)胞的選擇性不強(qiáng)，不同革蘭氏陰性細(xì)菌的內(nèi)毒素，引起的病理變和臨床癥狀大致相同。

①發(fā)熱反應(yīng)

②糖代謝紊亂

③血管舒縮機(jī)能紊亂

④彌漫性血管內(nèi)凝血第三頁，共四十六頁，2022年，8月28日沙門氏菌屬是一大群寄生于人類和動物腸道內(nèi)生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭氏陰性桿菌統(tǒng)稱為沙門氏桿菌。目前至少有67種O抗原和2000個以上血清型，所致疾病稱沙門氏菌病。根據(jù)其對宿主的致病性，可分為三類：①對人致??；②對人和動物均致??；③對動物致病。

與人類關(guān)系密切的沙門氏菌有：傷寒桿菌，甲、乙、丙型副傷寒桿菌，鼠傷寒桿菌，豬霍亂桿菌，腸炎桿菌。

第四頁，共四十六頁，2022年，8月28日生物學(xué)性狀形態(tài)與染色

大小0.6～1.0×2～3um，無芽胞，一般有鞭毛，無莢膜，多數(shù)有菌毛，革蘭氏陰性桿菌。第五頁，共四十六頁，2022年，8月28日第六頁，共四十六頁，2022年，8月28日培養(yǎng)特性兼性厭氧菌在普通瓊脂平板上形成中等大小、半透明的S型菌落。在腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基上形成無色菌落。

第七頁，共四十六頁，2022年，8月28日生化反應(yīng)不發(fā)酵乳糖和蔗糖不產(chǎn)生吲哚不分解尿素VP試驗陰性大多產(chǎn)生硫化氫發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖和甘露醇，除傷寒桿菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣外，其他沙門氏菌均產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

第八頁，共四十六頁，2022年，8月28日第九頁，共四十六頁，2022年，8月28日第十頁，共四十六頁，2022年，8月28日抗原構(gòu)造與分類主要有O和H兩種抗原。少數(shù)菌具有表面抗原，一般認(rèn)為與毒力有關(guān)，故稱Vi抗原。

第十一頁，共四十六頁，2022年，8月28日O抗原為脂多糖，性質(zhì)穩(wěn)定。能耐100℃達(dá)數(shù)小時，不被乙醇或0.1%石炭酸破壞。決定O型原特異性的是脂多糖中的多糖側(cè)鏈部分，以1、2、3等阿拉伯?dāng)?shù)字表示。其中有些O抗原是幾種菌所共有，將具有共同O抗原沙門氏菌歸為一組，這樣可將沙門桿氏菌屬分為A～Z、O51～O63、O65～O67共有42組。使人類致病的沙門氏桿菌大多屬于A～F組。O抗原刺激機(jī)體主要產(chǎn)生lgM抗體。

第十二頁，共四十六頁，2022年，8月28日H抗原為蛋白質(zhì)，對熱不穩(wěn)定，60℃經(jīng)15分鐘或乙醇處理被破壞。具有鞭毛的細(xì)菌經(jīng)甲醇液固定后，其O抗原全部被H抗原遮蓋，而不能與相應(yīng)抗O抗體反應(yīng)。H抗原的特異性取決于多肽鏈上氨基酸的排列順序和空間構(gòu)型。沙門氏桿菌的H抗原有兩種，稱為第1相和第2相。第1相特異性高，又稱特異相，用a、b、c等表示。第2相特異性低，為數(shù)種沙門氏桿菌所共有，也稱非特異相，用1、2、3等表示。具有第1相和第2相H抗原的細(xì)菌稱為雙相菌，僅有一相者稱單相菌。每一組沙門氏桿菌根據(jù)H抗原不同，可進(jìn)一步分種或型。H抗原刺激機(jī)體主要產(chǎn)生lgG抗體。

第十三頁，共四十六頁，2022年，8月28日Vi抗原因與毒力有關(guān)而命名為Vi抗原。由聚-N-乙酰-D-半乳糖胺糖醛酸組成。不穩(wěn)定，經(jīng)60℃加熱、石碳酸處理或人工傳代培養(yǎng)易破壞或丟失。新從患者標(biāo)本中分離出的傷寒桿菌、丙型副傷寒桿菌等有此抗原。Vi抗原存在于細(xì)菌表面，可阻止O抗原與其相應(yīng)抗體的反應(yīng)。Vi抗原的抗原性弱。當(dāng)體內(nèi)菌存在時可產(chǎn)生一定量抗體；細(xì)菌被清除后，抗體也隨之消失。故測定Vi抗體有助于對傷寒帶菌者的檢出。第十四頁，共四十六頁，2022年，8月28日抵抗力對熱抵抗力不強(qiáng)，60℃1小時或65℃經(jīng)15～20分鐘可被殺死。在水中能存活2～3周。糞便中可活1～2個月。可在冰凍土壤中過冬。在一般食物中不僅能生存且繁殖。對氯霉素、呋喃唑酮、復(fù)方新諾明敏感。第十五頁，共四十六頁，2022年，8月28日致病性致病物質(zhì)

1．侵襲力：沙門氏桿菌侵入小腸粘膜上皮細(xì)胞，穿過上皮細(xì)胞層到達(dá)上皮下組織。細(xì)菌雖被細(xì)胞吞噬，但不被殺滅，并在其中繼續(xù)生長繁殖。這可能與Vi抗原和O抗原的保護(hù)作用有關(guān)。菌毛的粘附作用也是細(xì)菌侵襲力的一個因素。

2．內(nèi)毒素：引起發(fā)熱、白細(xì)胞減少。大劑量時可發(fā)生中毒性休克。內(nèi)毒素可激活補(bǔ)體系統(tǒng)釋放趨化因子，吸引粒細(xì)胞，導(dǎo)致腸道局部炎癥反應(yīng)。

3．腸毒素：有些沙門氏桿菌，如鼠傷寒桿菌可產(chǎn)生腸毒素，性質(zhì)類似腸產(chǎn)毒性大腸桿菌的腸毒素。第十六頁，共四十六頁，2022年，8月28日人類的沙門氏菌病

1．腸熱癥：是傷寒病和副傷寒病的總稱，主要由傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起。2.急性腸炎(食物中毒)

：多由鼠傷寒桿菌、豬霍亂桿菌、腸炎桿菌等引起。3．?dāng)⊙Y：常由豬霍亂桿菌、丙型副傷寒桿菌、鼠傷寒桿菌、腸炎桿菌等引起。

第十七頁，共四十六頁，2022年，8月28日腸熱癥（傷寒和副傷寒）

細(xì)菌到達(dá)小腸后，侵入腸壁淋巴組織，在其中大量繁殖，并進(jìn)血流，引起第一次菌血癥。病人有發(fā)熱、全身不適、乏力等。細(xì)菌隨血流至骨髓、肝、脾、腎、膽囊、皮膚等并在其中繁殖，并再次進(jìn)入血流，引起第二次菌血癥。此期癥狀明顯，病人持續(xù)高熱，相對緩脈，肝脾腫大及全身中毒癥狀，皮膚出現(xiàn)玫瑰疹。血中的白細(xì)胞數(shù)量顯著下降。存于膽囊中的細(xì)菌隨膽汁排至腸道，一部分隨糞便排出體外。部分菌可再次侵入腸壁淋巴組織，出現(xiàn)超敏反應(yīng)，引起局部壞死和潰瘍，嚴(yán)重者發(fā)生腸出血和腸穿孔。腎臟中的細(xì)菌可隨尿排出。典型傷寒的病程約3～4周。病愈后部分患者可自糞便或尿液繼續(xù)排菌3周至3個月，稱恢復(fù)期帶菌者。約有3%的傷寒患者成為慢性帶菌者。副傷寒病與傷寒病癥狀相似，但一般較輕，病程較短，約1～3周即愈。主要由傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起。第十八頁，共四十六頁，2022年，8月28日急性腸炎(食物中毒)是最常見的沙門氏桿菌感染。多由鼠傷寒桿菌、豬霍亂桿菌、腸炎桿菌等引起。系因食入未煮熟的病畜病禽的肉類、蛋類而發(fā)病。潛伏期短，一般4～24小時，主要癥狀為發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。細(xì)菌通常不侵入血流，病程較短，一般2～4天內(nèi)可完全恢復(fù)。

第十九頁，共四十六頁，2022年，8月28日敗血癥常由豬霍亂桿菌、丙型副傷寒桿菌、鼠傷寒桿菌、腸炎桿菌等引起。病菌進(jìn)入腸道后，迅速侵入血流，導(dǎo)致組織器官感染，如腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、腎盂腎炎、心內(nèi)膜炎等。出現(xiàn)高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血等。在發(fā)熱期，血培養(yǎng)陽性率高。

第二十頁，共四十六頁，2022年，8月28日免疫性傷寒或副傷寒病后有牢固的免疫性，很少再感染。主要依靠細(xì)胞免疫，表現(xiàn)為單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)在淋巴因子的作用下，胞內(nèi)酶數(shù)量增多，活性增強(qiáng)，從而殺死寄生在細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌。體液免疫方面，局部抗體較重要，尤其是SlgA具有特異性防止傷寒桿菌粘附于腸粘膜表面的能力。抗O和抗Vi抗體能抵抗病原菌的感染。血循環(huán)中l(wèi)gM、lgG抗體對胞內(nèi)寄生菌無免疫作用。第二十一頁，共四十六頁，2022年，8月28日防治原則

主要通過消化道傳播,需加強(qiáng)飲水、食品衛(wèi)生的監(jiān)督和管理，對飲食加工及服務(wù)行業(yè)、制藥行業(yè)工作人員應(yīng)定期進(jìn)行健康檢查，及時發(fā)現(xiàn)帶菌者并調(diào)離工作崗位。腸熱癥的特異性免疫，以往采用接種死菌苗，雖有一定的保護(hù)作用，但常引起局部和全身反應(yīng)。近年來，Sd株減毒口服活菌苗免疫效果好且較持久。此菌株安全、穩(wěn)定。對病人應(yīng)隔離治療?？刹捎寐让顾亍逼S青霉素、羥氨芐青霉素等，中藥白花蛇舌草，穿心蓮等有效。第二十二頁，共四十六頁，2022年，8月28日志賀菌屬是人類細(xì)菌性痢疾（菌?。┑牟≡?。本屬細(xì)菌包括志賀痢疾桿菌、福氏痢疾桿菌、鮑氏痢疾桿菌和宋內(nèi)痢疾桿菌4個群。在我國以福氏和宋內(nèi)痢疾桿菌引起的菌痢較為多見。第二十三頁，共四十六頁，2022年，8月28日生物學(xué)性狀

形態(tài)與染色

志賀氏菌屬細(xì)菌的形態(tài)與一般腸道桿菌無明顯區(qū)別，為革蘭氏陰性桿菌，長約2-3μm,寬0.5-0.7μm。不形成芽胞，無莢膜，無鞭毛，不運(yùn)動，有菌毛。第二十四頁，共四十六頁，2022年，8月28日第二十五頁，共四十六頁，2022年，8月28日

志賀氏菌掃描電鏡照片

第二十六頁，共四十六頁，2022年，8月28日培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧。營養(yǎng)要求不高，能在普通培養(yǎng)基上生長，最適溫度為37℃，最適pH為。37℃培養(yǎng)18-24小時后菌落呈圓形、微凸、光滑濕潤、無色、半透明、邊緣整齊，直徑約2nm，宋內(nèi)氏菌菌落一般較大，較不透明，并常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落。在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長，無菌膜形成。麥康凱瓊脂平板，志賀氏菌的菌落為淺粉紅色，半透明。第二十七頁，共四十六頁，2022年，8月28日液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長第二十八頁，共四十六頁，2022年，8月28日第二十九頁，共四十六頁，2022年，8月28日第三十頁，共四十六頁，2022年，8月28日志賀氏菌的生化特性本菌屬都能分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。大多不發(fā)酵乳糖，僅宋內(nèi)氏菌遲緩發(fā)酵乳糖。靛基質(zhì)產(chǎn)生不定甲基紅陽性VP試驗陰性不分解尿素不產(chǎn)生H2S根據(jù)生化反應(yīng)可進(jìn)行初步分類。第三十一頁，共四十六頁，2022年，8月28日志賀氏菌的抗原構(gòu)造與分型抗原結(jié)構(gòu)由菌體抗原（O）、表面抗原（K）及菌毛抗原組成。無鞭毛（H）抗原。主要抗原有三種：型特異性抗原、群特異性抗原、表面抗原（K抗原）。根據(jù)O抗原構(gòu)造的不同，按最新國際分類法，將本屬細(xì)菌分為四個群、39個血清型（包括亞型）。第三十二頁，共四十六頁，2022年，8月28日志賀氏菌的抵抗力對理化因素抵抗力較弱。在外界環(huán)境中的生存力，以宋內(nèi)氏最強(qiáng)，福氏菌次之，志賀氏菌最弱。一般在潮濕土壤中能存活34天，37℃水中存活20天，在糞便內(nèi)（室溫）存活11天。日光直接照射30分鐘，56-60℃10分即被殺死，對酸、高溫和化學(xué)消毒劑很敏感，1%石炭酸中15-30分鐘即被殺死。對氯霉素、磺胺類、鏈霉素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。第三十三頁，共四十六頁，2022年，8月28日志賀氏菌的變異性S-R型變異：菌落可由光滑型變?yōu)榇植谛停瑫r常伴有生化反應(yīng)、抗原構(gòu)造和致病性的變異。耐藥性變異：自從廣泛使用抗菌素以來，志賀氏菌的耐藥菌株不斷增加，給防治工作帶來許多困難。國內(nèi)部分地區(qū)報道（1972-1974），志賀氏菌對四環(huán)素的耐藥率達(dá)74%、氯霉素73.6-97%、鏈霉素84-98%、合霉素75-100%、磺胺類97-100%，可見國內(nèi)對常用幾種抗菌素的耐藥率相當(dāng)高。毒力變異：依鏈Sd株，口服預(yù)防痢疾。Sd株是一株必須有鏈霉素存在下才能生長的菌株，其毒力減弱但仍保持免疫原性。第三十四頁，共四十六頁，2022年，8月28日志賀氏菌的流行病學(xué)人和靈長類是志賀氏菌的適宜宿主，營養(yǎng)不良的幼兒、老人及免疫缺陷者更為易感。志賀氏菌病常為食物爆發(fā)型或經(jīng)水傳播。和志賀氏菌病相關(guān)的食品包括色拉（土豆、金槍魚、蝦、通心粉、雞），生的蔬菜，奶和奶制品，禽，水果，面包制品，漢堡包，和有鰭魚類。志賀氏菌在擁擠和不衛(wèi)生條件下能迅速傳播，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)于人員大量集中的地方如餐廳、食堂。食源性志賀氏菌流行的最主要原因是從事食品加工行業(yè)人員患菌痢或帶菌者污染食品，食品接觸人員個人衛(wèi)生差，存放已污染的食品溫度不適當(dāng)?shù)取?/p>

第三十五頁，共四十六頁，2022年，8月28日志賀氏菌的致病性

志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾，主要通過消化道途徑傳播。根據(jù)宿主的健康狀況和年齡，只需少量病菌（至少為10個細(xì)胞）進(jìn)入，就有可能致病。致病因素：志賀氏菌的致病作用，主要是侵襲力、菌體內(nèi)毒素、個別菌株能產(chǎn)生外毒素。第三十六頁，共四十六頁，2022年，8月28日志賀氏菌的致病因素

侵襲力志賀氏菌進(jìn)入大腸后，由于菌毛的作用粘附于大腸粘膜的上皮細(xì)胞上，繼而進(jìn)入上皮細(xì)胞并在內(nèi)繁殖，擴(kuò)散至鄰近細(xì)胞及上皮下層。目前認(rèn)為不論是產(chǎn)生外毒素的還是只有內(nèi)毒素的志賀氏菌，必須侵入腸壁才能致病。因此，對粘膜組織的侵襲力是決定致病力的主要因素。第三十七頁，共四十六頁，2022年，8月28日內(nèi)毒素志賀氏菌屬中各菌株都有強(qiáng)烈的內(nèi)毒素。內(nèi)毒素作用于腸壁，使通透性增高，從而促進(jìn)毒素的吸收。內(nèi)毒素繼而作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)，引起臨床上一系列毒血癥癥狀，如發(fā)熱、神志障礙，甚至中毒性休克。內(nèi)毒素破壞粘膜，形成炎癥、潰瘍，呈現(xiàn)典型的痢疾膿血便。內(nèi)毒素作用于腸壁植物神經(jīng)，使腸道功能紊亂，腸蠕動共濟(jì)失調(diào)和痙攣，尤其直腸括約肌最明顯，因而發(fā)生腹痛、里急后重等癥狀。第三十八頁，共四十六頁，2022年，8月28日外毒素（志賀毒素）志賀菌1型及部分2型菌株能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素。為蛋白質(zhì)，不耐熱，75-80℃1小時即可破壞。有細(xì)胞毒素，腸毒素和神經(jīng)毒素三種活性?？墒鼓c粘膜通透性增加，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損害，作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起神經(jīng)麻痹等癥狀。經(jīng)甲醛處理可脫毒成類毒素，能刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素。具有外毒素的志賀菌引起的菌痢疾比較嚴(yán)重。第三十九頁，共四十六頁，2022年，8月28日所致疾病志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾是最常見的消化道傳染病，夏秋季多見。僅人和靈長類動物對志賀菌屬易感。傳染源是患者和帶菌者。經(jīng)口感染，潛伏期為數(shù)小時至7d。第四十頁，共四十六頁，2022年，8月28日志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾分類

細(xì)菌性痢疾可分為三種類型

A、急性細(xì)菌性痢疾B、慢性細(xì)菌性痢疾C、中毒性菌痢第四十一頁，共四十六頁，2022年