超高壓水射流對五味子中五味子醇甲含量影響的研究

1、超高壓水射流對五味子中五味子醇甲含量影響的研究【摘要】目的研究超高壓水射流對五味子提取液中五味子醇甲含量的影響。方法通過150350Pa的超高壓水射流處理五味子水提醇沉液，采用薄層色譜法定性鑒別和高效液相色譜法定量測定五味子提取液中五味子醇甲的含量。結(jié)果不同超高壓水射流處理五味子提取液后，五味子的薄層圖譜中斑點個數(shù)、大小及Rf值無顯著差異；高效液相色譜中峰個數(shù)及形狀亦無明顯差異，且經(jīng)超高壓150350Pa水射流處理后，五味子中五味子醇甲的含量較五味子原液均有不同程度的升高，250Pa壓力處理后含量升高最多，更高的壓力使五味子醇甲開場有下降的趨勢。結(jié)論該研究可為超高壓水射流對中藥有效成分的影響提

2、供根據(jù)，為五味子藥材的藥品、食品及保健品的開發(fā)研究進展有益的探究?！娟P(guān)鍵詞】超高壓水射流；高效液相色譜法；薄層色譜法；五味子；五味子醇甲五味子為木蘭科植物五味子Shisandrahinesis(Turz.)Baill.的枯燥成熟果實，主產(chǎn)于我國東北地區(qū)，故習稱“北五味子。五味子具有收斂固澀、益氣生津、補腎寧心之成效，臨床上常用于久嗽虛喘，夢遺滑精，短氣脈虛，內(nèi)熱消渴，心悸失眠等1，?神農(nóng)本草經(jīng)?將其列為上品。五味子的化學成分主要有木脂素、揮發(fā)油、有機酸、萜類及多糖等多種化學成分2，木脂素是其重要的有效成分，具有保肝護肝、對中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用及抗氧化等作用3。五味子醇甲是五味子中木脂素類的主要成分

3、之一，具有良好的水溶性，為五味子注射劑等制劑中的主要活性成分。藥理學研究說明，五味子醇甲有明顯的安定、鎮(zhèn)靜及抗驚活性，且對大腦皮層的興奮抑制過程有調(diào)節(jié)作用。超高壓技術(shù)及超高壓水射流技術(shù)都是近幾十年開展起來的新興技術(shù)，在食品加工及醫(yī)藥滅菌領(lǐng)域現(xiàn)已獲得初步成效，超高壓技術(shù)已用于五味子飲料的消費加工，不僅確保了質(zhì)量，同時還進步了消費效率，減少了設備投資4。為促進超高壓水射流技術(shù)在飲料及醫(yī)藥行業(yè)中的應用，本文討論了經(jīng)超高壓水射流處理后五味子水提液中五味子醇甲的含量變化情況，以期為進一步進展超高壓水射流提取和超高壓水射流滅菌等研究提供根底實驗數(shù)據(jù)，并進展有益的探究。1儀器與材料L-20AT高效液相色譜儀

4、，包括L-20AT泵、SPD-20A紫外檢測器、AT-330柱溫箱、lass-VP數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)、7725i進樣閥日本島津公司；DPSB-3040型超高壓水射流系統(tǒng)南京大地水刀股份。五味子藥材購自于四川省峨眉山市藥材公司，經(jīng)本院王盛民教授鑒定為木蘭科植物五味子Shisandrahinensis(Turz.Baill.的枯燥成熟果實；五味子醇甲對照品購自中國藥品生物制品檢定所，批號：110857-202206；乙腈為HPL級美國Fisher公司；所用水為超純水；其余試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1供試品溶液的制備取五味子果實，洗凈烘干后，粉碎成粗粉，稱取本品約300g，精細稱定，10倍量水煎煮2

5、次，1.5h/次，合并提取液，靜置、離心，抽濾后定容至7000l。量取五味子水提取液5000l，用超純水稀釋至15L，分別在150，200，250，300和350Pa壓力條件下，經(jīng)超高壓水射流處理，將各溶液搖勻、靜置，分別取未經(jīng)處理和各處理液的上清液過0.45微孔濾膜，分別標號為0，1，2，3，4，5號，作為供試品溶液。2.2對照品溶液的制備精細稱取在40枯燥24h的五味子醇甲對照品7.5g，置50l容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即制成每毫升含五味子醇甲0.150g的對照品溶液。2.3五味子的薄層色譜鑒別照薄層色譜法試驗，吸勸2.1和“2.2項制備的供試品溶液和對照品溶液各10l，分

6、別點于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚3060-甲酸乙酯-甲酸1551的上層溶液為展開劑，展開，取出晾干，置紫外燈254n下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點。斑點較為圓整，別離效果好，各供試品斑點大小及Rf值無顯著差異。2.5線性關(guān)系考察分別精細吸勸2.2項下制備的五味子醇甲對照品溶液2，4，6，8，10l進樣測定，記錄各樣品峰面積。以五味子醇甲進樣量g為橫坐標X，峰面積為縱坐標Y，得回歸方程Y=610331.2X-13975.2，r=0.9998n=5。結(jié)果說明在0.3001.500g范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.6精細度實驗精細汲

7、取五味子醇甲對照品溶液10l，重復進樣5次，測定峰面積，得RSD為1.35%。2.7穩(wěn)定性實驗勸2.1項未經(jīng)超高壓水射流處理的供試品溶液，同法分別于2，4，6，8，24h測定，進樣10l/次，結(jié)果RSD為1.17%，說明樣品在24h內(nèi)穩(wěn)定。2.8重復性實驗取同一批樣品粉末，按樣品含量測定法同法測定5次，RSD為2.13%，說明該測定方法重復性比擬好。2.9加樣回收實驗采用加樣回收法，稱取含量的五味子藥材5份，精細稱定，再分別精細參加五味子醇甲對照品溶液0.15gl-120l，按“2.1項下方法制備供試品溶液，在上述色譜條件下進樣10l，記錄色譜圖，結(jié)果五味子醇甲平均回收率為95.8%，RSD為

8、1.01%n=5。見表1。表1五味子醇甲回收率實驗結(jié)果略2.10樣品的測定精細吸勸2.1項和“2.2項下制備的供試品溶液和對照品溶液各10l分別進樣5次，按上述色譜條件測定五味子醇甲含量。結(jié)果見表2。表2樣品測定結(jié)果略3討論五味子是著名的滋補性中藥，進入21世紀后，我國已把五味子列入保健食品原料5。隨著功能性食品在國際上掀起熱潮，已經(jīng)開發(fā)出多種關(guān)于五味子的功能性食品，可見五味子的食用和保健價值正逐步為人們所重視，對其進展研究開發(fā)也越來越深化。本實驗對五味子提取液進展超高壓水射流處理，對深化研究其主要有效成分的構(gòu)造、合成及活性，說明五味子在傳統(tǒng)中醫(yī)應用中的成效具有重要的意義。木脂素(ligaan

9、)類化合物具有聯(lián)苯環(huán)辛二烯構(gòu)造(dibenza,yl-tadiene),其化學構(gòu)造式及五味子醇甲的化學構(gòu)造式見圖2。本實驗的結(jié)果說明，在研究的150350Pa超高壓力范圍內(nèi)，經(jīng)超高壓水射流處理后，五味子中主要有效成分五味子醇甲的含量均有不同程度的升高，在150250Pa范圍內(nèi)，隨著處理壓力的升高，五味子醇甲的含量隨之增加，最高較原液增加了11.45%；但處理壓力到達250Pa以上時，隨著壓力的升高，五味子醇甲的含量反而呈下降趨勢。經(jīng)過超高壓水射流處理后，五味子醇甲含量升高的原因可能是經(jīng)過超高壓力和水射流作用后，破壞了與五味子醇甲相結(jié)合的非共價鍵，使五味子醇甲可以游離出來；同時高壓條件可抑制五味

10、子醇甲類似物的分解酶活性，激活局部合成酶，促進二芳基經(jīng)自由陽離子中間體氧化偶合而形成木脂素骨架，因此增加了處理液中五味子醇甲的含量。但是由于在250Pa以上過高的壓力作用下，形成五味子木脂素骨架比擬困難，同時高壓高速的水射流撞擊容器產(chǎn)生的溫度升高分解和破壞了五味子醇甲的構(gòu)造，壓力越高，其破壞程度就越高，因此其含量隨著壓力的升高反而呈下降的趨勢。通過對單一成分含量的測定，來考察超高壓水射流加工處理中藥液體制劑方法的可行性，雖不能對五味子藥材質(zhì)量有完好和科學的評價，但可以從某一方面為指導消費提供科學參考?！緟⒖嘉墨I】1李萍，趙守訓，李昌齊，等.生藥學.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2022:227.2鄭占虎，董澤宏，佘靖，等.中藥現(xiàn)代研究與臨床應用，第1卷.北京:學苑出版社，1997：148.3Hankejl,BurgsRA,AhuadaF.Shisandrahinensis(TurzBail)J.Fitterapia，1999，70(5):451.4劉長嬌，張守勤，吳華，等.超高壓技術(shù)在五味子飲料加工中的應用J.農(nóng)業(yè)工程學報，2022，22(6):227.5TianhuiHuang,PingniangShen,YngjiaShen.Prepar