培養(yǎng)基的制備

1、實(shí)驗(yàn)二、培養(yǎng)基的制備實(shí)驗(yàn)二、培養(yǎng)基的制備一、實(shí)驗(yàn)原理：一、實(shí)驗(yàn)原理： 培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)、繁殖和代謝的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)、繁殖和代謝的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 適宜的適宜的pH值、一定的緩沖能力及合適的滲透壓值、一定的緩沖能力及合適的滲透壓 半固體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基中加入半固體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基中加入0.5-1%瓊脂瓊脂 固體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基中加入固體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基中加入1-2%瓊脂瓊脂 瓊脂是從石花菜等海藻中提取的多糖，是應(yīng)用最廣泛的凝固瓊脂是從石花菜等海藻中提取的多糖，是應(yīng)用最廣泛的凝固劑，它在劑，它在96-100融化，融化，46以下凝固以下凝固 培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后方可使用培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后方可

2、使用 根據(jù)培養(yǎng)基的用途：可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒根據(jù)培養(yǎng)基的用途：可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等別培養(yǎng)基等 選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或抑制不需選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或抑制不需要的菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，如結(jié)晶紫能抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌要的菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，如結(jié)晶紫能抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng)等的生長(zhǎng)等 增殖培養(yǎng)基：在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜增殖培養(yǎng)基：在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以增加這種微生物的繁殖速度，逐漸淘汰歡的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以增加這種微生物的繁殖速度，逐漸淘汰其它微生物，這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基其它微生物，這種培

3、養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基 鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使難鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別，因而有助開快以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別，因而有助開快速鑒別某種微生物。如常用的麥康凱培養(yǎng)基，它含有膽鹽、速鑒別某種微生物。如常用的麥康凱培養(yǎng)基，它含有膽鹽、乳糖和中性紅。膽鹽具有抑制腸道菌以外的細(xì)菌的作用乳糖和中性紅。膽鹽具有抑制腸道菌以外的細(xì)菌的作用（選擇性），乳糖和中性紅（指示劑）能幫助區(qū)別乳糖發(fā)（選擇性），乳糖和中性紅（指示劑）能幫助區(qū)別乳糖發(fā)酵腸道菌（如大腸桿菌）和不能發(fā)酵乳糖的腸道致病菌酵腸道菌（如大腸桿菌）和不能發(fā)酵

4、乳糖的腸道致病菌（如沙門氏菌和志賀氏菌）（如沙門氏菌和志賀氏菌） 固體培養(yǎng)基：分離、純化、生物活性檢測(cè)固體培養(yǎng)基：分離、純化、生物活性檢測(cè) 半固體培養(yǎng)基：可作穿刺試驗(yàn)，觀察細(xì)菌半固體培養(yǎng)基：可作穿刺試驗(yàn)，觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)及短期的保存菌種的運(yùn)動(dòng)及短期的保存菌種 液體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基：確定細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線確定細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線、保存、保存菌種菌種二、目的要求二、目的要求1、掌握基礎(chǔ)培養(yǎng)基制備的原理和要求、掌握基礎(chǔ)培養(yǎng)基制備的原理和要求2、掌握一般培養(yǎng)基的制備過程及、掌握一般培養(yǎng)基的制備過程及pH的測(cè)定的測(cè)定三、培養(yǎng)基制作的注意事項(xiàng)三、培養(yǎng)基制作的注意事項(xiàng)容器不含抑菌物容器不含抑菌物合適的合適的pH值（值

5、（7.2-7.6）藥匙不要混用，如需要反復(fù)使用時(shí)應(yīng)擦拭后再使用藥匙不要混用，如需要反復(fù)使用時(shí)應(yīng)擦拭后再使用制好后需高壓滅菌，制好后需高壓滅菌，如因特殊情況不能及時(shí)滅菌應(yīng)放冰箱內(nèi)暫存如因特殊情況不能及時(shí)滅菌應(yīng)放冰箱內(nèi)暫存不同培養(yǎng)基各有配制特點(diǎn)：如加入抗生素、血清等應(yīng)注意溫度不不同培養(yǎng)基各有配制特點(diǎn)：如加入抗生素、血清等應(yīng)注意溫度不能太高能太高無菌檢查：隨機(jī)挑選制備好的培養(yǎng)基一兩份置無菌檢查：隨機(jī)挑選制備好的培養(yǎng)基一兩份置37恒溫箱內(nèi)恒溫箱內(nèi)24h四、培養(yǎng)基制備的一般過程稱取稱取溶解溶解調(diào)調(diào)pH定容至定容至1000ml過濾過濾分裝分裝滅菌滅菌菌菌檢檢稱?。号Ｈ飧嗫梢栽跓戏Q量，隨后放入熱水中；蛋

6、白胨極稱?。号Ｈ飧嗫梢栽跓戏Q量，隨后放入熱水中；蛋白胨極易吸潮，稱量時(shí)要迅速易吸潮，稱量時(shí)要迅速溶解：向燒杯中加入少許所需水量，隔以石棉網(wǎng)小心加熱，用溶解：向燒杯中加入少許所需水量，隔以石棉網(wǎng)小心加熱，用玻璃棒攪拌玻璃棒攪拌調(diào)調(diào)pH：待培養(yǎng)基冷至室溫時(shí)檢測(cè)其：待培養(yǎng)基冷至室溫時(shí)檢測(cè)其pH值值基礎(chǔ)培養(yǎng)基制備1、配方：、配方：牛肉膏牛肉膏5克克蛋白胨蛋白胨10克克NaCl5克克磷酸氫二鉀磷酸氫二鉀1克克用蒸餾水定容到用蒸餾水定容到1000ml2、按量稱取、按量稱取溶解溶解調(diào)調(diào)pH過濾過濾分裝分裝10根試管根試管滅菌滅菌菌檢菌檢瓊脂培養(yǎng)基的制備測(cè)好測(cè)好PH后，稱量后，稱量7.5g瓊脂粉，用肉湯定容至瓊脂粉，用肉湯定容至500ml，加熱，待瓊脂完全溶解后分裝，加熱