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文檔簡介

1、食用菌培訓學校支招菌種的保存方法沙土管法將沙或土過篩烘干裝管滅菌然後將菌種制成孢子懸液滴入其中混勻放到盛氯化鈣的干燥器里吸除水分干燥後保存或用火焰封管後保存。吸附在干燥沙土上的孢子因缺水而處于休眠狀態(tài)可保存較長時期。此法適用于芽孢桿菌梭狀芽孢桿菌放線菌鐮刀菌等。 甘油管好弄,你首先用水把孢子收集起來弄成孢子懸液,然后用孢子濾器過濾一下之后,離心收集孢子,用20%的甘油(甘油的濃度好像不同實驗室方法還不太一樣,有的用的是30%)重懸,然后就可以放-80度保存了 甘油保存法:把菌孢子用少量無菌水收集到小試管中,加入滅菌甘油,使管中甘油濃度大于70%,搖勻,存入冰箱, 一般我在保存放線菌時,也是保存

2、放線菌孢子的。先是制備孢子懸液,離心收集孢子,20%甘油懸浮,分裝保種管,-80冰箱保存。不過沒有長時間(1y)來驗證好壞,但我覺得放線菌活力還好,也沒有什么污染,關(guān)鍵是很方便操作。 放線菌的菌落放線菌的菌落放線菌的菌落放線菌的菌落 放線菌在固體培養(yǎng)基上形成與細菌不同的菌落特征,放線菌菌絲相互交錯纏繞形成質(zhì)地致密的小菌落,干燥、不透明、難以挑取,當大量孢子覆蓋于菌落表面時,就形成表面為粉末狀或顆粒狀的典型放線菌菌落,由于基內(nèi)菌絲和孢子常有顏色,使得菌落的正反面呈現(xiàn)出不同的色澤。細菌保存:液體培養(yǎng),至OD0.1,再與50%的甘油等體積混合,甘油要兩次滅菌菌種保存原理:菌種凍存與復蘇原則是:慢凍速

3、融。即凍存時要先-20,在凍存-80。而復蘇時直接將凍存的丟37快速融化。斜面保存發(fā):適用于細菌、放線菌、酵母、絲狀真菌短期保藏。霉菌、放線菌及有芽孢的細菌保存24個月,移種一次。酵母菌兩個月,細菌*每月移種一次。放線菌:(甘油濃度40%-60%)1、將純甘油先干熱160過夜12h 2、再將純甘油濕熱滅菌 3、將滅倆次菌的純甘油與滅菌的無菌水等體積混合至濃度為50%,并再次滅菌4、將滅菌的50%甘油分裝進小紅帽(1-2ml)5、將長滿孢子的放線菌直接刮取放入小紅帽6、先-20,在凍存-80細菌:1、將純甘油先干熱160過夜12h 2、再將純甘油濕熱滅菌 3、將滅倆次菌的純甘油與滅菌的無菌水等體積混合至濃度為50%,并再次滅菌4、將滅菌的50%甘油分裝進小紅帽(1-2ml)5、取細菌液體培養(yǎng)(至OD0.

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