臨床分子診斷學(xué)習(xí)題匯總

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上第一章 緒論一、名詞解釋1.臨床分子診斷學(xué) 二、問答題：1用于臨床分子診斷的主流技術(shù)包括哪幾種？3第一個實踐分子診斷的人類單基因遺傳病是什么？4哪3種分子生物學(xué)方法構(gòu)成了整個現(xiàn)代分子生物學(xué)的實驗基礎(chǔ)？第二章 基因組及蛋白質(zhì)組一、名詞解釋：1. Gene 2.Genome 3.operon 4.質(zhì)粒的不相容性 5. overlapping gene 6. segmented genome 7. 反向重復(fù)序列 8. 衛(wèi)星DNA 9.multigene family 10.RFLP 11.SNP 12. Genomics 13.nucleoid 14.proteome 15

2、.proteomics 16.雙向凝膠電泳技術(shù)（2-DE） 17. Pseudo gene 18. 基因多態(tài)性二、問答題：1. 簡述原核生物基因組特征。2. 簡述質(zhì)粒的分類。（按功能、復(fù)制機(jī)制、轉(zhuǎn)移方式）3. 簡述病毒基因組特征。4. 簡述真核生物核基因組的特征？5. 真核生物基因組重復(fù)序列主要包括哪幾類？6. 中度重復(fù)序列可分為哪兩個類型？7. 真核生物的細(xì)胞器基因組具有哪些特點(diǎn)？6. 真核生物基因組中基因多態(tài)性的表述常采用哪兩種方式？7. RFLP分為哪兩種類型？8. 簡述IPG-IEF的基本原理9. 簡述蛋白質(zhì)經(jīng)2-DE分離后，凝膠上的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)常見的幾種染色方法。10.簡述質(zhì)譜分析法的

3、過程。11.簡述生物質(zhì)譜的組成部件有哪些？最重要的兩個部件是什么？并寫出這兩個部件的主要作用是什么？12.生物質(zhì)譜中常使用的離子源有哪幾種？13.簡述生物質(zhì)譜中使用的質(zhì)量分析器的類型？14.簡述酵母雙雜交技術(shù)的基本原理。15.定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)有哪些？第四章 核酸與蛋白質(zhì)的分離與純化一、名詞解釋：生物大分子（biomacromolecule）二、問答題：1、臨床診斷常見的標(biāo)本包括哪些？應(yīng)從哪幾方面進(jìn)行考慮來選擇適宜的分離和純化核酸的方法？2.分離與純化核酸的技術(shù)很多，各具特點(diǎn)及適用范圍，但不論采取何種方法，均應(yīng)遵循總的原則，其內(nèi)容是什么？3.在核酸的分離與純化過程中，應(yīng)該清除的雜質(zhì)主要包括哪三

4、部分？4.濃縮核酸最常用且高效的方法是什么？其優(yōu)點(diǎn)是什么？5.核酸的有機(jī)溶劑沉淀法的原理是什么？6.紫外分光光度法測定核酸濃度的原理是什么？具體的換算關(guān)系是什么？靈敏度是多少？7.紫外分光光度法測定核酸濃度的原理是什么？8.采用紫外分光光度法如何對核酸制品的純度進(jìn)行鑒定？11.如何采用瓊脂糖凝膠法對核酸的完整性進(jìn)行鑒定？12.酚抽提法提取哺乳動物細(xì)胞基因組DNA所需試劑及過程是怎樣的？13.酚抽提法涉及到的主要試劑有哪些？它們的作用是什么？14.純化與回收所需要的DNA片段需要注意的原則是什么？15.從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的方法主要有哪些？16.從聚丙烯酰胺凝膠中回收DNA片段的標(biāo)準(zhǔn)方法

5、是怎樣的？17.質(zhì)粒DNA的提取與純化的經(jīng)典方法包括哪些？這些方法主要包括哪三個步驟？18.純化質(zhì)粒DNA的方法很多，效果好且適用范圍廣的方法主要包括哪些？19.RNA分離與純化需要注意哪些？20.酸性異硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分離總RNA的過程是怎么樣的？21.mRNA分離純化的方法有哪些？22.蛋白質(zhì)分離與純化的主要依據(jù)和方法有哪些。（71頁表4-2）23.蛋白質(zhì)精制純化的方法有哪些？第五章核酸擴(kuò)增技術(shù)英譯漢：polymerase chain reaction (PCR)denaturationannealingextentionprimerestriction fragment leng

6、th polymorphism(RFLP)reverse transcription PCR(RT-PCR)real-time fluorescent quantitative PCR (RFQ-PCR)Multiplex PCR1.PCR是由美國哪位科學(xué)家于1985年創(chuàng)立，并為此榮獲哪個年度諾貝爾化學(xué)獎？2.簡述PCR技術(shù)的基本原理。3.PCR反應(yīng)體系的基本要素有哪些？分別具有哪些特點(diǎn)和作用？4.PCR反應(yīng)的特異性主要由哪一個要素決定？5.引物在PCR反應(yīng)中的三大作用是什么？6.簡述引物設(shè)計原則。7.簡述PCR反應(yīng)條件設(shè)定原則（循環(huán)參數(shù)設(shè)定）。8.依據(jù)PCR反應(yīng)動力學(xué)，如何計算PCR產(chǎn)物的量

7、？（公式）9.提高PCR反應(yīng)特異性的方法有哪些？10.PCR產(chǎn)物的檢測方法有哪些？其中最常用的是哪一種？最可靠的是哪一種？11.什么是逆轉(zhuǎn)錄PCR？12.RT-PCR常用的逆轉(zhuǎn)錄酶和逆轉(zhuǎn)錄引物有哪些？13.什么是實時熒光定量PCR？其具備哪些特點(diǎn)？14.實時熒光定量PCR的定量檢測方法分為哪兩大類？15.實時定量PCR技術(shù)的特異性熒光探針主要包括哪幾種？16.何謂分子信標(biāo)？簡述Taqman探針技術(shù)和分子信標(biāo)技術(shù)的基本原理。17.何謂熒光閾值和Ct值？18.影響熒光定量PCR的主要因素有哪些？19.熒光定量PCR主要應(yīng)用于哪些方面？20.PCR標(biāo)準(zhǔn)化操作程序包括哪幾個方面？21.何謂PCR？22

8、.常用熱啟動PCR方法有哪些？23.臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室原則上分為幾個區(qū)？各個區(qū)進(jìn)行的主要操作是什么？24.如何進(jìn)行標(biāo)本的穩(wěn)定化處理？第六章 核酸分子雜交英譯漢：nucleic acid hybridizationnucleic acid probehyperchromic effectmelting temperature (Tm)denaturation annealingfluorescence in situ hybridization(FISH)問答題：1. 何謂核酸分子雜交？2. DNA 的Tm大小與哪些因素有關(guān)？3. 核酸變性因素有哪些？何謂增色效應(yīng)？4. 影響DNA復(fù)性速度的

9、因素有哪些？5. 核酸分子雜交的影響因素有哪些？洗滌條件遵循的原則是什么？6. 常用的固相支持介質(zhì)有哪些？分別具有哪些特點(diǎn)？7. 常用的轉(zhuǎn)膜方法有哪些？各有何優(yōu)缺點(diǎn)？8. 何謂Southern印跡雜交？簡述Southern印跡雜交的基本過程。9. 何謂預(yù)雜交？其目的是什么？常用封閉物有哪幾類？10. 何謂Northern印跡雜交？Northern印跡雜交與Southern印跡有哪些不同點(diǎn)？11. 何謂斑點(diǎn)雜交？與傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比有何優(yōu)缺點(diǎn)？主要應(yīng)用在哪些方面？12. 何謂菌落雜交？主要應(yīng)用在哪些方面？13. 何謂原位雜交？主要應(yīng)用在哪些方面？其基本步驟是什么？14. 何謂核酸探針？根據(jù)性質(zhì)和來

10、源不同，可分為哪幾大類？15. 簡述寡核苷酸探針的設(shè)計原則。16. 理想的探針標(biāo)記物應(yīng)具有哪些特征？核酸探針標(biāo)記物分為哪兩類？17. 核酸探針非放射性標(biāo)記物分為哪幾類（舉例）？各有何特點(diǎn)？18. 常用核酸探針標(biāo)記方法有哪些？19. 簡述切口平移法的基本過程及注意事項。20. 簡述隨機(jī)引物法的基本過程及注意事項。21. 如何對核酸探針3端或5端標(biāo)記？22. 核酸探針的純化方法主要有哪些？23. 何謂熒光原位雜交？具有什么特點(diǎn)？主要應(yīng)用于哪些方面？24. 核酸分子雜交按其反應(yīng)介質(zhì)不同可分哪兩類？25. 常用的固相雜交類型有哪些？檢測目的分別是什么？26. 放射性核素探針的檢測方式是什么？27. 非

11、放射性探針檢測步驟是什么？28. FISH探針的種類有哪些？29. FISH基本過程是什么？第7章 生物芯片技術(shù)BiochipDNA chipProtein chipLab-on-a-chipDifferential methylation hybridization, DMHMethylation specific oligonucleotide, MSO1. 何謂生物芯片？其特點(diǎn)包括哪些？生物芯片是如何分類的？2. 何謂DNA芯片？其主要步驟包括哪些？3. 基因芯片的制備方法包括哪兩類？原位合成又包括哪幾種合成方法？4. 直接點(diǎn)樣芯片合成包括哪幾個步驟？探針設(shè)計包括兩類，對照組又包括哪3種

12、，各有何特點(diǎn)？5. 常用的載片分為哪兩類？舉例。理想載片應(yīng)符合哪些條件？6. 樣品制備過程包括哪三個步驟？常用的標(biāo)記物有哪些？7. 如何優(yōu)化雜交反應(yīng)條件？8. 常用的DNA芯片有哪些？SNP檢測芯片探針的設(shè)計采用何種方法？9. 簡述表達(dá)譜芯片探針的設(shè)計原則？簡述表達(dá)譜芯片的臨床應(yīng)用。10. 甲基化芯片探針合成的方法有哪些？11. 簡述DMH芯片和MSO芯片的技術(shù)原理。12. 何謂miRNA？miRNA芯片技術(shù)主要包括哪兩種技術(shù)？RAKE探針設(shè)計原則？13. 何謂蛋白質(zhì)芯片？是如何分類的？14. 簡述蛋白質(zhì)芯片的應(yīng)用？15. 何謂芯片實驗室？有哪些應(yīng)用？16. 簡述DMH芯片的局限性。第8章 核

13、酸測序技術(shù)Pyrosequencingsequencing by hybridization,SBHSingle-molecule real-time sequencing 1.簡述三代測序技術(shù)。2.何謂雙脫氧鏈末端終止法？3.何謂化學(xué)降解法？4.簡述焦磷酸測序技術(shù)原理。5.三種第二代測序技術(shù)都采用合成測序法，分別是由哪些公司發(fā)明的？ 采用哪些PCR技術(shù)擴(kuò)增？6.454測序技術(shù)依據(jù)的測序原理是什么？其優(yōu)缺點(diǎn)有哪些？7.Solexa測序技術(shù)優(yōu)缺點(diǎn)有哪些?8.SOLiD測序技術(shù)有哪些獨(dú)特之處？有何優(yōu)缺點(diǎn)？9.第三代測序技術(shù)的共同點(diǎn)是什么？分別利用何種信號測序？各有何優(yōu)缺點(diǎn)？第九章分子克隆Molec

14、ular cloning Restriction endonuclease VectorYAC (yeast artificial chromosome)isoschizomerisocaudarnercloning vectorexpression vector MCS(multiple cloning site)MCS1.什么是分子克隆？2.分子克隆的基本步驟是什么？3.分子克隆技術(shù)中常用的工具酶有哪些？4.限制性核酸內(nèi)切酶主要有幾類？區(qū)別是什么？其中哪一類是分子克隆中最常使用的，它的作用是什么？5.什么是回文結(jié)構(gòu)？6.II型限制性核酸內(nèi)切酶切割DN

15、A分子可產(chǎn)生哪兩類切口？7.什么是同裂酶或同工異源酶？8.什么是同尾酶？9.什么是星號活力？10.DNA連接酶的作用是什么？主要有哪兩種？11.實驗室常用的堿性磷酸酶有哪些？其主要用途包括？12.DNA 聚合酶、T4DNA聚合酶和TaqDNA聚合酶各有哪幾種酶活性?13.Taq DNA聚合酶具有哪幾種酶的活性？14.逆轉(zhuǎn)錄酶的三個功能是什么？15.作為克隆載體應(yīng)該具備哪些條件？16.什么分子克隆中的藍(lán)白斑實驗？17.舉例說明分子克隆中常用的質(zhì)粒載體及其組成特點(diǎn)。18.常用的噬菌體載體有哪些？酵母人工染色體的組成原件有哪些？19.動物病毒克隆載體包括哪些？20.原核生物的表達(dá)載體應(yīng)該具備哪些條件

16、？常見的啟動子有哪些？真核的呢？常見的真核表達(dá)載體的標(biāo)記基因有哪些？21.將重組DNA導(dǎo)入原核和真核細(xì)胞內(nèi)有哪些方法？它們的原理是什么？22.如何篩選和鑒定分子克隆中的陽性重組體？第十章 感染性疾病的臨床分子診斷Hepatitis B virus，HBVviral loadCovalently closed circular DNA, cccDNAHCV (Hepatitis C virus)HPV (human papilloma virus)Genotypic resistanceVirological breakthroughClinical breakthrough

17、1.乙型肝炎病毒容易發(fā)生突變的原因是什么？目前共分為幾種基因型？2.常用的基因分型的方法有哪些？3.HBV的核酸檢測有哪些方法？各自的優(yōu)缺點(diǎn)是什么？診斷HBV感染最敏感的方法是什么？4.什么是病毒載量？乙肝致病的根本原因是什么？何為反映HBV復(fù)制狀態(tài)及傳染性的最直接和可靠的標(biāo)志？5.HBV耐藥突變的分子機(jī)制是什么？6.HBV耐藥類型發(fā)生的順序為？什么類似物是臨床最常用的抗HBV藥物，其代表是？7.目前臨床上HBV耐藥基因檢測的金標(biāo)準(zhǔn)是什么？發(fā)現(xiàn)和鑒定HBV耐藥的基本方法有哪兩種？解釋之。還有哪些方法可用來檢測突變？8.目前用于HBV表型耐藥分析的系統(tǒng)有哪些？評價病毒復(fù)制力的主要指標(biāo)是什么？常規(guī)

18、用何種方法？9.HCV核酸定性和定量的檢測方法分別有哪些？RT-PCR檢測HCV RNA檢出率的原因有哪些？應(yīng)采取哪些措施規(guī)范化檢測？10.HCV的基因型種類有哪些？基因分型的方法有哪些？11.為什么HCV對直接作用抗病毒藥物會產(chǎn)生耐藥性？12.結(jié)核分枝桿菌的核酸檢測有哪些方法？13.結(jié)核分枝桿菌抵制藥物活性的機(jī)制有哪三種類型？14.結(jié)核分枝桿菌耐多藥的分子機(jī)制是什么？利福平通過作用那個酶抑制基因轉(zhuǎn)錄？異煙肼耐藥與那三個基因突變有關(guān)？那個基因突變是乙胺丁醇產(chǎn)生的主要分子機(jī)制？SM和吡嗪酰胺發(fā)生耐藥的原因？15.結(jié)核分枝桿菌耐藥基因檢測基本分為三個步驟，分別是什么？16.結(jié)核分枝桿菌耐藥基因檢測

19、的方法有哪些？17.衣原體的核酸檢測有哪些方法？18.為什么要對人乳頭瘤病毒進(jìn)行分型檢測？19.HPV分型檢測的試劑分為哪兩類？HPV分型檢測的分子生物學(xué)方法有哪些？第11章 遺傳性疾病的臨床分子診斷proband；thalassemia；hemophilia；mitochrondrial diseasesDuchenne muscular dystrophy, DMDpolygenic inheritanceadditive effectminor genequantitative charactersusceptibilityAssociated Studiesgenome-wide as

20、sociation study，GWAS1. 什么是單基因遺傳病？單基因遺傳病分子診斷遵循的基本流程是什么？什么是先證者？2. 單基因遺傳病致病基因篩查的分子診斷策略有哪些？3. 什么是地中海貧血？最常見的類型有哪些？列舉可以用于地中海貧血分子診斷的技術(shù)有哪些？4. 什么是血友?。垦巡》譃槟膸最?？列舉可以用于血友病A和血友病B的分子診斷的技術(shù)有哪些？5. 什么是多基因遺傳病？概述多基因病的遺傳特點(diǎn)？關(guān)聯(lián)分析的研究設(shè)計主要包括哪三種研究？主要研究哪些內(nèi)容？6. 什么是線粒體疾??？人類線粒體疾病的遺傳規(guī)律有哪些？7. 檢測線粒體突變主要包括哪些內(nèi)容？各采用哪些方法？8. DMD基因缺失型和非缺失型的分子診斷方法有哪些？9. 何謂連鎖分析？10. 圖示病例對照研究的關(guān)聯(lián)分析流程圖。第十二章 腫瘤的臨床分子生物學(xué)檢驗TumorOncogeneProto-oncogeneAnti-oncogeneTumor metastasis genes, TMGGene mutationGenetic polymorphismTelomereCirculating tumor cell,