刺五加對(duì)他克林所致小鼠急性肝組織損傷的保護(hù)作用

1、刺五加對(duì)他克林所致小鼠急性肝組織損傷的保護(hù)作用         【摘要】  探討刺五加對(duì)他克林所致小鼠急性肝組織損傷的保護(hù)作用. 方法 灌胃給予35mg/kg他克林制作小鼠急性肝組織損傷模型，每日分別灌胃給予小鼠不同劑量的刺五加總皂苷及粗多糖，連續(xù)4d，觀察小鼠血清中天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）及腫瘤壞死因子（TNF-）活性的變化. 結(jié)果 不同劑量的刺五加總皂苷及粗多糖均可降低急性肝組織損傷小鼠血清AST，ALT，ALP，TNF-活性，與水飛薊素比較無顯著

2、性差別. 結(jié)論 刺五加對(duì)他克林所致小鼠急性肝組織損傷有一定的保護(hù)作用. 【關(guān)鍵詞】  刺五加屬;他克林;水飛薊素;肝疾病;小鼠刺五加作為藥物已廣泛應(yīng)用于臨床，具有固本強(qiáng)壯之功效.近年來，國內(nèi)外學(xué)者在刺五加的化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用等方面進(jìn)行了較為深入的研究，但關(guān)于刺五加對(duì)肝組織損傷保護(hù)作用的報(bào)道較少見.本文觀察了刺五加對(duì)他克林所致小鼠急性肝組織損傷的保護(hù)作用，旨在為刺五加的應(yīng)用提供更多的依據(jù).   1 材料   1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物  取昆明種小鼠，由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供，體重為2022g，均為雄性.25恒溫環(huán)境飼養(yǎng)，飼以標(biāo)準(zhǔn)

3、飼料.   1.2 藥品與試劑  水飛薊素購自中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為050603;刺五加購自吉林省延吉市新藥大藥房，由延邊大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)教研部劉永鎮(zhèn)教授鑒定為正品;他克林（tacrine）為美國Sigma公司產(chǎn)品;天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、血清堿性磷酸酶（ALP）及腫瘤壞死因子（TNF-）試劑盒均購自南京建成生物工程研究所.   1.3 儀器  SP-4430型全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀為日本Arkray公司產(chǎn)品;BS224型電子天平為北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司產(chǎn)品;95308型全自動(dòng)離心機(jī)為美國

4、Sigma公司產(chǎn)品.   2 方法   1 刺五加粗多糖及總皂苷的制備  取刺五加生藥材適量，加入蒸餾水，于80條件下提取，高濃度乙醇沉淀，沉淀物洗凈得刺五加粗多糖;取刺五加生藥材適量，經(jīng)950mL/L乙醇提取，蒸干，加水溶解，飽和正丁醇萃取，揮干乙醇得刺五加總皂苷 1 .   2 分組及肝組織損傷模型制作  將小鼠按體重分為9個(gè)組，即空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、水飛薊素對(duì)照組、刺五加總皂苷大、中、小劑量組及刺五加粗多糖大、中、小劑量組，每組各為10只.刺五加總皂苷及粗多糖大、中、小劑量組給藥劑量分別為25，15，5m

5、g/L.每日分別灌胃給予各給藥組小鼠20mL/kg相應(yīng)藥物，連續(xù)4d;而空白對(duì)照組及模型對(duì)照組小鼠則每日灌胃給予等體積生理鹽水.末次給藥前禁食16h，末次給藥1h后除空白對(duì)照組小鼠外均灌胃給予35mg/L他克林溶液20mL/kg，24h后脫頸椎處死 2 .   3 小鼠血清的制備  取小鼠頸動(dòng)脈血，靜置15min，以2000r/min離心15min，取血清，置于-20條件下冷凍保存，備用.   4 生物化學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)  應(yīng)用全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀測(cè)定各組小鼠血清中AST，ALT，ALP，TNF-的活性 3 . 2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

6、0; 所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)偏差（x±SD）表示，用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，組間差異比較采用t檢驗(yàn).            3 結(jié)果   1 刺五加總皂苷對(duì)急性肝組織損傷小鼠血清ALT，AST，ALP，TNF-活性的影響  由Table1可見，灌胃給予他克林后，模型對(duì)照組小鼠AST，ALT，ALP，TNF-活性均明顯升高，與空白對(duì)照組比較有顯著性差異（P0.05，P0.01），提示模型制作成功.刺五加總皂苷大、中、小劑量組小鼠血

7、清AST活性均較模型對(duì)照組顯著下降，相比較均有顯著性差異（P0.05，P0.01）.   2 刺五加粗多糖對(duì)急性肝組織損傷小鼠血清ALT，AST，ALP，TNF-的影響  由Table1可見，刺五加粗多糖大、中、小劑量組小鼠血清AST活性較模型對(duì)照組均下降，且刺五加粗多糖大、中劑量組小鼠ALT，ALP活性較模型組明顯下降，相比較均有顯著性差異（P0.05，P0.01）.   Table1 Effects of total saponin（T-sap）and acanthopanax santicosus polysaccharide（略）

8、60;  4 討論   他克林可加速細(xì)胞能量的消耗，引發(fā)線粒體功能障礙，從而抑制肝細(xì)胞線粒體DNA合成，引發(fā)肝細(xì)胞核糖體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能障礙，降低肝細(xì)胞蛋白質(zhì)水平，誘發(fā)肝細(xì)胞壞死 4 .本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，刺五加總皂苷及粗多糖大、中、小劑量組小鼠血清AST，ALT，ALP，TNF-活性均低于模型對(duì)照組，且大劑量組降低效果最為明顯，提示刺五加總皂苷及粗多糖均具有較好的保護(hù)肝組織作用，并呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性. 【參考文獻(xiàn)】  1 曲中原，金哲雄，高文昊，等.刺五加總皂苷提取工藝的研究J. 哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) ，2005，21（1）:14.2 馮有輝，何康，鄒麗宜，等.人參須對(duì)四氯化碳致小鼠肝纖維化的保護(hù)作用J. 中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué) ，2004，9（9）:101