植物細(xì)胞滲透勢(shì)的測(cè)定

1、植物細(xì)胞滲透勢(shì)的測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、觀察植物組織在不同濃度溶液中細(xì)胞質(zhì)壁分離的產(chǎn)生過(guò)程。2、掌握測(cè)定植物組織滲透勢(shì)勢(shì)的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理（一）、滲透勢(shì)是水勢(shì)的組分之一，是指由于細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)顆粒的存在而使水勢(shì)下降的數(shù)值，純水的滲透勢(shì)為零，溶液的滲透勢(shì)為負(fù)值。植物細(xì)胞的滲透勢(shì)是植物的一個(gè)重要生理指標(biāo)，對(duì)于植物的水分代謝、生長(zhǎng)及抗性都具有重要的意義。常用于測(cè)定植物細(xì)胞與組織水勢(shì)的方法有質(zhì)壁分離法、冰點(diǎn)降低法、蒸汽壓降低法等。成熟植物細(xì)胞水勢(shì)的組成：W=Ws+Wp1.3籀質(zhì)勢(shì)/滲透勢(shì)由于溶液中溶質(zhì)顆粒的存在而使水勢(shì)降低的值。純水的溶質(zhì)勢(shì)為0,溶液的滲透勢(shì)可根據(jù)Van'tHoffEquation計(jì)

2、算：¥s=-RTiC2.。p壓力勢(shì)壓力勢(shì)是指外界（如細(xì)胞壁）對(duì)細(xì)胞的壓力而使水勢(shì)增大的值。一般情況下細(xì)胞處于膨脹狀態(tài)，原生質(zhì)體壓迫細(xì)胞壁產(chǎn)生膨壓，而細(xì)胞壁反過(guò)來(lái)反作用于原生質(zhì)體使產(chǎn)生壓力勢(shì)。當(dāng)發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí)，p=0,這時(shí)里=Ws（二）、質(zhì)壁分離法實(shí)驗(yàn)原理：生活細(xì)胞的原生質(zhì)膜是一種選擇透性膜，可以看作是半透膜，它對(duì)于水是全透性的，而對(duì)于一些溶質(zhì)如蔗糖的透性較低。因此當(dāng)把植物組織放在一定濃度的外液中，組織內(nèi)外的水分便可通過(guò)原生質(zhì)膜根據(jù)水勢(shì)梯度的方向而發(fā)生水分的遷移，當(dāng)外液濃度較高時(shí)（高滲溶液），細(xì)胞內(nèi)的水分便向外滲出，引起質(zhì)壁分離；而在外液濃度低時(shí)（低滲溶液），外液中的水則進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。當(dāng)

3、細(xì)胞在一定濃度的外液中剛剛發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí)（初始質(zhì)壁分離,質(zhì)壁分離僅在細(xì)胞角隅處發(fā)生），細(xì)胞的壓力勢(shì)等于零，細(xì)胞的滲透勢(shì)等于細(xì)胞的水勢(shì)，也就等于外液的滲透勢(shì)。該溶液即稱為細(xì)胞或組織的等滲溶液，其濃度稱為等滲濃度。三、實(shí)驗(yàn)器材及試劑1、實(shí)驗(yàn)儀器：顯微鏡，載玻片及蓋玻片，鐐子，刀片2、實(shí)驗(yàn)試劑：1mol/L蔗糖溶液：配成0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60mol/L的蔗糖溶液各2ml3、實(shí)驗(yàn)材料：洋蔥鱗莖四、實(shí)驗(yàn)步驟1、分別配制0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60mol/L的蔗糖溶液各2ml于稱量

4、瓶中，混勻,編號(hào)。2、用鐐子撕取帶有色素的洋蔥鱗莖表皮，分別放入不同濃度蔗糖溶液中(4-5片/瓶)，使其完全浸沒(méi)，約15min。3、自高濃度依次取出洋蔥表皮放在載玻片上，加一滴原容易，加蓋玻片，于低倍顯微鏡下觀察。4、統(tǒng)計(jì)50個(gè)細(xì)胞，如果有50%發(fā)生質(zhì)壁分離，就認(rèn)為從此濃度發(fā)生質(zhì)壁分離。5、 確定一個(gè)引起半數(shù)以上細(xì)胞原生質(zhì)剛剛從細(xì)胞壁角隅上分離的濃度和不引起質(zhì)壁分離的最高濃度，洋蔥鱗莖細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離的等滲濃度即為兩極限濃度的平均值。6、記錄結(jié)果并將結(jié)果代入公式；-小fRTiCI式中：-3S為細(xì)胞滲透勢(shì)；R為氣體常數(shù)=0.083X05L.Pa/mol.K;T為熱力學(xué)溫度，單位K；即273+t，

5、t為實(shí)驗(yàn)溫度，單位是；i為解離系數(shù)，蔗糖為1；C1為等滲溶液的質(zhì)量摩爾濃度，單位是mol/kg。C1=C2X1000/(1000Xp-MBC2)注意C1與C2的轉(zhuǎn)換。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)，最后確定在視野中剛剛找到一半的細(xì)胞原生質(zhì)從細(xì)胞壁的角隅處上分離的濃度為：0.50mol/l。對(duì)其濃度進(jìn)行修正為：質(zhì)量摩爾濃度(mol/kg)C1=C2<1000/(1000X廠MBC2)=(0.475x1000)/(1000x1.0653342.3x0.475)=0.526mol/kg所以，洋蔥莖下表皮的細(xì)胞質(zhì)液的滲透勢(shì)為：¥s=-RtiC=0.083X1X0.526X(273+20)X105=1.28MPa六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析1、本次實(shí)驗(yàn)中，由于撕下的洋蔥下表皮普遍較厚，通常是由幾層疊在一起的，這在一定程度上影響了在顯微鏡下的觀察，特別是確定大約一半的細(xì)胞發(fā)生了質(zhì)壁分離，并很難確定發(fā)生質(zhì)壁分離的程度。2、在撕下的洋蔥下表皮帶有色素的細(xì)胞較少，這在一定程度上對(duì)確定剛好發(fā)生質(zhì)壁分離的濃度也有偏差。3、撕取楊蔥鱗莖表皮較后的原因也與撕取的速度有關(guān)，所以在撕取時(shí)因盡量迅速，且由于浸入溶液的先后不同，導(dǎo)致時(shí)間有所差異。七、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1 蔗糖溶液一定要混合均勻；2 表皮組織必須完全浸沒(méi)