流式細胞儀原理

1、流式細胞儀原理（一）流式細胞儀概念流式細胞術（Flow Cytometry ，FCM）是一種對處在液流中的細胞或其它生物微粒（如細菌）逐個進行多參數的快速定量分析和分選的技術。簡言之，流式細胞儀是測量染色細胞標記物熒光強度的細胞分析儀，是在單個細胞分析和分選基礎上發(fā)展起來的對細胞的物理或化學性質，如大小、內部結構、DNA、RNA、蛋白質、抗原等進行快速測量并可分類收集的高技術，FCM以其快速、靈活、大量、靈敏和定量的特色，廣泛應用于基礎研究和臨床實踐各個方面，包括細胞生物學、腫瘤學、血液學、免疫學、藥理學、遺傳學及臨床檢驗學等，在各學科領域發(fā)揮著重要的作用。（二）流式細胞儀分類FCM儀器分為二

2、大類。一類為臺式機，如B-D公司的FACSCalibur。其特點為：儀器的光路調節(jié)系統(tǒng)固定，自動化程度高，操作簡便，易學易掌握。B-D公司的臨床型流式細胞儀FACScan也是最早獲得美國FDA批準可用于臨床診斷的儀器。FACSCalibur: 世界上唯一的自動化四色臺式分析和分選機。提供自動進樣系統(tǒng)、分選濃縮系統(tǒng)、自動免疫樣本制備儀和DNA樣本制備儀等選配功能。常規(guī)應用包括免疫表型分析、DNA分析、多色分析等，可廣泛應用于臨床和科研。另一類為大型機，如B-D公司的FACS Vantage SE其特點為可快速將所感興趣的細胞分選出來，并且可將單個或指定個數的細胞分選到特定的培養(yǎng)孔或板上，同時可選

3、配多種波長和類型的激光器，適用于更廣泛更靈活的科學研究應用。FACSVantage：具有最佳分析靈活性和高速度分選功能，可通過Autosort進行自動化分選。除常規(guī)應用外，還可進行高分辨率的染色體分析。第一部分 流式細胞儀工作原理（一）原理待測樣本的細胞懸液，在鞘液的包圍和約束下，細胞排成單列高速由流動室噴嘴噴出，形成細胞液柱。當液柱通過檢測區(qū)，在入射的激光束照射下產生前向散射光（FSC）和側向散射光（SSC），它們分別反映細胞大小和顆粒度，根據這些特性可以將細胞分類。經一種或幾種特殊熒光標記的樣本，在激光束的激發(fā)下所產生的特定熒光，可被光學系統(tǒng)檢測并輸送到計算機進行分析，得到細胞相應的各種特

4、性。（二）流式細胞儀檢測的細胞特性細胞結構組成細胞功能大小細胞表面、胞漿、核特異性抗原粒度細胞活性DNA、RNA含量胞內細胞因子蛋白質含量激素結合位點鈣離子、pH值、膜電位酶活性第二部分 流式細胞儀構造FCM的結構一般可分為五部分：(1)流動室及液流驅動系統(tǒng); (2)激光光源及光束成形系統(tǒng); (3)光學系統(tǒng); (4)信號檢測與存貯、顯示、分析系統(tǒng)，(5)細胞分選系統(tǒng)。見圖一圖一：BD公司FACSCaliburFDA通過的世界唯一全自動四色臺式分選機注：High Performance Side-Scatter and Fluoresence Photomultiplier:高性能側向角散射光及

5、熒光光電倍增管Argon Laser:氬離子激光Beam-Shaping Optics:光束成形鏡Red Diode Laser:紅色二極管激光Low-Angle, Light-Scatter Detector:前向角散射光檢測器（彩圖）(一)、流動室與液流驅動系統(tǒng)流動室(Flow Chamber或 Flow Cell)是儀器核心部件，被測樣品在此與激光相交。流動室由石英玻璃制成，并在石英玻璃中央開一個孔徑為430×180um的長方形孔，供細胞單個流過，檢測區(qū)在該孔的中心，這種流動室的光學特性良好，流速較慢,因而細胞受照時間長，可收集的細胞信號光通量大，配上廣角收集透鏡，可獲得很高的

6、檢測靈敏度和測量精度。流動室內充滿了鞘液,鞘液的作用是將樣品流環(huán)包。鞘液流是一種穩(wěn)定流動，操作人員無法隨意改變其流動的速度,樣品流在鞘流的環(huán)包下形成流體動力學聚焦，使樣品流不會脫離液流的軸線方向，并且保證每個細胞通過激光照射區(qū)的時間相等，從而得到準確的細胞熒光信息。細胞流和鞘液流的驅動一般采用加正壓的方法，流速與壓力的關系服從 Bernoulli方程，即P = (½) pv2 (忽略高度的變化)，可見只要壓力恒定，就可得到恒定的鞘液流流速, 從而可確保每個細胞流經激光照射區(qū)的速度不變。圖二：FACSCalibur液流系統(tǒng) 低速(Low) 高速(Hi)圖三：流動池中，不同流速下的細胞流

7、動情況從圖二可以知道,真空泵產生壓縮空氣,通過鞘流壓力調節(jié)器加在鞘液上一恒定的壓力(壓力的大小由工廠設定),這樣鞘液以勻速運動流過流動室,在整個系統(tǒng)運行中流速是不變的。而改變樣本的進樣速率開關,可提高采樣分析的速度,但是,這并不是提高樣本流的速度,而是改變了細胞間的距離,從圖三可以看出,樣本流變寬,細胞間距離縮短,這樣單位時間內流經激光照射區(qū)的細胞數就增加。 這種情況應在具體實驗中引起注意,由于激光焦點處能量分布為正態(tài)分布(見圖四),中心處能量最高,因此當樣本速率選擇高速(Hi)時,處在樣本流不同位置的細胞或顆粒,受激光光照射的能量不一樣,從而被激發(fā)出的熒光強度也不相同，這就會造成測量誤差,當

8、在檢測分辨率要求高的實驗時(如 DNA analysis)應選用低速(Low)。（二）、激光光源與光束成形系統(tǒng)目前臺式機FCM，大多采用氬離子氣體激光器，BD公司的FACSCallibur可增配小功率半導體激光器（波長635nm)從而拓寬了其染料的應用范圍。 激光 (Laser, light amplification by stimulated emission of radiation)是一種相干光源，它能提供單波長、高強度及穩(wěn)定性高的光照，是細胞微弱熒光快速分析的理想光源，這是因為由于細胞的快速流動，每個細胞經過光照區(qū)的時間僅為微秒左右，每個細胞所攜帶熒光物質被激發(fā)出的熒光信號強弱，與被

9、照射的時間和激發(fā)光的強度有關，因此細胞必須達到足夠的光照強度。 激光光束在到達流動室前，先經過透鏡，將其聚焦，形成幾何尺寸約為22 × 66 um，即短軸稍大于細胞的直徑的光斑(見圖四)。這種橢園形光斑激光能量分布屬正態(tài)分布;為保證樣品中細胞是一個一個分別受到光照并且受照強度十分一致,須將樣本流與激光束正交且相交于激光能量分布峰值處,臺式機FCM的光路調節(jié)對用戶是封閉的，即安裝時由工程師調試完畢后, 無需用戶作任何調節(jié), 所以用戶操作十分方便。圖四：激光光斑示意圖（三）、光學系統(tǒng)FCM的光學系統(tǒng)是由若干組透鏡、濾光片、小孔組成，它們分別將不同波長的熒光信號送入到不同的電子探測器。圖五

10、：FACSCalibur的光學系統(tǒng)在FCM的光學系統(tǒng)中主要光學原件是濾光片( Filter )，主要分為三類：長通濾片（Long-Pass Filter，LP )、短通濾片( Short-Pass Filter,SP) 及帶通濾片( Band-Pass Filter, BP )。(1)長通濾片：長通濾片使特定波長以上的光通過，特定波長以下的不通過。如LP500濾片，將允許500 nm以上的光通過，而500 nm以下的光吸收或返回。圖六：長通濾片(2)短通濾片：與長通濾片相反，特定波長以下的光通過，特定波長以上的光吸收或返回。圖七：短通濾片(3)帶通濾片：帶通濾片可允許相當窄的一波長范圍內光通過

11、，一般濾片上有兩個數，一個為允許通過波長的中心值，另一為允許通過光波段的范圍。如BP 500 / 50表示其允許通過波長范圍為475nm525nm。圖八：帶通濾片（四）、信號檢測與分析當細胞攜帶熒光素標記物，通過激光照射區(qū)時，受激光激發(fā)，產生代表細胞內不同物質、不同波長的熒光信號，這些信號以細胞為中心，向空間360度立體角發(fā)射，產生散射光和熒光信號, 圖九是以激發(fā)光光源波長488nm為例的示意圖：圖九：熒光信號的產生注：FITC為綠色熒光PE為橙紅色熒光PerCP為紅色熒光 1. 散射光信號：散射光分為前向角散射( FSC ，Forward Scatter ) 和側向角散射(SSC，Side

12、Scatter)，散射光不依賴任何細胞樣品的制備技術(如染色)，因此被稱為細胞的物理參數（或稱固有參數）。(1) 前向角散射：前向角散射與被測細胞的大小有關，確切說與細胞直徑的平方密切相關，通常在FCM應用中，選取FSC作閾值，來排除樣品中的各種碎片及鞘液中的小顆粒，以避免對被測細胞的干擾。(2) 側向角散射：側向角散射是指與激光束正交900方向的散射光信號，側向散射光對細胞膜、胞質、核膜的折射率更為敏感，可提供有關細胞內精細結構和顆粒性質的信息。圖十：散射光信號注：Laser-激光FALS Sensor-前向角散射光檢測器90LS Sensor-側向角散射光檢測器上述兩種信號都是來自于激光原

13、光束，其波長與激光相同，目前采用這兩個參數組合，可區(qū)分裂解紅細胞處理后外周血白細胞中淋巴細胞、單核細胞和粒細胞三個細胞群體，或在未進行裂解紅細胞處理的全血樣品中找出血小板和紅細胞等細胞群體。圖十一：外周全血細胞散射光點圖（裂解紅細胞處理）2. 熒光信號：當激光光束與細胞正交時，一般會產生兩種熒光信號。一種是細胞自身在激光照射下發(fā)出微弱的熒光信號，稱為細胞自發(fā)熒光；另一種是經過特異熒光素標記細胞后，受激發(fā)照射得到的熒光信號，通過對這類熒光信號的檢測和定量分析就能了解所研究細胞參數的存在與定量。圖十二：熒光信號注：Laser-激光FALS Sensor-前向角散射光檢測器Fluorescence

14、Detector-熒光檢測器熒光染料可選用的熒光素有多種多樣，由于它們分子結構不同，其熒光激發(fā)譜與發(fā)射譜也各異。選擇染料或單抗所標記的熒光素必須考慮儀器所配置光源的波長，目前臺式機FCM常配置的激光器為488nm通?？捎萌玖嫌蠵I(propidium iodide)、PE(phycoreythrin)、FITC(fluorescein isothiocyanate)、PerCP(peridinin chlorophyll protein)、CY5等。另外，B-D公司推出的FACSCalibur還可配置半導體激光器（波長為635nm），可激發(fā)APC、To-Pro3等染料，更拓寬了流式細胞儀的應用

15、范圍。 （1）熒光信號線性測量和對數測量：熒光信號的線性測量與對數測量主要由電子線路完成。從圖一可知，當攜帶熒光素的細胞與激光正交時，受激發(fā)出熒光，經過濾光片分離不同波長的光信號分別到達不同的光電倍增管(PMT)，PMT將光信號轉換成電信號。有些廠家不采用光電倍增管(PMT)，而采用線性放大光電轉換器，其優(yōu)點是降低成本提高線性度，但其最大缺點是響應速度慢，造成儀器分析細胞速度降低，最高不可能超過3300個/秒，如果樣本流速超過此速度會導致數據損失，因此高檔機器不采用此種方法。電信號輸入到放大器放大，放大器分兩類：線性放大和對數放大。線性放大器，即放大器的輸出與輸入是線性關系，細胞DNA含量、R

16、NA含量、總蛋白質含量等的測量一般選用線性放大測量。但在細胞膜表面抗原等的熒光檢測時通常使用對數放大器，如果原來輸出是1，當輸入增大到原來十倍時，輸出為2；當輸入增大到原來一百倍時輸出為3等。在免疫學樣品中，細胞膜表面抗原的分布有時要相差幾十倍甚至幾萬倍。如用線性放大器，將無法在一張圖上清晰地將細胞陽性群、陰性群同時顯示出來。（2）熒光信號的面積和寬度所謂熒光信號的面積是采用對熒光光通量進行積分測量，一般對DNA倍體測量時采用面積（如FL2-A），這是因為熒光脈沖的面積比熒光脈沖的高度更能準確反映DNA的含量，當形狀差異較大，而DNA含量相等的二個細胞，得到的熒光脈沖高度是不等的，經過對熒光信

17、號積分后，所得到的信號值就相等。圖十三：熒光信號的面積和寬度左側為G1期雙聯體細胞，右側為G2/M期單細胞寬度（如FL2-W）常用來區(qū)分雙聯體細胞(B-D公司的專利技術)，由于DNA樣本極容易聚集，當兩個G1期細胞粘連在一起時，其測量到的DNA熒光信號（FL2-A）與G2期細胞相等，這樣得到的測量數據G2期細胞比例會增高，影響測量準確性，圖九是用小牛胸腺細胞測量得到的DNA分布曲線，圖十四b中G2形成了小峰，其中，有一部分是因為G1期細胞粘連在一起，形成假G2期細胞，而圖十四a是通過設“門”（gate），將雙聯體細胞排除，其原理是雙聯體細胞所得到的熒光寬度信號（FL2-W）要比單個G2期細胞大

18、，因此設“門”后才能得到真正的DNA含量分布曲線和細胞周期（圖十四c）。圖十四：DDM檢查abc （3）光譜重疊的校正當細胞攜帶兩種熒光素如（PE和FITC）受激光激發(fā)而發(fā)射出兩種不同波長的熒光時，理論上，可選擇濾片使每種熒光僅被相應的檢測器檢測到，而不會檢測到另一種熒光。但由于目前所使用的各種熒染料都是寬發(fā)射譜性質，雖然它們之間各自發(fā)射峰值各不相同，但發(fā)射譜范圍有一定的重疊，從圖五上圖中可以看出，陰影為探測器檢測光譜的范圍，FITC探測器會探測到少量的PE光譜，而PE探測器則檢測到較多的FITC光譜。克服這種誤差的最有效方法是使用熒光補償電路，利用標準已知樣品或熒光小珠，可合理設置熒光信號的

19、補償值。圖十五給出補償前后模型圖。FITC(BF 530/30)PE(BF 575/26)（波長nm）圖十五：補償模型圖注：FITC為綠色PE為橙紅色（五）、 FCM測量數據的存貯、顯示與分析 目前FCM數據的存貯的方式均采用列表排隊(List Mode)方式。因為目前FCM所采用的都是多參數指標，熒光參數標記物已可多達4個，采用List Mode方式可大量地節(jié)約內存和磁盤容量。當一個細胞被檢測4個測量參數，那么獲取一萬個細胞，所占容量為4×10000個(字或雙字)。同時當只檢測細胞一個參數時（如DNA)，可靈活的關閉其他三個參數，節(jié)省四分之三的空間。 數據文件雖然有易于加工處理分析

20、的優(yōu)點，但缺乏直觀性，數據的顯示通常有一維直方圖、二維點圖、等高線圖、密度圖等幾種。1、單參數直方圖：細胞每一個單參數的測量數據可整理成統(tǒng)計分布，以直方圖(distribution histogram)來顯示。在圖中，橫坐標表示熒光信號或散射光信號相對強度的值，其單位是道數，橫坐標可以是線性的，也可以是對數的，縱坐標一般是細胞數。圖十六：直方圖左上圖較低道數處為G1期細胞，道數為G1期細胞兩倍得是G2+M期細胞，二者之間是期細胞。右上圖100 101為陰性細胞，而101以上為陽性細胞。2、雙參數數據的顯示雙參數數據的顯示是用于表達來自同一細胞兩個參數與細胞數量間的關系, 常用的表示方法有二維點

21、圖(Dot Plot), 等高線圖(Contour Plot), 二維密度圖(Density Plot)。在二維圖中, X坐標為該細胞一參數的相對含量, 而Y坐標為該細胞另一參數的含量, 從雙參數圖形中可以將各細胞亞群區(qū)分開, 同時可獲得細胞相關的重要信息, 左下圖為FSC和SSC組成的點圖, 從圖中可以很容易把全血樣本中淋巴細胞, 單核細胞及粒細胞區(qū)分開,從而可以分別分析各細胞亞群的統(tǒng)計數據, 右下圖是通過設“門”分析(Gating analysis)得到的FL1和 FL2點圖,設“門”可以是單參數設“門”,也可以是雙參數設“門”,通過設“門”可調出其他參數的相關信息,被調出的信息同樣也可以

22、是單參數和雙參數。圖十其就是通過細胞的前向和側向散射光雙參數點圖,設“門”圈出標本中的淋巴細胞群體,再調出免疫熒光的點圖。圖十七：點圖圖十八：等高線圖密度圖圖十九：流式細胞儀測定流程圖第三部分 流式細胞儀的主要技術指標1. 熒光測量靈敏度靈敏度的高低是衡量儀器檢測微弱熒光信號的重要指標，一般以能檢測到單個微球上最少標有FITC或PE熒光分子數目來表示,一般現在FCM均可達到<600個熒光分子。 2. 儀器的分辨率分辨率是衡量儀器測量精度的指標，通常用變異系數CV (Coefficient of Variation)值來表示： /µ×100% (是分布的標準誤差，

23、81; 是分布的平均值)如果一群含量完全相等樣本，用FCM來測量，理想的情況下，CV=0，用FCM測量曲線表示為圖二十a，但是在整個系統(tǒng)檢測中，會帶入許多誤差，其中樣本含量本身的誤差，樣本在流進照射光的微量變化，再加上儀器本身的誤差等，實際得到的曲線為圖二十B。CV值越小則曲線分布越窄越集中，測量誤差就越小，一般的FCM在最佳狀態(tài)時CV值均<2%。AB圖二十CV值的計算除了采用以上的計算公式外,還可以用半高峰寬來計算，半高峰寬指在峰高一半的地方量得的峰寬，它與CV值有以下的關系：CV=半高峰寬/µ ×0.4236×100%上述公式是建立在正態(tài)分布的條件下，而

24、實際情況所得測量數據分布常常是非對稱圖形，故采用半高峰寬所計算得到的CV值要明顯小于前統(tǒng)計公式得到的CV，在實際情況中應引起注意。3. 前向角散射光檢測靈敏度前向角散射光檢測靈敏度是指能夠檢測到的最小顆粒大小，一般目前商品化的FCM可以測量到0.2-0.5um左右。4. FCM分析速度分析速度以每秒可分析的細胞數來表示，當細胞流過光束的速度超過FCM儀器響應速度時，細胞產生的熒光信號就會被丟失，這段時間稱為儀器的死時間（Dead time）。死時間越短，我們就說這臺儀器處理數據越快，一般可達到3000個/ 秒6000個/ 秒左右,FACSCalibur的分析速度為10000個/ 秒，大型機已達

25、到每秒幾萬個細胞。5. FCM分選指標 分選指標主要包括：分選速度、分選純度及分選收獲率。分選速度指每秒可提取所要細胞的個數，目前臺式帶分選的儀器只有BD公司生產的FACSCalibur產品，它的分選速度為300個/ 秒，BD大型機的流式細胞儀最高分選速度可達每秒上萬個細胞。圖二十一：FACSCalibur的分選裝置注：To Collection-收集端To Waste-廢液端Catcher Tube in and out of stream-捕獲管Sample Injection-標本進樣針分選純度指被分選出細胞所占的百分比，一般臺式機和大型機的分選純度均可達到99%左右。分選收獲率指被分出

26、細胞與原來溶液中該細胞的百分比。通常情況下，分選純度和收獲率是互相矛盾的，純度提高，收獲率降低，反之亦然。這是由于樣品在液流中并不是等距離一個接著一個有序地排著隊，而是隨機的，因此，一旦兩個不同細胞挨得很近時，在強調純度和收獲率不同條件下，儀器會作出取或舍的決定，因此，選擇不同模式要視具體實驗要求而定。第四部分 流式細胞儀的簡明操作步驟(一) FACSCalibur開機程序1 打開FACSCalibur主機開關。低流速按扭（LO）變綠，STANDBY按扭顯橙紅色。2 打開FACStation計算機開關。3 拉開液流抽屜，檢查鞘液桶，裝滿鞘液；檢查廢液桶，倒空并加入400ml漂白劑。4 將壓力開

27、關打開。5 排空管路氣泡。(二) 運行FACSComp軟件，檢查儀器狀況，預設獲取條件FACSComp是BD公司自動設置儀器的應用軟件，它不僅可通過標準微球（CaliBRITE beads）來監(jiān)測儀器的工作狀態(tài)，還可以為人類外周血淋巴細胞免疫分群的應用提供常規(guī)的、自動化的儀器設置。流式細胞儀包含了一些靈敏的光電元件，為了保證實驗結果的一致性，最好每天用CaliBRITE beads來運行FACSComp軟件。(三) 調出CELLQuest軟件，選擇Connect to Cytometer（1） 獲取標本數據h 調出該試驗的獲取窗口和試驗獲取條件（Detector/Gain、Threshold、

28、Compensation）。h 為數據文件命名，并選擇數據文件的保存路徑。h 將流式細胞儀的功能鍵放在RUN位置，選定合適的流速，將含有單細胞懸液的樣品管放在支撐架上。h 在CELLQuest中點擊Aquire，儀器開始獲取數據，獲取數據結束后，儀器自動保存文件到規(guī)定的目錄下。（2） 分析數據，打印報告h 調出該試驗的報告窗口，在需要的數據圖中調出數據文件，并進行數據統(tǒng)計，得到相應的數據分布圖和統(tǒng)計結果。h 調整報告格式和內容，打印報告。(四) FACSCalibur關機程序1 清洗儀器管路。h 儀器置于RUN狀態(tài)，流速置于HI狀態(tài)，上樣管放3ml漂白劑（1:10稀釋），放在支撐架上，外管運行

29、1分鐘，內管運行5分鐘。h 上樣管中換蒸餾水3ml，放在支撐架上，外管運行1分鐘，內管運行5分鐘。h 儀器置于STANDBY狀態(tài)。2 上樣管內加蒸餾水1ml，放在支撐架上，使加樣針浸泡在蒸餾水中。3 關計算機，再關流式細胞儀。第五部分 聯系BD公司（一） BD公司全球業(yè)務BD公司成立于1897年，總部設于美國的新澤西州。一百多年來，BD公司已發(fā)展成為機構遍布全世界九十多個國家和地區(qū)、全球雇員近二萬名的跨國公司，由最初發(fā)明世界上第一支塑料注射器的家族式企業(yè)發(fā)展為紐約交易所的上市公司，由產品單一發(fā)展成為業(yè)務涵蓋皮下注射、血液采集、微生物產品、流式細胞儀等諸多領域世界著名的醫(yī)療技術綜合公司，并且多次

30、榮幸地躋身于美國財富雜志五百強之列。在產品質量方面，BD公司上市的所有產品均符合或高于同行業(yè)最高質量要求并獲得ISO及CE質量認證。在1998年度公司全球銷售額為31億美元,用于研究開發(fā)新產品方面資金為2.18億美元。BD公司主要產品為：1、 BD生物科學系統(tǒng)（BD Biosciences，BDB） BDB是BD公司的高科技部分，致力于為生命科學的基礎研究和臨床應用提供全方位強有力的支持 和幫助。BDB由以下世界著名的品牌組成： h BD Immunocytometry Systems（BDIS）h PharMingen （PMG）h Transduction Laboratories（TL）

31、h BD Labwareh BD Microbiology Systems （BDMS）h Biometric Imaging （BMI）h Clontech.。作為流式技術領域的先鋒企業(yè)，BDIS的使命是通過采用劃時代的技術為科學發(fā)展提供有診斷意義的解決方案和工具來擴展我們的全球領導地位。目前BD品牌的流式細胞儀占全球同類產品總量的70%，占美國總量的80%,為腫瘤、白血病、愛滋病及其它免疫系統(tǒng)疾病的診斷作出了積極的貢獻。BD公司提供的流式細胞儀包括:· FACSCalibur: 世界上唯一的自動化四色臺式分析和分選機.。提供自動進樣系統(tǒng)、分選濃縮系統(tǒng)、自動免疫樣本制備儀和DNA樣

32、本制備儀等選配功能。常規(guī)應用包括免疫表型分析、DNA分析、多色分析等，可廣泛應用于臨床和科研。· FACSVantage：具有最佳分析靈活性和高速度分選功能，可通過Autosort進行自動化分選。除常規(guī)應用外，還可進行高分辨率的染色體分析。BD公司同時提供FDA批準的體外診斷試劑和研究試劑。通過最優(yōu)良流式儀器、系統(tǒng)化軟件以及試劑的完美配合，BD公司力爭在科研和臨床，尤其在腫瘤和免疫系統(tǒng)疾病的控制（如HIV）方面竭盡所長。BD公司始終遵循用戶至上，多方位滿足用戶的需要。幾年來BD公司不斷壯大，PharMingen、ClonTECH、Transduction Laboratories等高

33、科技公司的加盟無疑進一步鞏固了BD公司在細胞生物和分子生物多學科領域的絕對領先地位。PMG建立在涵蓋免疫學、細胞生物學、神經科學、分子生物學/蛋白質表達系統(tǒng)、蛋白質化學等多學科多樣化的技術基礎上，提供3000多種具領先技術的高質量產品，并繼續(xù)在細胞因子、信號傳導、凋亡、細胞周期調控、神經科學等戰(zhàn)略性領域開發(fā)最新產品。具體分類如下：1. 抗體：· CD Antigens and Cell Surface Molecles· Adhesion Molecules · Cytokines, Chemokines and Cytokine Receptors·

34、No Azide/Low Endotoxin (NE/LE) Products for Functional Studies· Tumor Suppressor/Onco-Proteins· Signal Transduction Proteins· Cell Cycle Related Proteins· Apoptosis-Associated Proteins· Transcription Factors· Neuroscience· 2nd Step Reagents· Isotype Controls2.

35、 分子生物學產品：· BD BaculoGold Baculovirus Kits, Vectors and Expression Systems· GST/6x His Purification and Expression Systems· BD BioColors Green Fluorescent Protein Expression Vectors· BD RiboQuant Ribonuclease Protection Assay Systems· Luciferase Assay & Detection System&#

36、183; DNA Damage & Repair· Custom Molecular Biology Products3. 重組蛋白質：· Signal Transduction Proteins· Cytokines And Chemokines· Cell Cycle ProteinsBD Transduction Laboratories 正是迅速發(fā)展的信號傳導研究領域提供高質量的單克隆抗體。成立于1993年，1998年成為BD的有機組成，BD TL 已經從最初的25個產品成長為超過700個產品的專業(yè)公司。 產品包括：· Phos

37、phorylation & Dephosphorylation· Nitric Oxide· Calcium Signaling · Apoptosis· Cell Cycle· Gene Regulation · Cell Biology · Cancer Ressearch· Neuroscience · Immunology· GTPases & RegulatorsBD Labware作為BDB的一員，以多種多樣的高質量試劑、培養(yǎng)基及其添加物、生物活性細胞外基質等產品為防止和治愈疾病作出貢獻。BDL 產品包括：· BD Falcon: 實驗室塑料用品的首選，包括細胞培養(yǎng)、液體操作及其他生命科學應用；· BD BioCoat Cell Enviroments:全面提供細胞培養(yǎng)用品及細胞外生物活性基質；· Collaborative Biomedical Products: 高質量細胞培養(yǎng)試劑和培養(yǎng)基添加物的革新者和創(chuàng)造者。Clontech是功能性基因時代的科學家最忠實最有力的支持者。成立于1984年, CLONTECH 一直以迅猛的速度增長CLONTECH的使命始終是