預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版課件

1、預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版1第六章第六章外源化學(xué)物的一般毒性作用外源化學(xué)物的一般毒性作用環(huán)境衛(wèi)生與毒理學(xué)教研室環(huán)境衛(wèi)生與毒理學(xué)教研室李宏輝李宏輝 預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版2掌握：掌握：n基本概念、試驗(yàn)?zāi)康?、急性毒性試?yàn)設(shè)計(jì)、基本概念、試驗(yàn)?zāi)康?、急性毒性試?yàn)設(shè)計(jì)、LD50的計(jì)算方法及急性毒性分級(jí)；的計(jì)算方法及急性毒性分級(jí)；熟悉：熟悉：n急性毒性替代試驗(yàn)的方法、局部刺激試驗(yàn)的方急性毒性替代試驗(yàn)的方法、局部刺激試驗(yàn)的方法、蓄積毒性、亞慢性毒性、慢性毒性試驗(yàn)設(shè)法、蓄積毒性、亞慢性毒性、慢性毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)；計(jì)；了解了解:n化學(xué)毒物所致的病理學(xué)改變及其評(píng)價(jià)?；瘜W(xué)毒物所致的病理學(xué)改變及其

2、評(píng)價(jià)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版3預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版4一般毒性作用：一般毒性作用：也稱為也稱為基礎(chǔ)毒性基礎(chǔ)毒性，是，是全身各系統(tǒng)全身各系統(tǒng)對(duì)外源化學(xué)對(duì)外源化學(xué)物的毒作用反應(yīng)。物的毒作用反應(yīng)。急性毒性作用急性毒性作用重復(fù)劑量毒性作用重復(fù)劑量毒性作用亞慢性毒性作用亞慢性毒性作用慢性毒性作用慢性毒性作用急性毒性試驗(yàn)急性毒性試驗(yàn)重復(fù)劑量毒性試驗(yàn)重復(fù)劑量毒性試驗(yàn)亞慢性毒性試驗(yàn)亞慢性毒性試驗(yàn)慢性毒性試驗(yàn)慢性毒性試驗(yàn)預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版5特殊毒性作用特殊毒性作用 致畸作用致畸作用 致癌作用致癌作用致突變作用致突變作用預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版6為什么要研

3、究外源化學(xué)物的一般毒性作用？為什么要研究外源化學(xué)物的一般毒性作用？預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版7Section 1急性毒性作用急性毒性作用（acute toxicity）預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版8健康相關(guān)產(chǎn)品毒理學(xué)評(píng)價(jià)階段與試驗(yàn)項(xiàng)目健康相關(guān)產(chǎn)品毒理學(xué)評(píng)價(jià)階段與試驗(yàn)項(xiàng)目農(nóng)藥農(nóng)藥食品食品化妝品化妝品法規(guī)名稱法規(guī)名稱農(nóng)藥安全性毒理學(xué)農(nóng)藥安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序評(píng)價(jià)程序GB15670-1995食品安全性毒理學(xué)食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法評(píng)價(jià)程序和方法 GB15193.1-1994化妝品安全性評(píng)化妝品安全性評(píng)價(jià)程序和方法價(jià)程序和方法 GB7919-87第一階段第一階段急性毒性試驗(yàn)，皮膚

4、急性毒性試驗(yàn)，皮膚與眼粘膜試驗(yàn)與眼粘膜試驗(yàn)急性毒性試驗(yàn)急性毒性試驗(yàn)急性毒性試驗(yàn)，皮急性毒性試驗(yàn)，皮膚與眼粘膜試驗(yàn)?zāi)w與眼粘膜試驗(yàn)第二階段第二階段蓄積毒性試驗(yàn)，致突蓄積毒性試驗(yàn)，致突變?cè)囼?yàn)變?cè)囼?yàn)遺傳毒性試驗(yàn)，致畸遺傳毒性試驗(yàn)，致畸試驗(yàn)，短期毒性試驗(yàn)試驗(yàn)，短期毒性試驗(yàn)亞慢性毒性試驗(yàn)，亞慢性毒性試驗(yàn)，致畸試驗(yàn)致畸試驗(yàn)第三階段第三階段亞慢性毒性試驗(yàn)，代亞慢性毒性試驗(yàn)，代謝試驗(yàn)謝試驗(yàn)亞慢性毒性試驗(yàn)，繁亞慢性毒性試驗(yàn)，繁殖試驗(yàn)，代謝試驗(yàn)殖試驗(yàn)，代謝試驗(yàn)致突變，致癌短期致突變，致癌短期生物篩選試驗(yàn)生物篩選試驗(yàn)第四階段第四階段慢性代謝試驗(yàn)，致癌慢性代謝試驗(yàn)，致癌試驗(yàn)試驗(yàn)慢性毒性試驗(yàn)，致癌慢性毒性試驗(yàn)，致癌試驗(yàn)試

5、驗(yàn)慢性毒性試驗(yàn)，致慢性毒性試驗(yàn)，致癌試驗(yàn)癌試驗(yàn)第五階段第五階段人體試驗(yàn)（激發(fā)斑人體試驗(yàn)（激發(fā)斑貼、試用試驗(yàn)）貼、試用試驗(yàn)）預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版9acute toxicity:是指機(jī)體（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人）是指機(jī)體（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人）一次一次或或24小時(shí)小時(shí)內(nèi)接觸多次一定劑量外源化內(nèi)接觸多次一定劑量外源化學(xué)物后在學(xué)物后在短期內(nèi)短期內(nèi)所產(chǎn)生的毒作用及死亡。所產(chǎn)生的毒作用及死亡。一、急性毒性的概念一、急性毒性的概念預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版10概念的解釋：概念的解釋： 經(jīng)口、注射器染毒，瞬間給予；經(jīng)口、注射器染毒，瞬間給予； 經(jīng)呼吸道、皮膚染毒，一段時(shí)間。經(jīng)呼吸道、皮膚染毒，一段時(shí)間

6、。v24小時(shí)內(nèi)多次接觸：外源化學(xué)物毒性很低。小時(shí)內(nèi)多次接觸：外源化學(xué)物毒性很低。v短期內(nèi)：最長(zhǎng)的觀察期限為短期內(nèi)：最長(zhǎng)的觀察期限為14天。天。v 一次：一次：預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版11v獲得急性毒性參數(shù)：獲得急性毒性參數(shù)：LD50、LD100、LD0等；等； v初步評(píng)價(jià)毒物對(duì)機(jī)體的毒效應(yīng)特征、靶器官、初步評(píng)價(jià)毒物對(duì)機(jī)體的毒效應(yīng)特征、靶器官、劑量劑量-反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系和對(duì)人體產(chǎn)生損害的反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系和對(duì)人體產(chǎn)生損害的危險(xiǎn)性；危險(xiǎn)性；二、急性毒性試驗(yàn)的目的二、急性毒性試驗(yàn)的目的預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版12v為重復(fù)劑量、亞慢性和慢性毒性試驗(yàn)等后續(xù)試驗(yàn)為重復(fù)劑量、亞慢性和慢

7、性毒性試驗(yàn)等后續(xù)試驗(yàn)提供接觸劑量設(shè)計(jì)依據(jù)，并為觀察指標(biāo)的選擇提提供接觸劑量設(shè)計(jì)依據(jù)，并為觀察指標(biāo)的選擇提出建議；出建議；v為毒理學(xué)機(jī)制研究提供初步的線索。為毒理學(xué)機(jī)制研究提供初步的線索。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版13 經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)：經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)： 急性毒性替代試驗(yàn)：急性毒性替代試驗(yàn)： LDLD5050應(yīng)用中的有關(guān)問(wèn)題：應(yīng)用中的有關(guān)問(wèn)題： 急性毒性分級(jí)和評(píng)價(jià)：急性毒性分級(jí)和評(píng)價(jià)：三、急性毒性試驗(yàn)方法的要點(diǎn)三、急性毒性試驗(yàn)方法的要點(diǎn)預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版14（一）經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)的設(shè)計(jì)（一）經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)的設(shè)計(jì) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 染毒途徑染毒途徑試驗(yàn)周期與

8、毒效應(yīng)觀察試驗(yàn)周期與毒效應(yīng)觀察 染毒劑量與分組染毒劑量與分組預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版15選擇的原則：選擇的原則：n選擇對(duì)化學(xué)毒物的代謝和毒效應(yīng)表現(xiàn)與人的反選擇對(duì)化學(xué)毒物的代謝和毒效應(yīng)表現(xiàn)與人的反應(yīng)盡可能一致的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；應(yīng)盡可能一致的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；n品系純化；品系純化；n價(jià)格較低和易于飼養(yǎng)和獲得。價(jià)格較低和易于飼養(yǎng)和獲得。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版16實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇p實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬和品系；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬和品系；p實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡和體重；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡和體重；p實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別；p動(dòng)物數(shù)量；動(dòng)物數(shù)量；p實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的預(yù)檢；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

9、的預(yù)檢；p禁食。禁食。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版17實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇1.1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬和品系：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬和品系：p種屬：種屬：n最好用兩種種屬的動(dòng)物最好用兩種種屬的動(dòng)物 n嚙齒類嚙齒類: :小鼠、大鼠、豚鼠或家兔；小鼠、大鼠、豚鼠或家兔；n非嚙齒類：狗或猴。非嚙齒類：狗或猴。n大鼠大鼠為首選的嚙齒類動(dòng)物。為首選的嚙齒類動(dòng)物。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版18實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇p品系品系：起源于共同祖先的一群動(dòng)物。起源于共同祖先的一群動(dòng)物。p依據(jù)遺傳學(xué)背景分類：依據(jù)遺傳學(xué)背景分類：n近交系近交系 （Inbred strain）n雜交群雜交群 （Hyb

10、rid strain）n封閉群（封閉群（Closed colony），如：昆明種小鼠、），如：昆明種小鼠、Wistar大鼠、大鼠、SD大鼠等。大鼠等。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版19實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇 大鼠大鼠180240g家兔家兔22.5kg小鼠小鼠1825g狗狗1015kg 豚鼠豚鼠200250g2.2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡和體重：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡和體重：n同一批試驗(yàn)動(dòng)物體重變異范圍不應(yīng)超過(guò)該批同一批試驗(yàn)動(dòng)物體重變異范圍不應(yīng)超過(guò)該批動(dòng)物平均體重的動(dòng)物平均體重的20。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版20實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別： n雌雄各半

11、；雌雄各半；n化學(xué)毒物對(duì)雌、雄動(dòng)物的毒效應(yīng)有明顯差異時(shí)；化學(xué)毒物對(duì)雌、雄動(dòng)物的毒效應(yīng)有明顯差異時(shí)；n致畸試驗(yàn)，可僅作雌性動(dòng)物的致畸試驗(yàn)，可僅作雌性動(dòng)物的LD50測(cè)試；測(cè)試；n實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須是未曾交配和受孕的動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須是未曾交配和受孕的動(dòng)物。 預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版21實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇4.動(dòng)物數(shù)量與分組動(dòng)物數(shù)量與分組n大、小鼠等小動(dòng)物大、小鼠等小動(dòng)物-每組每組1010只只n狗等大動(dòng)物狗等大動(dòng)物-每組每組6 6只只 幾組？幾組？預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版22實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇動(dòng)物分組：動(dòng)物分組：n改進(jìn)寇氏法至少設(shè)改進(jìn)寇氏法至少設(shè)5個(gè)劑量組；個(gè)劑量

12、組；n概率單位圖解法一般設(shè)概率單位圖解法一般設(shè)610組；組；n霍恩法設(shè)霍恩法設(shè)4個(gè)劑量組；個(gè)劑量組；分組方法：分組方法：n隨機(jī)分組。隨機(jī)分組。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版23實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的預(yù)檢：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的預(yù)檢：n通常情況下觀察通常情況下觀察57天，剔除異常的動(dòng)物，天，剔除異常的動(dòng)物，選擇健康動(dòng)物；選擇健康動(dòng)物；n檢疫期與實(shí)驗(yàn)期雌雄動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，防止檢疫期與實(shí)驗(yàn)期雌雄動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，防止交配及受孕。交配及受孕。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版24實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇6.禁食：禁食：n大鼠應(yīng)隔夜禁食；大鼠應(yīng)隔夜禁食；n小鼠應(yīng)禁食小鼠應(yīng)禁食4h；n大動(dòng)物

13、可在染毒前不喂食，染毒后繼續(xù)禁大動(dòng)物可在染毒前不喂食，染毒后繼續(xù)禁食食34h；n要保障飲水的供應(yīng)。要保障飲水的供應(yīng)。 預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版25選擇的原則：選擇的原則：n模擬人在生活和生產(chǎn)環(huán)境中實(shí)際接觸受試物的途模擬人在生活和生產(chǎn)環(huán)境中實(shí)際接觸受試物的途徑和方式；徑和方式；n有利于不同化學(xué)物之間急性毒性大小的比較；有利于不同化學(xué)物之間急性毒性大小的比較；n受試物的性質(zhì)和用途；受試物的性質(zhì)和用途；n各種受試物毒性評(píng)價(jià)程序的要求等。各種受試物毒性評(píng)價(jià)程序的要求等。染毒途徑的選擇染毒途徑的選擇預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版26染毒途徑的選擇染毒途徑的選擇最常用的染毒途徑為：最常用

14、的染毒途徑為：p經(jīng)口；經(jīng)口；p經(jīng)呼吸道；經(jīng)呼吸道；p經(jīng)皮膚；經(jīng)皮膚；p注射途徑。注射途徑。 預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版27染毒途徑的選擇染毒途徑的選擇n經(jīng)口染毒：灌胃、喂飼、吞咽膠囊；經(jīng)口染毒：灌胃、喂飼、吞咽膠囊；n經(jīng)呼吸道：吸入染毒、氣管內(nèi)注入；經(jīng)呼吸道：吸入染毒、氣管內(nèi)注入；n經(jīng)皮膚染毒：動(dòng)物背部皮膚、小鼠浸尾法；經(jīng)皮膚染毒：動(dòng)物背部皮膚、小鼠浸尾法；n注射途徑注射途徑:腹腔注射、靜脈注射、肌內(nèi)注射、皮腹腔注射、靜脈注射、肌內(nèi)注射、皮下注射。下注射。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版28染毒途徑的選擇染毒途徑的選擇各種染毒途徑都有一個(gè)最大染毒容量的問(wèn)題：各種染毒途徑都有一個(gè)最

15、大染毒容量的問(wèn)題：n小鼠一次灌胃體積小鼠一次灌胃體積0.2 1.0ml/只；只；n大鼠一次灌胃體積大鼠一次灌胃體積1.0 4.0ml/只；只；n 豚鼠一次灌胃體積豚鼠一次灌胃體積1.05.0ml/只；只；預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版29 了解理、化性質(zhì)了解理、化性質(zhì)染毒劑量及分組染毒劑量及分組 預(yù)實(shí)驗(yàn)預(yù)實(shí)驗(yàn) 正式試驗(yàn)正式試驗(yàn) 查閱文獻(xiàn)查閱文獻(xiàn)預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版301.1.查閱文獻(xiàn)查閱文獻(xiàn)n有相關(guān)毒性資料可供參考者；有相關(guān)毒性資料可供參考者；n沒有相關(guān)毒性資料可供參考者沒有相關(guān)毒性資料可供參考者預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版31（1）有相關(guān)毒性資料可供參考者有相關(guān)

16、毒性資料可供參考者 找出與受試化學(xué)毒物結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)近似的化學(xué)找出與受試化學(xué)毒物結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)近似的化學(xué)物的毒性資料物的毒性資料 ，以文獻(xiàn)資料中相同的動(dòng)物種系和，以文獻(xiàn)資料中相同的動(dòng)物種系和相同接觸途徑所測(cè)得的相同接觸途徑所測(cè)得的LD50值作為受試化學(xué)物的值作為受試化學(xué)物的預(yù)期毒性中值。預(yù)期毒性中值。 設(shè)定以此預(yù)期值作為待測(cè)化學(xué)物的中間劑量組，設(shè)定以此預(yù)期值作為待測(cè)化學(xué)物的中間劑量組，并在該劑量的上下各設(shè)計(jì)并在該劑量的上下各設(shè)計(jì)12個(gè)劑量作為預(yù)試驗(yàn)劑個(gè)劑量作為預(yù)試驗(yàn)劑量。量。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版32（2）無(wú)相關(guān)毒性資料可供參考者）無(wú)相關(guān)毒性資料可供參考者 以最大耐受量作為實(shí)驗(yàn)的

17、最高劑量以最大耐受量作為實(shí)驗(yàn)的最高劑量 ； 以以1mg/kg為最低劑量組為最低劑量組 ，組距為，組距為4，進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。，進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版332.2.預(yù)試驗(yàn)預(yù)試驗(yàn)n找出找出10%90%或或0%100%致死劑量的致死劑量的范圍，然后在這個(gè)劑量范圍內(nèi)以合適的范圍，然后在這個(gè)劑量范圍內(nèi)以合適的間距設(shè)幾個(gè)劑量組，作為正式試驗(yàn)的劑間距設(shè)幾個(gè)劑量組，作為正式試驗(yàn)的劑量。量。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版343.3.正式試驗(yàn)正式試驗(yàn)p組數(shù)的確定：組數(shù)的確定： pLD50的計(jì)算方法：的計(jì)算方法：n改進(jìn)寇氏法（改進(jìn)寇氏法（karbers method）n序貫法（序貫法（seq

18、uential method）nBliss法法n霍恩法（霍恩法（Horn）預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版35n改進(jìn)寇氏法至少設(shè)改進(jìn)寇氏法至少設(shè)5個(gè)劑量組；個(gè)劑量組；n概率單位圖解法一般設(shè)概率單位圖解法一般設(shè)610組；組；n霍恩法設(shè)霍恩法設(shè)4個(gè)劑量組；個(gè)劑量組；n設(shè)立對(duì)照組；設(shè)立對(duì)照組；n采用隨機(jī)化分組的方法。采用隨機(jī)化分組的方法。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版36可根據(jù)以下公式計(jì)算出組距可根據(jù)以下公式計(jì)算出組距 i 值：值：ni= (lgLD90- lgLD10)/(n-1)或或i= (lgLD100- lgLD0)/(n-1)式中：式中：ni為組距（相鄰兩個(gè)劑量組對(duì)數(shù)劑量之差）為

19、組距（相鄰兩個(gè)劑量組對(duì)數(shù)劑量之差）nn為設(shè)計(jì)的劑量組數(shù)為設(shè)計(jì)的劑量組數(shù)預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版37劑量分組劑量分組n求得求得 i 值后，以最低劑量組（值后，以最低劑量組（ lgLD0或或 lgLD10 ）的對(duì)數(shù)劑量加上一個(gè)）的對(duì)數(shù)劑量加上一個(gè)i，既是第二，既是第二個(gè)劑量組的對(duì)數(shù)劑量，依次類推直至最高個(gè)劑量組的對(duì)數(shù)劑量，依次類推直至最高劑量組，查各自的反對(duì)數(shù)即得出各組劑量劑量組，查各自的反對(duì)數(shù)即得出各組劑量的真實(shí)值。的真實(shí)值。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版38毒效應(yīng)的觀察毒效應(yīng)的觀察觀察期限：觀察期限：n一般為一般為14天；天；n也可依據(jù)毒性反應(yīng)、癥狀發(fā)生的速度和恢也可依據(jù)毒性

20、反應(yīng)、癥狀發(fā)生的速度和恢復(fù)期的長(zhǎng)短而定。復(fù)期的長(zhǎng)短而定。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版39毒效應(yīng)的觀察毒效應(yīng)的觀察急性毒性試驗(yàn)的觀察和記錄內(nèi)容主要包括：急性毒性試驗(yàn)的觀察和記錄內(nèi)容主要包括：n中毒體征及發(fā)生過(guò)程；中毒體征及發(fā)生過(guò)程；n體重和病理形態(tài)學(xué)變化；體重和病理形態(tài)學(xué)變化；n死亡情況和時(shí)間分布。死亡情況和時(shí)間分布。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版401.1.中毒體征及發(fā)生過(guò)程中毒體征及發(fā)生過(guò)程n試驗(yàn)過(guò)程應(yīng)詳細(xì)地觀察和記錄動(dòng)物出現(xiàn)的中毒試驗(yàn)過(guò)程應(yīng)詳細(xì)地觀察和記錄動(dòng)物出現(xiàn)的中毒癥狀、發(fā)生的時(shí)間、癥狀發(fā)展的經(jīng)過(guò)，死亡前癥狀、發(fā)生的時(shí)間、癥狀發(fā)展的經(jīng)過(guò)，死亡前的特征以及死亡時(shí)間等。的特征

21、以及死亡時(shí)間等。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版41表6-1 嚙齒類動(dòng)物急性中毒表現(xiàn)預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版422.2.體重和病理形態(tài)學(xué)變化體重和病理形態(tài)學(xué)變化 n體重的變化：體重的變化：n病理形態(tài)學(xué)變化：對(duì)死亡的動(dòng)物均應(yīng)及時(shí)進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)變化：對(duì)死亡的動(dòng)物均應(yīng)及時(shí)進(jìn)行大體解剖和病理組織學(xué)檢查。大體解剖和病理組織學(xué)檢查。n根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目稍黾訖z測(cè)指標(biāo)：體溫、心電圖、根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目稍黾訖z測(cè)指標(biāo)：體溫、心電圖、電圖或進(jìn)行某些生化指標(biāo)測(cè)定等電圖或進(jìn)行某些生化指標(biāo)測(cè)定等 。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版433.3.死亡情況和時(shí)間分布死亡情況和時(shí)間分布p重點(diǎn)觀察和記錄每只動(dòng)物死亡的時(shí)

22、間，特重點(diǎn)觀察和記錄每只動(dòng)物死亡的時(shí)間，特別是最早出現(xiàn)死亡的時(shí)間以及各個(gè)劑量組別是最早出現(xiàn)死亡的時(shí)間以及各個(gè)劑量組動(dòng)物的死亡數(shù)。動(dòng)物的死亡數(shù)。 預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版44表表 急性毒性實(shí)驗(yàn)原始記錄急性毒性實(shí)驗(yàn)原始記錄受試物名稱：受試物名稱：受試物性狀：受試物性狀：受試物來(lái)源：受試物來(lái)源：動(dòng)物物種品系：動(dòng)物物種品系：動(dòng)物來(lái)源及合格證號(hào)：動(dòng)物來(lái)源及合格證號(hào)：染毒途徑：染毒途徑：室溫：室溫：相對(duì)濕度：相對(duì)濕度：組別組別劑量劑量動(dòng)物動(dòng)物編號(hào)編號(hào)性性別別體重體重(g)染毒量染毒量(ml)染毒染毒時(shí)間時(shí)間體征及體征及出現(xiàn)時(shí)間出現(xiàn)時(shí)間死亡死亡時(shí)間時(shí)間預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版45LD

23、50的計(jì)算方法的計(jì)算方法以改進(jìn)寇氏法為例：以改進(jìn)寇氏法為例：n本法要求每個(gè)染毒劑量組動(dòng)物數(shù)要相同，個(gè)本法要求每個(gè)染毒劑量組動(dòng)物數(shù)要相同，個(gè)劑量組距組距呈等比級(jí)數(shù)，死亡率呈正態(tài)分劑量組距組距呈等比級(jí)數(shù)，死亡率呈正態(tài)分布，要求最低劑量組死亡數(shù)布，要求最低劑量組死亡數(shù)20%20%，最高劑量，最高劑量組死亡率組死亡率80%80%。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版46計(jì)算公式如下計(jì)算公式如下 m=Xk- i (p-0.5)pqSmin式中：式中： mlgLD50; i相鄰兩劑量組之對(duì)數(shù)劑量差值相鄰兩劑量組之對(duì)數(shù)劑量差值 Xk最大劑量的對(duì)數(shù)值最大劑量的對(duì)數(shù)值 p死亡率死亡率 q存活率（存活率（1- p

24、 ） p各劑量組死亡率總和各劑量組死亡率總和 n每組動(dòng)物數(shù)每組動(dòng)物數(shù)預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版47舉例：小鼠經(jīng)口給予某種化學(xué)毒物染毒，劑量和舉例：小鼠經(jīng)口給予某種化學(xué)毒物染毒，劑量和死亡動(dòng)物數(shù)結(jié)果見表：死亡動(dòng)物數(shù)結(jié)果見表：組別劑量動(dòng)物數(shù)(n)死亡數(shù)(只)死亡率(p)存活率(q)p.qmg/kg對(duì)數(shù)115.01.17611000.01.00.00218.01.25611020.20.80.16321.71.33611050.50.50.25426.11.41611070.70.30.21531.31.49611090.90.10.09i=0.08p=2.3預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter61

25、15版48LD50的計(jì)算方法：的計(jì)算方法：nm=Xk- i (p-0.5)lgLD50=1.4961-0.08(2.3-0.5) =1.3521n =0.0213lgLD50及其及其95%可信限為：可信限為：1.35211.960.0213LD50及其及其95%可信限為：可信限為：？pqSm in預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版49p又稱又稱“3R”法，即法，即:p優(yōu)化（優(yōu)化（refinement）:試驗(yàn)方法和技術(shù)，試驗(yàn)方法和技術(shù)，p減少（減少（reduction）：）：受試動(dòng)物的數(shù)量和痛苦，受試動(dòng)物的數(shù)量和痛苦，p取代（取代（replacement）：）：整體動(dòng)物試驗(yàn)的方法。整體動(dòng)物試驗(yàn)

26、的方法。（二）急性毒性替代試驗(yàn)（二）急性毒性替代試驗(yàn)預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版50p固定劑量法固定劑量法p急性毒性分級(jí)法急性毒性分級(jí)法p上上-下移動(dòng)法下移動(dòng)法預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版51固定劑量法（固定劑量法（fixed dose procedure）觀察終點(diǎn)：觀察終點(diǎn)：n不以死亡為觀察終點(diǎn)，而是以出現(xiàn)不以死亡為觀察終點(diǎn)，而是以出現(xiàn)“明顯毒性明顯毒性”作為觀察終點(diǎn)。作為觀察終點(diǎn)。染毒劑量：染毒劑量：n5 5、5050、500mg/kg500mg/kg，最高限量是，最高限量是2000 mg/kg2000 mg/kg。 預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版52固定劑量法固定劑

27、量法具體方法：試驗(yàn)分為具體方法：試驗(yàn)分為2 2個(gè)階段進(jìn)行個(gè)階段進(jìn)行 。預(yù)實(shí)驗(yàn)階段：預(yù)實(shí)驗(yàn)階段：正式試驗(yàn)階段：正式試驗(yàn)階段： 預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版53固定劑量法和經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)的比較固定劑量法和經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)的比較毒性反應(yīng)無(wú)明顯差異；毒性反應(yīng)無(wú)明顯差異；毒性分級(jí)基本一致；毒性分級(jí)基本一致；固定劑量法可以獲得較全面的危險(xiǎn)度評(píng)價(jià)固定劑量法可以獲得較全面的危險(xiǎn)度評(píng)價(jià)資料。資料。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版54固定劑量法固定劑量法優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)： 所用動(dòng)物數(shù)少所用動(dòng)物數(shù)少 測(cè)定一個(gè)化合物的測(cè)定一個(gè)化合物的LDLD5050，固定劑量法平均用大鼠，固定劑量法平均用大鼠14.814.8

28、只，經(jīng)典方法平均用大鼠只，經(jīng)典方法平均用大鼠24.224.2只。只。 動(dòng)物死亡率低。動(dòng)物死亡率低。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版55急性毒性分級(jí)法急性毒性分級(jí)法（acute toxic class method ）觀察終點(diǎn)：觀察終點(diǎn)：以死亡為終點(diǎn)；以死亡為終點(diǎn)；染毒劑量：染毒劑量：25、200、2000mg/kg；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：嚙齒類，首選大鼠。嚙齒類，首選大鼠。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版56急性毒性分級(jí)法急性毒性分級(jí)法具體方法：具體方法：從從25、200、2000mg/kg3個(gè)固定劑量中選擇一個(gè)個(gè)固定劑量中選擇一個(gè)劑量開始進(jìn)行試驗(yàn)，每階段劑量開始進(jìn)行試驗(yàn)，每階段3只動(dòng)物

29、，根據(jù)死亡動(dòng)只動(dòng)物，根據(jù)死亡動(dòng)物的數(shù)量來(lái)判定大致的物的數(shù)量來(lái)判定大致的LD50值范圍，直接進(jìn)行危值范圍，直接進(jìn)行危害評(píng)估和毒性分級(jí)。害評(píng)估和毒性分級(jí)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版57急性毒性分級(jí)法急性毒性分級(jí)法結(jié)果判斷：結(jié)果判斷：n不需要進(jìn)一步試驗(yàn)進(jìn)行分級(jí)；不需要進(jìn)一步試驗(yàn)進(jìn)行分級(jí)；n下一階段以相同劑量的另一種性別試驗(yàn)；下一階段以相同劑量的另一種性別試驗(yàn)；n下一階段以較高或較低的劑量水平進(jìn)行。下一階段以較高或較低的劑量水平進(jìn)行。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：所用動(dòng)物數(shù)少。所用動(dòng)物數(shù)少。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版58上上-下移動(dòng)法下移動(dòng)法（up/down method）觀察終點(diǎn)：觀察終點(diǎn)：以死亡

30、為終點(diǎn)，但也可以觀察不同的終點(diǎn)。以死亡為終點(diǎn)，但也可以觀察不同的終點(diǎn)。具體方法：具體方法：用用1只動(dòng)物序貫進(jìn)行，觀察只動(dòng)物序貫進(jìn)行，觀察48h，不死亡，下一只，不死亡，下一只提高一檔劑量，死亡，就降一檔劑量做。但每一提高一檔劑量，死亡，就降一檔劑量做。但每一只存活動(dòng)物都需觀察至只存活動(dòng)物都需觀察至14d，后期死亡動(dòng)物在統(tǒng)計(jì)，后期死亡動(dòng)物在統(tǒng)計(jì)結(jié)果時(shí)也要記為死亡。結(jié)果時(shí)也要記為死亡。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版59上上-下移動(dòng)法下移動(dòng)法劑量設(shè)計(jì)：劑量設(shè)計(jì)：n推薦采用劑量序列推薦采用劑量序列1.75、5.5、17.5、55、175、550、2000或或5000mg/kg；n具體從哪個(gè)劑量開

31、始，要參照已有的資料。具體從哪個(gè)劑量開始，要參照已有的資料。n對(duì)于無(wú)毒性資料可以參考，推薦從對(duì)于無(wú)毒性資料可以參考，推薦從175mg/kg開始。開始。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版60上上-下移動(dòng)法下移動(dòng)法試驗(yàn)終止的條件：試驗(yàn)終止的條件：設(shè)立了設(shè)立了3種實(shí)驗(yàn)可以終止的判斷標(biāo)準(zhǔn)，滿足其中之種實(shí)驗(yàn)可以終止的判斷標(biāo)準(zhǔn)，滿足其中之一即應(yīng)停止進(jìn)一步的動(dòng)物試驗(yàn)。一即應(yīng)停止進(jìn)一步的動(dòng)物試驗(yàn)。 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：動(dòng)物數(shù)量少，只需要?jiǎng)游飻?shù)量少，只需要69只動(dòng)物。只動(dòng)物。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版61n1995年年Lipnick等比較了上下法、固定劑量等比較了上下法、固定劑量法和經(jīng)典法，上下法和經(jīng)典法一

32、致性為法和經(jīng)典法，上下法和經(jīng)典法一致性為23/25，上下法與固定劑量法一致性為，上下法與固定劑量法一致性為16/20。上下法需單性別動(dòng)物上下法需單性別動(dòng)物610只，少于另兩種只，少于另兩種方法。方法。三種替代方法的比較三種替代方法的比較預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版62（三）（三）LDLD5050應(yīng)用中的有關(guān)問(wèn)題應(yīng)用中的有關(guān)問(wèn)題vLD50的意義的意義vLD50的局限性的局限性預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版63LD50的意義的意義n標(biāo)準(zhǔn)化藥物毒作用強(qiáng)度，評(píng)價(jià)藥物對(duì)機(jī)體毒性的標(biāo)準(zhǔn)化藥物毒作用強(qiáng)度，評(píng)價(jià)藥物對(duì)機(jī)體毒性的大小，比較不同藥物毒性的大??；大小，比較不同藥物毒性的大??；n計(jì)算藥物

33、的治療指數(shù)，藥效劑量和毒性劑量的距計(jì)算藥物的治療指數(shù)，藥效劑量和毒性劑量的距離；離；n為后續(xù)的重復(fù)給藥毒理學(xué)試驗(yàn)劑量的選擇提供參為后續(xù)的重復(fù)給藥毒理學(xué)試驗(yàn)劑量的選擇提供參考；考；預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版64LD50的意義的意義n通過(guò)比較不同途徑的通過(guò)比較不同途徑的LD50值，獲得生物利用度的值，獲得生物利用度的信息；信息；n試驗(yàn)結(jié)果可用來(lái)推測(cè)人類的致死劑量以及中毒后試驗(yàn)結(jié)果可用來(lái)推測(cè)人類的致死劑量以及中毒后的體征，為臨床毒副反應(yīng)提供監(jiān)測(cè)參考。的體征，為臨床毒副反應(yīng)提供監(jiān)測(cè)參考。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版65LD50的局限性的局限性n獲得的信息較少，實(shí)用性有限；獲得的信息較

34、少，實(shí)用性有限；nLD50的波動(dòng)性很大，影響因素很多；的波動(dòng)性很大，影響因素很多；n物種差異對(duì)物種差異對(duì)LD50影響大；影響大；n傳統(tǒng)計(jì)算傳統(tǒng)計(jì)算LD50的方法的方法消耗的動(dòng)物量大。消耗的動(dòng)物量大。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版66（四）（四）急性毒性分級(jí)和評(píng)價(jià)急性毒性分級(jí)和評(píng)價(jià)v現(xiàn)行的各種急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)是以現(xiàn)行的各種急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)是以LD50值為值為基礎(chǔ)劃分的，而國(guó)家組織以及不同的國(guó)家都基礎(chǔ)劃分的，而國(guó)家組織以及不同的國(guó)家都自行制定了標(biāo)準(zhǔn)。自行制定了標(biāo)準(zhǔn)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版67表表1 1 工業(yè)毒物急性毒性分級(jí)工業(yè)毒物急性毒性分級(jí)毒性分級(jí)毒性分級(jí)小鼠一次經(jīng)口小鼠一次

35、經(jīng)口LD50 (mg/kg)小鼠吸入小鼠吸入2h LC50 (ppm)兔經(jīng)皮兔經(jīng)皮LD50(mg/kg)劇毒劇毒105010000500005000我國(guó)我國(guó)19781978年工業(yè)毒物的五級(jí)急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。年工業(yè)毒物的五級(jí)急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版68表表2 2 我國(guó)食品毒理急性毒性分級(jí)法我國(guó)食品毒理急性毒性分級(jí)法(1994)(1994)急性毒性分級(jí)急性毒性分級(jí)大鼠經(jīng)口大鼠經(jīng)口LD50(mg/kg)大致相當(dāng)于大致相當(dāng)于70kg人的致人的致死量死量6級(jí)級(jí)(極毒極毒)1稍嘗稍嘗,150001050克克19941994年頒布實(shí)施的年頒布實(shí)施的食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法

36、食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法中提出的急性中提出的急性毒性分級(jí)的六級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。毒性分級(jí)的六級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版69毒性分級(jí)毒性分級(jí)經(jīng)口經(jīng)口LD50 (mg/kg）吸入吸入2h LC50 (mg/m3)經(jīng)皮經(jīng)皮LD50(mg/kg)劇毒劇毒520500 2000 200019951995年頒布實(shí)施的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)年頒布實(shí)施的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗(yàn)方法農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗(yàn)方法中提出的農(nóng)藥中提出的農(nóng)藥急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。表表3 3 農(nóng)藥的急性毒性分級(jí)農(nóng)藥的急性毒性分級(jí)預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版70毒性分級(jí)毒性分級(jí)大鼠一次大鼠一次經(jīng)口經(jīng)口LD50 (mg/kg

37、)6只大鼠吸入只大鼠吸入4小時(shí)，死亡小時(shí)，死亡24只的濃度只的濃度(ppm)兔經(jīng)皮兔經(jīng)皮LD50(mg/kg)對(duì)人可能致死的估計(jì)量對(duì)人可能致死的估計(jì)量g/kg總量總量(g/60kg)劇毒劇毒11051510002003年年WHO全球化學(xué)品統(tǒng)一分類和標(biāo)簽制度全球化學(xué)品統(tǒng)一分類和標(biāo)簽制度對(duì)多種毒性進(jìn)行分級(jí)，對(duì)多種毒性進(jìn)行分級(jí)，推薦的五級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。推薦的五級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。表表4 外源化學(xué)物急性毒性分級(jí)外源化學(xué)物急性毒性分級(jí)預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版71急性毒性危害類別和急性毒性估計(jì)值急性毒性危害類別和急性毒性估計(jì)值(LD50(LD50或或 LC50)LC50)接觸途徑接觸途徑第一類第一類第二類第二類第

38、三類第三類第四類第四類第五類第五類經(jīng)口經(jīng)口(mg/kg）5503002000經(jīng)皮經(jīng)皮(mg/kg）50200100020005000氣體氣體(ppm，V)10050025005000蒸氣蒸氣(mg/L）0.52.01020粉塵與煙霧粉塵與煙霧(mg/L）0.050.51.052005年對(duì)年對(duì)2003年年WHO全球化學(xué)品統(tǒng)一分類和標(biāo)簽制度全球化學(xué)品統(tǒng)一分類和標(biāo)簽制度的修訂，的修訂，2008年全面實(shí)施。年全面實(shí)施。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版72Section 2局部刺激試驗(yàn)局部刺激試驗(yàn)（local irritation test）預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版73n局部刺激試驗(yàn)（局

39、部刺激試驗(yàn)（local irritation testlocal irritation test）: :目的是了解外源化學(xué)物對(duì)皮膚、眼睛的局目的是了解外源化學(xué)物對(duì)皮膚、眼睛的局部刺激性和腐蝕性，包括眼刺激、皮膚刺部刺激性和腐蝕性，包括眼刺激、皮膚刺激試驗(yàn)。激試驗(yàn)。n試驗(yàn)結(jié)果可以為制定化學(xué)物對(duì)眼睛和皮膚試驗(yàn)結(jié)果可以為制定化學(xué)物對(duì)眼睛和皮膚防護(hù)措施提供依據(jù)。防護(hù)措施提供依據(jù)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版74n皮膚致敏試驗(yàn)可了解化學(xué)物對(duì)哺乳動(dòng)物是皮膚致敏試驗(yàn)可了解化學(xué)物對(duì)哺乳動(dòng)物是否可以引起皮膚變態(tài)反應(yīng)及其程度。否可以引起皮膚變態(tài)反應(yīng)及其程度。n我國(guó)農(nóng)藥、化學(xué)品和消毒劑毒理學(xué)試驗(yàn)程我國(guó)農(nóng)藥、

40、化學(xué)品和消毒劑毒理學(xué)試驗(yàn)程序均規(guī)定局部刺激試驗(yàn)為必做項(xiàng)目。序均規(guī)定局部刺激試驗(yàn)為必做項(xiàng)目。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版75一、眼刺激試驗(yàn)一、眼刺激試驗(yàn)n眼原發(fā)性刺激試驗(yàn)（眼原發(fā)性刺激試驗(yàn)（eye primaryeye primary）: :觀察終點(diǎn)觀察終點(diǎn)為眼刺激和眼腐蝕。為眼刺激和眼腐蝕。n眼刺激性（眼刺激性（eye irritationeye irritation）: :指眼睛前表面指眼睛前表面接觸受試物后產(chǎn)生的眼睛可逆性炎癥變化。接觸受試物后產(chǎn)生的眼睛可逆性炎癥變化。n眼腐蝕性（眼腐蝕性（eye corrosioneye corrosion）: :指眼睛前表面接指眼睛前表面接觸受

41、試物后產(chǎn)生的眼睛不可逆性組織損傷。觸受試物后產(chǎn)生的眼睛不可逆性組織損傷。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版76眼刺激試驗(yàn)眼刺激試驗(yàn)n一般對(duì)皮膚產(chǎn)生刺激的強(qiáng)酸和強(qiáng)堿性物質(zhì)一般對(duì)皮膚產(chǎn)生刺激的強(qiáng)酸和強(qiáng)堿性物質(zhì)可免做眼刺激試驗(yàn)；可免做眼刺激試驗(yàn)；n而對(duì)于而對(duì)于PH接近中性的大部分化學(xué)物質(zhì)，其接近中性的大部分化學(xué)物質(zhì)，其對(duì)皮膚和眼的刺激性反應(yīng)結(jié)果不一定有關(guān)對(duì)皮膚和眼的刺激性反應(yīng)結(jié)果不一定有關(guān)系。系。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版77眼刺激試驗(yàn)眼刺激試驗(yàn)n目前眼刺激試驗(yàn)推薦的方法是目前眼刺激試驗(yàn)推薦的方法是Draize試驗(yàn)，試驗(yàn)，具體方法：使用白色家兔具體方法：使用白色家兔4只，每只兔的一只，每

42、只兔的一只眼睛滴入只眼睛滴入0.1ml受試物，另一只眼睛做對(duì)受試物，另一只眼睛做對(duì)照，觀察眼睛結(jié)膜、角膜和虹膜的反應(yīng)，照，觀察眼睛結(jié)膜、角膜和虹膜的反應(yīng)，按按規(guī)定分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分。進(jìn)行評(píng)分。n眼刺激試驗(yàn)一般觀察期限為眼刺激試驗(yàn)一般觀察期限為7天，必要時(shí)可天，必要時(shí)可延長(zhǎng)觀察時(shí)間到延長(zhǎng)觀察時(shí)間到21天；天；預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版78眼刺激評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)眼刺激評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)刺激程度刺激程度積分積分無(wú)刺激性無(wú)刺激性03輕度刺激性輕度刺激性48中度刺激性中度刺激性912強(qiáng)度刺激性強(qiáng)度刺激性1316預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版79眼刺激試驗(yàn)眼刺激試驗(yàn)nDraize試驗(yàn)以主觀判斷為主

43、，故實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)以主觀判斷為主，故實(shí)驗(yàn)室內(nèi)及實(shí)驗(yàn)室間有一定的差異。室內(nèi)及實(shí)驗(yàn)室間有一定的差異。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版80二、皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)二、皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)n皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)：皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)：包括單次和多次皮膚刺包括單次和多次皮膚刺激試驗(yàn)，完整皮膚和破損皮膚刺激試驗(yàn)等。激試驗(yàn)，完整皮膚和破損皮膚刺激試驗(yàn)等。觀觀察終點(diǎn)為皮膚刺激和皮膚腐蝕。察終點(diǎn)為皮膚刺激和皮膚腐蝕。n皮膚刺激（皮膚刺激（dermal irritation）:是指其皮膚接是指其皮膚接觸化學(xué)物后產(chǎn)生的局部可逆性的炎癥變化。觸化學(xué)物后產(chǎn)生的局部可逆性的炎癥變化。n皮膚腐蝕（皮膚腐蝕（dermal corros

44、ion）:是指皮膚接觸是指皮膚接觸化學(xué)物后產(chǎn)生的局部不可逆性組織損傷?；瘜W(xué)物后產(chǎn)生的局部不可逆性組織損傷。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版81皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)n皮膚刺激評(píng)價(jià)方法稱為皮膚刺激評(píng)價(jià)方法稱為Draize試驗(yàn)。試驗(yàn)。 n常用的動(dòng)物是家兔和豚鼠，因?yàn)檫@兩種動(dòng)常用的動(dòng)物是家兔和豚鼠，因?yàn)檫@兩種動(dòng)物的皮膚相對(duì)較敏感；物的皮膚相對(duì)較敏感；n觀察時(shí)間的長(zhǎng)短應(yīng)足以觀察到可逆或不可觀察時(shí)間的長(zhǎng)短應(yīng)足以觀察到可逆或不可逆刺激作用，一般不超過(guò)逆刺激作用，一般不超過(guò)14天。天。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版82皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)p具體方法：具體方法：n選擇健

45、康、成年的動(dòng)物；選擇健康、成年的動(dòng)物；n進(jìn)行脫毛：脫毛的方法、脫毛的面積（脫毛區(qū)進(jìn)行脫毛：脫毛的方法、脫毛的面積（脫毛區(qū)不可過(guò)大，為動(dòng)物體表面積的不可過(guò)大，為動(dòng)物體表面積的10%）、脫毛的）、脫毛的部位（背部皮膚，而不是脊柱表面的皮膚）；部位（背部皮膚，而不是脊柱表面的皮膚）；n染毒：涂抹好受試物后，用紗布覆蓋；染毒：涂抹好受試物后，用紗布覆蓋；n試驗(yàn)結(jié)束后，觀察涂抹部位皮膚有無(wú)充血、紅試驗(yàn)結(jié)束后，觀察涂抹部位皮膚有無(wú)充血、紅斑、水腫、潰瘍等表現(xiàn)。斑、水腫、潰瘍等表現(xiàn)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版83皮膚刺激反應(yīng)強(qiáng)度評(píng)價(jià)皮膚刺激反應(yīng)強(qiáng)度評(píng)價(jià)強(qiáng)度強(qiáng)度平均分值平均分值無(wú)刺激性無(wú)刺激性0.5

46、輕度刺激性輕度刺激性2.0中度刺激性中度刺激性4.0嚴(yán)重刺激性嚴(yán)重刺激性6.0預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版84皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)n破損皮膚刺激試驗(yàn)：是認(rèn)為地將動(dòng)物皮膚破損皮膚刺激試驗(yàn)：是認(rèn)為地將動(dòng)物皮膚某部位擦傷（不能傷及真皮產(chǎn)生出血），某部位擦傷（不能傷及真皮產(chǎn)生出血），比較受試物對(duì)完整皮膚及受損皮膚造成的比較受試物對(duì)完整皮膚及受損皮膚造成的刺激反應(yīng)的情況。傷口消毒用的產(chǎn)品常需刺激反應(yīng)的情況。傷口消毒用的產(chǎn)品常需要做破損皮膚刺激試驗(yàn)。要做破損皮膚刺激試驗(yàn)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版85下列情況下，不適宜做皮膚刺激試驗(yàn)：下列情況下，不適宜做皮膚刺激試驗(yàn)：n根

47、據(jù)結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系及理化性質(zhì)推測(cè)可能根據(jù)結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系及理化性質(zhì)推測(cè)可能有腐蝕性的物質(zhì)，如強(qiáng)酸和強(qiáng)堿；有腐蝕性的物質(zhì)，如強(qiáng)酸和強(qiáng)堿；n在急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)顯示有很強(qiáng)的系統(tǒng)毒在急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)顯示有很強(qiáng)的系統(tǒng)毒性的物質(zhì)；性的物質(zhì)；n在急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)中染毒劑量達(dá)在急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)中染毒劑量達(dá)2000mg/kg時(shí)仍未產(chǎn)生皮膚刺激體征的物質(zhì)。時(shí)仍未產(chǎn)生皮膚刺激體征的物質(zhì)。預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理chapter6115版86皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)皮膚原發(fā)性刺激試驗(yàn)影響皮膚刺激反應(yīng)的因素影響皮膚刺激反應(yīng)的因素:n皮膚的完整性；皮膚的完整性；n固態(tài)受試物的物理特性；固態(tài)受試物的物理特性；n固態(tài)受試物的溶解狀態(tài)；固態(tài)受試物的溶解狀態(tài)；n受試物在皮膚表面封閉染毒的嚴(yán)密程度；受試物在皮膚表面封閉染毒的嚴(yán)密程度；n試驗(yàn)的年齡、性別及受試部位的影響；試驗(yàn)的年齡、性別及受試部位的影響；n主觀判斷的差別；主觀判斷的差別；n物種的差異，皮膚反應(yīng)的敏感順序：物種的差異，皮膚反應(yīng)的敏感順序： 兔兔豚鼠豚鼠人人豬豬.預(yù)防醫(yī)學(xué)毒理cha