消毒滅菌效果監(jiān)測實施方案

1、吐哈石油醫(yī) 院 2015 年消 毒滅 菌效 果監(jiān)測 實施方案 醫(yī)院消毒是預防醫(yī)院內感染的重要措施之一， 消毒效果的監(jiān)測是評價其消毒 設備運轉是否正常、 消毒藥劑是否有效、 消毒方法是否合理、 消毒效果是否達標 的唯一手段。為規(guī)范消毒效果監(jiān)測，依據衛(wèi)計委 醫(yī)院感染管理辦法 、醫(yī)院感 染監(jiān)測規(guī)范、醫(yī)院消毒技術規(guī)范規(guī)范（ 2012版）特制定哈密地區(qū)中心醫(yī)院消 毒滅菌效果監(jiān)測實施方案。 一、監(jiān)測項目： 1. 空氣消毒效果的監(jiān)測； 2. 手和物體表面的消毒效果監(jiān)測； 3. 牙科用水的監(jiān)測； 4. 內鏡消毒及滅菌效果的監(jiān)測； 5. 使用中消毒劑及滅菌劑的監(jiān)測； 6. 壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測； 7. 血液透析

2、用水和透析液的監(jiān)測 8. 滅菌物品監(jiān)測 二、監(jiān)測單的填寫： 1. 空氣監(jiān)測：采樣地點、樣品名稱（空氣） 、采樣時間、采樣人，檢驗項目： 細菌總數、致病菌（如金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌等） 。 2. 物表監(jiān)測：采樣地點、物表名稱（注明所采物品的名稱和部位） 、采樣人、 采樣時間、檢驗項目、細菌總數、致病菌（如金黃色葡萄球菌等） 。 3. 手監(jiān)測：采樣地點、被監(jiān)測人姓名、采樣人、采樣時間、檢驗項目：細菌 總數、致病菌（如金黃色葡萄球菌等） 。 4. 其他物品的監(jiān)測： 采樣地點、樣品名稱、檢驗項目、采樣人、采樣時間等。 （一）空氣消毒效果的監(jiān)測 1. 監(jiān)測科室： 非潔凈手術室、產房、血透室、消毒供

3、應室等。 2. 監(jiān)測頻次：重點科室每 季度一次 ，如有疑似感染發(fā)生隨時采樣。 3. 采樣（沉降法） 采樣時間：空氣消毒后 4 小時內、操作前。 平板暴露法：（非潔凈手術室）暴露前先檢查平板是否污染， 是否有氣泡 及霉點。將普通營養(yǎng)瓊脂平板（直徑為 9cm）放在室內各采樣點處，采樣高度為 距地面0.8m- 1.5m，采樣時將平板蓋打開，斜扣放于平板旁，暴露15min，在 放置、收取平皿時，手不能在暴露平皿的正上方移動。 布點方法：室內面積w 30吊，設內、中、外對角線上的3點，內、外點布 點部位距墻1M處；室內面積30斥，設4角及中央共5點，4角的布點部位距 墻壁1m處 圖1室內面積w 30m

4、2布點圖圖2 室內面積30m 2的布點 cro on 圖 4. 注意事項 采樣前，關好門、窗，在無人走動的情況下，靜止 10min進行采樣 平板擺放如取一條對角線，避免離門近的一條。 工作人員不要靠近自動門，以免影響監(jiān)測結果。 5. 結果計算及報告 結果計算：空氣中菌落總數=cfu （皿、暴露時間） 監(jiān)測結果的判定及結果報告格式（見表 1） 表1非潔凈空氣監(jiān)測（II類、III類環(huán)境）的結果報告 樣品名稱 采樣地點 檢驗結果 標準 細菌總數 致病菌 細菌總數 致病菌 II類環(huán)境 某某空氣 cfu/ 15min . 90 皿 未檢出 w 4 cfu/15min . 90 皿 不得檢出 III類環(huán)境

5、 某某空氣 cfu/5min . 90 皿 未檢出 w 4 cfu/5min . 90 皿 不得檢出 注意事項 檢測結果為“ 0”時：細菌菌落總數應報告為Ocfu/分鐘數.皿 （二）手、物體表面消毒效果監(jiān)測 1、監(jiān)測重點科室：手術室、產房、導管室、重癥監(jiān)護病房、新生兒室、母嬰 室、血液透析病房、感染疾病科、口腔科、消毒供應中心等。 2、監(jiān)測頻次 重點科室物表每月監(jiān)測，工作人員手每季度監(jiān)測。 有醫(yī)院感染流行，懷疑與手衛(wèi)生或醫(yī)院環(huán)境衛(wèi)生學因素有關時，應及時進 行監(jiān)測。 3、手消毒效果的監(jiān)測 采樣時間：在接觸患者、進行診療活動前采樣。 采樣方法：被檢人五指并攏，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子

6、 在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦 2次（一只手涂擦面積約30cm2），并隨之 轉動采樣棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入10ml含相應中和劑的無 菌洗脫液試管內，立即送檢。 檢測方法：將采樣管用力振打80次，用無菌吸管吸取待檢樣品接種于滅菌 平皿，每一樣本接種2個平皿，平皿內加入已溶化的45C-48 C的營養(yǎng)瓊脂 15ml-18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置36C 1C溫箱培養(yǎng)48h，計數菌落數。 結果判定及報告 細菌菌落總數計算方法： 細菌菌落總數（cfu/cm2）=平板上菌落數x稀釋倍數/采樣面積（col） 采樣液的稀釋倍數為10 判定標準及報告格式： 一般醫(yī)護人員手不得檢出

7、大腸桿菌、 金黃色葡萄球菌；I類、U類區(qū)域工作 人員手不得檢出銅綠假單胞菌；母嬰同室、新生兒室及兒科病房工作人員手不得 檢出沙門氏菌，溶血性鏈球菌。結果報告及判定標準見表2。 表2手衛(wèi)生的結果報告及判定標準 樣品名稱 采樣地點 檢驗結果 標準 細菌總數致病菌 細菌總數 致病菌 手（張三） 某某科 2 cfu/ cm未檢出 衛(wèi)生手消毒w 10 cfu/ cm 外科手消毒w 5 cfu/ cm 不得檢出 不得檢出 檢測結果為“ 0”或細菌菌落總數不足“ 1 ”時：應報告為v 1cfu/ cmf;當 細菌菌落總數有小數時，按四舍五入計數。如cm2報1cfu/ cni, cO報2cfu/cmf。 注意

8、事項： 洗手后不要接觸未消毒的物品。 用消毒巾擦干，或控干手上的水分。 4. 物體表面消毒效果的監(jiān)測 物體表面的采樣：用5cm x 5cm的滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，采樣 面積100 cO，連續(xù)采樣4個，用浸有含相應中和劑或生理鹽水采樣液的棉拭 子1支，在規(guī)格板內橫豎往返涂擦各5次，并隨之轉動棉拭子，剪去手接觸部 位后，將棉拭子投入10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內。 門把手等不規(guī)則物體表面用棉拭子直接涂擦采樣。 注意事項 被采樣本表面積v 100cm取全部表面；被采樣本表面積100cnf，取100cnf。 不規(guī)則物體表面的采樣，盡量準確估算實際面積。 小型物體表面的結果計算，用cfu

9、/件表示，（國家現(xiàn)無評價標準，可估計面 積計算菌落總數，參照一般物表的標準進行評價）。 若消毒因子為化學消毒劑，采樣液中應加入相應中和劑。 結果判定及報告 結果計算： 采樣液的稀釋倍數為10;物體表面面積100cm的物表，按照100cm2計算。 判定標準及報告格式： 一般的物體表面不得檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌；母嬰同室、早產 兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門氏菌。結果報告及判定標 準見表3。 表3物體表面的結果報告及判定標準 檢驗結果標準 樣品名稱采樣地點 細菌總數致病菌 細菌總數 致病菌 I 類環(huán)境w 5 cfu/ cm2 治療臺面 某某科 cfu/ cm 未檢出 n

10、類環(huán)境w 5 cfu/ cm2 m類環(huán)境w 10 cfu/ cm 不得檢出 W類環(huán)境w 15 cfu/ cm 檢測結果為“ 0”或細菌菌落總數不足“ 1 ”時：應報告為V 1cfu/ cm2;當 細菌菌落總數有小數時，按四舍五入計數。如 cm報1cfu/ cm, cm報2cfu/cmL （三）滅菌物品的監(jiān)測 1、滅菌物品不做常規(guī)監(jiān)測，如懷疑醫(yī)院感染與滅菌物品有關時，可按下列方 法進行監(jiān)測。 2、采樣: 米樣時間：在火菌處理后，存放有效期內米樣。 采樣方法：用無菌操作打開器械包（敷料包），用沾有無菌洗脫液的棉拭子 反復涂抹手術鉗、鑷子等醫(yī)療器械（手術敷料），將棉拭子投入10ml無菌洗脫 液中，將

11、采樣液混勻。 檢驗方法：吸取被檢樣液接種15m需厭氧培養(yǎng)管（共6管，其中1管作陽 性對照），接種量為1ml/管，30C -35 C培養(yǎng)5天。再取接種15m霉菌培養(yǎng)管（共4 管，其中1管作陽性對照）25 T培養(yǎng)7天。 結果判定：陽性對照在24h內應有菌生長，陰性對照在培養(yǎng)期間應無菌生 長，如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管內均為澄清或雖顯混濁但經證明并非有菌生長， 判為滅菌合格；如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管中任何1管顯混濁并證實有菌生長，應 重新取樣，分別同法復試2次，除陽性對照外，其他各管均不得有菌生長，否 則判為滅菌不合格。 注意事項： 送檢時間不得超過6h，若樣品保存于0 C4C,則不得超過24h。 滅

12、菌物品采樣，應嚴格遵守無菌操作，避免微生物污染。 無菌檢驗應該在潔凈度為100級單向流空氣區(qū)域內進行采樣，對單向流向空 氣區(qū)域及工作臺面，必須進行潔凈度驗證。 4.檢測結果判定及報告可參考以下格式 表4敷料包、器械包的監(jiān)測報告 樣品名稱 采樣地點 檢驗結果 標準 需厭氧菌 霉菌 需厭氧菌 霉菌 敷料包 百級手術間 未檢出 未檢出 無菌生長 無菌生長 器械包 百級凈化臺 未檢出 未檢出 尢菌生長 無菌生長 （四）內鏡消毒、滅菌效果的監(jiān)測 1. 監(jiān)測時間：每季度進行 2. 采樣 采樣時間：在消毒滅菌后、使用前進行采樣。 采樣方法： 消毒后內鏡內腔面：取清洗消毒后內鏡，采用無菌注射器抽取50ml含相

13、應中 和劑的洗脫液，從內鏡活檢口注入沖洗內鏡管路，并全量收集進行檢驗。 3. 檢驗方法： 吸取被檢樣液接種平皿；將剩余洗脫液在無菌條件下采用濾膜（微米）過濾 濃縮，將濾膜接種于營養(yǎng)瓊脂平板上。 4. 結果判定及報告 菌落數/鏡=2個平皿菌落數的平均值X 20 消毒后的內鏡：細菌總數w 20cfu/件，并未檢出致病菌為合格。 表5 消毒后內鏡的檢驗結果及報告 樣品名稱 采樣地點 檢驗結果 標準 細菌總數 致病菌 細菌總數 致病菌 胃鏡內腔面 內鏡室 cfu/ 件 未檢出 20 cfu/ 件 不得檢出 注：致病菌指金黃色葡萄球菌、沙門氏菌，并不得檢出大腸桿菌。 平板菌落數為“ 0”時，細菌菌落總數

14、應報告為v 10cfu/件。 滅菌后內鏡：未檢出任何微生物為合格。 （五）使用中消毒、滅菌劑的監(jiān)測 1. 監(jiān)測時間 化學監(jiān)測：根據消毒、滅菌劑的性能設定監(jiān)測時間，如含氯消毒劑、過 氧乙酸等易揮發(fā)產品每日監(jiān)測；戊二醛監(jiān)測每周不少于一次。 生物監(jiān)測：消毒劑與滅菌劑每季度一次。 2. 結果的報告可參考以下格式： 表6戊二醛有效含量的結果報告 樣品名稱 采樣地點 檢驗項目 檢驗結果（） 2%戊二醛 口腔科 有效含量 3. 使用中消毒液染菌量測定 監(jiān)測樣品：碘伏、安爾碘、戊二醛 、含氯消毒液等。 采樣方法： 用無菌吸管吸取消毒液，加入含有相應中和劑混勻。醇類與酚類消毒劑 用普通營養(yǎng)肉湯中和，含氯消毒劑、

15、含碘消毒劑和過氧化物消毒劑用含硫代硫 酸鈉中和劑，醛類消毒劑用甘氨酸中和劑。 用無菌吸管吸取一定稀釋比例的中和后混合液接種平皿，將冷至 40C 45C的熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15ml20ml, 36C 1C恒溫箱培養(yǎng)72h,計 數菌落數。 結果計算及報告： 結果的計算：消毒液染菌量（cfu/ml ）=平均每皿菌落數x 10 x稀釋倍數 表7 消毒液的監(jiān)測結果報告及判定標準 樣品名稱 采樣地點 細菌染菌量 標準 消毒液染菌量 致病菌 火菌用消毒液 某某科 無菌生長 無菌生長 不得檢出 使用中皮膚黏膜消毒液染菌量 某某科 cfu/mL 10 cfu/mL 其他使用中消毒液染菌量 某某科 cfu

16、/mL 100 cfu/mL （七）壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測 1、監(jiān)測頻次 物理監(jiān)測：每鍋進行，并詳細記錄：滅菌壓力、溫度（波動范圍在+3C內）、 時間、鍋號、鍋次、滅菌操作者簽名等項。 化學監(jiān)測：每包進行外用化學指示物監(jiān)測，高度危險性物品包內應放置包 內化學指示物。 生物監(jiān)測：每周進行，對新滅菌器使用前或擬采用新包裝容器、 擺放方式、 排氣方式及特殊滅菌工藝，都必須進行生物監(jiān)測，合格后才能采用。滅菌植入型 器械應每批次進行生物監(jiān)測。 B-D試驗：預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器，每日進行一次B-D試驗。 可選擇具有代表性的PCD4行消毒滅菌效果監(jiān)測。 2、化學監(jiān)測法 化學指示卡：高危險性物品包內應

17、放置化學指示卡， 置于最難滅菌的部位； 化學指示膠帶：將化學指示膠帶粘貼于每一待滅菌物品包外，如果透過包 裝材料可直接觀察包內化學指示卡顏色變化，則包外不必貼化學指示膠帶； B-D試紙：預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器，每天滅菌前進行； 結果判定：通過觀察化學指示物顏色變化，判斷是否達到滅菌合格要求。 3、生物監(jiān)測法 指示菌株：耐熱的嗜熱脂肪桿菌芽抱（ATCC7953制備的壓力蒸汽滅菌生 物指示劑。 檢測方法：將1支生物指示劑管，置于標準試驗包中心部位。 下排氣壓力蒸汽滅菌器的監(jiān)測：在下排氣壓力蒸汽滅菌器滅菌柜室內 ，排氣 口上方放置一個標準試驗包（由3件平紋長袖手術衣，4塊小手術巾，2塊中手術

18、 巾, 1塊大毛巾，30塊10crX 10cm8層紗布敷料包裹成 25cmx 30cnX 30cm大?。? 預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器的監(jiān)測：預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌 器滅菌柜室內，排氣口上方放置一個標準測試包（由 16條41cmK 66cm全棉手術巾 制成，將每條手術巾的長邊先折成3層，短邊折成2層然后疊放，制成23cmx23cm x 15cm大小的測試包）； 小型壓力蒸汽滅菌器應選擇常用的有代表性的滅菌包作為生物測試包，包內 放置1支生物指示管，且滅菌器處于滿載狀態(tài)； 快速壓力蒸汽滅菌器應直接將1支生物指示管置于空載的滅菌器內； 經一個滅菌周期后，取出指示劑管，夾破管內安瓿，放于

19、56C培養(yǎng)箱中，同 時放1支未滅菌的指示管，夾破管內安瓿，做陽性對照；培養(yǎng) 48h，觀察結果。 結果報告：每個指示劑管的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基都不變色，判定為滅 菌合格；若由紫色變?yōu)辄S色時，則滅菌過程不合格。 （八）血液透析系統(tǒng)的監(jiān)測 1、監(jiān)測頻次 對入、出透析器的透析液：每月監(jiān)測一次。 對透析液內毒素：每季度監(jiān)測一次。 對透析用水化學污染物：每年一次。 疑有透析液污染或有嚴重感染病例時：應及時進行監(jiān)測，并增加采樣點， 如原水口、軟化水出口、反滲水出口、透析液配液口等。 檢查結果超標，必須復查。 2、樣品采集 對使用中的透析機入口液和出口液進行抽查采樣。 單一透析系統(tǒng)：采樣點為透析液入口及出口

20、，消毒后用無菌試管接原液5ml 即可。 3、檢測方法： 吸取原液標本加入血瓊脂平皿中均勻涂布，置 36E孵育箱培養(yǎng)48h，鑒定細菌 級計算每ml標本中的細菌菌落數。 4、監(jiān)測結果的判定及結果報告 結果計算：細菌總數（cfu/ml ）=平皿上的細菌菌落數x 5 表8 透析機出、入口液的監(jiān)測報告 樣品名稱 采樣地點 檢驗結果 標準 細菌總數 致病菌 細菌總數 致病菌 透析用水 透析中心 cfu/ml 未檢出 100 cfu/ ml 不得檢出 5、注意事項： 平板菌落數為“ 0”，細菌菌落總數應報告為v 100cfu/ml （九）潔凈手術室空氣監(jiān)測 1. 潔凈手術室空氣沉降菌濃度的測定: 采樣前的準

21、備工作 采樣前手術室與人員的準備：凈化機組開機時間滿 30分鐘后方可采樣；采 樣者必須穿著無菌工作服，采樣人員不超過 2人。 采樣培養(yǎng)皿的準備：用于測定的培養(yǎng)皿必需進行空白對照試驗；培養(yǎng)皿測點 數根據手術室的面積與級別而定；采樣點可布置在地面上或不高于地面 0.8米 的任意高度上。 采樣過程中的控制：采樣應在手術室處于清潔、靜止、密閉的狀態(tài)下進行； 培養(yǎng)皿放置妥當后人員迅速離開；采樣過程中禁止人員進入,手術室門保持關 閉狀態(tài)；采樣時間嚴格按照30分鐘執(zhí)行。 采樣點的布置：送風口集中布置的手術間，應對手術區(qū)和周邊區(qū)分別檢測， 當送風口分散布置時，全室統(tǒng)一檢測，但不應布置在送風口正下方。布點方法

22、見表9。 表9沉降菌采樣布點方法參考（空態(tài)或靜態(tài)） 等級 空氣潔凈程度等級 布點方法 最少點數 最少皿數 布點示意 正常值 I 手術區(qū) 100級 均勻布點 5 13 30min 90皿 周邊區(qū) 1000 級 每邊內兩點 8 5 30min 90 皿 n 手術區(qū) 1000 級 雙對角線 3 5 30min 90 皿 周邊區(qū) 10000 級 長邊內2點短邊內1點 6 3 30min 90 皿 出 手術區(qū) 10000 級 單對角線 3 3 30min 90 皿 周邊區(qū) 100000級 每邊內1點 4 3 30min 90 皿 采樣注意事項 布點時應從房間的里面開始，依次向外布放。收取平板時順序由外向里依次 收取。 空白對照：每次采樣設2次空白對照，第一次用于檢測培養(yǎng)皿（不打開平皿）， 第二次