酶工程制藥-藥智論壇.ppt

如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,第六章,酶工程制藥,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,酶工程是酶學(xué)和工程學(xué)相互滲透結(jié)合發(fā)展而形成的一門新的技術(shù)學(xué)科。它是從應(yīng)用的目的出發(fā)研究酶、應(yīng)用酶的特異性催化功能，并通過工程化將相應(yīng)原料轉(zhuǎn)化成有用物質(zhì)的技術(shù)。,一、酶工程簡介,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,二、酶的來源,大多數(shù)生物都是有用酶的來源，但只有有限數(shù)量的植物和動(dòng)物是經(jīng)濟(jì)的酶源，多數(shù)酶是從微生物獲得的。植物和動(dòng)物來源的酶一般是食品工業(yè)的重要用酶。,1.植物來源的酶木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、無花果蛋白酶、麥芽淀粉水解酶、大豆脂肪氧合酶等。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,2.動(dòng)物酶來源的酶豬胰蛋白酶和胃脂肪酶等。,3.微生物來源的酶微生物是酶制劑的重要來源，這是因?yàn)槲⑸锞邆淙缦聝?yōu)勢(shì)：微生物繁殖速度快細(xì)菌在合適的條件下2030min就可以繁殖一代，其生長速度為農(nóng)作物的500倍，為家畜的l000倍。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,3.微生物來源的酶微生物種類繁多，酶的品種全在不同環(huán)境下生存的微生物有不同的代謝途徑，可以產(chǎn)生適應(yīng)不同環(huán)境的酶分子，如高溫酶、中溫酶和低溫酶，耐高鹽酶，耐酸、堿酶等。微生物培養(yǎng)方法簡單微生物培養(yǎng)所用的原料大多為農(nóng)副產(chǎn)品，來源豐富，機(jī)械化程度高，易于大批量生產(chǎn)。連續(xù)發(fā)酵生產(chǎn)可以提供經(jīng)濟(jì)有效的酶制劑產(chǎn)品。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,3.微生物來源的酶利用微生物可以生產(chǎn)一些極端酶由于酶在應(yīng)用過程中常出現(xiàn)不穩(wěn)定現(xiàn)象，尤其在高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和高滲等極端條件下更易失活，因此限制了酶在工業(yè)上的應(yīng)用。利用嗜極菌生產(chǎn)的極端酶可克服這一缺陷。第一個(gè)極端酶嗜熱DNA聚合酶已成功地應(yīng)用于PCR技術(shù)。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,三、酶在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用,在疾病診斷方面的應(yīng)用在疾病治療方面的應(yīng)用在藥物生產(chǎn)方面的應(yīng)用在分析檢測(cè)方面的應(yīng)用,酶在醫(yī)藥領(lǐng)域的用途很廣，隨著酶分子修飾和酶固定化等酶技術(shù)的發(fā)展，將不斷擴(kuò)大酶在醫(yī)藥方面的應(yīng)用。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,1.在疾病診斷方面的應(yīng)用,酶學(xué)診斷方法是可靠、簡便又快捷的診斷方法。包括兩個(gè)方面：（1）根據(jù)體內(nèi)原有酶活力的變化來診斷某些疾??；（2）利用酶來測(cè)定體內(nèi)某些物質(zhì)的含量，從而診斷某些疾病。（1）根據(jù)體液內(nèi)酶活力變化診斷疾病一般健康人體液內(nèi)所含有的某些酶的量是恒定在某一范圍的，若出現(xiàn)某些疾病，則體液內(nèi)的某種或某些酶的活力將會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化。故此，可以根據(jù)體液內(nèi)某些酶的活力變化情況，而診斷出某些疾病。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,血清酶對(duì)某些疾病的診斷,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,酶具有專一性強(qiáng)、催化效率高等特點(diǎn)，可以利用酶來測(cè)定體液中某些物質(zhì)的含量，從而診斷某些疾病。例如：利用尿酸酶測(cè)定血液中尿酸的含量，從而診斷痛風(fēng)病。固定化尿酸酶巳在臨床診斷中使用。,（2）用酶測(cè)定體液中某些物質(zhì)的量診斷疾病,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,2.在疾病治療方面的應(yīng)用,酶作為藥物可以治療多種疾病。而且具有療效顯著、副作用小的特點(diǎn)，應(yīng)用日益廣泛。,（1）蛋白酶可用于治療多種疾病，是在臨床上使用最早，最廣的藥用酶之一。蛋白酶可作為消化劑，用于治療消化不良和食欲不振。使用時(shí)往往與淀粉酶，脂肪酶等制成復(fù)合制劑，以增加療效。作為消化劑使用時(shí)，蛋白酶一般制成片劑，以口服方式給藥。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,蛋白酶可作為消炎劑，治療各種炎癥有很好的療效。蛋白酶之所以有消炎作用，是由于它能分解一些蛋白質(zhì)和多肽，使炎癥部位的壞死組織溶解，增加組織的通透性，抑制浮腫，促進(jìn)病灶附近組織積液的排出并抑制肉芽的形成。給藥方式可以口服、局部外敷或肌肉注射等。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,蛋白酶經(jīng)靜脈注射，可治療高血壓。這是由于蛋白酶催化運(yùn)動(dòng)遲緩素原及胰血管舒張素原水解部分肽段而生成運(yùn)動(dòng)遲緩素和胰血管舒張素，使血壓下降。蛋白酶注射入人體后，可能引起抗原反應(yīng)。通過酶分子修飾技術(shù)，可使抗原性降低或消除。另外，蛋白酶在使用時(shí)還可能產(chǎn)生某些局部過敏反應(yīng)，要引起注意。目前臨床上使用的蛋白酶大部分來自動(dòng)物和植物，如胃蛋白酶和菠蘿蛋白酶等,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,（2）溶菌酶溶菌酶也是一種應(yīng)用廣泛的藥用酶，具有抗菌、消炎、鎮(zhèn)痛等作用。溶菌酶作用于細(xì)菌的細(xì)胞壁，可使病原菌，腐敗性細(xì)菌等溶解死滅，對(duì)抗生素有耐藥性的細(xì)菌同樣起溶菌作用，具有顯著療效而對(duì)人體的副作用很小，是一種較為理想的藥用酶。溶菌酶與抗生素聯(lián)合使用，可顯著提高抗生素的療效。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,（3）用酶制造各種藥物,酶在藥物制造方面的應(yīng)用是利用酶的催化作用將前體物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)樗幬铩，F(xiàn)已有不少藥物包括一些貴重藥物都是由酶法生產(chǎn)的。例如：,用青霉素?；负铣筛鞣N新型的內(nèi)酰胺抗生素，包括青霉素和頭孢霉素；用酪氨酸酶生產(chǎn)多巴(DOPA)；用蛋白酶生產(chǎn)各種氨基酸和蛋白質(zhì)水解液；用核糖核酸酶生產(chǎn)核苷酸類物質(zhì)；用核苷磷酸化酶生產(chǎn)阿拉伯糖腺嘌呤核苷(阿糖腺苷)；用多核苷酸磷酸化酶生產(chǎn)聚肌苷酸聚胞苷酸(聚肌胞)；用蛋白酶和羧肽酶將豬胰島素轉(zhuǎn)化為人胰島素。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,（4）酶在分析檢測(cè)方面的應(yīng)用,利用酶催化作用的高度專一性對(duì)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，巳成為物質(zhì)分析檢測(cè)的重要手段。,單酶反應(yīng)檢測(cè)多酶偶聯(lián)反應(yīng)檢測(cè)酶標(biāo)記免疫反應(yīng)檢測(cè),如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,單酶反應(yīng)檢測(cè),L谷氨酸脫羧酶L-谷氨酸脫羧酶專一地催化L-谷氨酸脫羧生成-氨基丁酸和二氧化碳，生成的CO2可以用氣體檢測(cè)法測(cè)定。該酶巳廣泛地用于L-谷氨酸的定量分析。可使用游離酶、固定化酶或酶電極。檢測(cè)CO2可以用華勃氏呼吸儀或CO2電極等。,利用單一種酶與底物反應(yīng)，然后用各種方法測(cè)出反應(yīng)前后物質(zhì)的變化，從而確定底物的量。這是最簡單的酶法檢測(cè)技術(shù)。使用的酶可以是游離酶，也可以是固定化酶或單酶電極等。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,脲酶脲酶能專一地催化尿素水解生成氨和CO2。通過氣體檢測(cè)或者使用氨電極、CO2電極、NH4+電極等，測(cè)出氨或CO2的量，就可確定尿素的量。葡萄糖氧化酶該酶催化葡萄糖與氧反應(yīng)生成葡萄糖酸和H2O2。通過測(cè)定酸的生成或氧的減少來確定葡萄糖的量，也可用pH電極、氧電極等測(cè)出葡萄糖的量。該酶巳廣泛用于食品，發(fā)酵工業(yè)和臨床診斷等方面。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,多酶偶聯(lián)反應(yīng)檢測(cè),多酶偶聯(lián)反應(yīng)檢測(cè)是利用兩種或兩種以上的酶的聯(lián)合作用，使底物通過兩步或多步反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為易于檢測(cè)的產(chǎn)物，從而測(cè)定被測(cè)物質(zhì)的量。多酶偶聯(lián)反應(yīng)檢測(cè)可克服單酶檢測(cè)易出現(xiàn)的其他物質(zhì)干擾，或檢測(cè)的靈敏度不高等缺點(diǎn)，使酶法檢測(cè)易于進(jìn)行并達(dá)到較理想的結(jié)果。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,葡萄糖氧化酶與過氧化物酶偶聯(lián),通過這兩種酶的聯(lián)合作用以檢測(cè)葡萄糖的含量。使用時(shí)先將葡萄糖氧化酶，過氧化物酶與還原型鄰聯(lián)甲苯胺一起用明膠共固定在濾紙條上制成酶試紙。測(cè)試時(shí)將酶試紙與樣品溶液接觸，在1060s的時(shí)間內(nèi)試紙即顯色。從顏色的深淺判定樣品液中葡萄糖的含量。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,葡萄糖氧化酶催化葡萄糖與氧反應(yīng)生成葡萄糖酸和H2O2，生成的H2O2在過氧化物酶的作用下分解為水和原子氧，新生態(tài)的原子氧將無色的還原型鄰聯(lián)苯甲胺氧化成藍(lán)色物質(zhì)。顏色的深淺與樣品中葡萄糖濃度成正比。隨著樣品中葡萄糖濃度的增加，酶試紙的顏色由粉紅一紫紅一紫色一藍(lán)色，不斷加深。其反應(yīng)過程如下：,此酶試紙已在臨床中用以測(cè)定血液或尿液中的葡萄糖含量，以診斷糖尿病。,酶偶聯(lián)法檢測(cè)葡萄糖原理：,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,酶標(biāo)記免疫反應(yīng)檢測(cè),用于測(cè)定樣品液中抗體或抗原含量的技術(shù)。先將適宜的酶與抗原或抗體結(jié)合在一起。若要測(cè)定樣品中抗原含量，就將酶與欲測(cè)定抗原的對(duì)應(yīng)抗體結(jié)合，制成酶標(biāo)抗體，反之，若要測(cè)定抗體，則需先制成酶標(biāo)抗原。然后其與樣品液中待測(cè)抗原（或抗體）通過免疫反應(yīng)結(jié)合在一起，形成酶抗體抗原復(fù)合物，測(cè)定復(fù)合物中酶的含量就可得出欲測(cè)抗原或抗體的量。常用于酶標(biāo)免疫測(cè)定的酶有堿性磷酸酶和過氧化氫酶等。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,堿性磷酸酶將堿性磷酸酶與抗體(或抗原)結(jié)合，制成堿性磷酸酶標(biāo)記抗體(或堿性磷酸酶標(biāo)記抗原)。該酶標(biāo)記抗體(或酶標(biāo)抗原)與樣品液中的對(duì)應(yīng)抗原(或抗體)，通過免疫反應(yīng)結(jié)合成堿性磷酸酶抗體抗原復(fù)合物。將該復(fù)合物與硝基酚磷酸(NPP)反應(yīng)。堿性磷酸酶催化NPP水解生成硝基酚和磷酸。硝基酚呈黃色，黃色的深淺與堿性磷酸酶的含量呈正比。故此，通過分光光度計(jì)測(cè)定420nm波長下的光吸收率，就可測(cè)出復(fù)合物中堿性磷酸酶的量，從而計(jì)算出欲測(cè)抗原(或抗體)的含量。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,酶標(biāo)免疫測(cè)定技術(shù)還可以應(yīng)用于某些具有親和力的生物分子對(duì)之間的測(cè)定。如用酶標(biāo)抗胰島素蛋白測(cè)定胰島素的含量，酶標(biāo)抗生物素蛋白測(cè)定生物素含量等。這類檢測(cè)的原理與酶標(biāo)免疫測(cè)定相類似，但由于不是抗體抗原間的免疫結(jié)合，只是分子對(duì)之間的親和結(jié)合，故稱為酶標(biāo)親和檢測(cè)。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,第二節(jié)酶和細(xì)胞的固定化,指限制或固定于特定空間位置的酶，具體來說，是指經(jīng)物理或化學(xué)方法處理，使酶變成不易隨水流失即運(yùn)動(dòng)受到限制，而又能發(fā)揮催化作用的酶制劑。,一、固定化酶的制備,固定化酶的定義,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,固定化酶的特點(diǎn)具有生物催化劑的功能，又有固相催化劑的功能?？啥啻问褂梅磻?yīng)后，酶底物產(chǎn)物易分開，產(chǎn)物中無殘留酶，易純化，產(chǎn)品質(zhì)量高。反應(yīng)條件易控制。酶的利用效率高。比水溶性酶更適合于多酶反應(yīng)。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,酶和細(xì)胞固定化方法載體結(jié)合法交聯(lián)法包埋法網(wǎng)格型微囊型物理吸附法離子結(jié)合法共價(jià)結(jié)合法熱處理（細(xì)胞）,酶的固定化方法與制備技術(shù),如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,酶和細(xì)胞固定化模式,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,酶和細(xì)胞的固定化載體,（1）吸附載體（2）包埋載體（3）交聯(lián)載體,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,固定化酶制備技術(shù)（1）吸附法制備固定化酶技術(shù)（2）包埋法制備固定化酶技術(shù)界面沉降法界面聚合法（3）交聯(lián)法制備固定化酶技術(shù)（4）共價(jià)結(jié)合法制備固定化酶技術(shù),如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,固定化細(xì)胞的定義將細(xì)胞限制或定位于特定空間位置的方法稱為細(xì)胞固定化技術(shù)。被限制或定位于特定空間位置的細(xì)胞稱為固定化細(xì)胞。,二、固定化細(xì)胞的制備,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,固定化細(xì)胞的特點(diǎn),抗污染能力強(qiáng)。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,固定化細(xì)胞的制備技術(shù)載體結(jié)合法是將細(xì)胞懸液直接與水不溶性的載體相結(jié)合的固定化方法。包埋法將細(xì)胞定位于凝膠網(wǎng)格內(nèi)的技術(shù)。交聯(lián)法用多功能試劑對(duì)細(xì)胞進(jìn)行交聯(lián)的固定化方法。無載體法靠細(xì)胞自身的絮凝作用制備固定化細(xì)胞的技術(shù)。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,固定化方法的選擇固定化酶應(yīng)用的安全性固定化酶在操作中的穩(wěn)定性固定化的成本載體的選擇書227頁表62,三、固定化方法與載體的選擇依據(jù),如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,固定化酶的形狀顆粒狀固定化酶纖維狀固定化酶膜狀固定化酶管狀固定化酶,四、固定化酶的形狀與性質(zhì),如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,固定化酶的性質(zhì)酶活力的變化酶穩(wěn)定性的變化操作穩(wěn)定性貯藏穩(wěn)定性熱穩(wěn)定性對(duì)蛋白酶的穩(wěn)定性,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,酶學(xué)特性的變化底物專一性最適pH最適溫度米氏常數(shù)最大反應(yīng)速度,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,第三節(jié)固定化酶和固定化細(xì)胞反應(yīng)器,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,一、反應(yīng)器的類型和特點(diǎn),特點(diǎn)：連續(xù)進(jìn)料、連續(xù)出料。,特點(diǎn)：反應(yīng)后隨即放料。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,特點(diǎn)：底物以恒定流速通過反應(yīng)床。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,循環(huán)反應(yīng)器部分反應(yīng)液流出和新加入底物流入液混合，在進(jìn)入反應(yīng)床進(jìn)行循環(huán)。,加正壓在膜兩邊產(chǎn)生壓差的方法產(chǎn)生負(fù)壓,膜式酶反應(yīng)器,原理加壓膜技術(shù)在酶反應(yīng)器中的應(yīng)用。與一般過濾一樣，主要依賴于被分離物質(zhì)分子量的大小、形狀和性質(zhì)不同，在一定的壓力差（外源N2或真空泵壓）下，使小分子能夠通過具有一定孔徑的特制薄膜，限額以上的大分子被膜阻留，使不同大小的分子得以分離。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,類型,反滲透操作壓達(dá)5002000磅/英寸2，膜的平均孔徑最小，一般為10-3m以下，用于分離小分子溶質(zhì)。超濾操作壓為5100磅/英寸2，膜的平均孔徑為10-3m10-2m，用于分離較大分子溶質(zhì)。微孔過濾操作壓5磅/英寸2，膜的平均孔徑為0.05m14m，用于分離大顆粒。,膜式酶反應(yīng)器,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,超濾(A)與反滲透(B)示意圖,超濾(A)與微孔過濾(B)示意圖,膜式酶反應(yīng)器,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,各種反應(yīng)器的示意圖,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,根據(jù)固定化酶的形狀來選擇根據(jù)底物的物理性質(zhì)來選擇根據(jù)反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)特性來選擇根據(jù)外界環(huán)境對(duì)酶的穩(wěn)定性的影響來選擇根據(jù)操作要求及反應(yīng)器費(fèi)用來選擇,二、反應(yīng)器的選擇依據(jù),如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,第四節(jié)酶的化學(xué)修飾,細(xì)胞外穩(wěn)定性差經(jīng)不起溫度、酸堿、有機(jī)溶劑及時(shí)間的考驗(yàn)，易變性失活。酶活性不夠高具有抗原性作為異體蛋白在體內(nèi)難于吸收、易引起免疫反應(yīng)和被識(shí)別降解。,限制酶大規(guī)模應(yīng)用的原因,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,通過化學(xué)基團(tuán)的引入或除去，使蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變稱為酶的化學(xué)修飾。只要選擇合適的修飾劑和修飾條件，在保持酶活性的基礎(chǔ)上，能夠在較大范圍內(nèi)改變酶的性質(zhì)，創(chuàng)造天然酶所不具備的優(yōu)良特性，甚至創(chuàng)造出新的活性。,1.概念,一、酶化學(xué)修飾概述,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,2.酶化學(xué)修飾的目的,人為改變天然酶的某些性質(zhì)，擴(kuò)大酶的應(yīng)用范圍。提高酶的生物活性（酶活力）。增強(qiáng)酶的穩(wěn)定性（熱穩(wěn)定性、體內(nèi)半衰期）。消除抗原性（針對(duì)特異性反應(yīng)降低生物識(shí)別能力）產(chǎn)生新的催化能力,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,1.酶的表面化學(xué)修飾（1）大分子修飾（大分子結(jié)合修飾）利用水溶性大分子與酶結(jié)合，使酶的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生某些精細(xì)的改變，從而改變酶的特性與功能的方法。是目前應(yīng)用最廣的酶分子修飾方法。修飾劑：聚乙二醇、右旋糖酐、肝素、蔗糖聚合物等。,二、酶化學(xué)修飾的方法,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,應(yīng)用：如：PEG超氧化物歧化酶（SOD）PEG溶血類蛋白質(zhì)（鏈激酶、尿激酶等）PEG天門冬酰胺酶（ASNase）消除了抗原性延長了酶在體內(nèi)的半衰期又如：用右旋糖酐修飾-淀粉酶，淀粉酶，胰蛋白酶、過氧化氫酶，提高了酶的熱穩(wěn)定性。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,（2）小分子修飾（酶蛋白側(cè)鏈基團(tuán)修飾）,通過選擇性的試劑或親和標(biāo)記試劑與酶分子側(cè)鏈上特定的功能基團(tuán)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。,（3）交聯(lián)修飾（交聯(lián)法）用雙功能基團(tuán)試劑(如戊二醛)，與酶分子內(nèi)不同肽鏈部分共價(jià)交聯(lián)，使酶分子空間構(gòu)象更加穩(wěn)定。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,（4）固定化修飾（共價(jià)偶聯(lián)法）通過酶表面的酸性或堿性殘基，將酶共價(jià)連接到惰性載體上，由于酶所處的微環(huán)境發(fā)生改變，使酶的最適pH、最適溫度和穩(wěn)定性發(fā)生改變。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,2.酶分子內(nèi)部修飾（1）非催化活性基團(tuán)的修飾經(jīng)常被修飾的殘基可以是親核的(Ser、Cys、Met、Thr、Lys、His)，也可以是親電的(Tyr、Trp)。對(duì)這類非催化殘基的修飾可改變酶的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，改變酶對(duì)特殊底物的束縛能力。,（2）蛋白主鏈修飾（肽鏈有限水解修飾）蛋白主鏈修飾采用酶法（用專一性較強(qiáng)的蛋白酶或肽酶為修飾劑）。例如：用蛋白酶對(duì)ATP酶有限水解，切除其十幾個(gè)殘基后，酶活力提高了5.5倍。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,通過選擇性修飾側(cè)鏈成分來實(shí)現(xiàn)氨基酸的取代，這種將一種氨基酸側(cè)鏈轉(zhuǎn)化為另一種新的氨基酸側(cè)鏈的方法叫化學(xué)突變法。,（3）催化活性基團(tuán)的修飾,如果輔因子與酶是非共價(jià)結(jié)合的，則可將輔因子共價(jià)結(jié)合于酶分子上。引入新的具有強(qiáng)反應(yīng)的輔因子金屬酶的金屬取代酶分子中的金屬離子取代可以改變酶的專一性、穩(wěn)定性及其抑制作用。,（4）與輔因子相關(guān)的修飾,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,（5）肽鏈伸展后的修飾,為了有效地修飾酶分子內(nèi)部的區(qū)域，可以先用脲、鹽酸胍處理酶，使其肽鏈充分伸展，為修飾酶分于內(nèi)部疏水基團(tuán)提供可能性。然后，讓修飾后伸展肽鏈在適當(dāng)條件下，重新折疊成具有某種催化活性的構(gòu)象。至今，尚未有成功的先例。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,三、修飾酶的特性,熱穩(wěn)定性提高抗原性消除對(duì)各類失活因子的能力提高體內(nèi)的半衰期延長最適pH改變酶學(xué)性質(zhì)改變對(duì)組織分布能力改變改變,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,第五節(jié)酶的分子工程,2.人工模擬酶,3.抗體酶,1.固定化酶,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,根據(jù)酶的作用原理，摸擬酶的活性中心和催化機(jī)理，用化學(xué)方法制備結(jié)構(gòu)較簡單、高效、高選擇性、穩(wěn)定性能好的新型催化劑,可以是無機(jī)化合物、有機(jī)化合物或小肽。,人工模擬酶,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,酶模型是人工合成的一類具有酶的某些屬性的有機(jī)化合物。雖然它的分子比較小，結(jié)構(gòu)比較簡單，但是含有酶所具有的主要活性基團(tuán)以及與酶的活性中心相似的空間結(jié)構(gòu)，能夠模擬酶的某些關(guān)鍵性功能。目前研究得比較多的主要是水解酶和單加氧酶模型。,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,人工模擬酶-benzyme,環(huán)糊精,催化側(cè)鏈,催化側(cè)鏈連接到環(huán)糊精上，可模擬胰凝乳蛋白酶,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,-環(huán)糊精的分子結(jié)構(gòu),如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,當(dāng)模板分子(印跡分子)與聚合物單體接觸時(shí)會(huì)形成多重作用點(diǎn)，通過聚合過程這種作用就會(huì)被記憶下來，當(dāng)模板分子除去后，聚合物中就形成了與模板分子空間構(gòu)型相匹配的具有多重作用點(diǎn)的空穴，這樣的空穴將對(duì)模板分子及其類似物具有選擇識(shí)別特性。,分子印跡技術(shù),如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,分子印跡示意圖,如果想要下載更多的資源請(qǐng)百度一下藥智論壇,抗體酶,抗體酶(abzyme)又稱催化抗體(catalyticantibody)一種具有催化功能的抗體分子，在其可變區(qū)賦予了酶的屬性。它是