果蠅雜交實驗計劃書.doc

果蠅雜交實驗計劃書生技08-1組員：劉曉瑜 080414113 侯交弟080414118 劉越 080414112 胡亞云 080414114一、實驗?zāi)康耐ㄟ^觀察具一對相對性狀差異的親本雜交，其F2代表現(xiàn)得分離現(xiàn)象，驗證分離定律的存在；通過觀察具兩對相對性狀差異的親本雜交，其F2代表現(xiàn)得分離現(xiàn)象，驗證自由組合定律的存在；驗證伴性遺傳規(guī)律，伴性基因與常染色體上等位基因分離定律想比較時，進一步理解兩者之間的區(qū)別與聯(lián)系。1、通過實驗掌握果蠅的雜交實驗2、驗證和加深理解遺傳定律的原理：分離定律自由組合定律伴性遺傳規(guī)律繪制遺傳圖的原理3、記錄實驗結(jié)果，掌握統(tǒng)計處理的方法及求重組值的方法、繪制遺傳圖的方法二、實驗原理及設(shè)計果蠅的染色體：選取雄性黑檀體果蠅（eeX+Y）和雌性三隱性果蠅（EEXWXW）作為親本。其中雄性為黑檀體、長翅、紅眼和直剛毛；雌性為灰體、小翅、白眼和卷剛毛。獲得F1代進行自交，統(tǒng)計F2代性狀及雌雄，數(shù)量等等，記錄?？刂萍t眼、長翅、直剛毛這三個形狀的基因在X染色體上，控制體色的基因在常染色體上，用EE或ee表示其基因型。黑檀體果蠅是野生型果蠅的突變體，即體色由灰色轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏?，其余形狀沒有改變。三隱形突變體形狀為白眼、小翅和卷剛毛，用XwXw表示。顯性性狀為紅眼、長翅和直剛毛，用X+Y表示。且白眼、小翅、卷剛毛這三個基因位于X染色體上連鎖。因此黑檀體雄性果蠅基因型為eeX+Y，雌性三隱性果蠅為EEXwXw。孟德爾分離定律：具一對相對性狀差異的親本雜交（單因子雜交），F(xiàn)1代為一對基因的雜合體，它們表現(xiàn)顯性性狀。雜合體中來自父本雄性生殖細胞和母本雌性生殖細胞的等位基因相互銀行獨立，在形成配子過程中，它們相互分離，分別進入到不同的配子中 ，從而產(chǎn)生兩種類型不同、數(shù)目相等的配子（不同配子的比例為1:1）, F1自交或互交時，由于雌雄配子的隨機結(jié)合，F(xiàn)2代基因型比例為1:2:1，在顯性完全時，表型分離比例為3:1孟德爾自由組合定律：具兩對或兩對以上相對性狀差異的親本雜交（雙因子或多因子雜交），F(xiàn)1代形成多對基因的雜合體，它們表現(xiàn)多種顯性性狀，F(xiàn)1代雜合體形成配子的過程中，一對等位基因按分離定律的彼此分離與另一結(jié)（或幾對）等位基因的彼此分離是相互獨立的，即不同對的等位基因是以自由組合的方式進入配子的。這樣兩對基因的雜合體可產(chǎn)生四種類型不同、數(shù)目相等的配子（四種類型的配子比例為1:1:1:1）,F1自交或互交時，由于精子、卵子的隨機組合，F(xiàn)2產(chǎn)生九種基因型，若顯性完全則出現(xiàn)四種表現(xiàn)型，它們的比例為9:3:3:1摩爾根通過試驗，提出了伴性遺傳規(guī)律即：位于性染色體上的基因所控制的性狀，伴隨性別傳遞給后代。摩爾根通過伴性遺傳實驗，第一次把一個特定的基因（控制白眼的基因）定位在一條特定的染色體（X染色體）上。連鎖互換定律：同源染色體上非等位基因間交換重組重組值（RF）=重組型數(shù)目（親組型數(shù)目+重組型數(shù)目）100%三點測交：位于同一條染色體上的基因稱為連鎖基因。同源染色體上的連鎖基因之間會發(fā)生一定頻率的交換，在子代中出現(xiàn)一定數(shù)量的重組型。重組型子代的多少反映出基因間發(fā)生交換的頻率的高低?；蛟谌旧w上是呈直線排列的，基因間距離越遠，發(fā)生交換的可能性就越大，反之亦然。連鎖基因間的距離與重組值的大小有關(guān)，則根據(jù)重組值可確定基因在染色體上的位置和排列順序，從而作出連鎖圖。具體如下：1、果蠅的單因子雜交實驗黑檀體與灰體P 黑體（ee）X灰體（EE）F1 灰體（Ee）2、果蠅的雙因子雜交實驗黑檀體正常翅果蠅與灰體小翅果蠅P灰體小翅（）（EExmxm）黑檀體長翅（）（eex+y） F1：灰體長翅(Eex+xm) 灰體小翅（Eexmy） F2：Exm1/4Ex+1/4exm1/4ex+1/4 Exm1/4 1/161/161/161/16 exm1/4 1/161/161/161/16 Ey1/4 1/161/161/161/16 ey1/4 1/161/161/161/16 灰體長翅：灰體小翅：黑體長翅：黑體小翅=3：3：1：1野生型果蠅與三隱性果蠅3、果蠅的伴性遺傳雜交實驗伴性遺傳實驗：反交 P xwxw(白眼) x+y(紅眼) F1 x+xw xwy (紅眼) （白眼）F2 x+xw xwxw x+y xwy (紅眼) （白眼） （紅眼） （白眼）4、果蠅的三點測交實驗果蠅的三點測驗的基因定位方法：（1） 三對基因雜合體的獲得，以三隱性（白眼、小翅、卷剛毛）雌蠅與黑檀體（紅眼、長翅、直剛毛）雄蠅進行雜交，得到三對基因的雜合體。 P w m sn3 + + + w m sn3 F1 w m sn3 w m sn3+ + + + + +(2) 測交：將三對基因雜合體自交,后代可獲得8種類型的果蠅，下面以一組實驗數(shù)據(jù)為例來進行白眼、小翅及卷剛毛三個基因的定位，統(tǒng)計后代雄性果蠅。F2代表型有：白眼 小翅 卷剛毛 470 紅眼 小翅 直剛毛 112紅眼 長翅 直剛毛 464 白眼 長翅 卷剛毛 71白眼 長翅 直剛毛 149 白眼 小翅 直剛毛 10紅眼 小翅 卷剛毛 131 紅眼 長翅 卷剛毛 14根據(jù)子二代的性狀和數(shù)據(jù)，可知白眼、小翅、卷剛毛和紅眼、長翅、直剛毛兩種親本類型的個體數(shù)量多;白眼、小翅、直剛毛和紅眼、長翅、卷剛毛兩種子代類型個體數(shù)最少，為雙交換類型。將親本型與雙交換型進行比較，哪個性狀發(fā)生了變化，則決定該性狀的基因一定居于另兩個基因之間。在本實驗中，控制剛毛的sn3的基因發(fā)生了變化，因此可以肯定決定剛毛性狀的基因居中，所以三個基因的順序應(yīng)為： w sn3 m(3) 將以上的雜交結(jié)果進行整理并計算交換值： w sn3 m 470 65.7% 親本型+ + + 464w + + 149 19.7% 單交換+ sn3 + 131w sn3 + 71 12.9% 單交換+ + m 112w + m 10 1.7% 雙交換+ sn3 + 14重組值的計算和基因作圖：w-sn3的重組值=19.7%+1.7%=21.4%sn3-m的重組值=12.9%+1.7%=14.6%w-m的重組值=19.7%+12.9%+21.7%+36.0%根據(jù)所得重組值，得出三個基因的順序和圖距如下： w 21.4 sn3 14.6 m三、果蠅生活史觀察：果蠅是完全變態(tài)昆蟲，生活周期可分為4個時期：卵、幼蟲、蛹和成蟲。卵：羽化后的雌蠅一般在12小時后開始交配，兩天后產(chǎn)卵。卵為白色，橢圓形，長約0.5mm，在背面的前端伸出一觸絲，附著在食物上。幼蟲：從卵孵化出來后，經(jīng)過兩次蛻皮，發(fā)育成三齡幼蟲，此時體長可達45cmm.肉眼可見其尖端稍尖部分為頭部，上有一黑色斑點為口器?？谄骱竺嬗幸粚ν该鞯耐僖合?透過提筆可見到一對生殖腺位于軀體后半部上方的兩側(cè),精巢較大,外觀上是一明顯的黑點,而卵巢則較小,可以此作為鑒別.幼蟲活動力強而貪食,他們在培養(yǎng)基上牌興時,留下很多條溝,夠多而且寬時,表明幼蟲生長力良好。蛹：幼蟲生活7-8天準備化蛹，化蛹前三齡幼蟲停止攝食，爬到相對干燥的瓶壁上，逐漸形成一梭形的蛹，在蛹前部有兩個呼吸孔，喉部有尾芽，起初蛹殼顏色淡黃而柔軟，以后逐漸硬化為深褐色，表明即將羽化了。成蟲：幼蟲在蛹殼內(nèi)完成成蟲體型和器官的分化，最后從蛹殼前爬出。剛從蛹殼里羽化出來的蟲體肥大，翅膀未展開，體表沒有完全幾丁質(zhì)化，故稱半透明的入白色，不久，變?yōu)槎檀賵A形，雙翅展開。體色加深。如果是野生型，起初為淺灰色，然后呈灰褐色。果蠅的最適培養(yǎng)溫度為20-25度，在25度的條件下，從卵發(fā)育到成蟲需十天左右，羽化后的成蟲壽命一般在四周左右，羽化12小時即可進行交配，2天后可以開始產(chǎn)卵。雌蠅體內(nèi)有儲精囊，做雜交實驗時，需要先將雌蠅和雄蠅分開?？梢韵胗靡颐褜⒐壜樽碇螅鶕?jù)雌雄蠅的不同特征將它們分開。雄蠅的前肢附節(jié)上有性梳，雌性沒有；雌性的腹部背面有五條黑紋，雄性的腹部背面有三條黑紋，最后一條極寬并延續(xù)至腹面腹部。四、實驗用品 1材料：三隱性突變型品系：雌蠅（wsn3m/wsn3m）和雄蠅（wsn3m/Y），黑檀體長翅（eeVgVg）2器材和儀器：隔水式恒溫培養(yǎng)箱，體式顯微鏡或普通光學顯微鏡，放大鏡，麻醉瓶、雙目解剖鏡、恒溫箱、高壓滅菌鍋、天平、培養(yǎng)瓶、白瓷板、鑷子、紗布、 吸水紙、牛皮紙、毛筆、油性筆、不干膠標簽、載玻片、蓋玻片。 3試劑：瓊脂，白糖或蔗糖，玉米粉，酵母（新鮮或干粉），苯甲酸，丙酸，乙醚，70%酒精，蒸餾水。五、實驗步驟 1、分別取部分三隱性果蠅和黑檀體果蠅，麻醉，從中挑出雌性三隱性和雄性黑檀體處女蠅各5只，放入一號瓶中進行雜交，并在瓶上做標簽。（4人共同負責）2、果蠅在瓶中交配，交配后大約40小時開始產(chǎn)卵，即第2天開始產(chǎn)卵，至第4、5天時出現(xiàn)產(chǎn)卵高峰。觀察并記錄果蠅的交配、產(chǎn)卵及其他特征性行為。（胡亞云和劉曉瑜一組，劉越和侯交弟一組，每次按組輪流觀察）3、F1代經(jīng)大約10天時間由蛹孵出變?yōu)槌上x，其間蛹變色時（未有F1代成蟲孵出時）將親代果蠅移出處死。觀察并詳細記錄果蠅由卵經(jīng)一齡幼蟲，兩次蛻皮后成蛹，至羽化的全過程。（劉越和侯交弟一組，胡亞云和劉曉瑜一組，每次按組輪流觀察）4、在新產(chǎn)生的F1代果蠅成蟲中選取20對移入2號瓶中。轉(zhuǎn)移時對果蠅雌雄，性狀及數(shù)量進行詳細記錄。1號瓶中的F1代果蠅完全羽化后，對所剩果蠅做統(tǒng)計，記錄雌雄，性狀及數(shù)量，然后移出處死。（四人全部負責）5、2號瓶中F1代果蠅開始雜交，得F2代。重復(fù)第2、3步驟，觀察并及時處理F1代果蠅。（劉越和侯交弟一組，胡亞云和劉曉瑜一組，每次按組輪流觀察）6、洗凈1號瓶，從發(fā)現(xiàn)F2代羽化后每天三次觀察將新羽化出的F2代移入1號瓶中，同時統(tǒng)計移出的F2代果蠅雌雄的數(shù)目，各個性狀及數(shù)量。重復(fù)該步驟至多10天（保證無F3代產(chǎn)生），直到對所有F2代都做過統(tǒng)計之后為止。（劉越和侯交弟一組，胡亞云和劉曉瑜一組，每次按組輪流觀察）7、處理數(shù)據(jù)，分析結(jié)果，與以實驗定律為基礎(chǔ)預(yù)期的結(jié)果相對照，驗證等位基因分離定律，非等位基因自由組合定律，連鎖互換及伴性遺傳的定律。（4人共同負責）培養(yǎng)基的配制：略備注：1、培養(yǎng)基由劉越和侯交弟負責。 2、4人共同負責指每八小時小組輪換觀察記錄，劉越和一、實驗?zāi)康耐ㄟ^觀察具一對相對性狀差異的親本雜交，其F2代表現(xiàn)得分離現(xiàn)象，驗證分離定律的存在；通過觀察具兩對相對性狀差異的親本雜交，其F2代表現(xiàn)得分離現(xiàn)象，驗證自由組合定律的存在；驗證伴性遺傳規(guī)律，伴性基因與常染色體上等位基因分離定律想比較時，進一步理解兩者之間的區(qū)別與聯(lián)系。1、通過實驗掌握果蠅的雜交實驗2、驗證和加深理解遺傳定律的原理：分離定律自由組合定律伴性遺傳規(guī)律繪制遺傳圖的原理3、記錄實驗結(jié)果，掌握統(tǒng)計處理的方法及求重組值的方法、繪制遺傳圖的方法二、實驗原理及設(shè)計果蠅的染色體：選取雄性黑檀體果蠅（eeX+Y）和雌性三隱性果蠅（EEXWXW）作為親本。其中雄性為黑檀體、長翅、紅眼和直剛毛；雌性為灰體、小翅、白眼和卷剛毛。獲得F1代進行自交，統(tǒng)計F2代性狀及雌雄，數(shù)量等等，記錄?？刂萍t眼、長翅、直剛毛這三個形狀的基因在X染色體上，控制體色的基因在常染色體上，用EE或ee表示其基因型。黑檀體果蠅是野生型果蠅的突變體，即體色由灰色轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏?，其余形狀沒有改變。三隱形突變體形狀為白眼、小翅和卷剛毛，用XwXw表示。顯性性狀為紅眼、長翅和直剛毛，用X+Y表示。且白眼、小翅、卷剛毛這三個基因位于X染色體上連鎖。因此黑檀體雄性果蠅基因型為eeX+Y，雌性三隱性果蠅為EEXwXw。孟德爾分離定律：具一對相對性狀差異的親本雜交（單因子雜交），F(xiàn)1代為一對基因的雜合體，它們表現(xiàn)顯性性狀。雜合體中來自父本雄性生殖細胞和母本雌性生殖細胞的等位基因相互銀行獨立，在形成配子過程中，它們相互分離，分別進入到不同的配子中 ，從而產(chǎn)生兩種類型不同、數(shù)目相等的配子（不同配子的比例為1:1）, F1自交或互交時，由于雌雄配子的隨機結(jié)合，F(xiàn)2代基因型比例為1:2:1，在顯性完全時，表型分離比例為3:1孟德爾自由組合定律：具兩對或兩對以上相對性狀差異的親本雜交（雙因子或多因子雜交），F(xiàn)1代形成多對基因的雜合體，它們表現(xiàn)多種顯性性狀，F(xiàn)1代雜合體形成配子的過程中，一對等位基因按分離定律的彼此分離與另一結(jié)（或幾對）等位基因的彼此分離是相互獨立的，即不同對的等位基因是以自由組合的方式進入配子的。這樣兩對基因的雜合體可產(chǎn)生四種類型不同、數(shù)目相等的配子（四種類型的配子比例為1:1:1:1）,F1自交或互交時，由于精子、卵子的隨機組合，F(xiàn)2產(chǎn)生九種基因型，若顯性完全則出現(xiàn)四種表現(xiàn)型，它們的比例為9:3:3:1摩爾根通過試驗，提出了伴性遺傳規(guī)律即：位于性染色體上的基因所控制的性狀，伴隨性別傳遞給后代。摩爾根通過伴性遺傳實驗，第一次把一個特定的基因（控制白眼的基因）定位在一條特定的染色體（X染色體）上。連鎖互換定律：同源染色體上非等位基因間交換重組重組值（RF）=重組型數(shù)目（親組型數(shù)目+重組型數(shù)目）100%三點測交：位于同一條染色體上的基因稱為連鎖基因。同源染色體上的連鎖基因之間會發(fā)生一定頻率的交換，在子代中出現(xiàn)一定數(shù)量的重組型。重組型子代的多少反映出基因間發(fā)生交換的頻率的高低。基因在染色體上是呈直線排列的，基因間距離越遠，發(fā)生交換的可能性就越大，反之亦然。連鎖基因間的距離與重組值的大小有關(guān)，則根據(jù)重組值可確定基因在染色體上的位置和排列順序，從而作出連鎖圖。具體如下：1、果蠅的單因子雜交實驗黑檀體與灰體P 黑體（ee）X灰體（EE）F1 灰體（Ee）2、果蠅的雙因子雜交實驗黑檀體正常翅果蠅與灰體小翅果蠅P灰體小翅（）（EExmxm）黑檀體長翅（）（eex+y） F1：灰體長翅(Eex+xm) 灰體小翅（Eexmy） F2：Exm1/4Ex+1/4exm1/4ex+1/4 Exm1/4 1/161/161/161/16 exm1/4 1/161/161/161/16 Ey1/4 1/161/161/161/16 ey1/4 1/161/161/161/16 灰體長翅：灰體小翅：黑體長翅：黑體小翅=3：3：1：1野生型果蠅與三隱性果蠅3、果蠅的伴性遺傳雜交實驗伴性遺傳實驗：反交 P xwxw(白眼) x+y(紅眼) F1 x+xw xwy (紅眼) （白眼）F2 x+xw xwxw x+y xwy (紅眼) （白眼） （紅眼） （白眼）4、果蠅的三點測交實驗果蠅的三點測驗的基因定位方法：（2） 三對基因雜合體的獲得，以三隱性（白眼、小翅、卷剛毛）雌蠅與黑檀體（紅眼、長翅、直剛毛）雄蠅進行雜交，得到三對基因的雜合體。 P w m sn3 + + + w m sn3 F1 w m sn3 w m sn3+ + + + + +(2) 測交：將三對基因雜合體自交,后代可獲得8種類型的果蠅，下面以一組實驗數(shù)據(jù)為例來進行白眼、小翅及卷剛毛三個基因的定位，統(tǒng)計后代雄性果蠅。F2代表型有：白眼 小翅 卷剛毛 470 紅眼 小翅 直剛毛 112紅眼 長翅 直剛毛 464 白眼 長翅 卷剛毛 71白眼 長翅 直剛毛 149 白眼 小翅 直剛毛 10紅眼 小翅 卷剛毛 131 紅眼 長翅 卷剛毛 14根據(jù)子二代的性狀和數(shù)據(jù)，可知白眼、小翅、卷剛毛和紅眼、長翅、直剛毛兩種親本類型的個體數(shù)量多;白眼、小翅、直剛毛和紅眼、長翅、卷剛毛兩種子代類型個體數(shù)最少，為雙交換類型。將親本型與雙交換型進行比較，哪個性狀發(fā)生了變化，則決定該性狀的基因一定居于另兩個基因之間。在本實驗中，控制剛毛的sn3的基因發(fā)生了變化，因此可以肯定決定剛毛性狀的基因居中，所以三個基因的順序應(yīng)為： w sn3 m(3) 將以上的雜交結(jié)果進行整理并計算交換值： w sn3 m 470 65.7% 親本型+ + + 464w + + 149 19.7% 單交換+ sn3 + 131w sn3 + 71 12.9% 單交換+ + m 112w + m 10 1.7% 雙交換+ sn3 + 14重組值的計算和基因作圖：w-sn3的重組值=19.7%+1.7%=21.4%sn3-m的重組值=12.9%+1.7%=14.6%w-m的重組值=19.7%+12.9%+21.7%+36.0%根據(jù)所得重組值，得出三個基因的順序和圖距如下： w 21.4 sn3 14.6 m三、果蠅生活史觀察：果蠅是完全變態(tài)昆蟲，生活周期可分為4個時期：卵、幼蟲、蛹和成蟲。卵：羽化后的雌蠅一般在12小時后開始交配，兩天后產(chǎn)卵。卵為白色，橢圓形，長約0.5mm，在背面的前端伸出一觸絲，附著在食物上。幼蟲：從卵孵化出來后，經(jīng)過兩次蛻皮，發(fā)育成三齡幼蟲，此時體長可達45cmm.肉眼可見其尖端稍尖部分為頭部，上有一黑色斑點為口器。口器后面有一對透明的唾液腺,透過提筆可見到一對生殖腺位于軀體后半部上方的兩側(cè),精巢較大,外觀上是一明顯的黑點,而卵巢則較小,可以此作為鑒別.幼蟲活動力強而貪食,他們在培養(yǎng)基上牌興時,留下很多條溝,夠多而且寬時,表明幼蟲生長力良好。蛹：幼蟲生活7-8天準備化蛹，化蛹前三齡幼蟲停止攝食，爬到相對干燥的瓶壁上，逐漸形成一梭形的蛹，在蛹前部有兩個呼吸孔，喉部有尾芽，起初蛹殼顏色淡黃而柔軟，以后逐漸硬化為深褐色，表明即將羽化了。成蟲：幼蟲在蛹殼內(nèi)完成成蟲體型和器官的分化，最后從蛹殼前爬出。剛從蛹殼里羽化出來的蟲體肥大，翅膀未展開，體表沒有完全幾丁質(zhì)化，故稱半透明的入白色，不久，變?yōu)槎檀賵A形，雙翅展開。體色加深。如果是野生型，起初為淺灰色，然后呈灰褐色。果蠅的最適培養(yǎng)溫度為20-25度，在25度的條件下，從卵發(fā)育到成蟲需十天左右，羽化后的成蟲壽命一般在四周左右，羽化12小時即可進行交配，2天后可以開始產(chǎn)卵。雌蠅體內(nèi)有儲精囊，做雜交實驗時，需要先將雌蠅和雄蠅分開。可以想用乙醚將果蠅麻醉之后，根據(jù)雌雄蠅的不同特征將它們分開。雄蠅的前肢附節(jié)上有性梳，雌性沒有；雌性的腹部背面有五條黑紋，雄性的腹部背面有三條黑紋，最后一條極寬并延續(xù)至腹面腹部。四、實驗用品 1材料：三隱性突變型品系：雌蠅（wsn3m/wsn3m）和雄蠅（wsn3m/Y），黑檀體長翅（eeVgVg）2器材和儀器：隔水式恒溫培養(yǎng)箱，體式顯微鏡或普通光學顯微鏡，放大鏡，麻醉瓶、雙目解剖鏡、恒溫箱、高壓滅菌鍋、天平、培養(yǎng)瓶、白瓷板、鑷子、紗布、 吸水紙、牛皮紙、毛筆、油性筆、不干膠標簽、載玻片、蓋玻片。 3試劑：瓊脂，白糖或蔗糖，玉米粉，酵母（新鮮或干粉），苯甲酸，丙酸，乙醚，70%酒精，蒸餾水。五、實驗步驟 1、分別取部分三隱性果蠅和黑檀體果蠅，麻醉，從中挑出雌性三隱性和雄性黑檀體處女蠅各5只，放入一號瓶中進行雜交，并在瓶上做標簽。（4人共同負責）2、果蠅在瓶中交配，交配后大約40小時開始產(chǎn)卵，即第2天開始產(chǎn)卵，至第4、5天時出現(xiàn)產(chǎn)卵高峰。觀察并記錄果蠅的交配、產(chǎn)卵及其他特征性行為。（胡亞云和劉曉瑜一組，劉越和侯交弟一組，每次按組輪流觀察）3、F1代經(jīng)大約10天時間由蛹孵出變?yōu)槌上x，其間蛹變色時（未有F1代成蟲孵出時）將親代果蠅移出處死。觀察并詳細記錄果蠅由卵經(jīng)一齡幼蟲，兩次蛻皮后成蛹，至羽化的全過程。（劉越和侯交弟一組，胡亞云和劉曉瑜一組，每次按組輪流觀察）4、在新產(chǎn)生的F1代果蠅成蟲中選取20對移入2號瓶中。轉(zhuǎn)移時對果蠅雌雄，性狀及數(shù)量進行詳細記錄。1號瓶中的F1代果蠅完全羽化后，對所剩果蠅做統(tǒng)計，記錄雌雄，性狀及數(shù)量，然后移出處死。（四人全部負責）5、2號瓶中F1代果蠅開始雜交，得F2代。重復(fù)第2、3步驟，觀察并及時處理F1代果蠅。（劉越和侯交弟一組，胡亞云和劉曉瑜一組，每次按組輪流觀察）6、洗凈1號瓶，從發(fā)現(xiàn)F2代羽化后每天三次觀察將新羽化出的F2代移入1號瓶中，同時統(tǒng)計移出的F2代果蠅雌雄的數(shù)目，各個性狀及數(shù)量。重復(fù)該步驟至多10天（保證無F3代產(chǎn)生），直到對所有F2代都做過統(tǒng)計之后為止。（劉越和侯交弟一組，胡亞云和劉曉瑜一組，每次按組輪流觀察）7、處理數(shù)據(jù)，分析結(jié)果，與以實驗定律為基礎(chǔ)預(yù)期的結(jié)果相對照，驗證等位基因分離定律，非等位基因自由組合定律，連鎖互換及伴性遺傳的定律。（4人共同負責）培養(yǎng)基的配制：略備注：1、培養(yǎng)基由劉越和侯交弟負責。 2、4人共同負責指每八小時小組輪換觀察記錄，劉越和侯交弟一組，胡亞云和劉曉瑜一組。六、觀察與統(tǒng)計表格1、果蠅生活史觀察記錄表格表一 果蠅生活史及行為觀察記錄表時間日期溫度（）卵幼蟲蛹成蟲其他狀況觀察人時間日期溫度（