蘇教版選修1 第一章 第一節(jié) 微生物的分離和培養(yǎng) 學案.doc

第一節(jié)微生物的分離和培養(yǎng)1.培養(yǎng)基中含有水、無機鹽、碳源、氮源和生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)。2培養(yǎng)基按化學組成可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基，按物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。3配制固體培養(yǎng)基的過程為：配制培養(yǎng)基調(diào)節(jié)ph分裝包扎滅菌擱置斜面。4消毒的目的是殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物，滅菌則是殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括孢子和芽孢。5接種的操作流程：準備接種接種環(huán)滅菌試管口滅菌挑取少許菌體劃線接種培養(yǎng)大腸桿菌。 培養(yǎng)基及接種操作1培養(yǎng)基(1)概念：為人工培養(yǎng)微生物而制備的適合微生物生長、繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。(2)種類：按物理性質(zhì)分：(3)營養(yǎng)成分：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽等，有時還要加入維生素等特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，并要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的ph使之滿足微生物生長的需要。 2接種(1)概念：在無菌條件下將微生物接入培養(yǎng)基的操作過程。(2)常用的接種工具：玻璃刮鏟、接種針、接種環(huán)等。(3)接種方法：用接種針進行穿刺接種。用接種環(huán)進行斜面接種或在固體培養(yǎng)基平板上進行劃線接種。用玻璃刮鏟涂抹平板接種等。3無菌操作(1)接種前：對所用試管、培養(yǎng)皿和微生物培養(yǎng)基進行滅菌。(2)接種時：在酒精燈火焰附近進行。(3)消毒和滅菌：消毒滅菌概念用較為溫和的物理學方法或化學方法殺滅物體上絕大多數(shù)微生物的方法采用強烈的物理學或化學方法使物體內(nèi)外所有的微生物永遠喪失生長和繁殖能力的方法。包括干熱滅菌和濕熱滅菌等方法殺滅效果絕大多數(shù)微生物所有微生物適用對象操作空間、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等1下面是察氏培養(yǎng)基(培養(yǎng)霉菌所用)的主要成分，請根據(jù)下述培養(yǎng)基，回答下列問題：成分質(zhì)量/g成分質(zhì)量/g蔗糖20mgso47h2o0.5nano33feso40.01k2hpo41瓊脂20kcl1水定容至1 000 ml(1)該培養(yǎng)基根據(jù)物理性質(zhì)劃分應(yīng)是什么培養(yǎng)基？為什么？提示：固體培養(yǎng)基。因為該培養(yǎng)基加入了凝固劑瓊脂。(2)該培養(yǎng)基包含微生物生長和繁殖所需要的幾類營養(yǎng)物質(zhì)？分別是什么？提示：4種成分。分別是碳源、氮源、無機鹽和水。(3)蔗糖提供的是哪類營養(yǎng)物質(zhì)？nano3提供的是哪類營養(yǎng)物質(zhì)？提示：蔗糖提供的是碳源。nano3提供的是氮源和無機鹽。(4)在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物所需要的哪些條件？提示：滿足微生物生長對ph、特殊營養(yǎng)物質(zhì)等的需要。2為什么要對培養(yǎng)基、接種環(huán)、實驗空間、一些液體等進行消毒或滅菌處理？提示：培養(yǎng)某種微生物的目的是獲得數(shù)量較多的、單一的該種微生物，如果不進行消毒或滅菌，則會出現(xiàn)其他一些雜菌，影響微生物的純度。3無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？提示：無菌技術(shù)還能有效避免操作者被微生物感染。1培養(yǎng)基的配制原則(1)目的要明確：不同的微生物需求不同，根據(jù)培養(yǎng)目的進行配制。(2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。(3)ph要適宜：為維持ph的相對恒定，可在培養(yǎng)基中加入緩沖劑，常用磷酸氫二鉀磷酸二氫鉀。特別提醒(1)營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低不能滿足微生物營養(yǎng)需要，過高對微生物的生長有抑制作用。(2)各種微生物適宜生長的ph范圍不同，如細菌的適宜ph約為6.57.5、放線菌的適宜ph約為7.58.5、真菌的適宜ph約為5.06.0。2培養(yǎng)基的成分營養(yǎng)物質(zhì)作用功能主要來源碳源能為微生物代謝提供碳元素構(gòu)成生物體的細胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機碳源：co2、nahco3等；有機碳源：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等氮源能為微生物的代謝提供氮元素合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無機化合物：n2、nh3、銨鹽、硝酸鹽等；有機氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生長因子是生長必不可少的酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等水是生命活動所必需的不僅是優(yōu)良的溶劑而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定外界攝入無機鹽為微生物提供除碳、氮以外的各種重要元素，包括大量元素細胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)節(jié)物質(zhì)，某些化能自養(yǎng)菌的能源，酶的激活劑無機化合物特別提醒某些微生物的代謝及特點硝化細菌：自養(yǎng)，需nh3或亞硝酸鹽做氮源。圓褐固氮菌：異養(yǎng)，培養(yǎng)基中不需加氮源。金黃色葡萄球菌：異養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加高濃度食鹽。破傷風桿菌：異養(yǎng)厭氧。大腸桿菌的接種與分離培養(yǎng)1配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基2斜面接種和培養(yǎng)大腸桿菌斜面接種大腸桿菌的主要目的有菌種轉(zhuǎn)移、擴大培養(yǎng)和保存純凈菌種等。具體操作：3平板劃線分離和培養(yǎng)大腸桿菌(1)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的平板制作：在酒精燈火焰旁一只手拿著裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，另一只手拔出瓶塞，使瓶口迅速通過火焰23次，并轉(zhuǎn)動瓶口，確保瓶口被滅菌。再取無菌培養(yǎng)皿，在火焰旁用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于錐形瓶瓶口的縫隙，將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中。等平板冷卻凝固后，將平板倒置備用。(2)平板劃線分離與培養(yǎng)大腸桿菌：平板劃線法的含義：用帶有微生物的接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面通過分區(qū)劃線而達到純化分離微生物的方法。注意事項：接種和劃線操作時需要在酒精燈火焰附近進行。培養(yǎng)結(jié)果：可以得到由單個細菌增殖而形成的菌落。1將培養(yǎng)基分裝到試管中時，為什么培養(yǎng)基的高度約為試管長度的1/5?提示：培養(yǎng)液加入試管的量為總?cè)莘e的1/5，其目的是為了后面的擱置斜面操作，而擱置斜面的目的是增大培養(yǎng)基表面積，以接種更多的微生物。2為什么要在酒精燈火焰附近接種？提示：酒精燈火焰附近的局部高溫使微生物難以存活，可避免接種過程中被其他雜菌污染。3接種24 h后培養(yǎng)基上長出了什么？肉眼看到的一個菌落肯定是由一個大腸桿菌生長和繁殖形成的嗎？提示：菌落。不一定，因為當兩個或多個細胞連在一起時，在平板上得到的還是一個菌落。1倒平板操作的注意事項(1)培養(yǎng)基要冷卻到50 左右時開始倒平板。其原因是瓊脂是一種多糖，在98 以上熔化，在44 以下凝固，倒平板時高于50 則會燙手，低于50 時若不能及時操作，瓊脂會凝固。(2)要使錐形瓶的瓶口通過火焰。通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。(3)倒平板時，要用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開，以免雜菌污染培養(yǎng)基。(4)平板冷凝后，要將平板倒置。因為平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，培養(yǎng)基表面的溫度也較高，平板倒置后，既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(5)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，那么這個平板不能用來培養(yǎng)微生物，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。(6)整個操作過程要在酒精燈火焰旁進行，避免雜菌污染。2幾種常用的劃線方法及注意事項(1)劃線方法：(2)交叉劃線中的注意事項：從操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束后，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的見下表：項目第一次劃線之前每次劃線之前劃線結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線后菌種數(shù)目減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者從第二次的劃線操作后的每次劃線總是從上一次劃線末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加逐漸減少，最終得到單個細菌繁殖而來的菌落。特別提醒(1)菌種管和接種管打開要迅速，接種完畢要及時用棉塞塞緊，以免被雜菌污染。(2)操作過程中注意溫度的控制，不要殺死大腸桿菌。(3)劃線動作要輕，不要劃破培養(yǎng)基表面。 以具體的實例為載體，考查培養(yǎng)基的成分例1下表是某微生物培養(yǎng)基成分，請據(jù)此回答：編號成分粉狀硫(nh4)2so4k2hpo4mgso4feso4cacl2h2o含量10 g0.4 g4.0 g9.25 g0.5 g0.5 g100 ml(1)上表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型是_。(2)若不慎將過量nacl加入培養(yǎng)基中，如不想浪費此培養(yǎng)基，可再加入_，用于培養(yǎng)_。(3)若除去成分，加入(ch2o)，該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)_。(4)表中營養(yǎng)成分共有_類。(5)不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進行的是_。(6)上表中各成分質(zhì)量確定的原則是_。(7)若上表培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分是_。思路點撥精講精析題表中的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機鹽、氮源三類，缺乏碳源和特殊營養(yǎng)物質(zhì)。該培養(yǎng)基中沒有碳源，說明培養(yǎng)的微生物是從空氣中獲得碳源的，即可判斷培養(yǎng)的微生物是自養(yǎng)型微生物。該培養(yǎng)基中加入了過量食鹽，就可以培養(yǎng)耐鹽的金黃色葡萄球菌，但金黃色葡萄球菌是異養(yǎng)型微生物，這個培養(yǎng)基還需要加入有機碳源。該培養(yǎng)基若加入(ch2o)，培養(yǎng)基中就有了碳源，但除去成分，卻使培養(yǎng)基中沒有了氮源，這時就只能用于培養(yǎng)固氮微生物了。微生物生長需要一定的ph，所以培養(yǎng)基裝瓶前需要調(diào)節(jié)ph。培養(yǎng)基中各成分含量要根據(jù)微生物的生長需要來確定。對于菌種鑒定，往往用的是固體培養(yǎng)基，而表中沒有凝固劑，故需要加入常見的凝固劑瓊脂。答案(1)自養(yǎng)型微生物(2)含碳有機物金黃色葡萄球菌(3)固氮微生物(4)三(5)調(diào)節(jié)ph(6)依微生物的生長需要確定(7)瓊脂(或凝固劑)微生物的營養(yǎng)物質(zhì)歸納(1)自養(yǎng)型微生物的碳源是無機碳(如co2)，異養(yǎng)型微生物的碳源是有機碳(如糖類)，由此可見培養(yǎng)不同類型的微生物，所用的培養(yǎng)基的組成成分不同，但一般微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)可分為五類：碳源、氮源、生長因子、水和無機鹽。(2)對異養(yǎng)微生物來說，含c、h、o、n的化合物既是碳源又是氮源和能源。(3)微生物之所以需要補充生長因子，往往是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。(4)一些天然物質(zhì)如酵母膏、蛋白胨、動植物組織提取液等可為微生物提供生長因子。(5)有些培養(yǎng)基不需要添加特殊營養(yǎng)物質(zhì)，生物自己能合成，如大腸桿菌能合成某些維生素，作為它的特殊營養(yǎng)物質(zhì)。下表是對四種生物的能源、碳源、氮源、新陳代謝類型的描述，正確的一組是()選項項目硝化細菌乳酸菌根瘤菌衣藻a能源nh3乳酸n2光能b碳源co2糖類等糖類等co2c氮源nh3n2n2nod代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型自養(yǎng)需氧型自養(yǎng)需氧型解析：選b從能源來看，乳酸菌需糖類等有機物供能；從氮源看，乳酸菌需要nh、no； 從代謝類型看，根瘤菌為異養(yǎng)需氧型；從碳源看，硝化細菌與衣藻需co2，乳酸菌和根瘤菌需糖類等有機物。微生物接種與分離方法例2(江蘇高考)某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()a培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌b轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線c接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)d培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次精講精析本題考查微生物的分離和培養(yǎng)。a項應(yīng)在培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿前進行滅菌。b項中，從前一區(qū)域劃線的末端開始往后一區(qū)域內(nèi)劃線之前，需要灼燒接種環(huán)。c項中有機廢水中的微生物只能利用現(xiàn)成的有機物，不能進行光合作用，沒有必要放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。d項中微生物的繁殖速度很快，應(yīng)培養(yǎng)24 h后觀察和記錄結(jié)果。答案b 課堂回扣練習1下列敘述正確的是()a培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)b培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基c固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基d微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的單個細菌解析：選a培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基的種類根據(jù)劃分依據(jù)的不同而不同，如根據(jù)化學成分可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基添加凝固劑形成的，其他成分均相同。單個的微生物形體微小，肉眼無法看到，必須借助儀器才能看到，在固體培養(yǎng)基上用肉眼觀察到的是一個菌落。2細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理方法，這些方法可分別用于殺滅哪些部位的雜菌()a接種針、手、培養(yǎng)基b高壓鍋、手、接種針c培養(yǎng)基、手、接種針 d接種針、手、高壓鍋解析：選c培養(yǎng)基通常用高壓蒸汽滅菌，常用酒精擦拭對手進行消毒，接種環(huán)、接種針等用火焰灼燒的方法進行滅菌。3右面是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序為12345。下列操作方法正確的是()a操作前不用做任何處理b劃線操作必須在火焰上進行c在每個區(qū)域中都可以得到所需菌落d在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌解析：選d每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目減少，以便得到菌落。劃線后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。4下列關(guān)于微生物營養(yǎng)物質(zhì)的描述正確的是()a同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源b除水以外的無機物僅提供無機鹽c凡是碳源都能提供能量d無機氮源也能提供能量解析：選d對異養(yǎng)型微生物來說，含c、h、o、n的化合物既是碳源又是氮源，如蛋白胨既是碳源又是氮源和能源。除水以外的無機物種類繁多，對不同的微生物起的作用可能不同，如co2是光能自養(yǎng)細菌的碳源，但不能提供能量；nahco3可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無機鹽；硝化細菌所利用的氮源是無機氮源氨，同時氨也為硝化細菌提供用于化能合成作用的能源。5為驗證某種中藥牙膏是否像其廣告宣傳的一樣具有較強的抑菌功效，老師帶領(lǐng)生物興趣小組的同學設(shè)計了如下實驗(實驗過程符合無菌操作要求)：用無菌水漱口，向漱口液中加入適量的該中藥牙膏；配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基；將上述樣品接種到培養(yǎng)基上，在適宜條件下進行培養(yǎng)；一段時間后，對培養(yǎng)結(jié)果進行觀察并進行菌落計數(shù)。請分析上述實驗過程并回答下列問題：(1)培養(yǎng)基中牛肉膏的作用主要是為微生物生長提供_等營養(yǎng)物質(zhì)；培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_。(2)如何證明所用培養(yǎng)基已經(jīng)徹底滅菌？_。(3)請指出本實驗設(shè)計中的一個明顯的錯誤，并加以改正。_。解析：該實驗的目的是檢驗?zāi)持兴幯栏嗍欠裼幸志π?。從實驗的操作可以看出，該實驗缺乏對照，?yīng)該將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏作為對照，其他操作相同。牛肉膏既是碳源也是氮源，還能為細菌生長提供磷酸鹽和維生素。培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。單獨將沒接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，如果沒有菌落產(chǎn)生，說明滅菌徹底，如果有菌落產(chǎn)生，說明還有殘菌未被殺滅。答案：(1)碳源、氮源、磷酸鹽、維生素高壓蒸汽滅菌法(2)對未接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，如無菌落出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基滅菌徹底(3)沒有設(shè)置對照實驗；應(yīng)將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏分別接種培養(yǎng)課下綜合檢測一、選擇題1不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含()a碳源、磷酸鹽和維生素b氮源和維生素c水、碳源、氮源和無機鹽d碳元素、氧元素、氫元素、氮元素解析：選c培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，此外還應(yīng)考慮ph、特殊營養(yǎng)物質(zhì)及o2等條件。2下列有關(guān)一種以co2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是()a氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素b碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)c無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)d水是該微生物的營養(yǎng)要素之一解析：選b該微生物以co2為唯一碳源，但co2不能為微生物提供能量，不屬于能源物質(zhì)。3高壓濕熱滅菌的操作順序應(yīng)該是()加水排冷氣裝滅菌物品100 kpa下滅菌加蓋0 kpa下排氣，打開滅菌鍋a bc d解析：選a高壓濕熱滅菌的使用包括加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓、出鍋等步驟。裝鍋是指將待滅菌物品放在滅菌桶中，蓋好鍋蓋，按對稱方法旋緊四周固定螺栓，打開排氣閥。4有關(guān)培養(yǎng)基配制原則表述正確的是()a任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長因子b碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素c微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受到ph、氧、滲透壓的影響d營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好解析：選c不同的微生物對每種成分的需求不同，所以培養(yǎng)基的成分也各有不同。培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。5細菌培養(yǎng)基的配制步驟是()a配制培養(yǎng)液、分裝、調(diào)節(jié)ph、滅菌、包扎、擱置斜面b配制培養(yǎng)液、滅菌、調(diào)節(jié)ph、包扎、分裝、擱置斜面c配制培養(yǎng)液、調(diào)節(jié)ph、分裝、包扎、滅菌、擱置斜面d配制培養(yǎng)液、滅菌、分裝、調(diào)節(jié)ph、包扎、擱置斜面解析：選c配制細菌培養(yǎng)基時，配制好培養(yǎng)液后應(yīng)先調(diào)節(jié)ph，再分裝、包扎、高壓蒸汽滅菌并冷卻后再擱置斜面。6下列有關(guān)倒平板操作錯誤的是()a將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上b使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰c將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上d等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置解析：選c整個倒平板過程要防止外來雜菌的入侵，因此，滅過菌的培養(yǎng)皿要放在火焰旁；打開的錐形瓶瓶口要迅速通過火焰；培養(yǎng)皿應(yīng)打開一條稍大于瓶口的縫隙，不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開；等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置。7將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37 恒溫箱的目的是()a對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用b對比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌c沒必要放入未接種的培養(yǎng)基d為了下次接種時再使用解析：選b通過設(shè)計對照實驗，目的是為了檢測培養(yǎng)基制備是否成功，即是否污染了雜菌。8下列關(guān)于對大腸桿菌的接種的敘述不正確的是()a接種環(huán)在接種的試管的斜面上輕輕劃“s”型曲線b在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿和接種環(huán)進行消毒c不能將剛剛灼燒過的接種環(huán)直接挑取菌種d使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄解析：選b對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進行滅菌而不是消毒；因為灼燒過的接種環(huán)溫度太高，直接接觸菌種會將菌種殺死，所以要將接種環(huán)接觸沒有菌種的培養(yǎng)基的頂端待溫度降低后再挑取菌種；有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素，所以使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。二、非選擇題9某學校打算開辟一塊食用菌栽培基地，以豐富學生的勞動技術(shù)課內(nèi)容。首先對食用菌實驗室進行清掃和消毒處理，準備食用菌栽培所需的各種原料和用具，然后從菌種站購來各種食用菌菌種。請回答下列問題：(1)對買回來的菌種進行擴大培養(yǎng)，首先制備試管培養(yǎng)基，寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料：_、_、_、_、_。其中提供氮源的是_；提供碳源的主要物質(zhì)是_。(2)微生物在生長過程中對各種成分所需量不同，配制培養(yǎng)基時各成分要有合適的_。在燒杯中加入瓊脂后要不停地_，防止_。(3)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干個試管一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入_中滅菌，壓力_ kpa，溫度_，時間_左右。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到0時，將試管取出。如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，此試管應(yīng)_。(4)使用高壓蒸汽滅菌鍋時注意，先向鍋內(nèi)倒入_，把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。(5)從一支試管向另一支試管接種時注意，接種環(huán)要在酒精燈_(填“內(nèi)”或“外”)焰滅菌，并且待接種環(huán)_后蘸取菌種，試管口不能離開酒精燈火焰附近，將接種的試管在適溫下培養(yǎng)，長成菌落后放入_冰箱中保存。解析：(1)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方：牛肉膏蛋白胨nacl瓊脂蒸餾水5.0 g10.0 g5.0 g15.0 g1 000 ml由配方可知所需的原料；凡能提供所需氮元素的物質(zhì)為氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。(2)在配制培養(yǎng)基時營養(yǎng)要協(xié)調(diào)，按所培養(yǎng)微生物對各種成分的需求確定；在加入瓊脂后，要不斷攪拌，防止瓊脂糊底而導(dǎo)致