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文檔簡介
八、現(xiàn)代生物科技專題12018全國卷回答下列問題:(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細胞中進行了表達。該研究除證明了質(zhì)??梢宰鳛檩d體外,還證明了_(答出兩點即可)。(2)體外重組的質(zhì)粒可通過Ca2參與的_方法導(dǎo)入大腸桿菌細胞;而體外重組的噬菌體DNA通常需與_組裝成完整噬菌體后,才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細胞。在細菌、心肌細胞、葉肉細胞中,可作為重組噬菌體宿主細胞的是_。(3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細胞內(nèi)表達時,表達出的蛋白質(zhì)可能會被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解,在實驗中應(yīng)選用_的大腸桿菌作為受體細胞,在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加_的抑制劑。22018全國卷某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達。某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5末端,獲得了L1GFP融合基因(簡稱為甲),并將其插入質(zhì)粒P0,構(gòu)建了真核表達載體P1,其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點的示意圖如下,圖中E1E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。回答下列問題:(1)據(jù)圖推斷,該團隊在將甲插入質(zhì)粒P0時,使用了兩種限制酶,這兩種酶是_。使用這兩種酶進行酶切是為了保證_,也是為了保證_。(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培育的牛皮膚細胞后,若在該細胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了_和_過程。(3)為了獲得含有甲的牛,該團隊需要做的工作包括:將能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的_移入牛的_中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。(4)為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中,某同學(xué)用PCR方法進行鑒定,在鑒定時應(yīng)分別以該牛不同組織細胞中的_(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。32018全國卷2018年細胞期刊報道,中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細胞對非人靈長類動物進行克隆,獲得兩只克隆猴“中中”和“華華”?;卮鹣铝袉栴}:(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程,核移植是指_。通過核移植方法獲得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細胞的染色體數(shù)目_(填“減半”“加倍”或“不變”)。(2)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植,胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難度_(填“大于”或“小于”)體細胞核移植,其原因是_。(3)在哺乳動物核移植的過程中,若分別以雌性個體和雄性個體的體細胞作為核供體,通常,所得到的兩個克隆動物體細胞的常染色體數(shù)目_(填“相同”或“不同”),性染色體組合_(填“相同”或“不同”)。42018江蘇卷為生產(chǎn)具有特定性能的淀粉酶,研究人員從某種海洋細菌中克隆了淀粉酶基因(1 656個堿基對),利用基因工程大量制備淀粉酶,實驗流程見右圖。請回答下列問題:(1)利用PCR技術(shù)擴增淀粉酶基因前,需先獲得細菌的_。(2)為了便于擴增的DNA片段與表達載體連接,需在引物的_端加上限制性酶切位點,且常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點,主要目的是_。(3)進行擴增時,反應(yīng)的溫度和時間需根據(jù)具體情況進行設(shè)定,下列選項中_的設(shè)定與引物有關(guān),_的設(shè)定與擴增片段的長度有關(guān)。(填序號)變性溫度退火溫度延伸溫度變性時間退火時間延伸時間(4)下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼淀粉酶的mRNA的部分堿基序列:圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含_個密碼子,如虛線框后的序列未知,預(yù)測虛線框后的第一個密碼子最多有_種。(5)獲得工程菌表達的淀粉酶后,為探究影響酶活性的因素,以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測定酶活性,結(jié)果如下表所示:緩沖液50 mmol/L Na2HPO4KH2PO450 mmol/L TrisHCl50 mmol/L GlyNaOHpH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5酶相對活性%25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8根據(jù)上述實驗結(jié)果,初步判斷該淀粉酶活性最高的條件為_。52018河北武邑中學(xué)調(diào)考如圖列舉了幾種植物的育種方式,請據(jù)圖回答相關(guān)問題:(1)甲育種方式稱為_,該過程用到的酶有_和_。(2)愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度_化的呈無定型狀的_細胞。(3)通過丁方式可以獲得脫毒苗,培養(yǎng)過程中c常常取用莖尖的原因是_。(4)丙方式將外源目的基因?qū)胧荏w植物細胞,最常采用的方法是_。(5)甲、丙兩種育種方式與傳統(tǒng)雜交育種相比,其優(yōu)點是_。62018河北正定中學(xué)調(diào)研干擾素是治療癌癥的藥物,其成分是一種糖蛋白,它必須從血液中提取,每升人血中只能提取0.05 g,所以價格昂貴?,F(xiàn)在美國加利福尼亞的基因公司用如圖所示的方式生產(chǎn)干擾素,試分析并回答下列問題:(1)從人的淋巴細胞中取出_,使它同質(zhì)粒相結(jié)合,然后移植到酵母菌體內(nèi),讓酵母菌_。(2)有人嘗試將干擾素基因與大腸桿菌的質(zhì)粒重組,轉(zhuǎn)入大腸桿菌體內(nèi)后,形成“工程菌”,此種操作能制備到干擾素嗎?_,請說明理由:_。(3)中國青年科學(xué)家陳炬成功地把人的干擾素基因移植到煙草的DNA分子上,使煙草獲得了抗病毒的能力,試分析:人的基因之所以能移接到植物體內(nèi),其物質(zhì)基礎(chǔ)是_。煙草有了抗病能力,這表明煙草體內(nèi)產(chǎn)生了_。這個事實說明,人和植物共用一套_,蛋白質(zhì)合成方式_(基本相同/大不相同)。72018內(nèi)蒙古奮斗中學(xué)如圖為蛋白質(zhì)工程操作的基本思路,請據(jù)圖回答下列問題:(1)寫出圖中各數(shù)字代表的生物學(xué)過程的名稱或內(nèi)容:_;_;_;_。(2)蛋白質(zhì)工程的目的是_,通過_來實現(xiàn)。(3)代表蛋白質(zhì)工程操作思路的過程是_(填寫數(shù)字);代表中心法則內(nèi)容的是_(填寫數(shù)字)。82018河南實驗中學(xué)聯(lián)考如圖為純種荷斯坦小奶牛的繁殖過程,請據(jù)圖回答下列問題。(1)克隆動物培育過程與圖示繁殖過程相比,特有的技術(shù)手段是_。兩種動物繁殖的方式相比,實質(zhì)性的區(qū)別為前者是_,后者是_。(2)一般用_激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。(3)為了提高胚胎的利用率,可以采用_技術(shù)處理早期胚胎,如果選擇囊胚階段的早期胚胎,在分割時需要注意_。(4)如果培育轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛,可采用_技術(shù)將藥用蛋白基因?qū)氲绞芫阎校⒉捎胈技術(shù)檢測受體細胞中的染色體DNA上是否插入了目的基因。92018河南安陽聯(lián)考下圖表示從蘇云金芽孢桿菌分離出來的殺蟲晶體蛋白質(zhì)基因(簡稱Bt基因)及形成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的圖解。請據(jù)圖回答下面的問題:(1)圖中a過程要用到的酶是_。(2)為確定抗蟲棉是否培育成功,既要用放射性同位素標記的_作探針進行分子雜交測試,又要在個體水平上鑒定,后者具體過程是_。(3)活化的毒性物質(zhì)應(yīng)是一種_分子,可以全部或部分嵌合于昆蟲的細胞膜上,使細胞膜產(chǎn)生孔道,導(dǎo)致細胞由于滲透平衡的破壞而破裂。(4)我國在“863”計劃資助下開展Bt抗蟲棉、抗蟲水稻等研究,可以減少農(nóng)藥、殺蟲劑的使用,這將對_起到重要作用。10回答下列有關(guān)基因工程的問題:嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的葡萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶,為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用,開展了以下試驗。(1)通常情況下,獲得的目的基因需要進行擴增,最簡便的方法是_技術(shù)。(2)如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。下表為限制酶的酶切位點。限制酶BamHHindEcoRNde識別序列及切割位點GGATCCAAGCTTGAATTCCATATG圖示的質(zhì)粒上有多個酶切位點,本實驗中沒有選擇Xba酶切割質(zhì)粒,原因是_。(3)分析圖示,可選擇兩種不同的限制酶_切割質(zhì)粒,以防止質(zhì)粒自身環(huán)化。質(zhì)粒被切割后,可用DNA連接酶將其與目的基因連接。在動物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細胞時通常的方法是_。(4)大腸桿菌不能降解纖維素,但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達載體后則獲得了降解纖維素的能力,這是因為_。112018湖北十堰聯(lián)考科學(xué)家已分離出H7N9病毒(一種RNA病毒)。某制藥廠根據(jù)下面流程圖生產(chǎn)出預(yù)防和治療甲流的抗體,請據(jù)圖回答有關(guān)問題:(1)若A細胞是小鼠骨髓瘤細胞,則B細胞是取自感染病毒的人體內(nèi)的_細胞,促進d過程的常用誘導(dǎo)劑是_。(2)假設(shè)僅考慮某兩個細胞的融合,則可形成_種類型的C細胞,因此需用培養(yǎng)基篩選出_(填特點)的D細胞用于培養(yǎng)。D細胞的名稱是_。(3)理論上,注射了該抗體的人群不能長期對甲流免疫,試分析原因:_。(4)不同種動物的體細胞融合,相比誘變育種和雜交育種方法,具有_等突出的特點。(5)請說明不能用單個B淋巴細胞獲得大量抗體的原因:_。 (6)單克隆抗體的主要用途有_。122018河北冀州中學(xué)調(diào)考科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛,如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育,可以對此轉(zhuǎn)基因奶牛進行克隆(如圖所示)。請結(jié)合圖示回答下列問題:(1)在進行細胞培養(yǎng)時,要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細胞進行分散處理,形成單個細胞,這個過程中需要利用_酶處理。(2)用于核移植的供體細胞,一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞,原因是_。(3)在進行原代培養(yǎng)時,細胞增殖的方式是_,此外,細胞增殖還表現(xiàn)出_和接觸抑制等特點。(4)將進行培養(yǎng)的供體細胞注入去核的卵母細胞中,去除卵母細胞細胞核的目的是_。(5)將重組細胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后,該母牛就會生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢,但也不是100%復(fù)制,原因最可能是_。(6)上述動物細胞工程中涉及的技術(shù)有_。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功,說明了動物的_具有全能性。13回答下列有關(guān)胚胎工程的問題:(1)從母牛體內(nèi)獲得的卵母細胞需要培養(yǎng)到_(時期)才能與精子受精。在體外培養(yǎng)受精卵時,需要滿足以下條件:_、營養(yǎng)、溫度和pH以及氣體。(2)通過試管動物技術(shù)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后,再經(jīng)_、_可產(chǎn)生多個基因型相同的后代。(3)胚胎移植時,供、受體應(yīng)處于相同的生理狀況,此時可利用激素對供、受體進行_處理;此外,受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生_反應(yīng),這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能,胚胎移植的優(yōu)勢在于供體的主要職能變?yōu)開。(4)生產(chǎn)上常用_期的胚胎送入母體內(nèi),使其生長發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物。而在制備乳腺生物反應(yīng)器的過程中,科學(xué)家將生長激素基因與_的啟動子等調(diào)控組件重組在一起,通過_等方法導(dǎo)入哺乳動物的受精卵中。142018天津靜海一中期末生態(tài)工程的建設(shè)已經(jīng)成為社會關(guān)注的熱點。近日,北京頻繁發(fā)生的霧霾嚴重影響人們的生活,天津港火災(zāi)爆炸事故遺址將在徹底清理后建成海港生態(tài)公園,這再次將生態(tài)環(huán)境與生態(tài)經(jīng)濟推上輿論的焦點。請回答下列問題:(1)生態(tài)工程建設(shè)的目的是遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止環(huán)境污染,達到_的同步發(fā)展。與傳統(tǒng)的工程相比,生態(tài)工程是一類_的工程體系。(2)山西省為產(chǎn)煤大省,生態(tài)環(huán)境破壞嚴重,礦區(qū)廢棄地的生態(tài)恢復(fù)工程的關(guān)鍵在于_,具體實施的措施有_(答兩點)。(3)某農(nóng)村生態(tài)工程以沼氣工程為中心,各類植物的秸稈、枝葉用來生產(chǎn)飼料喂養(yǎng)畜、禽、魚,人、畜、禽的糞便作為原料生產(chǎn)沼氣,沼渣水返還農(nóng)田、菜園、果園、苗圃、魚塘,這主要體現(xiàn)了生態(tài)工程的_原理。該生態(tài)工程建設(shè)中,魚塘中每一種魚苗的投放量都不宜超過其_。該生態(tài)系統(tǒng)把魚塘、農(nóng)田、果園等有機地組合在一起,優(yōu)化了系統(tǒng)結(jié)構(gòu),遵循_原理。在該生態(tài)工程中,種植不同的農(nóng)作物、果樹,飼養(yǎng)多種畜禽,這體現(xiàn)了生態(tài)工程的_原理。(4)一般來說,生態(tài)工程的主要任務(wù)是對_進行修復(fù),對造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進行改善,并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。(5)在應(yīng)用植物修復(fù)技術(shù)治理重金屬污染的土壤時,需選擇符合要求的植物,這遵循了生態(tài)工程的_原理。152018云南曲靖一中聯(lián)考人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示。(1)卵母細胞除從活體輸卵管中采集外,還可以從已處死的雌鼠_中獲取。(2)圖中的高血壓相關(guān)基因作為_,質(zhì)粒作為_,二者需用_切割后連接成重組載體,該過程與質(zhì)粒上含有_有關(guān)。(3)子代大鼠如果_和_,即可分別在分子水平和個體水平上說明高血壓相關(guān)基因已成功表達,然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動物模型。(4)在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中,所用到的主要胚胎工程技術(shù)是_、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。162018云南大理聯(lián)考以下是科學(xué)家采用不同方法培育良種牛的過程,ah為操作過程,請據(jù)圖回答有關(guān)問題:(1)“試管?!奔夹g(shù)的操作流程是_(填字母)。(2)圖中數(shù)字標號代表的結(jié)構(gòu)名稱是_;_。(3)d操作的名稱是_。(4)圖中用到的激素是_,過程h常用的方法是_。(5)移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是_。17我國基因工程藥物的研制和生產(chǎn)發(fā)展迅猛。目前科學(xué)家已在牛和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素等重要藥品,其大致過程如圖所示:(1)哺乳動物的體外受精主要包括a_、b_和受精等幾個主要步驟。若要充分發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖潛能,可給供體注射_,使其排出更多的卵子。(2)在過程c中需要用到的工具酶有_。要使人的藥用蛋白基因在奶牛乳腺細胞中特異性表達,完整的基因表達載體要包括目的基因、_、標記基因等部分。(3)d過程常用的方法是_,e過程的名稱為_。(4)若要一次獲得多只完全相同的轉(zhuǎn)基因牛,應(yīng)采用_技術(shù),通常選擇_的桑椹胚或囊胚。(5)早期胚胎發(fā)育的幾個階段:受精卵_期桑椹胚囊胚_。182018四川成都外國語學(xué)校聯(lián)考下面是以小鼠為對象進行的研究工作,請分析回答問題: (1)進行小鼠胚胎工程操作時,首先在光控周期下(光照14 h,黑暗10 h)飼養(yǎng)成年雌鼠,并注射促性腺激素,其目的是_。然后從雌鼠輸卵管中取出卵子,在一定條件下培養(yǎng)成熟;并從雄鼠附睪中取出精子,在一定條件下培養(yǎng)一段時間,目的是使_。再在37 、5%CO2條件下,精卵共同作用4 h,沖洗后繼續(xù)培養(yǎng)。定時在顯微鏡下觀察胚胎的變化,第5天可以看到胚胎發(fā)生收縮,細胞間隙擴大,接著胚胎內(nèi)部出現(xiàn)裂隙,這是胚胎_期開始的標志。 (2)如果體外受精后,在精核與卵核融合之前,用微型吸管吸除精核,再用細胞松弛素B處理(作用類似于用秋水仙素處理植物細胞),處理后的受精卵可發(fā)育成小鼠。這種方法在動物新品種選育中的顯著優(yōu)點是_。(3)如果將小鼠甲的體細胞核移入小鼠乙的去核卵細胞中,由重組細胞發(fā)育成小鼠丙,則小鼠丙的基因來源于_。八、現(xiàn)代生物科技專題1(1)體外重組的質(zhì)??梢赃M入體細胞;真核生物基因可在原核細胞中表達(2)轉(zhuǎn)化外殼蛋白(噬菌體蛋白)細菌(3)蛋白酶缺陷型蛋白酶解析:(1)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿細胞中進行了表達,該過程證明了體外重組的質(zhì)??梢赃M入體細胞,也可證明真核生物基因可在原核細胞中表達等。(2)體外重組的質(zhì)??赏ㄟ^Ca2參與的轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入大腸桿菌細胞;體外重組的噬菌體DNA通常需與蛋白質(zhì)外殼組裝成完整的噬菌體后,才能通過侵染的方法將重組噬菌體DNA導(dǎo)入受體細胞;噬菌體侵染的是細菌,而不能寄生在其它細胞中,因此可作為重組噬菌體宿主細胞的是細菌。(3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細胞內(nèi)表達時,表達出的蛋白質(zhì)可能會被降解,為防止蛋白質(zhì)被降解,可以選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細胞。在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加蛋白酶的抑制劑。2(1) E1和E4甲的完整甲與載體正確連接(2)轉(zhuǎn)錄翻譯(3)細胞核去核卵母細胞(4)核DNA解析:(1)用限制酶進行酶切時,為了保證甲(融合基因)的完整,而且也要保證甲(融合基因)與載體正確連接,該團隊在將甲插入質(zhì)粒P0時,需要使用E1和E4這兩種酶進行酶切,如果用E2或E3進行酶切,則融合基因不完整。(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細胞后,若在該細胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。(3)要獲得含有甲的牛,需要做的工作是:將能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的細胞核移入牛的去核卵母細胞中獲得重組細胞,然后經(jīng)體外培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)獲得含有甲的牛。(4)若利用PCR方法檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中,則應(yīng)分別以該牛不同組織細胞中的核DNA作為PCR模板。3(1)將動物的一個細胞核,移入一個已去掉細胞核的卵母細胞中不變(2)小于胚胎細胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對容易(3)相同不同解析:(1)核移植是指將動物的一個細胞的細胞核,移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中;通過核移植方法獲得的克隆猴的細胞核來自供體,因此克隆猴體細胞的染色體數(shù)目和供體相同。(2)因為動物胚胎細胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對容易,所以胚胎細胞核移植的難度小于體細胞核移植。(3)哺乳動物雌性個體和雄性個體的體細胞染色體常染色體相同,性染色體前者是XX,后者是XY,因此分別以雌性個體和雄性個體的體細胞作為核供體,通常所得到的兩個克隆動物體細胞的常染色體數(shù)目相同,性染色體組合不同。4(1)基因組DNA(2)5使DNA片段能定向插入表達載體,減少自連(3)(4)813(5)pH為8.5,緩沖液為50 mmol/L TrisHCl解析:(1)必須先獲得細菌的基因組DNA,然后再利用PCR技術(shù)擴增淀粉酶基因。(2)目的基因與運載體結(jié)合前需要用限制酶對兩者進行切割,延伸是在引物的3端延伸,為了保證目的基因的完整性,因此需在引物的5端加上限制性酶切位點,且為了使DNA片段能定向插入表達載體,減少自連,常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點。(3)進行擴增時,退火溫度的設(shè)定與引物有關(guān),延伸時間的設(shè)定與擴增片段的長度有關(guān)。(4)虛線框內(nèi)mRNA片段內(nèi)含有24個堿基,每3個堿基構(gòu)成一個密碼子,因此包含8個密碼子;構(gòu)成mRNA的堿基有4種,若虛線框后的序列未知,預(yù)測虛線框后的第一個密碼子最多有44313種。(5)分析表中數(shù)據(jù)可知,在pH為8.5,緩沖液為50 mmol/L TrisHCl的條件下,淀粉酶相對活性為99.5%,活性最高。5(1)植物體細胞雜交纖維素酶果膠酶(2)液泡薄壁(3)莖尖所含病毒極少,甚至不含病毒(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(5)都能克服遠緣雜交不親和的障礙解析:(1)甲表示植物體細胞雜交,該過程需要用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁。(2)愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度液泡化的呈無定形狀的薄壁細胞。(3)莖尖所含病毒極少,甚至不含病毒,因此植物組織培養(yǎng)技術(shù)可獲得脫毒苗。(4)將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法,最常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(5)甲表示植物體細胞雜交育種、丙表示基因工程育種,這兩種育種方式與傳統(tǒng)雜交育種相比,其優(yōu)點是都能克服不同物種遠源雜交不親和障礙。6(1)干擾素基因合成干擾素(2)不能大腸桿菌是原核生物,無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細胞器,無法合成干擾素(糖蛋白)(3)DNA結(jié)構(gòu)基本相同干擾素遺傳密碼基本相同解析:(1)從人的淋巴細胞中提取目的基因干擾素基因,使它與細菌質(zhì)粒相結(jié)合,然后移植到酵母菌體內(nèi),讓酵母菌合成干擾素。(2)大腸桿菌是原核生物,無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細胞器,無法合成糖蛋白,因此用大腸桿菌作為工程菌時不能制備得到干擾素。(3)人的基因之所以能接到植物體內(nèi)去,其物質(zhì)基礎(chǔ)是兩者的DNA結(jié)構(gòu)基本相同,空間結(jié)構(gòu)都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。煙草有了抗病能力,這表明干擾素基因煙草體內(nèi)得到了表達,產(chǎn)生了干擾素。這個事實說明:人和植物共有一套密碼子。所有生物合成蛋白質(zhì)的方式相同,都是脫水縮合形成蛋白質(zhì)。7(1)轉(zhuǎn)錄翻譯分子設(shè)計DNA合成(2)獲得滿足人類生產(chǎn)和生活需求的蛋白質(zhì)基因合成或改造(3)解析:(1)圖中為轉(zhuǎn)錄過程,為翻譯過程,為分子設(shè)計,表示DNA合成。(2)蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要??梢姡鞍踪|(zhì)工程的目的是獲得滿足人類生產(chǎn)和生活需求的蛋白質(zhì),通過基因合成或改造來實現(xiàn)。(3)圖中過程代表蛋白質(zhì)工程的操作思路;過程代表中心法則。8(1)核移植無性生殖有性生殖(2)促性腺(3)胚胎分割將內(nèi)細胞團均等分割(4)顯微注射DNA分子雜交解析:(1)圖示繁殖過程是試管動物技術(shù),克隆動物培育過程與其相比,特有的技術(shù)手段是核移植。兩種動物繁殖的方式相比,實質(zhì)性的區(qū)別為克隆動物培育過程沒有經(jīng)過受精作用,屬于無性生殖,試管動物技術(shù)有經(jīng)過受精作用,屬于有性生殖。(2)一般用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。(3)為了提高胚胎的利用率,可以采用胚胎分割技術(shù)處理早期胚胎,如果選擇囊胚階段的早期胚胎,在分割時需要注意將內(nèi)細胞團均等分割,否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。(4)如果培育轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛,可采用顯微注射技術(shù)將藥用蛋白基因?qū)氲绞芫阎?,并采用DNA分子雜交技術(shù)檢測受體細胞中的染色體DNA上是否插入了目的基因。9(1)限制性核酸內(nèi)切酶(2)殺蟲晶體蛋白質(zhì)基因(或Bt基因、目的基因)讓害蟲吞食抗蟲棉葉子,觀察害蟲的存活狀態(tài)(或其他合理答案)(3)多肽(4)環(huán)境保護解析:(1)圖中a過程是提取目的基因,用到的酶是限制酶。(2)為確定抗蟲棉是否培育成功,既要用放射性同位素標記的目的基因作探針進行分子雜交測試,又要在個體水平上鑒定,后者具體過程是讓害蟲吞食抗蟲棉葉子,觀察害蟲的存活狀態(tài)。(3)活化的毒性物質(zhì)應(yīng)是一種多肽分子,可以全部或部分嵌合于昆蟲的細胞膜上,使細胞膜產(chǎn)生孔道,導(dǎo)致細胞由于滲透平衡的破壞而破裂。(4)開展Bt抗蟲棉、抗蟲水稻等研究,可以減少農(nóng)藥、殺蟲劑的使用,這將對環(huán)境保護起到重要作用。10(1)PCR擴增(2)由于Xba在質(zhì)粒不止一個酶切位點(3)Nde、BamH顯微注射法(4)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶解析:(1)通常情況下,獲得的目的基因需要進行擴增,最簡便的方法是PCR擴增技術(shù)。(2)根據(jù)啟動子和終止子的生理作用可知,目的基因應(yīng)導(dǎo)入啟動子和終止子之間。據(jù)圖可知,兩者之間存在有三種限制酶切點,但是由于Xba在質(zhì)粒上有不止一個酶切位點,因此本實驗中沒有選擇Xba酶切割質(zhì)粒。 (3)分析圖示,為防止質(zhì)粒自身環(huán)化,擴增的BglB基因兩端需分別引入Nde和BamH不同限制酶的識別序列,再用DNA連接酶將其與目的基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒。如果受體細胞是動物細胞,常用顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細胞。 (4)大腸桿菌不能降解纖維素,但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達載體后則獲得了降解纖維素的能力,這是因為轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶。11(1)B淋巴聚乙二醇(PEG)(滅活的病毒)(2)3既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體雜交瘤細胞(3)引起甲流的病毒不斷發(fā)生變異(4)目的性強,克服遠緣雜交不親和的障礙(能有效地打破物種的生殖隔離界限) (5)B淋巴細胞已經(jīng)分化,在體外不能大量增殖 (6)作為診斷試劑、用于治療疾病和運載藥物 解析:(1)若A細胞是小鼠骨髓瘤細胞,則B細胞是取自感染病毒的人體內(nèi)的B淋巴細胞,促進d動物細胞融合的常用誘導(dǎo)劑是聚乙二醇(PEG)(滅活的病毒)。 (2)假設(shè)僅考慮某兩個細胞的融合,則可形成骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合、骨髓瘤細胞與B細胞融合、B細胞與B細胞融合共3種類型的C細胞,因此需用培養(yǎng)基篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的D雜交瘤細胞用于培養(yǎng)。 (3)由于引起甲流的病毒不斷發(fā)生變異,理論上,注射了該抗體的人群不能長期對甲流免疫。 (4)相比誘變育種和雜交育種方法,不同種動物的體細胞融合目的性強,且能克服遠緣雜交不親和的障礙。 (5)由于B淋巴細胞已經(jīng)分化,在體外不能大量增殖,因此不能用單個B淋巴細胞獲得大量抗體。 (6)單克隆抗體的主要用途有作為診斷試劑、用于治療疾病和運載藥物。12(1)胰蛋白(2)細胞能保持正常的二倍體核型(3)有絲分裂貼壁生長(4)使克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細胞 (5)生物的性狀受細胞核基因和細胞質(zhì)基因共同控制;生物的性狀還受環(huán)境因素的影響 (6)核移植、動物細胞培養(yǎng)體細胞的細胞核解析:(1)在進行細胞培養(yǎng)時,要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細胞進行分散處理,形成單個細胞,這個過程中需要利用胰蛋白酶處理。(2)用于核移植的供體細胞,一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞,原因是保持正常的二倍體核型。(3)在進行原代培養(yǎng)時,細胞增殖的方式是有絲分裂,此外,動物細胞培養(yǎng)時還表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制等特點。(4)要使克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細胞,需要將進行培養(yǎng)的供體細胞注入去核的卵母細胞中。(5)因為生物的性狀受細胞核基因和細胞質(zhì)基因共同控制;同時還受環(huán)境因素的影響,所以將重組細胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后,該母牛就會生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢,但也不是100%復(fù)制。(6)上述動物細胞工程中涉及的技術(shù)有核移植、動物細胞培養(yǎng)。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功,說明了動物的體細胞的細胞核具有全能性。13(1)減數(shù)第二次分裂中期無菌無毒的環(huán)境(2)胚胎分割胚胎移植(3)同期發(fā)情免疫排斥只產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎(4)桑椹胚(或囊胚)乳腺蛋白基因顯微注射解析:(1)從母牛體內(nèi)獲得的卵母細胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能與獲能的精子受精。在體外培養(yǎng)受精卵時,需要滿足的條件有無菌、無毒的環(huán)境、營養(yǎng)、溫度和pH以及氣體。(2)通過試管動物技術(shù)培養(yǎng)發(fā)育到早期胚胎后,再經(jīng)胚胎分割、胚胎移植產(chǎn)生多個基因型相同的后代。(3)胚胎移植時,供、受體應(yīng)處于相同的生理狀況,此時可利用激素對供、受體進行同期發(fā)情處理。此外,受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能,胚胎移植的優(yōu)勢在于供體的職責(zé)變?yōu)橹划a(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎。(4)生產(chǎn)上常將用桑椹胚(或囊胚)期的胚胎送入母體內(nèi),使其生長發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物。而在制備乳腺生物反應(yīng)器的過程中,科學(xué)家將生長激素基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起,通過顯微注射等方法導(dǎo)入哺乳動物的受精卵中。14(1)經(jīng)濟效益和生態(tài)效益少消耗、多效益、可持續(xù)(2)植被恢復(fù),以及為植被恢復(fù)所必需的土壤微生物群落的重建人工制造表土、平整壓實土地(3)物質(zhì)循環(huán)再生環(huán)境容納量系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能物種多樣性(4)已破壞的生態(tài)系統(tǒng)(5)協(xié)調(diào)與平衡解析:(1)生態(tài)工程建設(shè)的目的是遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止環(huán)境污染,達到經(jīng)濟效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展。與傳統(tǒng)的工程相比,生態(tài)工程是一類少消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系。(2)在礦區(qū)生態(tài)環(huán)境的恢復(fù)工程中,關(guān)鍵的措施是植被的恢復(fù)及其所必需的土壤微生物群落的重建。具體措施有:人工制造表土、多層覆蓋、特殊隔離、土壤侵蝕控制、植被恢復(fù)工程。(3)沼氣工程主要體現(xiàn)了生態(tài)工程的物質(zhì)循環(huán)再生原理。魚塘中每一種魚苗的投放量都不宜超過其環(huán)境容納量。該生態(tài)系統(tǒng)把魚塘、農(nóng)田、果園等有機地組合在一起,優(yōu)化了系統(tǒng)結(jié)構(gòu),遵循系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理。在該生態(tài)工程中,種植不同的農(nóng)作物、果樹,飼養(yǎng)多種畜禽,這體現(xiàn)了生態(tài)工程的物種多樣性原理。(4)一般來說,生態(tài)工程的主要任務(wù)是對已破壞的生態(tài)系統(tǒng)進行修復(fù),對造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進行改善,并提高生
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