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復(fù)習(xí)舊知 1、腐乳的制作用的是什么微生物 細(xì)胞結(jié)構(gòu)?代謝類型?生殖方式? 2、腐乳的前期發(fā)酵的目的是什么?時(shí)間多長(zhǎng)? 3、腐乳制作過(guò)程中有哪些措施可以預(yù)防雜菌污染?,泡菜的制作,一、課題目標(biāo) 嘗試制作泡菜,并嘗試用比色法測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量的變化。討論與此相關(guān)的食品安全問(wèn)題。 二、課題重點(diǎn)與難點(diǎn) 課題重點(diǎn):制作泡菜并測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量。 課題難點(diǎn):泡菜中亞硝酸鹽含量的測(cè)定。,泡菜是一種以濕態(tài)發(fā)酵方式加工制成的浸制品,為泡酸菜類的一種。泡菜制作容易,成本低廉,營(yíng)養(yǎng)衛(wèi)生,風(fēng)味可口,利于貯存。在我國(guó)四川、東北、湖南、湖北、河南、廣東、廣西等地民間均有自制泡菜的習(xí)慣。目前較受歡迎的是川味和韓味泡菜,在許多風(fēng)味餐館里,都有其蹤影,它鮮嫩清脆,可以增進(jìn)食欲,幫助消化與吸收。如果自己在家也做一些這樣的泡菜,做為每天飯前小菜,或以它配菜,烹成各種菜肴,不失為一件美事。但是泡菜含亞硝酸鹽具致癌作用危害身體健康,所以不宜多吃。,一、泡菜的制作,(一)、泡菜制作基礎(chǔ)知識(shí),1、乳酸菌,(1)形態(tài):球型或桿型; (2)細(xì)胞結(jié)構(gòu):原核細(xì)胞;你認(rèn)為有哪些結(jié)構(gòu)? (3)代謝類型:乳酸菌是異養(yǎng)厭氧型細(xì)菌; 在無(wú)氧條件下,將葡萄糖分解成乳酸。常見(jiàn)的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。,你能寫(xiě)出乳酸菌分解葡萄糖的反應(yīng)式嗎? 另外,乳酸桿菌還常用于制作酸奶。 思考: 用乳酸桿菌制作酸奶時(shí),牛奶的營(yíng)養(yǎng)和能量會(huì)發(fā)怎樣的變化?為什么? 把100毫升的牛奶分別放入100、200、300、400毫升的容器中進(jìn)行乳酸發(fā)酵,最先發(fā)酵成功的是哪個(gè)? 你能說(shuō)出理由嗎?,(4)分布 乳酸菌種類很多,在自然界中分布廣泛,空氣、土壤、植物體表、人或動(dòng)物的腸道內(nèi)都有乳酸菌的分布。 你能說(shuō)出乳酸桿菌與酵母菌的異同嗎?,2、亞硝酸鹽 你知道亞硝酸鹽嗎?知道它的危害嗎?,亞硝酸鹽(包括亞硝酸鉀和亞硝酸鈉)為白色粉末,易溶于水。,當(dāng)人體攝入的亞硝酸鹽總量達(dá)到0.30.5g時(shí),會(huì)引起中毒,達(dá)3g時(shí)會(huì)引起死亡。,分布: 蔬菜中亞硝酸鹽的平均含量約為4mg/Kg,咸菜中亞硝酸鹽的平均含量在7mg/Kg以上,而豆粉中平均含量可達(dá)10mg/Kg。 衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn): 亞硝酸鹽的殘留量在肉制品中不得超過(guò)30mg/Kg,醬腌菜中不超過(guò)20mg/Kg,而嬰兒奶粉中不得超過(guò)2mg/Kg。,膳食中的絕大多數(shù)亞硝酸鹽在人體內(nèi)以“過(guò)客”的形式隨尿排出,只有在特定的條件下(適宜的PH、溫度和一定的微生物作用),才會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物亞硝胺。大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,亞硝胺具有致癌作用,同時(shí)對(duì)動(dòng)物具有致畸和致突變作用。研究表明,人類的某些癌癥可能與亞硝胺有關(guān)。 請(qǐng)你設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明亞硝胺能使動(dòng)物細(xì)胞發(fā)生癌變。,3、腌制條件 腌制過(guò)程中,要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。 溫度過(guò)高、食鹽用量不足10、腌制時(shí)間過(guò)短,容易造成細(xì)菌大量繁殖,亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后,亞硝酸鹽的含量開(kāi)始下降。,4、泡菜壇的選擇 泡菜壇本身質(zhì)地好壞對(duì)泡菜與泡菜鹽水有直接影響,故用于泡菜的壇子應(yīng)經(jīng)嚴(yán)格檢驗(yàn),其優(yōu)劣的區(qū)分方法如下: 觀型體:泡菜壇以火候老、釉質(zhì)好、無(wú)裂紋、無(wú)砂眼、形體美觀的為佳。 看內(nèi)壁:將壇壓在水內(nèi),看內(nèi)壁,以無(wú)砂眼、無(wú)裂紋、無(wú)滲水現(xiàn)象的為佳。, 視吸水:壇沿?fù)饺肭逅话耄脧U紙一卷,點(diǎn)燃后放壇內(nèi),蓋上壇蓋,能把沿內(nèi)水吸干(從壇沿吸入壇蓋內(nèi)壁)的泡菜壇質(zhì)量較好,反之則差。 聽(tīng)聲音:用手擊壇,聽(tīng)其聲,鋼音的質(zhì)量則好,空響、砂響、音破的質(zhì)次。,(2) 添加的調(diào)味品,如花椒、八角等。 (3) 白酒。 (4) 食糖和鹽。,3、材料 (1) 各種蔬菜均可,一般用白菜、洋白菜、黃瓜、柿子椒、胡蘿卜、白蘿卜等。,4、步驟 (1)各種菜洗凈并切成34cm長(zhǎng)的小塊。,(2)將泡菜壇洗凈,并用熱水洗壇內(nèi)壁兩次。 (3)將各種蔬菜、鹽水、及調(diào)味品放入壇,混合均勻。如果希望發(fā)酵快些,可將蔬菜在開(kāi)水中浸1分鐘后入壇,再加上一些白酒。,發(fā)酵前期:蔬菜剛?cè)雺瘯r(shí),表面帶入的微生物,主要是以不抗酸的大腸桿菌和酵母菌等較為活躍,它們進(jìn)行異型乳酸發(fā)酵和微弱的酒精發(fā)酵產(chǎn)生較多的乳酸、酒精、醋酸和二氧化碳等,二氧化碳以氣泡從水槽內(nèi)放出,逐漸使壇內(nèi)形成缺氧狀態(tài)。,(4)將壇口用水封好,防止外界空氣進(jìn)入。 (5)泡菜發(fā)酵,發(fā)酵產(chǎn)物中除乳酸外,還有其他,如乙醇、CO2等稱異型乳酸發(fā)酵。,發(fā)酵中期:由于前期乳酸的積累,pH下降,缺氧狀態(tài)的形成,乳酸桿菌活躍進(jìn)行活躍的同型乳酸發(fā)酵,乳酸積累pH達(dá)3.53.8.大腸桿菌、酵母菌、霉菌等的活動(dòng)受到抑制。這一期為完全成熟階段,泡菜有酸味且清香品質(zhì)最好。,發(fā)酵產(chǎn)物中只有乳酸,稱為同型乳酸發(fā)酵。,發(fā)酵后期:繼續(xù)進(jìn)行乳酸發(fā)酵,乳酸積累達(dá)1.2以上時(shí),乳酸桿菌的活性受到抑制,發(fā)酵速度逐漸變緩甚至停止。 腌制1周左右即可開(kāi)壇食用。也可隨時(shí)加入新鮮蔬菜,不斷取用。,(6)如果加入一些已經(jīng)腌制過(guò)的泡菜汁更好,這相當(dāng)于接種已經(jīng)擴(kuò)增的發(fā)酵菌,可減少腌制時(shí)間。,1、加入白酒有什么作用?,白酒可抑制泡菜表面雜菌的生長(zhǎng),它也是一種調(diào)味劑,可增加醇香感。,幾個(gè)思考題:,2、用水封閉壇口起什么作用?不封閉有什么結(jié)果?,水封閉壇口起著使壇內(nèi)與壇外空氣隔絕的作用,空氣中21是氧氣,這是最簡(jiǎn)易的造成無(wú)氧環(huán)境的方法。這樣,壇內(nèi)可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌進(jìn)行乳酸發(fā)酵。如不封閉,則會(huì)有許多需氧菌生長(zhǎng),蔬菜會(huì)腐爛。 說(shuō)出壇內(nèi)微生物的代謝類型的變化情況。,3、為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜,這層白膜是怎么形成的?,形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌的繁殖。,4、為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不吃存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、變質(zhì)的蔬菜?,有些蔬菜,如小白菜和蘿卜等含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過(guò)久時(shí)發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時(shí),蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。 這些蔬菜究竟能不能吃,你判斷的理由是什么?,二、亞硝酸鹽含量的測(cè)定,1、測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理 在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,再與N-1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合生成玫瑰紅溶液。將經(jīng)過(guò)反應(yīng)顯色后的待測(cè)樣品與標(biāo)準(zhǔn)液比色,即可計(jì)算出樣品中的亞硝酸鹽含量。 我們還學(xué)過(guò)哪些顏色反應(yīng)?,2、材料與器具 泡菜、對(duì)氨基苯磺酸、 N-1萘基乙二胺鹽酸鹽、氯化鈉、氫氧化鈉、氫氧化鋁、氯化鎘、氯化鋇、亞硝酸鈉、蒸餾水、移液管、容量瓶、比色管、榨汁機(jī)等。,3、步驟,(1)配制溶液 看書(shū)配制了哪些溶液?具體做法是什么?濃度是多少? 對(duì)氨基苯磺酸溶液:稱取0.4克對(duì)氨基苯磺酸,溶解于100ml體積分?jǐn)?shù)為20的鹽酸中,避光保存(4mg/ml)。 N-1萘基乙二胺鹽酸鹽溶液:稱取0.2克N-1萘基乙二胺鹽酸鹽,溶解于100ml的水中,避光保存(2mg/ml) 。,亞硝酸鈉溶液:稱取0.10克于硅膠干燥器中干燥24小時(shí)的亞硝酸鈉,用水溶解至500ml,再轉(zhuǎn)移5 ml溶液至200 ml容量瓶,定容至200ml(5ug/ml) 提取劑:分別稱取50克氯化鎘、氯化鋇,溶解于1000ml蒸餾水中,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1。氫氧化鋁乳液和2.5mol/l的氫氧化鈉溶液。,(2) 配制標(biāo)準(zhǔn)液 用移液管吸取0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml、1.50ml亞硝酸鈉溶液,分別置于50ml比色管中,再取1支比色管作為空白對(duì)照。并分別加入2.0ml對(duì)氨基苯磺酸溶液,混勻,靜置35分鐘后,再分別加入1.0ml N-1萘基乙二胺鹽酸鹽溶液,加蒸餾水至50ml,混勻,觀察亞硝酸鈉溶液顏色的梯度變化。,(3) 制備樣品處理液 將3壇樣品做好標(biāo)記后,分別稱取0.4千克泡菜,榨汁過(guò)濾得200ml汁液。取其中100 ml至500ml容量瓶中,加200ml蒸餾水、 100ml提取劑,混勻,再加入40ml氫氧化鈉溶液,用蒸餾水定容至500ml后,立即過(guò)濾。將60ml濾液轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中,加入氫氧化鋁(吸附脫色)乳液,定容至100ml,過(guò)濾。,(4)比色 吸取40ml透明澄清的濾液,轉(zhuǎn)移到50ml比色管中,將比色管做好標(biāo)記。按步驟2的方法分別加入對(duì)氨基苯磺酸溶液和N-1萘基乙二胺鹽酸鹽溶液,并定容至50ml,混勻,靜置15分鐘后,觀察樣品顏色的變化,并與標(biāo)準(zhǔn)顯色液比較,找出與標(biāo)準(zhǔn)液最相近的顏色,記錄對(duì)應(yīng)的亞硝酸鈉含量,并計(jì)算。每隔2天測(cè)一次,將結(jié)果記錄下來(lái)。,泡菜腌制過(guò)程中亞硝酸鹽含量的變化,你能繪制相關(guān)的曲線圖嗎?,4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析和討論,三只泡菜壇中的亞硝酸鹽含量變化的絕對(duì)數(shù)量雖然不同,但整體的變化趨勢(shì)卻基本相同。在腌制后的第五天,三只泡菜壇中亞硝酸鹽的含量都達(dá)到最高峰(1、2、3號(hào)壇中的亞硝酸鹽分別達(dá)到 0.6mg/kg、0.2mg/kg、0.8mg/kg), 為什么不同的壇內(nèi)的亞硝酸鹽的含量不同?,在腌制后的前6天內(nèi),泡菜中的亞硝酸鹽含量就可以達(dá)到最高峰。而第9天后泡菜中的亞硝酸鹽含量開(kāi)始有明顯下降。這可能是由于泡菜在開(kāi)始腌制時(shí),壇內(nèi)環(huán)境有利于某些細(xì)菌的繁殖(包括一些硝酸鹽還原菌),這些細(xì)菌可以促進(jìn)硝酸鹽還原為亞硝酸鹽。但隨著腌制時(shí)間的延長(zhǎng),乳酸細(xì)菌也大量繁殖,對(duì)硝酸鹽還原菌產(chǎn)生一定的抑制作,使其生長(zhǎng)繁殖受到影響,造成泡菜中亞硝酸鹽的含量又有所下降。,乳酸菌除了可以用于制作泡菜,還可以用于牛奶發(fā)酵。那么,在牛奶的發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽嗎? 請(qǐng)你設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明你的結(jié)論。,制作家庭酒釀的具體操作過(guò)程:先將米煮熟,待冷卻至30時(shí),加一定量的“酒藥”與米飯混勻后置

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