2018_2019學年高中生物專題1基因工程的基本操作程序1.2.1目的基因的獲取和基因表達載體的構(gòu)建學案新人教版.docx

12.1目的基因的獲取和基因表達載體的構(gòu)建學習目標1.說出基因工程的基本操作程序。 2.理解獲取目的基因的途徑。3.說出基因表達載體的構(gòu)建的目的與組成。方式一抑制疾病傳播的轉(zhuǎn)基因蚊子巴西等拉美國家深受致倦庫蚊的危害。致倦庫蚊可攜帶多種病毒和寄生蟲，能夠傳播腦炎、絲蟲等傳染病，而這些傳染病常年在拉美國家肆虐。為了抑制疾病的傳播，巴西科學家培育出了一種轉(zhuǎn)基因雄性致倦庫蚊。科學家在雄性致倦庫蚊體內(nèi)植入一種特殊基因，當具該基因的轉(zhuǎn)基因雄蚊與野生雌蚊交配時，這種基因可以進入雌蚊的基因組，并使雌蚊死亡，從而減少了該種蚊子的數(shù)量，達到抑制疾病傳播的目的。怎樣才能最終得到轉(zhuǎn)基因雄蚊呢？讓我們一起來學習基因工程的基本操作程序吧！方式二師：出示我國有知識產(chǎn)權(quán)的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育圖解：問：轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育需要哪些步驟？學生看圖并回答：首先要獲得目的基因，其次將目的基因連接到Ti質(zhì)粒上，然后將重組的Ti質(zhì)粒導入受體細胞，最后要重建轉(zhuǎn)基因植物。根據(jù)學生回答補充：還需檢測抗蟲基因是否已經(jīng)進入棉花植株，并由此引出基因工程的四部曲。一、目的基因的獲取1基因工程的基本操作程序(1)目的基因的獲取。(2)基因表達載體的構(gòu)建。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞。(4)目的基因的檢測與鑒定。2目的基因的獲取(1)目的基因：主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因，也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。(2)常見方法從基因文庫中獲取a基因文庫：將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導入受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為基因文庫。b種類c提取依據(jù)：基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色體上的位置、基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA，以及基因的表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性。利用PCR技術(shù)擴增目的基因aPCR的含義：是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。b目的：短時間內(nèi)大量擴增目的基因。c原理：DNA雙鏈復制。d前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列。e過程第一步：加熱至9095 ，DNA解鏈為單鏈；第二步：冷卻至5560 ，引物結(jié)合到互補DNA鏈；第三步：加熱至7075 ，熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)從引物起始進行互補鏈的合成。如此重復循環(huán)多次。f結(jié)果：每一次循環(huán)后，目的基因的量可以增加一倍，即成指數(shù)形式擴增(約為2n，n為擴增循環(huán)的次數(shù))?；瘜W方法直接人工合成a條件：基因比較小，核苷酸序列又已知。b方法：借助DNA合成儀用化學方法直接人工合成。歸納總結(jié)1.PCR技術(shù)與細胞內(nèi)DNA復制的比較比較項目細胞內(nèi)DNA復制PCR技術(shù)區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高溫下變性解旋場所主要在細胞核內(nèi)細胞外酶解旋酶、DNA聚合酶熱穩(wěn)定DNA聚合酶溫度細胞內(nèi)溫和條件控制溫度，需在不同溫度下進行結(jié)果合成整個DNA分子擴增特定的DNA片段或基因聯(lián)系(1)模板：均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板(2)原料：均為四種脫氧核苷酸(3)酶：均需DNA聚合酶(4)引物：都需要引物，使DNA聚合酶從引物開始進行互補鏈的合成2.獲取目的基因的方法比較方法從基因文庫獲取PCR技術(shù)擴增化學方法直接人工合成基因組文庫部分基因文庫(如cDNA文庫)過程供體細胞中的DNA 限制酶許多DNA片段連接表達載體導入受體菌群外源DNA擴增，產(chǎn)生特定性狀分離目的基因目的基因的mRNA反轉(zhuǎn)錄單鏈DNA合成雙鏈DNA插入載體導入受體菌群(cDNA文庫)分離目的基因目的基因DNA高溫解鏈單鏈DNA 與引物結(jié)合、 DNA聚合酶大量目的基因蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測mRNA的核苷酸序列推測基因的核苷酸序列 化學合成目的基因優(yōu)點操作簡單專一性強可在短時間內(nèi)大量擴增目的基因?qū)Ｒ恍詮?，可產(chǎn)生自然界中不存在的新基因缺點工作量大、盲目性大、專一性差操作過程較繁瑣，技術(shù)要求高需要嚴格控制溫度，技術(shù)要求高適用范圍小3.獲取目的基因的方法選擇(1)如果不知道目的基因的核苷酸序列，可以通過構(gòu)建基因文庫的方法，即通過受體菌儲存并擴增目的基因后，從基因文庫中獲取目的基因。(2)如果知道目的基因的核苷酸序列，而且基因比較小，可以通過DNA合成儀利用化學方法直接人工合成。(3)如果知道要擴增的目的基因及兩端的核苷酸序列，而且基因又比較大，可以通過PCR技術(shù)擴增目的基因。例1以下為形成cDNA(圖中的單鏈DNA)過程和PCR擴增過程示意圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是()A催化過程的酶是RNA聚合酶B過程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA結(jié)合C催化過程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高溫D如果RNA單鏈中A與U之和占該鏈堿基含量的40%，則一個雙鏈DNA中，A與U之和也占該DNA堿基含量的40%答案B解析由題意可知，分別表示反轉(zhuǎn)錄、DNA的復制、DNA解鏈、引物結(jié)合到互補DNA鏈及互補鏈的合成，B正確；過程由反轉(zhuǎn)錄酶催化完成，A錯誤；催化過程的酶都是DNA聚合酶，過程是在7075 的高溫條件下進行的，只有該過程中的酶需耐高溫，C錯誤；在DNA分子中有堿基T無U，D錯誤。例2(2017湖南長沙一中期末考試)下列有關(guān)獲取目的基因的方法，敘述錯誤的是()A.從基因文庫中直接獲取目的基因的優(yōu)點是操作簡便，缺點是工作量大，具有一定的盲目性B.由于真核細胞的基因中含有不表達的DNA片段，所以一般使用人工合成的方法獲取真核細胞中的目的基因C.如果基因比較小，核苷酸序列又已知，可以利用化學方法直接人工合成D.PCR技術(shù)的原理是DNA復制，需DNA連接酶催化DNA合成答案D解析PCR技術(shù)的原理是DNA分子的復制，需要耐高溫的DNA聚合酶催化DNA合成，D錯誤。二、基因表達載體的構(gòu)建1基因表達載體構(gòu)建的目的使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2基因表達載體的組成3基因表達載體的構(gòu)建過程一般用同一種限制酶分別切割載體和目的基因，再用DNA連接酶把兩者連接(如圖)。歸納總結(jié)1啟動子和起始密碼子、終止子和終止密碼子的區(qū)別啟動子終止子起始密碼子終止密碼子化學成分DNA片段DNA片段mRNA上三個相鄰堿基mRNA上三個相鄰堿基位置目的基因首端目的基因尾端mRNA首端mRNA尾端作用RNA聚合酶識別和結(jié)合的部分，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA決定轉(zhuǎn)錄的結(jié)束翻譯的起始信號決定翻譯過程的結(jié)束2.構(gòu)建基因表達載體時限制酶的選擇原因分析(1)選用同一種限制酶切割目的基因和載體的原因：選用同一種限制酶切割會產(chǎn)生相同的黏性末端，可以在DNA連接酶的作用下將切割的目的基因和載體連接起來。(2)基因工程操作時往往用兩種限制酶分別切割目的基因的兩端以及載體的原因：如果用一種限制酶切割，目的基因兩側(cè)的末端以及質(zhì)粒切口的兩個末端都是互補的，因此連接時可能會出現(xiàn)載體與載體、目的基因與目的基因、目的基因與載體三種連接情況，而符合要求的只有載體與目的基因的連接。如果用兩種不同的限制酶進行切割就可以有效避免載體與載體以及目的基因與目的基因的連接，提高連接的有效性。例3(2017河南南陽一中月考)在基因工程的操作過程中，獲得重組質(zhì)粒不需要()DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶RNA聚合酶 具有標記基因的質(zhì)粒目的基因四種脫氧核苷酸A B C D答案A解析構(gòu)建重組質(zhì)粒時，首先要用限制性核酸內(nèi)切酶切割含有目的基因的DNA片段和載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與載體連接；RNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄過程，獲得重組質(zhì)粒時不需要RNA聚合酶；獲得重組質(zhì)粒時，需要具有標記基因的質(zhì)粒作為載體；重組質(zhì)粒是由目的基因與質(zhì)粒形成的；四種脫氧核苷酸是合成DNA的原料，獲得重組質(zhì)粒不需要四種脫氧核苷酸。例4如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)可食用疫苗的部分過程示意圖，其中Pst、Sma、EcoR、Apa為四種限制性核酸內(nèi)切酶。下列說法錯誤的是()A圖示過程是基因工程的核心步驟B表達載體構(gòu)建時需要用到限制酶SmaC抗卡那霉素基因的存在有利于將含有抗原基因的細胞篩選出來D除圖示組成外，表達載體中還應該含有啟動子和終止子等結(jié)構(gòu)答案B解析圖示過程為基因表達載體的構(gòu)建過程，是基因工程中的核心步驟；構(gòu)建過程中需要將目的基因完整切割下來，此時要用到限制酶Pst、EcoR；抗卡那霉素基因是標記基因，目的是便于鑒定和篩選含有目的基因的細胞；基因表達載體包括啟動子、目的基因、終止子和標記基因等。1基因工程的核心是()A目的基因的獲取B基因表達載體的構(gòu)建C將目的基因?qū)胧荏w細胞D目的基因的檢測與鑒定答案B解析目的基因構(gòu)建表達載體后才能使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能發(fā)揮作用，只有構(gòu)建表達載體后，才能根據(jù)載體上的標記基因鑒別目的基因是否導入了受體細胞，從而篩選出含目的基因的受體細胞，避免進行盲目的無效工作。2如圖表示基因工程中獲取水稻某目的基因的不同方法。下列相關(guān)敘述中正確的是()A三種方法都需要酶并均在體外進行B堿基對的排列順序均相同C三種方法均屬于人工合成法D方法a不遵循中心法則答案A解析這三種方法都是在體外進行的，且都用到酶(方法a需要反轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶；方法b需要限制酶；方法c需要DNA聚合酶)，A正確；通過方法a得到的目的基因不含有內(nèi)含子，通過方法c得到的目的基因的堿基序列可能有多種，因此堿基對的排列順序不都相同，B錯誤；方法a和c屬于人工合成法，而方法b是從供體細胞的DNA中直接分離目的基因的方法，C錯誤；方法a遵循中心法則，D錯誤。3如圖為基因表達載體的模式圖，若結(jié)構(gòu)X是表達載體所必需的，則X最可能是 ()A氨芐青霉素抗性基因 B啟動子C限制酶 DDNA連接酶答案B解析啟動子是該表達載體所必需的，功能是啟動插入基因的轉(zhuǎn)錄過程。4下列有關(guān)抗蟲基因表達載體的敘述，正確的是()A切割含抗蟲基因的DNA片段和載體必須用同一種限制酶B抗蟲基因表達載體中要有啟動子和終止密碼子C抗蟲基因表達載體必須具備標記基因，其作用是篩選含有目的基因的受體細胞D抗蟲基因的表達啟動于復制原點答案C解析切割含抗蟲基因的DNA片段和載體可以用不同的限制酶，只要切割出的末端相同即可，A項錯誤；抗蟲基因表達載體的構(gòu)建必須具備啟動子和終止子，終止密碼子位于mRNA上，B項錯誤；基因表達載體必須具備標記基因，其作用是檢測目的基因是否導入到受體細胞中，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來，C項正確；抗蟲基因的表達開始于啟動子，D項錯誤。5重疊延伸PCR技術(shù)是一種通過寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋、互為模板，通過多次PCR擴增，從而獲得目的基因的方法。該技術(shù)在擴增較長片段的DNA、不同來源的DNA片段拼接、基因的定點誘變等方面具有廣泛的應用前景。如圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)擴增某目的基因的過程。其主要設計思路是用具有互補配對片段的引物(圖中引物2、引物3)分別進行PCR，獲得有重疊鏈的兩種DNA片段，再在隨后的擴增反應中通過重疊鏈的延伸獲得目的基因。結(jié)合所學知識，回答下列問題：(1)引物中GC的含量影響著引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性，引物中GC的含量越高，結(jié)合穩(wěn)定性_。(2)在第一階段獲得兩種具有重疊片段DNA的過程中，必須將引物1、2和引物3、4置于不同反應系統(tǒng)中，這是因為_。(3)在引物1、引物2組成的反應系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過_次復制。(4)若在引物1、引物2組成的反應系統(tǒng)和引物3、引物4組成的反應系統(tǒng)中均復制一次，共產(chǎn)生_種雙鏈DNA分子。(5)若利用微生物擴增該目的基因，其基本步驟包括：_、_、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取目的基因。答案(1)越高(2)引物2和3中存在互補配對片段，置于同一反應系統(tǒng)時它們會發(fā)生結(jié)合而失去作用(3)2(4)3(5)目的基因與載體結(jié)合將重組DNA導入受體細胞解析(1)由于C與G之間有3個氫鍵，而A與T之間有2個氫鍵，所以引物中C與G含量越高，引物與模板DNA的結(jié)合就越穩(wěn)定。(2)由題干可知，引物2和引物3具有互補配對片段，如果將引物2和引物3放在一個反應系統(tǒng)中，則會引起引物2和引物3的結(jié)合而失效。(3)第一階段形成的2個DNA分子分別含有引物1和引物2，圖中第一階段形成的DNA分子同時具有引物1和引物2，圖示雙鏈DNA分子至少要經(jīng)過2次復制才能形成。(4)兩個反應系統(tǒng)中各自形成2種DNA分子，但由于引物1和引物4形成兩個與原DNA相同的DNA分子，所以含有引物1和4的DNA屬于同一種DNA，故共形成3種DNA分子。(5)利用微生物擴增該目的基因的基本步驟為：將目的基因與載體結(jié)合；將目的基因?qū)胧荏w細胞；微生物的篩選和培養(yǎng)，從菌群中獲取目的基因。 對點訓練題組一目的基因的獲取1基因工程的基本操作程序有：使目的基因與載體相結(jié)合；將目的基因?qū)胧荏w細胞；檢測目的基因的表達是否符合特定性狀要求；目的基因的獲取。正確的操作順序是()A BC D答案C解析基因工程的主要操作步驟順序是：目的基因的獲取基因表達載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細胞目的基因的檢測和鑒定。2下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是()從基因文庫中獲取目的基因利用PCR技術(shù)擴增目的基因反轉(zhuǎn)錄法通過DNA合成儀利用化學方法人工合成A BC D答案D解析PCR利用的是DNA雙鏈復制原理，即將雙鏈DNA之間的氫鍵打開，變成單鏈DNA ，作為聚合反應的模板。反轉(zhuǎn)錄法則是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的mRNA為模板，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，先反轉(zhuǎn)錄形成互補的單鏈DNA，再合成雙鏈DNA。、均不需要模板。3(2017鄭州一中高二下學期期中)下列關(guān)于基因文庫的說法，錯誤的是()A可分為基因組文庫和部分基因文庫BcDNA文庫屬于部分基因文庫C基因組文庫的基因在不同物種之間均可進行基因交流D同種生物的cDNA文庫中基因數(shù)量較基因組文庫少答案C解析基因組文庫中只有部分基因能夠在不同物種之間進行基因交流。4下圖表示基因工程中目的基因的獲取示意圖，不正確的是()A表示PCR技術(shù)，用來擴增目的基因B從基因文庫中要得到所需的目的基因可以根據(jù)目的基因的相關(guān)信息來獲取C若獲取的目的基因相同，則圖中基因組文庫小于cDNA文庫D若基因比較小，核苷酸序列又已知，則可以直接通過人工合成的方法獲取答案C解析可以利用PCR技術(shù)，大量擴增目的基因，A項正確；可以根據(jù)目的基因的相關(guān)信息，如核苷酸序列、基因功能、基因在染色體上的位置等，從基因文庫中得到所需的目的基因，B項正確；基因組文庫是從DNA中獲取的，而cDNA文庫是利用mRNA反轉(zhuǎn)錄法獲得的，不包含內(nèi)含子，故基因組文庫大于cDNA文庫，C項錯誤；若基因比較小，核苷酸序列又已知，則可以直接通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成，D項正確。題組二基因表達載體的構(gòu)建5下列哪項不是表達載體所必需的組成成分()A目的基因 B啟動子C終止子 D抗青霉素基因答案D解析A、B、C三項均為表達載體的必要的組成成分；具有標記基因也是表達載體所必需的組成成分，但抗青霉素基因只是標記基因中的一種，不是所有的表達載體都含有。6(2017無錫模擬)環(huán)境雌激素(EEs)會影響動物和人類的性腺發(fā)育。斑馬魚在EEs的誘導下，會表達出卵黃蛋白原(vtg)。已知綠色熒光蛋白(GFP)基因能使斑馬魚發(fā)光，欲獲得能檢測水中是否含有EEs的轉(zhuǎn)基因斑馬魚，下列操作合理的是()A將EEs基因的啟動子與GFP基因重組B將vtg基因的啟動子與GFP基因重組C將GFP基因的啟動子與GFP基因重組D將GFP基因的啟動子與vtg基因重組答案B解析由題意可知，環(huán)境中的EEs可誘導斑馬魚體內(nèi)vtg基因的表達，在不含EEs的環(huán)境中，斑馬魚體內(nèi)vtg基因不能表達。因此，只要將vtg基因的啟動子與GFP基因重組并導入斑馬魚體內(nèi)，便能根據(jù)斑馬魚是否發(fā)光檢測水中是否含EEs。7下圖為基因表達載體的模式圖，下列有關(guān)基因工程中載體的說法，錯誤的是()A基因表達載體的構(gòu)建是在生物體外完成的B任何基因表達載體的構(gòu)建都是一樣的，沒有差別C圖中啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位D抗生素抗性基因的作用是作為標記基因，用于鑒別受體細胞中是否導入了目的基因答案B解析由于受體細胞有植物、動物和微生物之分，以及目的基因?qū)胧荏w細胞的方式不同，所以基因表達載體的構(gòu)建也會有所差別，不可能千篇一律。8在基因表達載體的構(gòu)建中，下列說法不正確的是()一個基因表達載體的組成只包括目的基因、啟動子、終止子有了啟動子才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA 終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止所有基因表達載體的構(gòu)建是完全相同的A BC D答案B解析基因表達載體的結(jié)構(gòu)包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子，錯誤；有了啟動子才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，正確；終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止，正確；由于受體細胞有植物、動物以及微生物之分，以及目的基因?qū)胧荏w細胞的方法不同，因此基因表達載體的構(gòu)建是不完全相同的，錯誤。綜合強化9“X基因”是DNA分子上一個有遺傳效應的片段，若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝“X基因”，需在PCR反應中加入兩種引物(注：引物的作用是與模板鏈形成雙鏈后在DNA聚合酶的作用下就可以繼續(xù)鏈的延伸)，兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如下圖甲所示。經(jīng)4輪循環(huán)后產(chǎn)物中有五種不同的DNA分子，如下圖乙所示，其中第種DNA分子有幾個()A8 B6 C4 D2答案A解析由圖分析可知：X基因第一次復制得到兩個兩種DNA分子：和；X基因第二次復制得到四個四種DNA分子：復制得和、復制得和；X基因第三次復制得到八個五種DNA分子：復制得和、復制得和、復制得和、復制得和；X基因第四次復制得到16個五種DNA分子：復制得和、兩個復制得兩個和兩個、兩個復制得兩個和兩個、兩個得到4個。從上面的推測可知，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中有8個。10下列對基因表達載體構(gòu)建的敘述，不正確的是()A需要限制酶和DNA連接酶等特殊工具B基因表達載體中有的含有啟動子和密碼子C標記基因不一定是抗生素抗性基因D基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心答案B解析基因表達載體是目的基因與載體的結(jié)合，在此過程中需用同一種限制酶切割目的基因與載體，用DNA連接酶將相同的末端連接起來，A項正確；基因表達載體含有啟動子、終止子、標記基因和目的基因，密碼子位于mRNA上，B項錯誤；抗生素抗性基因可作為標記基因，但標記基因不都是抗生素抗性基因，C項正確；基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心，在細胞外進行，使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發(fā)揮作用，D項正確。11為從根本上解決水稻中的高植酸問題，可將植酸酶基因?qū)胨荆嘤椭菜徂D(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。據(jù)圖回答下列問題：(1)B過程需要的酶是_。(2)圖中基因組文庫_(填“小于”“大于”或“等于”)cDNA文庫。(3)目的基因和除可從構(gòu)建的文庫中分離外，還可以分別以圖中_和_為模板直接進行PCR擴增，該過程中所用酶的顯著特點是_。答案(1)反轉(zhuǎn)錄酶(2)大于(3)DNAcDNA耐高溫解析B過程是以RNA為模板合成DNA的反轉(zhuǎn)錄過程，需要的酶是反轉(zhuǎn)錄酶；目的基因和除可從構(gòu)建的文庫中分離外，還可以分別以圖中DNA和cDNA為模板直接進行PCR擴增，該過程中所用酶的顯著特點是耐高溫。12(2017吉林舒蘭一高高二下月考)識圖作答：(1)PCR技術(shù)的中文名稱為_，加熱使DNA雙鏈打開，這一步是打開氫鍵，在細胞中是在_酶的作用下進行的。(2)當溫度降低時，引物與模板末端結(jié)合，在_酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成2個DNA分子，此過程中的原料是_，遵循的原則是_。(3)PCR技術(shù)的前提是_?！癙CR”技術(shù)使DNA分子大量復制，若將一個用15N標記的DNA分子放入試管中，以14N標記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復制4次之后，則15N標記的DNA分子占全部DNA分子的比例為_。在基因工程中，把選出的目的基因(共2 000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌呤脫氧核苷酸是860個)放入DNA擴增儀中擴增4代，那么，在擴增儀中應放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)是_，其中在第四代利用的胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)是_。答案(1)多聚酶鏈式反應解旋(2)Taq4種脫氧核苷酸堿基互補配對原則(3)要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物17 1009 120解析(1)PCR是多聚酶鏈式反應的縮寫。加熱使DNA雙鏈打開，這一步是打開氫鍵，在細胞中是在解旋酶的作用下進行的。(2)當溫度降低時，引物與模板末端結(jié)合，在Taq酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成2個DNA分子，此過程中的原料是4種脫氧核苷酸，遵循的原則是堿基互