生活飲用水消毒效果檢驗(yàn)操作步驟、消毒劑、消毒設(shè)備所產(chǎn)生消毒劑及所用化學(xué)原料的樣品采集與配制

（規(guī)范性附錄）

消毒效果檢驗(yàn)操作步驟消毒效果檢驗(yàn)的準(zhǔn)備按消毒劑產(chǎn)品使用說明書稀釋配制水樣，進(jìn)行消毒效果檢驗(yàn)。消毒劑溶液濃度應(yīng)以所含有效成分為準(zhǔn)，消毒劑有效成分濃度的計(jì)算，應(yīng)以細(xì)菌加標(biāo)水樣與消毒劑的混合液中有效成分的最終濃度為準(zhǔn)。消毒設(shè)備分為產(chǎn)生消毒劑的發(fā)生器和不產(chǎn)生消毒劑的消毒處理器。消毒劑發(fā)生器按照產(chǎn)品使用說明書操作，待設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)正常后，在出口處采集樣品，按說明書規(guī)定的最小劑量稀釋后，進(jìn)行消毒效果檢驗(yàn)；消毒劑溶液濃度應(yīng)以所含有效成分為準(zhǔn)，消毒劑有效成分濃度的計(jì)算，應(yīng)以細(xì)菌加標(biāo)水樣與消毒劑的混合液中有效成分的最終濃度為準(zhǔn)。不產(chǎn)生消毒劑的消毒處理器按照產(chǎn)品使用說明操作，待設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)正常后，進(jìn)行消毒效果檢驗(yàn)。樣品的采集見附錄B。微生物實(shí)驗(yàn)采用GB/T5750.12中的濾膜法。生活飲水消毒劑中和劑鑒定操作程序取36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h的3代～14代大腸桿菌8099斜面，用生理鹽水洗下菌苔，混勻后用生理鹽水適當(dāng)稀釋，配制成試驗(yàn)用大腸桿菌懸液。在脫氯自來水中加入大腸桿菌8099，加標(biāo)量為500CFU/100mL~2000CFU/100mL。按產(chǎn)品使用說明書規(guī)定的最大劑量，進(jìn)行中和劑鑒定試驗(yàn)。將裝有600mL細(xì)菌加標(biāo)水樣的錐形瓶和加入消毒劑、高濃度中和劑的300mL脫氯自來水的錐形瓶標(biāo)記好，放入20℃±1℃恒溫水浴箱中，開動(dòng)磁力攪拌器5min。平行進(jìn)行以下試驗(yàn)。第1組取300mL細(xì)菌加標(biāo)水樣，加入高濃度中和劑，使水樣中的中和劑含量為擬使用劑量，混勻，20℃±1℃恒溫水浴作用10min，分別取10mL、1mL各2份，用濾膜法進(jìn)行大腸桿菌活菌計(jì)數(shù)。第2組分別取10mL、1mL細(xì)菌加標(biāo)水樣各2份，用濾膜法進(jìn)行大腸桿菌活菌計(jì)數(shù)。第3組將裝有加入消毒劑、高濃度中和劑（使水樣中的中和劑含量為擬使用劑量）的300ml脫氯自來水20℃±1℃水浴恒溫10min后，加入大腸桿菌懸液至加標(biāo)含量，20℃±1℃恒溫水浴作用10min，分別取10mL、1mL水樣各2份，用濾膜法進(jìn)行大腸桿菌活菌計(jì)數(shù)。第4組分別取100mL脫氯自來水各2份，各加入高濃度中和劑混勻（使水樣中的中和劑含量為擬使用劑量），用濾膜法進(jìn)行大腸桿菌活菌計(jì)數(shù)。作為陰性對(duì)照組。試驗(yàn)重復(fù)3次。評(píng)價(jià)規(guī)定：3次試驗(yàn)結(jié)果中，1、2、3組平均菌量分別在500CFU/100mL~2000CFU/100mL之間，且組間誤差率不超過15%，第4組（陰性對(duì)照組）無菌生長(zhǎng)時(shí)，判定為實(shí)驗(yàn)室中和劑試驗(yàn)有效，若未達(dá)上述要求，應(yīng)查找原因，糾正后重做試驗(yàn)。細(xì)菌加標(biāo)操作程序?qū)⒆詠硭貧庵劣嗦葹?，在脫氯自來水中加入大腸桿菌8099，加標(biāo)量為500CFU/100mL~2000CFU/100mL。開動(dòng)磁力攪拌器攪拌5min，使細(xì)菌在水中分布均勻。先取2份細(xì)菌加標(biāo)水樣，進(jìn)行大腸桿菌活菌計(jì)數(shù)(陽性對(duì)照組)。將裝有細(xì)菌加標(biāo)水樣900mL的錐形瓶放入20℃±1℃恒溫水浴箱中，待水溫恒定后按說明書規(guī)定的最小劑量加入消毒劑或使用消毒設(shè)備對(duì)水樣進(jìn)行消毒。從開始消毒起計(jì)時(shí)。設(shè)定3個(gè)工作時(shí)間，說明書規(guī)定的最短作用時(shí)間為T，3個(gè)作用時(shí)間分別為0.5T，T和1.5T，作用后分別吸取水樣300mL，注入裝有中和劑（通過步驟3鑒定有效）的無菌錐形瓶中，以終止消毒作用。將中和的水樣，分別取1mL、10mL、100mL各2份，過濾后將濾膜平貼于品紅亞硫酸鈉瓊脂平板,36℃±1℃培養(yǎng)48h（每天觀察結(jié)果）進(jìn)行大腸桿菌活菌計(jì)數(shù)。將未接種大腸桿菌的試驗(yàn)用同批次培養(yǎng)基平板2個(gè)，置恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(陰性對(duì)照組)。試驗(yàn)重復(fù)3次，記錄品紅亞硫酸鈉瓊脂平板濾膜上生長(zhǎng)大腸桿菌的菌落數(shù)。大腸桿菌在品紅亞硫酸鈉平板上呈現(xiàn)的菌落形態(tài)為暗紅色有金屬光澤、粉紅的、粉紅色中心暗紅。求其平均值，記錄每100mL水中大腸桿菌菌落數(shù)。評(píng)價(jià)規(guī)定：3次試驗(yàn)結(jié)果T時(shí)間每100mL水中均未檢出大腸桿菌8099，判定合格。上述試驗(yàn)的同時(shí)，測(cè)定作用時(shí)間為T時(shí)的消毒劑余量，并記錄水溫。注：消毒劑發(fā)生器：待水溫恒定后加入采集稀釋后的消毒劑樣品，迅速攪拌均勻，從加入消毒劑起計(jì)時(shí)。消毒處理器：待水溫恒定后使設(shè)備對(duì)細(xì)菌加標(biāo)水樣進(jìn)行消毒，從通入加標(biāo)水樣開始計(jì)時(shí)。消毒劑發(fā)生器：待水溫恒定后加入采集稀釋后的消毒劑樣品，迅速攪拌均勻，從加入消毒劑起計(jì)時(shí)。消毒處理器：待水溫恒定后使設(shè)備對(duì)細(xì)菌加標(biāo)水樣進(jìn)行消毒，從通入加標(biāo)水樣開始計(jì)時(shí)。

（資料性附錄）

生活飲用水消毒劑、消毒設(shè)備所產(chǎn)生消毒劑及所用化學(xué)原料的樣品采集與配制樣品的采集樣品的采集見GB/T17218。樣品的配制試劑空白和試驗(yàn)用水按照樣品制備同樣方法制備試劑空白。本試驗(yàn)僅使用純水。樣品的配制方法次氯酸鈣、硫酸銨、亞氯酸鈉、氯酸鈉、過氧化氫、氯化鈉按10倍產(chǎn)品最大使用劑量稱取樣品以純水溶解，用純水定容稀釋至所需的溶液體積。按式(A.1)計(jì)算稱樣量。m=10×ρ×V……（A.1）式中：m——稱樣量，單位為毫克（mg）；ρ——產(chǎn)品最大使用劑量，單位為毫克每升（mg/L）；10——倍數(shù)因子；V——受檢樣品溶液所需體積，單位為升（L）。高錳酸鉀、次氯酸鈉、氫氧化銨、二氯異氰尿酸鈉、三氯異氰尿酸、氯氨T、對(duì)羧基苯磺酰二氯胺按10倍產(chǎn)品最大使用劑量稱取樣品以純水溶解，用鹽酸[ρ20=1.18g/mL]酸化至pH＜2（可適當(dāng)加熱，切勿煮沸）。用純水定容稀釋至所需的溶液體積。按式（A.1）計(jì)算稱樣量。硫酸、鹽酸于1000mL容量瓶中加入500mL純水，緩慢加入10mL樣品，并不斷振蕩，用純水定容。氯氣、氨氣于1000mL容量瓶中加入960mL純水后，將容量瓶、塞子和所裝的水一起稱量。在通風(fēng)良好的通風(fēng)櫥中，向容量瓶水中通入氣體后，稱量到所需量。其所需重量按式（A.2）計(jì)算。然后用純水定容，蓋好瓶塞，并緩慢地倒置容量瓶3次，立即進(jìn)行測(cè)定。m=10×ρ×1.000··············································