DB22-T2556-2016-轉(zhuǎn)抗蟲基因大豆對大豆食心蟲抗性鑒定技術規(guī)范-吉林省

ICS65.020DB22B05吉林省地方標準DB22/T2556—2016轉(zhuǎn)抗蟲基因大豆對大豆食心蟲抗性鑒定技術規(guī)范Specificationforevaluationofthegeneticallymodifiedsoybeanresistancetosoybeanpodborer吉林省質(zhì)量技術監(jiān)督局發(fā)布DB22/T2556—2016前言本標準按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標準由吉林省農(nóng)業(yè)委員會提出并歸口。本標準起草單位：吉林省農(nóng)業(yè)科學院。本標準主要起草人：汪洋洲、李啟云、杜茜、郭東全、張云月、董英山、高月波、張正坤。IDB22/T2556—2016轉(zhuǎn)抗蟲基因大豆對大豆食心蟲抗性鑒定技術規(guī)范1范圍本標準規(guī)定了轉(zhuǎn)抗蟲基因大豆對大豆食心蟲抗性鑒定的田間抗蟲性鑒定、室內(nèi)抗蟲性鑒定、注意事項、結果分析和報告編寫。本標準適用于轉(zhuǎn)抗蟲基因大豆材料、品系、品種等對大豆食心蟲的抗性鑒定與評價。2術語和定義下列術語和定義適用于本文件。2.1大豆食心蟲soybeanpodborer以幼蟲鉆蛀豆莢為害籽粒的鱗翅目（Lepidoptera）小卷蛾科（Olethreutidae）的大豆害蟲。2.2植物抗蟲性plantresistancetoinsects同一種植物在害蟲為害較重的情況下，其中某些植株能避免受害、耐害或雖受害而有補償能力的特3.1.1大豆食心蟲發(fā)生前期，利用對大豆食心蟲無影響的方法趨避其他害蟲，一周后罩網(wǎng)鑒定。3.1.2將規(guī)格為120cm×60cm×80cm的紗網(wǎng)罩于待鑒定的轉(zhuǎn)基因大豆地塊上，每籠1種樣本，共12株。每種樣本3次重復。1DB22/T2556—20163.2調(diào)查方法大豆成熟后，每籠樣本單收單晾干脫粒，調(diào)查蟲食粒數(shù)，將調(diào)查結果記錄在附錄C中。3.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析3.3.1計算蟲食率按公式（1）計算蟲食率p=n×100%N.....................................(1)式中：P——蟲食率，即蟲食籽粒數(shù)占調(diào)查籽粒數(shù)的百分率。n——蟲食籽粒數(shù)；N——總調(diào)查籽粒數(shù)。3.3.2統(tǒng)計分析采用單因素方差分析法，將轉(zhuǎn)基因材料與受體材料和對照材料進行多重比較。3.4抗性評價標準抗性等級蟲食率/%0≤P≤55＜P≤1010＜P≤1515＜P≤2525＜P抗性類型高抗（HR）抗（R）12345根據(jù)抗性鑒定結果，對鑒定材料進行抗蟲性評價，以抗性最低級別為準。在田間采集具有3個豆粒（鼓粒期）的對照材料、受體材料和供試材料的豆莢，分別放入自封袋，編號后帶回實驗室。在每個培養(yǎng)皿（直徑9cm）放入10個單一材料的豆莢，保濕待用。2DB22/T2556—2016每個豆莢上接入2粒黑頭卵，將接過卵粒的豆莢恒溫培養(yǎng)，待其孵化后自行蛀莢。試驗3次重復。培養(yǎng)條件同4.1。4.4調(diào)查處理7天后，調(diào)查大豆食心蟲幼蟲死亡數(shù)，調(diào)查結果記錄在附錄D中。4.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析4.5.1死亡率計算按公式（2）計算死亡率L=n×100%N.....................................(2)式中：L——死亡率（%），即幼蟲死亡數(shù)占調(diào)查幼蟲總數(shù)的百分率；n——死亡幼蟲數(shù)；N——調(diào)查的幼蟲總數(shù)。4.5.2統(tǒng)計分析采用單因素方差分析法，將轉(zhuǎn)基因材料與受體材料和對照材料進行多重比較。4.6抗性評價標準中抗（MR）感（S）根據(jù)抗性鑒定結果，對鑒定材料進行抗蟲性評價，以抗性最低級別為準。3DB22/T2556—20167編寫報告根據(jù)分析結果，寫出正式報告，列出原始數(shù)據(jù)。4DB22/T2556—2016AA附錄A（資料性附錄）大豆食心蟲形態(tài)特征及分布危害表A.1大豆食心蟲形態(tài)特征蟲態(tài)成蟲形態(tài)特征體長5cm～6cm，翅展12cm～14cm，黃褐至暗褐色。前翅前緣有10條左右黑紫色短斜紋，外緣內(nèi)側中央銀灰色，有3個縱列紫斑點。雄蛾前翅色較淡，有翅韁1根，腹部末端較鈍。雌蛾前翅色較深，翅韁3根，腹部末端較尖。卵幼蟲蛹扁橢圓形，長約0.5mm，橘黃色。體長8mm～10mm，初卵是乳黃色，老熟時變?yōu)殚冱S色。長約6mm，紅褐色。腹末有8根～10根鋸齒狀尾刺。表A.2分布與危害在中國主要分布于東北、華北、西北和湖北、江蘇、浙江、安徽、山東等地，以東北三省、河北、山東受害較重。日本、朝鮮及遠東沿海地區(qū)也有分布。吉林省大豆產(chǎn)區(qū)均有分布。主要為大豆，也取食野生大豆和苦參。分布寄主危害幼蟲蛀入豆莢咬食豆粒。5DB22/T2556—2016BB附錄B（資料性附錄）大豆食心蟲室內(nèi)飼養(yǎng)方法將田間采集到的大豆食心蟲成蟲配對后，放入事先接入豆莢的成蟲產(chǎn)卵籠中，每個產(chǎn)卵籠放入40對～50對大豆食心蟲成蟲。每天更換新鮮豆莢供成蟲產(chǎn)卵。將帶卵的豆莢放入養(yǎng)蟲室中恒溫保濕培養(yǎng)，待卵孵化。培養(yǎng)條件：養(yǎng)蟲室溫度24℃～28℃，相對濕度50%～80%，光照周期16L:8D。每天檢查卵的發(fā)育進度，等到卵粒出現(xiàn)黑頭后取出，用于室內(nèi)抗性鑒定試驗。6DB22/T2556—2016CC附錄C（規(guī)范性附錄）大豆食心蟲田間抗性調(diào)查表表C.1大豆食心蟲田間抗性調(diào)查表調(diào)查人：調(diào)查時間：總粒數(shù)調(diào)查地點：蟲食粒數(shù)重復2序號材料名稱蟲食率（%）重復1重復2重復3重復1