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文檔簡(jiǎn)介
細(xì)胞工程
?師生互動(dòng)提考能
考點(diǎn)一植物細(xì)胞工程
任務(wù)驅(qū)動(dòng)探究突破
任務(wù)1對(duì)細(xì)胞工程概念的理解
(1)原理和方法:細(xì)胞生物學(xué)和。
(2)操作水平:o
(3)目的:依據(jù)人的意愿來(lái)變更或獲得細(xì)胞產(chǎn)品。
(4)依據(jù)操作對(duì)象的不同分為兩類:植物細(xì)胞工程和o
任務(wù)2完善植物組織培育技術(shù)的相關(guān)內(nèi)容
⑴概念
①培育對(duì)象:。
②培育條件:無(wú)菌、人工配制的培育基、相關(guān)激素等人工限制條件。
③培育結(jié)果:產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成0
(2)操作流程
外植體(一)「|J-)根、芽或胚狀體一試管苗
任務(wù)3完善植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的相關(guān)內(nèi)容
(1)概念:將不同種的植物體細(xì)胞,在肯定條件下融合成,并把雜種細(xì)胞培育
成的技術(shù)。
(2)操作流程
手
植
物
細(xì)
上
胞
、
植物細(xì)胞融合d
(3)流程分析
①過(guò)程a為去除以獲得具有活力的原生質(zhì)體,用到的酶是o
②過(guò)程b是原生質(zhì)體的融合,其原理是0
③誘導(dǎo)b融合的兩種方法:物理法包括等;化學(xué)法一般用
____________作為誘導(dǎo)劑。
④過(guò)程c是原生質(zhì)體融合后再生出新的。
⑤過(guò)程d是技術(shù),其原理是。
(4)意義
任務(wù)4植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用
⑴植物繁殖的新途徑
.(常利用莖尖等分生組織)
單倍體育種
⑵作物新品種的培育
(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):如人參皂貳干粉的生產(chǎn)。
任務(wù)5比較植物組織培育與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)分與聯(lián)系
名稱植物組織培育植物體細(xì)胞雜交
細(xì)胞膜具有肯定的流淌性和細(xì)胞
原理—
的全能性
離體的植物器官、
植物細(xì)胞A
組織或細(xì)胞[去壁
(脫分化___________)人工誘導(dǎo)一___________
過(guò)程1去壁1再生壁
1再分化植物細(xì)胞B'
I脫分化
發(fā)育雜種再分化愈傷
3植株“組織
植物體
選取根尖、莖尖、形成層部位最簡(jiǎn)
選材
潔誘導(dǎo)脫分化—
除脫分化、再分化外,還要用酶解
技術(shù)
—法去除細(xì)胞壁,用肯定的方法誘導(dǎo)
操作
原生質(zhì)體融合
聯(lián)系—是_____________的基礎(chǔ),____________所用的技術(shù)更困難
任務(wù)6比較單倍體育種和突變體利用的不同點(diǎn)
項(xiàng)目原理優(yōu)點(diǎn)成果
單倍體單育1號(hào)煙草品種、中花8
染色體變異明顯縮短育種年限
育種號(hào)、11號(hào)水稻和京花1號(hào)
小麥品種等
突變體產(chǎn)生新基因,大幅度改良某抗花葉病毒的甘蔗、抗鹽堿
基因突變
的利用些性狀的野生煙草等
考向分類對(duì)點(diǎn)落實(shí)
考向一I植物組織培育技術(shù)及應(yīng)用
1.[2016?江蘇卷,9]下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述,正確的是()
A.PEG是促細(xì)胞融合劑,可干脆誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合
B.用原生質(zhì)體制備人工種子,要防止細(xì)胞裂開(kāi)
C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理,可干脆獲得單克隆抗體
D.核移植克隆的動(dòng)物,其線粒體DNA來(lái)自供卵母體
2.(多選)在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)試驗(yàn)步驟中,須要()
A.用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞
B.用選擇培育基篩選導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞
C.用聚乙二醇誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生質(zhì)體融合
D.用適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織生芽
3.[經(jīng)典高考]為了探究6—BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,某探討
小組在MS培育基中加入6—BA和IAA,配制成四種培育基(見(jiàn)下表),滅菌后分別接種數(shù)量相
同、生長(zhǎng)狀態(tài)一樣、消毒后的莖尖外植體,在相宜條件下培育一段時(shí)間后,統(tǒng)計(jì)再生叢芽外
植體的比率?,以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)5),結(jié)果如下表:
濃度/(mg?L-1)
培養(yǎng)基編號(hào)m/%〃/個(gè)
6-BAIAA
1076.73.1
20.177.46.1
0.5
30.266.75.3
40.560.05.0
回答下列問(wèn)題:
(1)依據(jù)植物的需求量,培育基中無(wú)機(jī)鹽的元素可分為和兩類。上
述培育基中,6—BA屬于類生長(zhǎng)調(diào)整劑。
(2)在該試驗(yàn)中,自變量是,因變量是,自變
量的取值范圍是o
(3)從試驗(yàn)結(jié)果可知,誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培育基是號(hào)培育基。
(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根,培育基中一般不加入(填“6—BA”或
“IAA”)o
4.[經(jīng)典模擬]傳統(tǒng)的人工繁殖蘭花的方法是分株繁殖和用種子播種,隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)
步,人們起先采納組織培育技術(shù)繁殖蘭花,其過(guò)程如圖所示:
(1)植物組織培育是在_________和人工培育條件下,將的植物組織、器官、
細(xì)胞,培育在人工配制的__________上,誘導(dǎo)其產(chǎn)生__________、叢芽,最終發(fā)育成完整植
株的過(guò)程。
(2)蘭花的葉肉細(xì)胞之所以能培育為新個(gè)體,是因?yàn)榧?xì)胞中含有,具
有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能,這種潛能叫o
(3)請(qǐng)用簡(jiǎn)潔的文字和箭頭,繪出①②③④之間的關(guān)系
(4)有人想到利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)解決蘭花生根速度慢、幼苗生存實(shí)力弱的好方法,
但操作后得到的“韭菜一蘭花”,并沒(méi)有預(yù)想中的“繁殖簡(jiǎn)潔,香氣濃郁”,可能的緣由是
5.[經(jīng)典模擬]植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分別和培育的主要過(guò)程可用如圖所示圖解簡(jiǎn)潔表
示:
(1)培育胚狀體利用了這一項(xiàng)生物技術(shù),胚狀體再接著培育,則可培育
出完整的植株,這體現(xiàn)了o培育基中除了含有肯定的養(yǎng)分外,還必需含有
等植物激素,還須要對(duì)培育基進(jìn)行嚴(yán)格的O
(2)假如愈傷組織是三七葉肉細(xì)胞培育產(chǎn)生的,若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物,則只須要培
育到;若為了獲得三七的人工種子,則須要培育到o假如愈傷組織是
棉花葉肉細(xì)胞培育產(chǎn)生的,通過(guò)基因工程要獲得抗蟲(chóng)棉,目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細(xì)胞常
用的方法是法。
(3)從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過(guò)程中,必須要經(jīng)過(guò)o
①無(wú)絲分裂②有絲分裂③減數(shù)分裂④原代培育
⑤傳代培育⑥植物體細(xì)胞雜交⑦細(xì)胞融合⑧脫分化⑨再分化
考向二植物體細(xì)胞雜交技術(shù)
6.[經(jīng)典高考]甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分A,乙含
有效成分B。某探討小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)為了培育該新型藥用植物,可取甲和乙的葉片,先用酶和酶去
除細(xì)胞壁,獲得具有活力的,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合,形成的融合細(xì)胞進(jìn)
一步培育形成組織,然后經(jīng)過(guò)形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱
為o
(2)上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指
假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的,
而上述雜種植株是可育的,造成這種差異的緣由是
(3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖,經(jīng)植物組織培育得到的
等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。
7.[天津卷]DHA對(duì)腦神經(jīng)發(fā)育至關(guān)重要。以A、B兩種單細(xì)胞真核藻為親本,利用細(xì)胞融
合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻。兩種藻特性如下表。
優(yōu)勢(shì)代生長(zhǎng)速率固體培育基DHA
親本藻
謝類型[g/(L?天)]上藻落直徑含量(%。)
A藻自養(yǎng)0.06小0.7
B藻異養(yǎng)0.14大無(wú)
據(jù)表回答:
(1)選育的融合藻應(yīng)具有A藻和B藻的
優(yōu)點(diǎn)。
(2)誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻,其目的是獲得
(3)通過(guò)以下三步篩選融合藻,步驟可淘汰B藻,步驟可淘汰生長(zhǎng)
速率較慢的藻落,再通過(guò)步驟獲得生產(chǎn)所需的融合藻。
步驟a:視察藻落的大小
步驟b:用不含有機(jī)碳源(碳源一一生物生長(zhǎng)的碳素來(lái)源)的培育基進(jìn)行光照培育
步驟c:測(cè)定DHA含量
(4)以獲得的融合藻為材料進(jìn)行甲、乙、丙三組試驗(yàn),結(jié)果如下圖:
生L0
0.25--
長(zhǎng)D
速-68H
0.20.A
率
(-s6含
g0.15.
/量
r-s
?4(
0.10-0%
>H)-s)
l2
0.05.-
O
0.
丙
試驗(yàn)組甲乙
光
暗
照
是否光照光照第
葡萄
葡萄
糖
糖
培養(yǎng)基碳源無(wú)機(jī)物
①甲組條件下,融合藻產(chǎn)生[田的細(xì)胞器是;丙組條件下產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是
②與甲、丙兩組相比,乙組融合藻生長(zhǎng)速率較快,緣由是在該培育條件下
o甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高,但實(shí)際生產(chǎn)中往往采納甲組
的培育條件,其緣由是
8.[原創(chuàng)]選取A、B植株的細(xì)胞進(jìn)行如下圖的操作,請(qǐng)回答問(wèn)題:
(1)實(shí)現(xiàn)圖中①過(guò)程最常用的方法是。
(2)②過(guò)程的發(fā)生,必需進(jìn)行,其方法有法和法。
(3)若細(xì)胞A內(nèi)含a個(gè)染色體,細(xì)胞B內(nèi)含b個(gè)染色體,則“雜種細(xì)胞”內(nèi)含—
個(gè)染色體;若A、B植株采納常規(guī)雜交育種方法勝利的話,得到的后代含個(gè)染色體,
必需用來(lái)處理幼苗,才能得到可育的雜種植株,其中含有個(gè)染
色體。這兩種方法相比,體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是:=
9.[2024?廣東省新高考適應(yīng)性測(cè)試]植物細(xì)胞工程技術(shù)在作物育種上具有廣泛的應(yīng)用。
回答下列問(wèn)題:
(1)植物組織培育技術(shù):在________和人工限制的條件下,將離體的組織和細(xì)胞在特定培
育基上先得到愈傷組織,再分化得到胚狀體等,進(jìn)而得到新植株。該過(guò)程的原理是
(2)植物原生質(zhì)體培育技術(shù):首先用酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁得到原生
質(zhì)體,然后向原生質(zhì)體中導(dǎo)入抗病基因或含有抗病基因的染色體片段,轉(zhuǎn)移至合適的環(huán)境中,
在(填細(xì)胞器)的作用下再生細(xì)胞壁、形成愈傷組織、得到胚狀體,最終發(fā)育成
完整的植株。
(3)植物體細(xì)胞雜交技術(shù):該技術(shù)是先用酶解法將兩種不同植物的細(xì)胞壁去除,再添加
(填化學(xué)法)誘導(dǎo)兩種原生質(zhì)體相融合,再生出細(xì)胞壁后形成雜種細(xì)胞,經(jīng)組織
培育技術(shù)得到雜種植株。該項(xiàng)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是,該技
術(shù)可能不會(huì)依據(jù)人們的意愿表達(dá)出雙親的優(yōu)良性狀,其緣由可能是
考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞工程
任務(wù)驅(qū)動(dòng)探究突破
任務(wù)1完善動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程示意圖,并填空
翳疆一常剪碎組織一區(qū)用處理
分散成單個(gè)細(xì)胞
制成細(xì)胞懸液」
放入二氧化碳
轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
進(jìn)行原代培養(yǎng)
貼滿瓶壁的細(xì)胞用處理
分散成單個(gè)細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液
轉(zhuǎn)入培養(yǎng)
液中進(jìn)行
傳代培養(yǎng)
(1)與植物細(xì)胞培育相比,動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程所用的培育基一般是培育基,并加
入。
(2)動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中兩次用到胰蛋白酶,第一次的作用是將剪碎的組織分散成
其次次是將貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞從瓶壁上______下來(lái),其目的是避開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞的
________現(xiàn)象。
(3)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)加入CO?的主要作用是維持培育液的;的作用是促進(jìn)細(xì)胞
任務(wù)2干細(xì)胞的種類
名稱胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞
類別全能干細(xì)胞多能干細(xì)胞專能干細(xì)胞
具有分化為成年動(dòng)物
具有組織特異性,具有只能分化成某一種類
體內(nèi)的任何一種類型
分化成多種細(xì)胞或組型或功能親密相關(guān)的
特點(diǎn)的細(xì)胞,并進(jìn)一步形成
織的潛能,不具有發(fā)育幾種類型的細(xì)胞,不能
機(jī)體的全部組織和器
成完整個(gè)體的實(shí)力發(fā)育成完整個(gè)體
官甚至個(gè)體的潛能
來(lái)源
早期胚胎(如桑甚胚或
或造血干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞等
囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞)
舉例
治療白血病,惡性腫瘤治療神經(jīng)組織損傷和
用于病人的器官移植放療、化療后引起的造神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病
應(yīng)用
等血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能(帕金森病、阿爾茨海
障礙等疾病默病等)
任務(wù)3比較動(dòng)物細(xì)胞培育與動(dòng)物體細(xì)胞核移植的不同點(diǎn)
動(dòng)物細(xì)胞培育動(dòng)物體細(xì)胞核移植
原理
動(dòng)物£H織塊
剪碎、胰蛋
門酶處理供體體細(xì)胞從卵巢中取卵母細(xì)胞
|細(xì)胞培養(yǎng)[減中期
細(xì)胞,懸液n
供體體細(xì)胞核去核
1放入培養(yǎng)瓶_____
培養(yǎng)(維胞貼壁生長(zhǎng))[細(xì)胞融合
過(guò)程
一1接觸抑制
_處理,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)
1胚胎移植
代孕雌性個(gè)體
11生出
培養(yǎng)與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體
少數(shù)細(xì)胞獲得二F死性(癌細(xì)胞)
結(jié)果獲得________獲得________
①加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良種繁育
①生產(chǎn)生物制品
②愛(ài)護(hù)瀕危物種
應(yīng)用②用于基因工程
③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白
③檢測(cè)有毒物質(zhì)
④供應(yīng)克隆器官、組織等
易錯(cuò)警示
細(xì)胞工程的兩個(gè)總結(jié)
(1)植物組織培育和動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程都存在細(xì)胞的培育過(guò)程,但植物細(xì)胞可以先分裂再
分化,而動(dòng)物細(xì)胞不分化只分裂。
(2)克隆動(dòng)物的起點(diǎn)是經(jīng)過(guò)核移植后形成的重組細(xì)胞,其遺傳物質(zhì)主要來(lái)自供體,因此形
成的個(gè)體性狀主要同供體,但也有部分性狀同受體。
任務(wù)4比較植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的不同點(diǎn)
植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合
細(xì)胞膜的流淌性、
原理—
細(xì)胞的全能性
細(xì)胞A、B細(xì)胞A、B
過(guò)程
1去壁(融合
原生質(zhì)體A、B雜交細(xì)胞
1融合J有絲分裂
融合的原生質(zhì)體多個(gè)相同雜交細(xì)胞
(再生壁
雜種細(xì)胞
(植物組織培育
雜種植株
相關(guān)酶—胰蛋白酶或膠原蛋白酶
融合物理法:離心、電激、振動(dòng);化學(xué)法:除物理法和化學(xué)法外,還可以用滅活
方法聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)的病毒誘導(dǎo)
結(jié)果——
突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣
意義—
雜交成為可能
任務(wù)5據(jù)圖完成下列各題
圖1中,a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和已免疫的B淋巴細(xì)胞,圖2為單克隆抗體制備的流
程(依次已被打亂)。
??
0Q
已免疫的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)產(chǎn)生特定
B淋巴細(xì)胞抗體的雜交瘤細(xì)胞
ACD
把產(chǎn)生特定抗體
培養(yǎng)獲取的
產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞注
骨髓瘤細(xì)胞的雜交瘤細(xì)胞入小鼠腹腔
EGH
圖2
⑴由圖1分析:①誘導(dǎo)a、b兩種細(xì)胞融合的方法有聚乙二醇(PEG)、、電激等;
②a、b兩種細(xì)胞可發(fā)生融合,融合的原理是;③融合后形成圖中的d細(xì)胞,d
細(xì)胞的特點(diǎn)是;④由d細(xì)胞產(chǎn)生的抗體與一般血清抗體相比,具
有等特點(diǎn)。
(2)圖2B中小鼠注射的物質(zhì)是,其目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答,從而產(chǎn)生效
應(yīng)B細(xì)胞(漿細(xì)胞)。
(3)在獲得C細(xì)胞時(shí),被篩選淘汰的細(xì)胞類型有,只有融合的
才能生長(zhǎng)。
(4)請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的依次連接起來(lái):
考向分類對(duì)點(diǎn)落實(shí)
考向一動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)的考查
1.[經(jīng)典高考]下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培育的敘述,正確的是()
A.細(xì)胞系連續(xù)分裂的細(xì)胞大多具有二倍體核型
B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞
C.由多個(gè)祖細(xì)胞培育形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆
D.未經(jīng)克隆化培育的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀
2.(多選)試驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培育(非克隆培育)的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述正確的是
()
|小鼠|一_-1細(xì)月包~[細(xì)胞
A.甲過(guò)程須要對(duì)試驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒
B.乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶處理
C.丙過(guò)程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型
D.丁過(guò)程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性
[題后歸納]
(1)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培育的緣由:幼齡動(dòng)物組織或胚
胎的細(xì)胞分化程度低,增殖實(shí)力很強(qiáng),更易于培育。
(2)在動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中兩次用到胰蛋白酶:第一次是將剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)胞;
其次次是將貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞從瓶壁上分別下來(lái),其目的是避開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)出現(xiàn)接觸抑制
現(xiàn)象。
(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制
懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)
胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。
(4)原代培育與傳代培育
①原代培育:細(xì)胞懸液第一次在瓶中培育,沒(méi)有分瓶培育之前的細(xì)胞培育。
②傳代培育:原代培育的細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖到肯定時(shí)間后,由于空間不足或細(xì)胞密度過(guò)大
導(dǎo)致養(yǎng)分枯竭,進(jìn)而影響細(xì)胞的生長(zhǎng),因此須要重新用胰蛋白酶等處理,進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培育,
即傳代培育。
3.[2024?四川成都棠湖中學(xué)高三月考]食品保鮮劑一一青鮮素能抑制植物細(xì)胞生長(zhǎng)與分
裂從而抑制發(fā)芽,被用于蔬菜的保鮮,但其殘留會(huì)損害人體健康。依據(jù)材料回答下列問(wèn)題。
(1)青鮮素是人工合成的對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育有調(diào)整作用的化學(xué)物質(zhì),屬于
(2)青鮮素殘留毒性可能會(huì)使發(fā)生突變,導(dǎo)致正常細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂
失控而變成癌細(xì)胞。
(3)科研人員以小兔為試驗(yàn)材料,用“動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)”對(duì)青鮮素的毒害性進(jìn)行了檢
測(cè)。
①請(qǐng)完善檢測(cè)青鮮素毒性的試驗(yàn):
主要試驗(yàn)步驟:
第一步:取大小相同的六只培育瓶編號(hào)為1?6,分別加入等量的相同培育液和小兔細(xì)胞。
其次步:向1號(hào)培育瓶中加入生理鹽水,向2?6號(hào)培育瓶中分別加入
第三步:培育一段時(shí)間后,取樣制成臨時(shí)裝片,用顯微鏡視察,
結(jié)果如下表:
培育瓶編號(hào)123456
添加劑中青
鮮素濃度水103090270810
(mg/L)
變異細(xì)
001/1061/1062/1068/106
胞比例
分析表中數(shù)據(jù)可得出結(jié)論
②該試驗(yàn)檢測(cè)有毒物質(zhì)毒性的指標(biāo)是,所用培育液中須
要加入的特別養(yǎng)分成分是—
考向二體細(xì)胞克隆技術(shù)及應(yīng)用
4.[2016?全國(guó)卷II,40]下圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的
流程。
回答下列問(wèn)題:
(1)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2〃,則其性染色體的組成可為0
過(guò)程①表示去除細(xì)胞核,該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培育至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,去核時(shí)常采納
的方法。②代表的過(guò)程是o
(2)經(jīng)過(guò)多次傳代后,供體細(xì)胞中的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此,選材時(shí)必需關(guān)注傳
代次數(shù)。
(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其緣由是
⑷與克隆羊“多利”培育勝利一樣,其他克隆動(dòng)物的勝利獲得也證明白
題后反思
(1)克隆技術(shù)形成的重組細(xì)胞可發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體,體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性,而非動(dòng)物細(xì)
胞的全能性。
(2)克隆屬于無(wú)性繁殖,產(chǎn)生新個(gè)體的性別以及絕大多數(shù)性狀與供核親本一樣。
(3)核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供核動(dòng)物性狀不完全相同:
①克隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自于供體細(xì)胞核,但其核外線粒體中的DNA主要來(lái)自于受體
卵細(xì)胞。
②性狀是基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果。供核動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不
會(huì)完全相同,其性狀也不行能和供核動(dòng)物完全相同。
③在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中有可能發(fā)生基因突變,產(chǎn)生供核動(dòng)物沒(méi)有的性狀。
考向三單克隆抗體的制備及應(yīng)用
5.(多選)下圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述,正確的是()
A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞
B.②中運(yùn)用聚乙二醇有利于雜交瘤細(xì)胞的形成
C.③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性
D.④是經(jīng)篩選培育獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群
6.(多選)關(guān)于下面制備單克隆抗體過(guò)程示意圖的敘述,正確的是()
B淋巴
.wC細(xì)胞、②細(xì)胞融合③雜交④篩選
小鼠、火也造,并篩選一*瘤細(xì)胞
瘤細(xì)胞
⑤能產(chǎn)生培兼足夠⑥體外盤慧
特定抗體暨數(shù)量大規(guī)模整2顰鬟
的細(xì)胞群的細(xì)胞培養(yǎng)大量抗體
A.①表示已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的
B.②促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo)
C.④中的篩選是通過(guò)抗原一抗體反應(yīng)進(jìn)行的
D.⑤可以無(wú)限增殖
7.[全國(guó)卷I,40]某探討者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免
疫5次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋
倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。
血清抗體效價(jià)
32000
28000
24000
20000
1600()
12000
8000
4000XyZ
第一次第二次第三次第四次第五次免疫次數(shù)
若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條),并將該細(xì)胞與
體外培育的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按肯定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)
細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培育及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則
小鼠最少須要經(jīng)過(guò)次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫
小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是小鼠,理由是
(2)細(xì)胞融合試驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有
____________________________________________________,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的緣由
是O
(3)雜交瘤細(xì)胞中有個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是條。
(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培育后都不能存活,緣由是
[題后反思]
比較制備單克隆抗體過(guò)程中的幾種細(xì)胞
細(xì)胞特點(diǎn)
漿細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體,但不能無(wú)限增殖
骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖,但不能產(chǎn)生抗體
雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生單一抗體,又能在體外培育條件下無(wú)限增殖
8.[2024?黑龍江省大慶市鐵人中學(xué)高三模擬]CD3分子是協(xié)助性T細(xì)胞表面的標(biāo)記分子,
在抗原識(shí)別和免疫信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中具有重要的作用。利用抗CD3單克隆抗體阻斷免疫細(xì)胞活
化信號(hào)傳導(dǎo),可為防治器官移植排斥反應(yīng)與治療自身免疫性疾病供應(yīng)新的方法和手段。下圖
為獲得抗CD3抗體(Ab—3)的兩種方法,請(qǐng)據(jù)圖回答:
(Da過(guò)程為從小鼠的中提取抗體;經(jīng)b、c、d過(guò)程獲得抗體相對(duì)于a過(guò)程獲得
抗體的優(yōu)勢(shì)是
(2)b過(guò)程一般從小鼠的(填器官)中分別免疫細(xì)胞,甲和乙試管中的細(xì)胞分別是
和O
(3)過(guò)程c須要在具有作用的培育基上培育,分別獲得的丙試管中細(xì)胞的特點(diǎn)是
(4)d過(guò)程是對(duì)丙試管中的細(xì)胞進(jìn)行和,以獲得足夠數(shù)量
的能夠分泌抗CD3特異性抗體的細(xì)胞。
9.:2024?重慶市開(kāi)州區(qū)鐵橋中學(xué)高三質(zhì)量檢測(cè)]用噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)獲得人的單克隆抗
體,方法是將人抗體基因插入噬菌體載體,然后讓該噬菌體感染大腸桿菌,抗體可能和病毒
蛋白以融合蛋白的形式,附著在噬菌體表面,也可能通過(guò)大腸桿菌分泌出去?;卮鹣铝袉?wèn)題:
⑴獲得人抗體基因時(shí),可從人的(填“B”“T”或“體”)細(xì)胞中獲得總RNA,
逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,再通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增出抗體基因。在PCR反應(yīng)體系中,加入dNTP(dCTP>dATP、
dGTP和dTTP)的作用是o
⑵在噬菌體抗體庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程中,理論上可以不利用Ca?+處理大腸桿菌,依據(jù)是
⑶從噬菌體抗體庫(kù)中篩選特異性抗體的方法是,原理是
(4)在抗體基因與噬菌體基因之間設(shè)計(jì)了一個(gè)終止密碼子(UAG)的對(duì)應(yīng)序列在終止密碼子
突變型的菌株表達(dá)時(shí),抗體基因的表達(dá)產(chǎn)物是(填“融合蛋白”或“分泌型抗
體”)。
(5)與利用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體相比,用該技術(shù)省去了(步
驟),使制備更簡(jiǎn)潔易行。
課堂總結(jié)?網(wǎng)絡(luò)聚焦大概念
[網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)提升]
[長(zhǎng)句應(yīng)答必備]
1.植物組織培育的過(guò)程主要包括脫分化和再分化兩個(gè)階段,脫分化的結(jié)果是形成愈傷組
織,再分化的結(jié)果是形成根和芽。
2.植物體細(xì)胞雜交須要用酶解法制備原生質(zhì)體,所用的酶包括纖維素酶和果膠酶。
3.無(wú)論是植物體細(xì)胞雜交,還是動(dòng)物細(xì)胞融合,都須要誘導(dǎo)。
4.植物組織培育須要各種養(yǎng)分成分和植物激素,動(dòng)物細(xì)胞培育須要各種養(yǎng)分成分及血清。
5.植物體細(xì)胞雜交可用于作物育種,動(dòng)物細(xì)胞融合可用于單克隆抗體的制備。
6.產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞,它既能產(chǎn)生單克隆抗體,又能無(wú)限增殖。
^0^0000^000^^00^00^0^?分類集訓(xùn)培素養(yǎng)
[等級(jí)選考研考向]
1.[2024?江蘇卷,22](多選)如圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是()
⑼a?b
A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分化再誘導(dǎo)融合
B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合須要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)
C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流淌性都有關(guān)
D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的全部基因
2.[2024?天津卷]某植物有A、B兩品種。科研人員在設(shè)計(jì)品種A組織培育試驗(yàn)時(shí),參
照品種B的最佳激素配比(如表)進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)。
細(xì)胞分裂素濃度生長(zhǎng)素濃度
品種B組織培育階段
(umol/L)(Rmol/L)
I誘導(dǎo)形成愈傷組織ni
n誘導(dǎo)形成幼芽Hk772
iii誘導(dǎo)生根Uh〃3
據(jù)表回答:
⑴I階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體,緣由是
(2)在I、II、III階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是階段。
(3)為確定品種A的I階段的最適細(xì)胞分裂素濃度,參照品種B的激素配比血>2.0),以
0.5Pmol/L為梯度,設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的試驗(yàn),細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)為Pmol/Lo
(4)III階段時(shí),科研人員分別選用濃度低于或高于aumol/L的生長(zhǎng)素處理品種A幼芽都
能達(dá)到最佳生根效果,緣由是處理幼芽時(shí),選用低濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為,選
用高濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為。
(5)在________階段用秋水仙素對(duì)材料進(jìn)行處理,最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體。
3.[2024?江蘇卷]新型冠狀病毒可通過(guò)表面的刺突蛋白(S蛋白)與人呼吸道黏膜上皮細(xì)
胞的ACE2受體結(jié)合,侵入人體,引起肺炎。圖1為病毒侵入后,人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)
示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵,故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的探
討熱點(diǎn)之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:
圖1圖2
(1)圖1中人體內(nèi)抗原遞呈細(xì)胞吞噬病毒,并將病毒的抗原暴露在細(xì)胞表面,被
細(xì)胞表面的受體識(shí)別后激活該細(xì)胞。
(2)B細(xì)胞識(shí)別入侵的病毒后,在淋巴因子作用下,經(jīng)過(guò)細(xì)胞的,形成
_________________________細(xì)胞。
(3)為推斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者,采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查,檢
測(cè)病毒的;采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查,檢測(cè)
(4)據(jù)圖2所示,研制抗S蛋白單克隆抗體,需先注射免疫小鼠以激活小鼠的免
疫細(xì)胞,再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,用HAT培育基篩選獲得細(xì)胞。因
為同一種抗原可能激活細(xì)胞,還需接著篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞株。
4.[2017?海南卷,31]甲、乙兩名
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