竹葉中黃酮的測定編制說明

《竹葉中黃酮的測定》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)編制說明

一、工作簡況

（一）項(xiàng)目背景

我國是世界上最主要的產(chǎn)竹國，竹產(chǎn)品種類繁多，產(chǎn)業(yè)橫跨一二三產(chǎn)業(yè)，是極具活力和潛力的

綠色富民產(chǎn)業(yè)。長期以來，相關(guān)部門和各主要竹產(chǎn)區(qū)地方政府積極推動(dòng)竹產(chǎn)業(yè)發(fā)展，持續(xù)加強(qiáng)規(guī)劃

引領(lǐng)、示范帶動(dòng)、科技支撐和政策支持，竹產(chǎn)業(yè)呈現(xiàn)良好發(fā)展態(tài)勢。竹材人造板、竹建材、竹日用

品、竹工藝品、竹漿造紙、竹纖維制品、竹炭、竹醋液、竹筍加工品、竹葉提取物等10大類、上

萬個(gè)品種的竹產(chǎn)品，已廣泛應(yīng)用于建筑、運(yùn)輸、包裝、家具、裝飾、紡織、造紙、食品、醫(yī)藥、旅

游、康養(yǎng)等領(lǐng)域，在促進(jìn)生態(tài)文明建設(shè)、拉動(dòng)地方經(jīng)濟(jì)增長、助推農(nóng)民增收致富等方面發(fā)揮了重要

作用。

貴州是我國竹類資源最豐富的地區(qū)之一，全省自然分布的竹種有19屬154種，現(xiàn)已開發(fā)利用

毛竹、方竹、慈竹等20余種。2019年以來，貴州省委、省政府將竹子作為特色林業(yè)產(chǎn)業(yè)統(tǒng)籌發(fā)展。

截至2022年底，全省竹林面積超500萬畝，竹產(chǎn)業(yè)綜合產(chǎn)值達(dá)125億元，竹產(chǎn)業(yè)規(guī)模、產(chǎn)品價(jià)值

和綜合效益形成破“竹”之勢。近年來，省委、省政府高度重視竹產(chǎn)業(yè)發(fā)展，將竹產(chǎn)業(yè)列入全省十

二大特色優(yōu)勢產(chǎn)業(yè)中的特色林業(yè)產(chǎn)業(yè)統(tǒng)籌發(fā)展，形成了以赤水河竹產(chǎn)業(yè)帶、大婁山竹產(chǎn)業(yè)帶、清水

江竹產(chǎn)業(yè)帶、武陵山竹產(chǎn)業(yè)帶為核心的“兩山兩水、星羅棋布”的竹產(chǎn)業(yè)發(fā)展格局。遵義市竹產(chǎn)業(yè)

快速發(fā)展，遵義市竹林資源面積達(dá)366萬畝，占全省竹林資源面積的70％以上，赤水市獲國家林業(yè)

產(chǎn)業(yè)示范園區(qū)稱號和“中國林草產(chǎn)業(yè)特色區(qū)域品牌培育試點(diǎn)單位‘中國竹都’”資格。

近年來，貴州省赤水市依托豐富的毛竹資源，引進(jìn)竹產(chǎn)業(yè)深加工企業(yè)，采取“黨支部+公司+農(nóng)

戶”的模式，大力發(fā)展竹筷、竹席、竹簽、竹地板等竹產(chǎn)業(yè)，將竹資源的生態(tài)優(yōu)勢轉(zhuǎn)化為經(jīng)濟(jì)優(yōu)勢，

帶動(dòng)農(nóng)民就業(yè)增收，助力鄉(xiāng)村振興。當(dāng)前，貴州提出，“十四五”期間全省計(jì)劃新造和改培竹林面積

295萬畝，其中新造25萬畝、改培低效竹林270萬畝。

目前全省有竹產(chǎn)品加工企業(yè)420余家。圍繞竹紙制品、竹木家具、竹集成材等產(chǎn)業(yè)，貴州不斷

延鏈補(bǔ)鏈強(qiáng)鏈，當(dāng)前省內(nèi)竹筍加工率達(dá)40%、竹材加工率達(dá)80%以上，初步形成了6大系列300種

產(chǎn)品。貴州積極推進(jìn)“竹旅融合”，赤水竹海國家森林公園、盤州大洞竹海等風(fēng)景區(qū)知名率不斷攀

升。

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貴州是全國唯一的生態(tài)文明建設(shè)先行區(qū)，大力發(fā)展竹產(chǎn)業(yè)，對提升竹林“四庫”（水庫、錢庫、

糧庫、碳庫）效益、鞏固生態(tài)優(yōu)勢、實(shí)施鄉(xiāng)村振興等具有重大意義。下一步貴州將開展資源培優(yōu)行

動(dòng)、加工提升行動(dòng)、科技創(chuàng)新行動(dòng)、以竹代塑行動(dòng)、促農(nóng)增收行動(dòng)，助力竹產(chǎn)業(yè)進(jìn)一步提質(zhì)量、增

動(dòng)力、強(qiáng)后勁、降能耗、惠民生。

竹葉黃酮（bambooleafextract）是一種天然的植物提取物，被廣泛應(yīng)用于食品、保健品和藥物

中。竹葉黃酮含有豐富的黃酮類化合物，具有多種功效與作用。1.抗氧化作用。竹葉黃酮具有較強(qiáng)

的抗氧化作用，可以清除體內(nèi)自由基，減少氧化損傷對細(xì)胞的傷害。研究表明，竹葉黃酮可以提高

SOD（超氧化物歧化酶）的活性，增強(qiáng)抗氧化能力，抑制過氧化脂質(zhì)的產(chǎn)生，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損

傷。此外，竹葉黃酮還能夠抑制一些有害酶的活性，減少其對細(xì)胞的損害。2.抗炎作用。竹葉黃酮

具有明顯的抗炎作用，可以抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展。研究表明，竹葉黃酮可以抑制多種炎癥介

質(zhì)的生成，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和白細(xì)胞介素-6（IL-6）等。竹

葉黃酮還可以抑制一些炎癥相關(guān)的信號通路的活化，如核因子-κB（NF-κB）和線粒體反應(yīng)性氧種

（ROS）等。通過抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生，竹葉黃酮可以緩解炎癥引起的疾病癥狀，如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、

腎炎等。3.降血脂作用。竹葉黃酮具有降低血脂的作用，可以調(diào)節(jié)血脂代謝，降低血液中的膽固醇

和三酰甘油水平。研究發(fā)現(xiàn)，竹葉黃酮可以通過抑制脂肪合成酶的活性，減少膽固醇的合成；并通

過抑制膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的活性，增加膽固醇的排泄，從而降低血液中的膽固醇水平。此外，竹葉黃

酮還可以增加脂肪的氧化分解，降低體內(nèi)脂肪的積累。4.保護(hù)心血管作用。竹葉黃酮具有保護(hù)心血

管的作用，可以降低心血管疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。竹葉黃酮可以降低血壓，改善血管彈性，減少動(dòng)脈硬

化的發(fā)生。研究顯示，竹葉黃酮可以增加一氧化氮（NO）的生成，促進(jìn)血管擴(kuò)張，降低血管阻力；

同時(shí)抑制血小板凝集和血栓形成，降低心腦血管事件的發(fā)生。此外，竹葉黃酮還可以減少心肌細(xì)胞

的損傷，增加心肌細(xì)胞的抗缺血和抗氧化能力。5.抗腫瘤作用。竹葉黃酮具有一定的抗腫瘤作用，

可以抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。研究表明，竹葉黃酮可以通過調(diào)控一些與腫瘤相關(guān)的信號通路的

活性，如Wnt、PI3K/AKT和MAPK等，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。此外，竹葉黃酮還可以誘導(dǎo)

腫瘤細(xì)胞凋亡，提高腫瘤細(xì)胞對化療藥物的敏感性，增強(qiáng)腫瘤的放射敏感性。

貴州民族大學(xué)陶文亮團(tuán)隊(duì)，多年來一直從事竹葉黃酮的提取，研究和應(yīng)用。2021年貴州省分析

測試研究院承擔(dān)了貴州省科協(xié)《基于貴州竹產(chǎn)業(yè)竹葉黃酮檢測標(biāo)準(zhǔn)研究及應(yīng)用項(xiàng)目》項(xiàng)目。

（二）任務(wù)來源

本項(xiàng)目于2022年3月由貴州省科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)、貴州省分析測試研究院等申請，2022年3月獲

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貴州省植物學(xué)會(huì)批準(zhǔn)立項(xiàng)。

（三）主要工作過程

1.成立標(biāo)準(zhǔn)編制組

2022年3月，組織標(biāo)準(zhǔn)編制貴州省分析測試研究院、貴州省檢測技術(shù)研究應(yīng)用中心等單位及相

關(guān)技術(shù)人員，成立標(biāo)準(zhǔn)編制組，制定標(biāo)準(zhǔn)起草方案，部署標(biāo)準(zhǔn)起草相關(guān)工作。起草組成員包括：吳

陽、李榮華、張穎、朱雪銅、邱恒亙、孫姣、劉羿希、陳杭依凡、王鋒、李楊、張瀠元、何鈺、趙

麗華、范秀章、袁健、王麗婧、龍昭航等。

2.查閱標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)、資料，提出研究方案，展開調(diào)研

2022年5月-12月，組織標(biāo)準(zhǔn)編制組成員，查閱相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)、資料，收集相關(guān)資料，開展檢

查技術(shù)研究。

通過分析文獻(xiàn)、實(shí)際種植經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù)、科研成果等形成標(biāo)準(zhǔn)草案及編制說明。

2024年3月起草組通過反復(fù)討論修改，形成標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿。

3.形成征求意見稿，提交貴州省植物學(xué)會(huì)掛網(wǎng)征求意見

2024年4月，起草組完成標(biāo)準(zhǔn)本文征求意見稿及編制說明起草工作，組織標(biāo)準(zhǔn)編制組成員單

位對標(biāo)準(zhǔn)草案進(jìn)行討論，形成征求意見稿，并向相關(guān)單位進(jìn)行廣泛征求意見，提交貴州省植物學(xué)會(huì)

辦理掛網(wǎng)征求意見。

4.形成送審稿，提交貴州省植物學(xué)會(huì)審查

5.形成報(bào)批稿，提交貴州省植物學(xué)會(huì)審批

二、現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行情況

本標(biāo)準(zhǔn)的起草嚴(yán)格按照GB/T1.1-2020的要求進(jìn)行起草。

三、確定標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容的依據(jù)

（一）主要技術(shù)指標(biāo)的依據(jù)

1方法原理

在堿性條件下，黃酮類化合物苯與鋁鹽進(jìn)行絡(luò)合反應(yīng)，生成黃色絡(luò)合物，在420nm波長下測定

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其吸光度，在一定濃度范圍內(nèi)，其吸光度與黃酮類化合物的含量成正比，與蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品比較，進(jìn)行

待測物中總黃酮的定量測定。

2試劑和材料

除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的二級水。

2.1硝酸鋁[Al(NO3)3·9H2O]。

2.2硝酸鋁溶液（100g/L）：稱取Al(NO3)3·9H2O17.6g加水溶解，定容于100mL容量瓶中。

2.3醋酸鉀（CH3COOK）。

2.4醋酸鉀溶液（98g/L）：稱取醋酸鉀9.814g，加水溶解，定容于100mL容量瓶中。

2.5蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，CAS號153-18-4。

2.6蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液

2.6.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)儲備液（1mg/mL）：精確稱取經(jīng)干燥（120℃減壓干燥）至恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品50mg，

使用無水乙醇溶解并定容于50mL容量瓶中。

2.6.2蘆丁標(biāo)準(zhǔn)使用液（0.2mg/mL）：吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)儲備液（4.6.1）10mL，置于50mL容量瓶中，

加無水乙醇至刻度，搖勻。

2.7無水乙醇（C2H5OH）。

2.830%乙醇（無水乙醇與蒸餾水按3：7比例配制）。

3儀器設(shè)備

3.1分光光度計(jì)，采用1cm比色皿。

3.2分析天平，感量為0.01g和0.0001g。

3.3搗碎機(jī)

3.4超聲清洗儀

3.5離心機(jī)

4試樣制備與保存

4.1試樣制備

將樣品放入搗碎機(jī)中進(jìn)行粉碎，粉碎后樣品過40目篩，混合均勻。

4.2試樣保存

制樣操作過程應(yīng)防止樣品收到污染。

5測定

5.1樣品處理

5.1.1鮮竹葉前處理

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取新鮮竹葉50ｇ洗凈、烘干、切碎置于燒杯中加蒸餾水煮沸3ｈ。冷卻后進(jìn)行粗濾對濾渣再浸

取2次將3次濾液合并濾液用高速離心機(jī)分離15min2500r／min。然后進(jìn)行加熱濃縮（加熱溫度在

80℃左右）濃縮冷卻后加入等體積95％乙醇放入冰箱內(nèi)2ｈ。用高速離心機(jī)進(jìn)行分離15min2500

ｒ／min。過濾得濾液濾渣棄去濾渣。對濾液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮（加熱溫度在80℃左右）待乙醇蒸發(fā)

完后將濃液置于真空干燥箱中干燥成疏松固體粉碎得終產(chǎn)物。

精確稱取0.1g（精確到1mg）置于100mL比色管，加入約50mL60%乙醇溶液充分搖勻樣品，將

搖勻樣品置于超聲清洗器中超聲溶解30min，其間每5min搖勻溶液一次，待試驗(yàn)完全溶解，定容，

待測。

5.1.2干竹葉前處理

方法一：精密稱取竹葉粉末2g置于索氏提取器中，用80%乙醇水浴回流提取兩次，每次提取

時(shí)間2h，提盡黃酮。另用少量80%乙醇多次洗滌竹葉，并入提取液中，定量轉(zhuǎn)移入100mL容量

瓶中，加80%乙醇至刻度，搖勻，即得測總黃酮之淡竹葉樣品液。將測總黃酮之樣品液精密吸取適

量于10mL容量瓶中定容。照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法操作，測定吸收度，由回歸方程求出稀釋液中

總黃酮濃度。

方法二：精密稱取竹葉粉末2g置于100mL圓底燒瓶中，用80%乙醇回流提取兩次，將此燒瓶

放入MCL-3型連續(xù)微波反應(yīng)器中，調(diào)整功率560W、500W、400W、350W，反應(yīng)時(shí)間20min，提

盡黃酮。另用少量80%乙醇多次洗滌淡竹葉，并入提取液中，定量轉(zhuǎn)移入100mL容量瓶中，加80%

乙醇定容，搖勻，即得測總黃酮之竹葉樣品液。將測總黃酮之樣品液精密吸取1.5mL于10mL容

量瓶中定容，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法操作，測定吸收度，由回歸方程求出稀釋液中總黃酮濃度。

5.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

5.2.1吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)使用液（4.6.2）1mL，2mL，3mL，4mL，5mL分別置于50mL容量瓶中。

5.2.2加無水乙醇至總體積為15mL，依次加入硝酸鋁溶液1mL，醋酸鉀溶液1mL，搖勻，加水至刻

度，搖勻。靜置1h。

5.2.3用1cm比色皿，在波長420nm處，以30%乙醇溶液為空白，測定吸光度。

5.2.4以蘆丁質(zhì)量（mg）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或按直線回歸方程計(jì)算。

5.3空白試驗(yàn)

吸取待測試樣溶液1.0mL，置于50mL容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15mL，加水稀釋至刻

度，搖勻。

5.4測定

5.4.1吸取待測試樣溶液1.0mL，置于50mL容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15mL，依次加入硝

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酸鋁溶液1mL，醋酸鉀溶液1mL，搖勻，加水至刻度，搖勻。靜置1h。

5.4.2以空白試液（7.3）作參比，用1cm比色皿，在波長420nm處測定試樣溶液的吸光度。

5.4.3查標(biāo)準(zhǔn)曲線或通過回歸方程計(jì)算，求出試樣溶液中的黃酮類化合物含量（mg）。在標(biāo)準(zhǔn)曲線

上求得試樣溶液中的濃度，

6結(jié)果計(jì)算

6.1竹葉中黃酮類化合物的總含量按下式計(jì)算。

式中：

X——黃酮類化合物的總含量。%；

m——由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出或由直線回歸方程求出的樣品比色液中蘆丁質(zhì)量，單位為毫克（mg）；

W——樣品的質(zhì)量，單位為（g）；

d——稀釋比例。

6.2計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后兩位。

7測定低限

本標(biāo)準(zhǔn)可用于測定黃酮類化合物的總量在0.05%以上。

8重復(fù)性

同一操作者兩次平行測試結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的15%。

（二）與國家標(biāo)準(zhǔn)、地方的比對情況

與國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T22291-2017、GB2762、GB2763等協(xié)調(diào)一致，尚無竹葉黃酮的地方標(biāo)準(zhǔn)。

四、與現(xiàn)行相關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，特別是強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)性

本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《中華人民共和國產(chǎn)品質(zhì)量法》及其實(shí)施條例的相關(guān)規(guī)定，本標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)要求以及

所涉及的產(chǎn)品安全等重要項(xiàng)目均