農(nóng)作物抗病性鑒定技術(shù)規(guī)范 第9部分：玉米抗大斑病

ICS65.020.01

B15

DB52

貴州省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB52/T1501.9—2020

農(nóng)作物抗病性鑒定技術(shù)規(guī)范

第9部分：玉米抗大斑病

Technicalspecificationforevaluationofcropresistancetodiseases

Part9:Maizeresistancetonorthernleafblight

2020-05-22發(fā)布2020-09-01實(shí)施

貴州省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

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農(nóng)作物抗病性鑒定技術(shù)規(guī)范第9部分：玉米抗大斑病

1范圍

本部分規(guī)定了玉米抗大斑?。‥xserohilumturcicum(Pass.)LeonardetSuggs）的鑒定方法與

抗病性評價。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于貴州區(qū)域種植的玉米品種(系)、種質(zhì)資源對大斑病抗病性的鑒定和評價。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)

準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T8321.10農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則

NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則

NY/T1248.1玉米抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)范第1部分：玉米抗大斑病鑒定技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

玉米大斑病northerncornleafblight

由大斑突臍孢菌（Exserohilumturcicum(Pass.)LeonardetSuggs）引起的以葉部產(chǎn)生大型病斑

癥狀為主的玉米病害。

3.2

接種體inoculum

通過人工接種多種貴州玉米大斑病菌的帶菌高粱粒。

3.3

病圃diseasenursery

在玉米大斑病常年發(fā)生較重區(qū)域選擇作為玉米大斑病抗性鑒定的地塊。

3.4

人工接種artificialinoculation

在適宜條件下，通過人為接種的方式將人工培養(yǎng)或收集的病原物置于植物適當(dāng)部位并使之發(fā)病的過

程。

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3.5

投芯接種fillingheartinoculation

將帶菌高粱粒投入玉米小喇叭口心葉中進(jìn)行接種。

4鑒定方法

4.1接種體制備

4.1.1病原物分離、純化和保存

采用常規(guī)組織分離法或單孢分離法從貴州各玉米主產(chǎn)區(qū)采集具有典型癥狀的發(fā)病植株分離、純化和

保存病原物。病原物經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定確認(rèn)為大斑突臍孢菌（Exserohilumturcicum(Pass.)

LeonardetSuggs）后，進(jìn)行純化，再回接到玉米上確認(rèn)其致病性，滿足柯赫氏法則。病原物保存在

4℃馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）（配方：馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g和蒸餾水1000ml）

斜面上或者-20℃濾紙片上備用。

4.2接種體擴(kuò)繁

接種用病原物應(yīng)采用貴州各玉米主產(chǎn)區(qū)分離得到的多種強(qiáng)致病性菌株。

將在PDA斜面上或者-20℃濾紙片上保存的貴州各玉米主產(chǎn)區(qū)分離得到的多種強(qiáng)致病病原物接種于

PDA平板上進(jìn)行活化，活化5天后再續(xù)代培養(yǎng)7天，之后分別將各病原物混勻后接種于經(jīng)高溫滅菌的高粱

粒上（高粱粒培養(yǎng)基制備方法為：高粱粒煮30min～40min，裝入三角瓶中121℃滅菌1h，冷卻后備

用），23℃～25℃條件下培養(yǎng)5天～7天，待菌絲布滿高粱粒，向三角瓶中加入少量無菌水，用滅菌

玻璃棒攪拌打斷菌絲，搖勻，放在23℃～25℃具有較高濕度的環(huán)境中黑光燈照射培養(yǎng)5天～7天，鏡檢

大量產(chǎn)孢后備用。

4.3病圃設(shè)置

4.3.1病圃選擇

病圃設(shè)在具備良好的自然發(fā)病環(huán)境，選擇排灌方便、肥力均勻的地塊，按NY/T1248.1的規(guī)定執(zhí)行。

4.3.2田間設(shè)置

鑒定小區(qū)行長5m～6m，行距0.7m，穴播，每行13穴，每穴2株。鑒定資源時，每份參鑒材料種植

2行，留苗50株以上，不設(shè)置重復(fù)。土壤肥力水平和耕作管理與大田生產(chǎn)相同，管理中肥料的使用應(yīng)符

合NY/T496的規(guī)定。參鑒材料隨機(jī)排列或順序排列，每50份參鑒材料設(shè)1組已知抗病、感病和高感對照

材料。在玉米整個生長期不使用殺菌劑，蟲、草害防治中農(nóng)藥的使用應(yīng)符合GB/T8321.10的規(guī)定。

4.4人工接種

4.4.1接種時期

接種時間為玉米小喇叭口期。

4.4.2接種方法

接種采用帶菌高粱粒投芯接種方法，及將帶菌高粱粒接種于玉米心葉內(nèi)，5粒/株。接種時間選擇

在雨后或陰天的傍晚。

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4.4.3接種后管理

接種前應(yīng)先進(jìn)行田間澆灌或在雨后進(jìn)行接種，接種后若遇持續(xù)干旱，應(yīng)及時進(jìn)行田間澆灌，保證滿

足病害發(fā)生所需的條件（人工接種前后保證田間濕度90%以上）。

4.5調(diào)查時間

在玉米進(jìn)入乳熟期及乳線在2/3以上時進(jìn)行調(diào)查，同一批次接種應(yīng)在同一天進(jìn)行調(diào)查。

4.6調(diào)查方法

每份鑒定材料調(diào)查每行的第3、5、7、9和11穴，每穴調(diào)查發(fā)病較重的1株，每份材料2行，共調(diào)查

10株，調(diào)查每株玉米果穗的上、下方各3片葉中發(fā)病較重的3片葉，及每份材料共調(diào)查30片葉，根據(jù)病

害癥狀描述和病害級別劃分標(biāo)準(zhǔn)逐株逐片進(jìn)行調(diào)查并記載病級，并將結(jié)果記入表B.1（附錄B）。

田間癥狀描述見附錄A.2，病情分級劃分見表1。

表1玉米抗大斑病病情分級

葉片病害級別癥狀描述

0葉片上無病斑

1葉片上有零星病斑，病斑占葉面積少于或等于5%

3葉片上有少量病斑，占葉面積6%～10%

5葉片上有較多病斑，占葉面積11%～30%

7葉片上有大量病斑，病斑相連，占葉面積31%～70%

9葉片病斑占葉面積70%以上，葉片枯死

4.7計算公式

通過對玉米鑒定材料群體中個體植株發(fā)病程度的綜合計算，確定各鑒定材料的病情指數(shù)。病情指數(shù)

采用公式1計算，得到的值采用四舍五入法保留小數(shù)點(diǎn)后2位有效數(shù)字。

（各級代表值各級病葉數(shù)）

病情指數(shù)（DI）100..................(1)

調(diào)查總?cè)~數(shù)9

5抗病性評價

5.1有效性判別

當(dāng)病圃中的感病對照材料達(dá)到7級或高感對照材料達(dá)到9級，該批次抗大斑病鑒定視為有效。

5.2抗病性評價

依據(jù)鑒定材料的病情指數(shù)（DI）所在范圍確定抗病性級別，劃分范圍標(biāo)準(zhǔn)見表2，依據(jù)抗病性級別

確定其對大斑病的抗性水平，并將結(jié)果記入表B.2（附錄B）。

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表2玉米對大斑病抗病性評價分級

抗病性級別病情指數(shù)（DI）抗病性評價

1≤10高抗（HR）

310<DI≤30抗?。≧）

530<DI≤50中抗（MR）

750<DI≤70感病（S）

9DI>70高感（HS）

4

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AA

附錄A

（資料性附錄）

玉米大斑病病原、田間癥狀及發(fā)生流行規(guī)律

A.1病原

玉米大斑病病原菌為：大斑突臍孢菌Exserohilumturcicum(Pass.)LeonardetSuggs。

A.2田間癥狀

該病主要侵害葉片、葉鞘和苞葉，以葉片受害最重。通常先從下部葉片開始發(fā)病逐漸蔓延到上部葉

片，也有少數(shù)從中部葉片開始發(fā)生，其最明顯的特征是在葉片上形成大型的梭狀病斑，病斑初期為灰綠

色或水浸狀的小斑點(diǎn)，幾天后病斑沿葉脈迅速擴(kuò)大，成熟病斑長梭型，一般長度在50mm以上。病斑的

大小、形狀、顏色及反應(yīng)因品種抗病性不同而不同，主要有三種類型：

a)黃褐色，中央灰褐色，病斑較大，出現(xiàn)在感病品種上。氣候潮濕時，病斑上可產(chǎn)生大量灰黑色

霉層；

b)黃褐色或灰綠色，外圍有明顯的黃色褪綠圈，病斑較小；

c)紫紅色，周圍有黃色或淡褐色褪綠圈。

A.3發(fā)生流行規(guī)律

玉米大斑病的病原菌大斑突臍孢菌能在病殘體內(nèi)越冬，病殘體內(nèi)會殘留大量的休眠菌絲體，另外一

些分生孢子也能在病殘體上越冬，第二年在玉米的生長期內(nèi)，殘留在病殘體上的越冬菌原菌會產(chǎn)生孢子，

隨風(fēng)飄散，或者隨雨水飛濺到玉米葉片上，在濕度、溫度適合時，就會在葉片上大量萌發(fā)，再進(jìn)行繁殖，

導(dǎo)致玉米植株發(fā)病，形成病斑后，溫濕條件適合又會大量產(chǎn)生分生孢子，在空中飄散，隨氣流傳播，進(jìn)

行多次再侵染，造成病害流行。當(dāng)溫度達(dá)到25℃左右時，病原菌的分生孢子便會產(chǎn)生，一般在15℃以

下時，濕度低于60%時，則病害會受到抑制。

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BB

附錄B

（規(guī)范性附錄）

玉米抗大斑病抗病性鑒定記載、評價表

B.1玉米大斑病抗病性鑒定田間調(diào)查記載表

見表B.1。

表B.1玉米大斑病抗病性鑒定田間調(diào)查記載表

播種（移栽）日期：鑒定地點(diǎn)：

經(jīng)緯度：海拔：接種日期：

調(diào)查人：記錄人：調(diào)查日期：

葉片病害級別

鑒定編號調(diào)查總?cè)~數(shù)

0級1級3級5級7級9級

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

…

注：調(diào)查時根據(jù)調(diào)查標(biāo)準(zhǔn)逐株逐葉進(jìn)行，用“正”字法進(jìn)行記載葉片病害級別。

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B.2玉米大斑病抗病性評價表

見表B.2。