2025年高考生物三輪復(fù)習(xí)之發(fā)酵工程

第46頁（共46頁）2025年高考生物三輪復(fù)習(xí)之發(fā)酵工程一．選擇題（共15小題）1．（2025?鹽城二模）下列有關(guān)發(fā)酵技術(shù)的敘述，正確的是（）A．制作泡菜過程中，泡菜鹽水濃度過高可能會導(dǎo)致泡菜咸而不酸 B．傳統(tǒng)制作果酒時，葡萄要盡量清洗干凈，以免雜菌污染使果酒變質(zhì) C．以大豆為主要原料制作醬油，應(yīng)選擇分泌脂肪酶能力強的黑曲霉 D．果酒和果醋發(fā)酵過程中均有pH值先升高后明顯下降的現(xiàn)象2．（2025?長沙校級一模）某研究小組通過基因工程技術(shù)對傳統(tǒng)酵母中與乙醇合成相關(guān)的基因進行了優(yōu)化，從而了提高酵母菌的代謝效率和乙醇生產(chǎn)能力。并比較了傳統(tǒng)酵母菌（野生型）和經(jīng)過基因改造后的酵母菌（改造型）在不同的發(fā)酵條件下的表現(xiàn)，實驗結(jié)果如下。酵母菌類型乙醇產(chǎn)量（g/L）乙醇產(chǎn)率（g乙醇/g葡萄糖）發(fā)酵時間（h）初始葡萄糖濃度（g/L）野生型250.504850改造型400.603650下列說法正確的是（）A．實驗室分離酵母菌常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 B．通過基因工程改造酵母菌的核心步驟是將重組載體轉(zhuǎn)入酵母菌中 C．與野生型酵母菌相比，改造型酵母菌雖提高了乙醇的產(chǎn)量但沒能提高乙醇的生成速率 D．乙醇是酵母菌發(fā)酵的主要產(chǎn)物，然而在發(fā)酵過程中乙醇的積累會抑制酵母菌的生長和發(fā)酵效率3．（2025?長沙校級一模）泡菜和酸奶是常見的發(fā)酵食品。下列關(guān)于家庭中發(fā)酵制作酸奶或泡菜的敘述，錯誤的是（）A．用酒精擦拭容器能使微生物蛋白變性失活 B．發(fā)酵裝置要封裝以抑制乳酸菌的有氧呼吸 C．可將菜料完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中 D．原料中的營養(yǎng)物質(zhì)為發(fā)酵菌提供了碳源和氮源4．（2025?遼陽模擬）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與傳統(tǒng)文化緊密相連，是中華飲食文化的重要組成部分。果酒、果醋、泡菜、腐乳、饅頭、酸奶的制作等離不開傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．果酒、饅頭的制作離不開酵母菌 B．果醋、酸奶、泡菜的酸味都來自醋酸 C．參與腐乳制作的酵母、毛霉、曲霉都是真核生物 D．酒精發(fā)酵以及泡菜的制作都需要無氧條件5．（2025?廣州一模）陳醋中的川芎嗪是治療血栓等疾病的新型藥物，能活血化瘀并對已聚集的血小板有解離作用。研究人員為提高陳醋藥用價值，分別探究了傳統(tǒng)、機械生產(chǎn)工藝對川芎嗪含量的影響，結(jié)果如下。下列敘述錯誤的是（）生產(chǎn)工藝川芎嗪含量/（mg?L﹣1）發(fā)酵后熏醅前發(fā)酵后進行傳統(tǒng)熏醅（80﹣90℃4﹣5d）發(fā)酵后進行機械熏醅（110﹣120℃12﹣24h）傳統(tǒng)醋酸發(fā)酵0.383.1511.18機械醋酸發(fā)酵1.334.7317.63A．陳醋發(fā)酵過程中需要提供碳源、氮源并通入空氣 B．傳統(tǒng)熏醅時提高熏醅的溫度可以提高川芎嗪的產(chǎn)量 C．受皮外傷的患者在傷口愈合期間建議減少對陳醋的食用 D．選用機械醋酸發(fā)酵和機械熏醅方式釀造的食醋藥用價值更高6．（2025?撫順模擬）傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵食醋過程包括酒曲和麥曲的糖化，然后通過酵母菌、醋酸菌等多菌種的發(fā)酵，最終陳釀而成。現(xiàn)代工業(yè)化生產(chǎn)食醋是基于傳統(tǒng)發(fā)酵方法，將菌種接種到大型發(fā)酵罐中，并在計算機系統(tǒng)的監(jiān)測和控制下完成。下列有關(guān)食醋發(fā)酵的敘述正確的是（）A．醋酸菌在無氧條件下發(fā)酵，能將酒精轉(zhuǎn)化為乙醛，再轉(zhuǎn)化為醋酸 B．與傳統(tǒng)發(fā)酵方式相比，食醋的工業(yè)化生產(chǎn)需要接種單一菌種進行發(fā)酵 C．醋酸菌可利用充足的糖源和氧氣，在其細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體中進行發(fā)酵 D．在工業(yè)化生產(chǎn)中，發(fā)酵罐需要嚴格消毒，可避免雜菌污染影響食醋品質(zhì)和風(fēng)味7．（2025?承德一模）甜酒釀（醪糟）是江南地區(qū)的傳統(tǒng)小吃，是用蒸熟的糯米拌上釀酒酵母發(fā)酵而成的一種甜米酒，其制作流程為：浸米→蒸米→涼飯→拌釀酒酵母→發(fā)酵→檢查→甜酒釀。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．“蒸米”的主要目的是通過殺滅雜菌，延長甜酒釀的保質(zhì)期 B．“涼飯”后再拌入釀酒酵母，可避免高溫殺死發(fā)酵所需菌種 C．“發(fā)酵”時應(yīng)將拌有釀酒酵母的涼飯裝滿密閉的容器 D．在發(fā)酵過程中酒精的濃度會持續(xù)增加，pH值會持續(xù)降低8．（2025?阿拉善盟一模）MRS肉湯培養(yǎng)基是青貯微生物常用培養(yǎng)基，但成本較高，難以作為青貯添加劑的主要成分開發(fā)利用。為篩選廉價培養(yǎng)基，研究人員分離純化青貯微生物，并分別接種到不同培養(yǎng)基中培養(yǎng)48h，得到如圖結(jié)果。下列敘述錯誤的是（）A．應(yīng)將接種青貯微生物的培養(yǎng)基置于適宜溫度下厭氧培養(yǎng) B．本實驗還可用血細胞計數(shù)板對青貯微生物的活菌數(shù)進行統(tǒng)計 C．培養(yǎng)初期，青貯微生物OD值較低可能與缺乏代謝所需酶有關(guān) D．初步判斷乳清粉培養(yǎng)基較適合作為青貯微生物的廉價培養(yǎng)基9．（2025?定州市校級一模）科研人員發(fā)現(xiàn)某個敞口被真菌M污染的培養(yǎng)皿中出現(xiàn)了大部分細菌能正常生長，唯獨真菌M附近沒有細菌生長的現(xiàn)象?？蒲腥藛T認為這可能是真菌M產(chǎn)生了抑制細菌生長的物質(zhì)。為驗證該猜想，科研人員做了如圖所示的實驗。下列有關(guān)分析正確的是（）A．過程①使用了平板劃線法接種真菌M，該過程中接種環(huán)至少要灼燒4次 B．若甲、乙和丙組的濾紙片周圍都出現(xiàn)了抑菌圈，則說明上述猜想正確 C．過程②應(yīng)取平板a中的單菌落置于培養(yǎng)基b中，其主要目的是選擇培養(yǎng) D．真菌M在培養(yǎng)基b中培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中應(yīng)加入瓊脂10．（2025?撫順模擬）某興趣小組欲對牛奶制品中乳酸菌的多樣性進行研究，他們采集菌種并做了相關(guān)實驗。下列敘述正確的是（）A．將分離后的乳酸菌接種到含有抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng) B．篩選菌種時，可選用牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基觀察菌落特征 C．在稀釋涂布平板法操作中，需用已滅菌冷卻的涂布器蘸取少量菌液進行接種 D．鑒定細菌種類時，除觀察菌落特征外，還可借助PCR等方法11．（2025?項城市模擬）從傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)到發(fā)酵工程，經(jīng)歷了漫長的歷史過程。下列敘述錯誤的是（）A．自制泡菜時泡菜壇裝八成滿可防止發(fā)酵液溢出 B．發(fā)酵工程需要嚴格控制溫度、pH和罐壓等條件 C．發(fā)酵獲得的單細胞蛋白可用于生產(chǎn)微生物飼料 D．啤酒生產(chǎn)過程中，加入啤酒花可提供發(fā)酵菌種12．（2025?湖北模擬）大豆發(fā)酵食品豆瓣醬是我國傳統(tǒng)發(fā)酵美食，它能讓麻婆豆腐熱辣鮮香，也能讓回鍋肉滋味醇厚，好似舌尖上的時光膠囊，封存著先輩們代代相傳的生活智慧。豆瓣醬的制作流程如圖所示，下列敘述錯誤的是（）A．保溫發(fā)酵過程中，醬豆中有機物的種類增加，有機物含量減少 B．米曲霉發(fā)酵過程中，添加面粉主要是為米曲霉的生長提供氮源 C．米曲霉發(fā)酵時需不斷翻醬，由此推測米曲霉屬于需氧型微生物 D．后期發(fā)酵中乳酸菌產(chǎn)生乳酸，能抑制雜菌生長并賦予豆瓣醬獨特酸味13．（2025?石家莊模擬）蛭弧菌能使污水中的嗜水氣單胞菌（異養(yǎng)型）裂解，將其接種在長滿嗜水氣單胞菌的平板上會出現(xiàn)噬菌斑。某興趣小組將嗜水氣單胞菌接種到固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)形成薄層，再接種采集的污水用以分離蛭弧菌。下列敘述錯誤的是（）A．可用干熱滅菌法對平板進行滅菌 B．可用涂布平板法接種嗜水氣單胞菌 C．出現(xiàn)噬菌斑一定是蛭弧菌作用的結(jié)果 D．污水可為自然環(huán)境中的嗜水氣單胞菌提供碳源14．（2025?漳州模擬）研究人員擬篩選出優(yōu)良的酵母菌菌株用于發(fā)酵，其部分實驗流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A．圖中涂布、劃線過程需在酒精燈火焰附近進行 B．培養(yǎng)基A上的菌落可先通過菌落特征進行篩選 C．進行平板劃線時，后一次劃線應(yīng)從前一次的末端開始 D．涂布時用滅菌后的接種環(huán)將菌液均勻涂布于培養(yǎng)基A表面15．（2025?長沙校級一模）野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基上生長，經(jīng)誘變獲得了兩種營養(yǎng)缺陷型的突變體M、N，且單獨培養(yǎng)時均不能在基本培養(yǎng)基上生長。若將兩種突變體在完全培養(yǎng)基（液體）中混合培養(yǎng)一段時間后，再采用稀釋涂布平板法接種在基本培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)后長出了大腸桿菌菌落。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．野生型大腸桿菌誘變時發(fā)生了基因突變或染色體變異 B．突變體M和N能相互為對方提供所缺營養(yǎng)物質(zhì) C．在混合培養(yǎng)期間突變體M和N發(fā)生了遺傳物質(zhì)的交流 D．混合培養(yǎng)獲得的大腸桿菌都能在基本培養(yǎng)基中生長二．解答題（共5小題）16．（2025?山東模擬）金黃色葡萄球菌（簡稱Sa）可引起皮膚傷口感染、敗血癥、細菌性肺炎等疾病。不規(guī)范使用抗生素易出現(xiàn)多重抗藥性Sa。（1）A、B、C、D四種抗生素均可治療由Sa引起的肺炎，為選出最佳療效的抗生素，研究者分別將含等劑量抗生素A、B、C、D的四張大小相同的濾紙片a、b、c、d置于均勻分布Sa的平板培養(yǎng)基上，在適宜條件下培養(yǎng)48h，結(jié)果如圖1。配制培養(yǎng)基時，需要加入的營養(yǎng)成分除了水和無機鹽外，還應(yīng)包括；A、B、C、D四種抗生素中，抑菌效果最佳的是。（2）Sa產(chǎn)生抗藥性可遺傳變異的來源有基因突變、（答出2點）。（3）推測Sa產(chǎn)生頭孢霉素抗性與其R基因有關(guān)。為驗證該推測，以圖2中R基因的上、下游片段和質(zhì)粒1構(gòu)建質(zhì)粒2，然后通過同源重組（質(zhì)粒2中的上、下游片段分別與Sa基因組中R基因上、下游片段配對，并發(fā)生交換）敲除Sa的R基因。注1：1kb＝1000堿基對2：Y是可被脫水四環(huán)素（不作為抗生素起作用）誘導(dǎo)表達的Sa致死基因①根據(jù)圖2信息，質(zhì)粒2的構(gòu)建過程中需選擇限制酶對PCR產(chǎn)物進行酶切，然后回收上、下游片段，再與SacⅡ酶切質(zhì)粒1所得大片段連接，獲得質(zhì)粒2。②用質(zhì)粒2轉(zhuǎn)化臨床分離的具有頭孢霉素抗性、對氯霉素敏感的Sa，然后涂布在含氯霉素的平板上，經(jīng)培養(yǎng)獲得含質(zhì)粒2的Sa單菌落。③將②獲得的單菌落多次傳代以增加同源重組敲除R基因的概率，隨后稀釋涂布在含的平板上，篩選并獲得不再含有質(zhì)粒2的菌落。從這些菌落中分別挑取少許菌體，依次接種到含的平板上，若無法增殖，則對應(yīng)菌落中細菌的R基因可能被敲除。④以③獲得的菌株基因組為模板，采用不同引物組合進行PCR擴增，電泳檢測結(jié)果如圖3，表明R基因已被敲除的是。17．（2025?長沙校級一模）白色污染問題已引起全社會廣泛關(guān)注，降解塑料的研究和開發(fā)是解決白色污染的理想途徑之一。地膜的主要成分是聚乙烯[化學(xué)式為（C2H4）n]。殘留在土壤中的地膜難以被降解，為篩選出高效降解地膜的細菌，研究人員進行了如圖所示的操作。X培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，聚乙烯分解菌在該培養(yǎng)基上會形成抑菌圈。回答下列問題：（1）在篩選聚乙烯分解菌過程中，應(yīng)選擇的土壤，制作培養(yǎng)基時，應(yīng)將作為X培養(yǎng)基中的唯一碳源，并使用滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌。（2）為了證明所配制X培養(yǎng)基具有選擇作用，在恒溫培養(yǎng)前，需要將接種后的X培養(yǎng)基平板和接種后的完全培養(yǎng)基平板同時進行培養(yǎng)，待兩種培養(yǎng)基平板上的菌落生長穩(wěn)定時，比較兩種平板培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。若結(jié)果為，則可證明上述觀點。（3）可挑選X培養(yǎng)基中的（填序號）中的單菌落接種到Y(jié)培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。配制Y培養(yǎng)基時，其pH一般調(diào)至。（4）用稀釋涂布平板法對細菌進行計數(shù)時，所統(tǒng)計的菌落數(shù)往往會比活菌的實際數(shù)目偏小，原因是。在5個平板上各接種稀釋倍數(shù)為103的菌液樣品0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上的菌落數(shù)分別為28、50、52、54、313，則每升原菌液樣品中細菌數(shù)為個。18．（2025?長沙校級一模）活性黑5是一種低毒性、難褪色的含氮染料。欲利用生物酶處理染料廢水中的活性黑5，具體操作流程如圖。從染料廢水堆積池的污泥中獲得優(yōu)勢菌群，采用濃度梯度馴化法，進一步培養(yǎng)獲得具備強分解活性黑5能力的假單胞桿菌，并進行基因表達分析?；卮鹣铝袉栴}：（1）培養(yǎng)基Ⅰ和培養(yǎng)基Ⅱ均以為唯一氮源，從用途上來看均屬于培養(yǎng)基，該類培養(yǎng)基的特點是。培養(yǎng)基Ⅱ是利用法將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的。（2）假單胞桿菌中，BVU5蛋白分解活性黑5的場所最可能為（填“細胞質(zhì)基質(zhì)”“溶酶體”或“核糖體”）；據(jù)題推測，馴化后的假單胞桿菌增強了過程。（3）假單胞桿菌分解活性黑5能力的強弱可能與（答出2點）因素有關(guān)。19．（2025?馬鞍山模擬）脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）具有一定的致癌性，DON廣泛存在于谷物類原料及其制品中。為篩選具有高效降解DON能力的微生物，科研人員進行了相關(guān)實驗，部分流程為：土壤稀釋液→MSD培養(yǎng)基富集培養(yǎng)→篩選→分離→純化→鑒定?；卮鹣铝袉栴}。（1）富集培養(yǎng)時，以DON為唯一碳源的MSD培養(yǎng)基從功能上屬于?？蒲腥藛T通過平板劃線法將培養(yǎng)液中的微生物接種在固體培養(yǎng)基上，實驗操作進行連續(xù)劃線的目的是。（2）通過篩選獲得了由兩種微生物組成的混合菌體。為了鑒定兩種微生物，科研人員對兩者16SrDNA序列進行PCR擴增。在PCR反應(yīng)體系中加Mg2+作用是。對PCR擴增結(jié)果進行凝膠電泳分析，出現(xiàn)多種條帶，可能原因是。（3）改進實驗后，結(jié)果顯示該混合菌體由Y1和S1兩種微生物組成。為明確DON被降解的原因，科研人員提出一種假設(shè)：混合菌體分泌了相關(guān)物質(zhì)將DON降解。請設(shè)計實驗驗證以上假說，寫出實驗思路。。（4）實驗表明混合菌體分泌了相關(guān)物質(zhì)將DON降解。當(dāng)科研人員將Y1和S1單獨接種在DON培養(yǎng)基上時，發(fā)現(xiàn)兩者均不能很好的降解DON，推測其原因是。20．（2025?天津模擬）磷是植物生長的重要元素，施入土中的磷大多數(shù)與Ca2+等離子結(jié)合形成難溶性磷酸鹽。科研人員從貢柑果園土中選出可以將難溶性或不溶性磷轉(zhuǎn)化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程見圖1，請回答下列問題：（1）步驟③將土壤懸浮液稀釋了倍。經(jīng)步驟③最后一次稀釋之后若在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，得到的結(jié)果是：39、38、37，則每克土樣中的活菌數(shù)為個。運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值，原因是。（2）步驟④中待菌落長好后挑出溶磷圈直徑（D）與菌落直徑（d）比值較的菌落。通常情況下，對獲得的純菌種可以依據(jù)對細菌進行初步的鑒定和分類。（3）為進一步測定初步篩選的三種菌株實際溶解磷的能力，研究人員將它們接種到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，并在37℃、200r?min﹣1搖床培養(yǎng)，定期取上清液，測定溶液中可溶性磷含量，得到如圖2所示曲線。用搖床進行培養(yǎng)的好處、。結(jié)果表明最優(yōu)良的解磷菌株是。

2025年高考生物三輪復(fù)習(xí)之發(fā)酵工程參考答案與試題解析一．選擇題（共15小題）題號1234567891011答案ADBBBBBBBDD題號12131415答案BCDB一．選擇題（共15小題）1．（2025?鹽城二模）下列有關(guān)發(fā)酵技術(shù)的敘述，正確的是（）A．制作泡菜過程中，泡菜鹽水濃度過高可能會導(dǎo)致泡菜咸而不酸 B．傳統(tǒng)制作果酒時，葡萄要盡量清洗干凈，以免雜菌污染使果酒變質(zhì) C．以大豆為主要原料制作醬油，應(yīng)選擇分泌脂肪酶能力強的黑曲霉 D．果酒和果醋發(fā)酵過程中均有pH值先升高后明顯下降的現(xiàn)象【考點】制作泡菜；果酒、果醋的制作．【專題】對比分析法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．【答案】A【分析】1、葡萄酒的制作運用的是酵母菌的無氧呼吸。在葡萄酒制作的過程中，酵母菌的培養(yǎng)溫度控制在18℃到30℃。2、以大豆為主要原料，利用產(chǎn)生蛋白酶的霉菌（如黑曲霉），將原料中的蛋白質(zhì)水解成小分子的肽和氨基酸，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制成的醬油產(chǎn)品。【解答】解：A、制作泡菜過程中，泡菜鹽水濃度過高會抑制乳酸菌的繁殖，從而導(dǎo)致泡菜咸而不酸，A正確；B、果酒制作利用水果表面野生型酵母菌，因此不能清洗的太干凈，B錯誤；C、以大豆為主要原料制作醬油，應(yīng)選擇分泌蛋白酶能力強的黑曲霉，C錯誤；D、果酒制作過程中會產(chǎn)生二氧化碳，二氧化碳溶于水，使pH降低，果醋制作過程中產(chǎn)生醋酸，同樣會使pH下降，D錯誤。故選：A?！军c評】本題考查腐乳的制作、泡菜的制作，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的方法、實驗現(xiàn)象及結(jié)論等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累。2．（2025?長沙校級一模）某研究小組通過基因工程技術(shù)對傳統(tǒng)酵母中與乙醇合成相關(guān)的基因進行了優(yōu)化，從而了提高酵母菌的代謝效率和乙醇生產(chǎn)能力。并比較了傳統(tǒng)酵母菌（野生型）和經(jīng)過基因改造后的酵母菌（改造型）在不同的發(fā)酵條件下的表現(xiàn)，實驗結(jié)果如下。酵母菌類型乙醇產(chǎn)量（g/L）乙醇產(chǎn)率（g乙醇/g葡萄糖）發(fā)酵時間（h）初始葡萄糖濃度（g/L）野生型250.504850改造型400.603650下列說法正確的是（）A．實驗室分離酵母菌常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 B．通過基因工程改造酵母菌的核心步驟是將重組載體轉(zhuǎn)入酵母菌中 C．與野生型酵母菌相比，改造型酵母菌雖提高了乙醇的產(chǎn)量但沒能提高乙醇的生成速率 D．乙醇是酵母菌發(fā)酵的主要產(chǎn)物，然而在發(fā)酵過程中乙醇的積累會抑制酵母菌的生長和發(fā)酵效率【考點】發(fā)酵工程在食品、醫(yī)藥、農(nóng)牧業(yè)等工業(yè)上的應(yīng)用．【專題】數(shù)據(jù)表格；從生物材料提取特定成分；理解能力．【答案】D【分析】酵母菌的代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，有氧氣存在時進行有氧呼吸，繁殖增加菌體數(shù)量，無氧氣時，進行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精和二氧化碳?！窘獯稹拷猓篈、實驗室分離酵母菌常用麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基等，而不是牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是培養(yǎng)細菌常用的培養(yǎng)基，A錯誤；B、基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，而不是將重組載體轉(zhuǎn)入酵母菌中，B錯誤；C、野生型酵母菌乙醇產(chǎn)量為25g/L，發(fā)酵時間為48h，則乙醇生成速率為2548≈0.52g/（L?h），改造型酵母菌乙醇產(chǎn)量為40g/L，發(fā)酵時間為36h，則乙醇生成速率為4036≈1.11g/（L?D、乙醇是酵母菌發(fā)酵的主要產(chǎn)物，當(dāng)乙醇積累到一定濃度時，會對酵母菌的生長和發(fā)酵效率產(chǎn)生抑制作用，這是發(fā)酵過程中的常見現(xiàn)象，D正確。故選：D?！军c評】本題考查發(fā)酵工程的相關(guān)知識，要求考生理解識記有關(guān)技術(shù)的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能將教材中的知識結(jié)合題中信息進行遷移應(yīng)用。3．（2025?長沙校級一模）泡菜和酸奶是常見的發(fā)酵食品。下列關(guān)于家庭中發(fā)酵制作酸奶或泡菜的敘述，錯誤的是（）A．用酒精擦拭容器能使微生物蛋白變性失活 B．發(fā)酵裝置要封裝以抑制乳酸菌的有氧呼吸 C．可將菜料完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中 D．原料中的營養(yǎng)物質(zhì)為發(fā)酵菌提供了碳源和氮源【考點】制作泡菜．【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．【答案】B【分析】泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵過程即為乳酸菌進行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸的過程?！窘獯稹拷猓篈、酒精可以使蛋白質(zhì)變性失活，則用酒精擦拭容器，使微生物蛋白變性失活，殺死容器表面附著的微生物，從而保證發(fā)酵過程不受雜菌污染，A正確；B、乳酸菌是厭氧菌，進行無氧呼吸，發(fā)酵裝置要封裝是為了保證乳酸菌的無氧呼吸，B錯誤；C、制作泡菜是利用乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，所以為制造無氧環(huán)境，制作泡菜的菜料要完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水，C正確；D、原料中一般含有糖類等含碳物質(zhì)，可為發(fā)酵菌提供碳源；同時含有蛋白質(zhì)等含氮物質(zhì)，可為發(fā)酵菌提供氮源，滿足乳酸菌等發(fā)酵微生物生長和代謝的需要，D正確。故選：B?！军c評】本題考查泡菜的制作的相關(guān)知識，學(xué)生掌握泡菜制作的原理和流程等是解答本題的關(guān)鍵。4．（2025?遼陽模擬）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與傳統(tǒng)文化緊密相連，是中華飲食文化的重要組成部分。果酒、果醋、泡菜、腐乳、饅頭、酸奶的制作等離不開傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．果酒、饅頭的制作離不開酵母菌 B．果醋、酸奶、泡菜的酸味都來自醋酸 C．參與腐乳制作的酵母、毛霉、曲霉都是真核生物 D．酒精發(fā)酵以及泡菜的制作都需要無氧條件【考點】果酒、果醋的制作；發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)；制作泡菜．【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．【答案】B【分析】制作果酒利用的是酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精的原理，在發(fā)酵初期通入空氣可以使酵母菌進行有氧呼吸并大量繁殖；醋酸菌是好氧微生物，在果醋發(fā)酵過程中必須持續(xù)通入空氣；參與腐乳發(fā)酵的青霉、毛霉、曲霉等都屬于真核生物；泡菜、酸奶制作過程中使用的乳酸菌是一種厭氧細菌?！窘獯稹拷猓篈、酵母菌是兼性厭氧微生物，能進行有氧呼吸，也能進行無氧呼吸，果酒、饅頭的制作離不開酵母菌，A正確；B、果醋的酸味來自醋酸，而酸奶、泡菜的酸味都來自乳酸，B錯誤；C、腐乳的制作過程中，多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如酵母、毛霉、曲霉等，它們都是真核生物，C正確；D、酒精發(fā)酵利用的是酵母菌的無氧呼吸，泡菜制作利用的是乳酸菌發(fā)酵，乳酸菌為厭氧菌，所以酒精發(fā)酵以及泡菜的制作均需無氧條件，D正確。故選：B。【點評】本題主要考查果酒、果醋、腐乳、酸奶、泡菜等的制作的內(nèi)容，要求考生識記相關(guān)知識，并結(jié)合所學(xué)知識準確答題。5．（2025?廣州一模）陳醋中的川芎嗪是治療血栓等疾病的新型藥物，能活血化瘀并對已聚集的血小板有解離作用。研究人員為提高陳醋藥用價值，分別探究了傳統(tǒng)、機械生產(chǎn)工藝對川芎嗪含量的影響，結(jié)果如下。下列敘述錯誤的是（）生產(chǎn)工藝川芎嗪含量/（mg?L﹣1）發(fā)酵后熏醅前發(fā)酵后進行傳統(tǒng)熏醅（80﹣90℃4﹣5d）發(fā)酵后進行機械熏醅（110﹣120℃12﹣24h）傳統(tǒng)醋酸發(fā)酵0.383.1511.18機械醋酸發(fā)酵1.334.7317.63A．陳醋發(fā)酵過程中需要提供碳源、氮源并通入空氣 B．傳統(tǒng)熏醅時提高熏醅的溫度可以提高川芎嗪的產(chǎn)量 C．受皮外傷的患者在傷口愈合期間建議減少對陳醋的食用 D．選用機械醋酸發(fā)酵和機械熏醅方式釀造的食醋藥用價值更高【考點】果酒、果醋的制作．【專題】數(shù)據(jù)表格；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．【答案】B【分析】參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿??！窘獯稹拷猓篈、醋酸菌是需氧型微生物，陳醋發(fā)酵過程中需要提供碳源、氮源并通入空氣，A正確；B、由表格數(shù)據(jù)可知，并未提及升高溫度對傳統(tǒng)熏醅川芎嗪的產(chǎn)量的提高的影響，B錯誤；C、陳醋中的川芎嗪是治療血栓等疾病的新型藥物，能活血化瘀并對已聚集的血小板有解離作用，受皮外傷的患者在傷口愈合期間建議減少對陳醋的食用，C正確；D、由表格數(shù)據(jù)可知，選用機械醋酸發(fā)酵和機械熏醅方式釀造的食醋川芎嗪含量高，藥用價值高，D正確。故選：B?！军c評】本題考查發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識記能力和判斷能力，運用所學(xué)知識綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵。6．（2025?撫順模擬）傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵食醋過程包括酒曲和麥曲的糖化，然后通過酵母菌、醋酸菌等多菌種的發(fā)酵，最終陳釀而成。現(xiàn)代工業(yè)化生產(chǎn)食醋是基于傳統(tǒng)發(fā)酵方法，將菌種接種到大型發(fā)酵罐中，并在計算機系統(tǒng)的監(jiān)測和控制下完成。下列有關(guān)食醋發(fā)酵的敘述正確的是（）A．醋酸菌在無氧條件下發(fā)酵，能將酒精轉(zhuǎn)化為乙醛，再轉(zhuǎn)化為醋酸 B．與傳統(tǒng)發(fā)酵方式相比，食醋的工業(yè)化生產(chǎn)需要接種單一菌種進行發(fā)酵 C．醋酸菌可利用充足的糖源和氧氣，在其細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體中進行發(fā)酵 D．在工業(yè)化生產(chǎn)中，發(fā)酵罐需要嚴格消毒，可避免雜菌污染影響食醋品質(zhì)和風(fēng)味【考點】果酒、果醋的制作；發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)．【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．【答案】B【分析】發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)模化生產(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品，主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面?！窘獯稹拷猓篈、醋酸菌是好氧菌，在有氧條件下發(fā)酵，才能將酒精轉(zhuǎn)化為乙醛，再轉(zhuǎn)化為醋酸，A錯誤；B、傳統(tǒng)發(fā)酵是多菌種發(fā)酵，現(xiàn)代工業(yè)化生產(chǎn)需要接種單一菌種進行發(fā)酵，B正確；C、醋酸菌屬于原核生物，沒有線粒體，C錯誤；D、在工業(yè)化生產(chǎn)中，發(fā)酵罐嚴格滅菌，能避免雜菌污染，因為雜菌可能會與發(fā)酵菌種競爭營養(yǎng)物質(zhì)等，從而影響食醋品質(zhì)和風(fēng)味，D錯誤。故選：B?！军c評】本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識，要求考生識記果酒、果醋的制作原理等知識，意在考查考生的識記和分析能力。7．（2025?承德一模）甜酒釀（醪糟）是江南地區(qū)的傳統(tǒng)小吃，是用蒸熟的糯米拌上釀酒酵母發(fā)酵而成的一種甜米酒，其制作流程為：浸米→蒸米→涼飯→拌釀酒酵母→發(fā)酵→檢查→甜酒釀。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．“蒸米”的主要目的是通過殺滅雜菌，延長甜酒釀的保質(zhì)期 B．“涼飯”后再拌入釀酒酵母，可避免高溫殺死發(fā)酵所需菌種 C．“發(fā)酵”時應(yīng)將拌有釀酒酵母的涼飯裝滿密閉的容器 D．在發(fā)酵過程中酒精的濃度會持續(xù)增加，pH值會持續(xù)降低【考點】果酒、果醋的制作．【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．【答案】B【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精。【解答】解：A、“蒸米”的主要目的是使淀粉更易分解，便于微生物發(fā)酵，A錯誤；B、“涼飯”后再拌入釀酒酵母，可避免高溫殺死發(fā)酵所需菌種，B正確；C、酒精發(fā)酵需要在無氧條件下進行，發(fā)酵時應(yīng)將拌有釀酒酵母的涼飯裝在密閉的容器中，但不能裝滿容器，應(yīng)該適當(dāng)留出約13的空間，CD、酵母菌細胞呼吸釋放的CO2使得pH值降低以及酒精含量增多，對發(fā)酵起抑制作用，導(dǎo)致一段時間后酵母菌發(fā)酵停止，所以酒精濃度不會持續(xù)增加，pH值也不會持續(xù)降低，D錯誤。故選：B?！军c評】本題主要考查果酒、果醋的制作的內(nèi)容，要求考生識記相關(guān)知識，并結(jié)合所學(xué)知識準確答題。8．（2025?阿拉善盟一模）MRS肉湯培養(yǎng)基是青貯微生物常用培養(yǎng)基，但成本較高，難以作為青貯添加劑的主要成分開發(fā)利用。為篩選廉價培養(yǎng)基，研究人員分離純化青貯微生物，并分別接種到不同培養(yǎng)基中培養(yǎng)48h，得到如圖結(jié)果。下列敘述錯誤的是（）A．應(yīng)將接種青貯微生物的培養(yǎng)基置于適宜溫度下厭氧培養(yǎng) B．本實驗還可用血細胞計數(shù)板對青貯微生物的活菌數(shù)進行統(tǒng)計 C．培養(yǎng)初期，青貯微生物OD值較低可能與缺乏代謝所需酶有關(guān) D．初步判斷乳清粉培養(yǎng)基較適合作為青貯微生物的廉價培養(yǎng)基【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．【專題】坐標(biāo)曲線圖；正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；理解能力．【答案】B【分析】由圖可知，培養(yǎng)48h后，乳清粉培養(yǎng)基pH小于4.2，且OD值僅次于MRS培養(yǎng)基，說明其較適合作為青貯微生物的廉價培養(yǎng)基。【解答】解：A、青貯為厭氧生物，故應(yīng)將接種青貯微生物的培養(yǎng)基置于適宜溫度下厭氧培養(yǎng)，保證青貯微生物正常發(fā)酵，A正確；B、血細胞計數(shù)板不能只計數(shù)活菌，B錯誤；C、培養(yǎng)初期，青貯微生物OD值較低可能與缺乏代謝所需酶導(dǎo)致微生物繁殖較慢有關(guān)，C正確；D、分析題圖，培養(yǎng)48h后，乳清粉培養(yǎng)基pH小于4.2，且OD值僅次于MRS培養(yǎng)基，由此可知其較適合作為青貯微生物的廉價培養(yǎng)基，D正確。故選：B。【點評】本題主要考查微生物的選擇培養(yǎng)的內(nèi)容，要求考生識記相關(guān)知識，并結(jié)合所學(xué)知識準確答題。9．（2025?定州市校級一模）科研人員發(fā)現(xiàn)某個敞口被真菌M污染的培養(yǎng)皿中出現(xiàn)了大部分細菌能正常生長，唯獨真菌M附近沒有細菌生長的現(xiàn)象?？蒲腥藛T認為這可能是真菌M產(chǎn)生了抑制細菌生長的物質(zhì)。為驗證該猜想，科研人員做了如圖所示的實驗。下列有關(guān)分析正確的是（）A．過程①使用了平板劃線法接種真菌M，該過程中接種環(huán)至少要灼燒4次 B．若甲、乙和丙組的濾紙片周圍都出現(xiàn)了抑菌圈，則說明上述猜想正確 C．過程②應(yīng)取平板a中的單菌落置于培養(yǎng)基b中，其主要目的是選擇培養(yǎng) D．真菌M在培養(yǎng)基b中培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中應(yīng)加入瓊脂【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．【專題】模式圖；正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；理解能力．【答案】B【分析】1、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。【解答】解：A、每次劃線前都需要灼燒接種環(huán)，分析題圖可知過程①使用了平板劃線法接種真菌M一共畫線4次，并且該過程結(jié)束時還需要灼燒一次接種環(huán)，因此該過程中接種環(huán)至少要灼燒5次，A錯誤；B、分析題圖可知，甲、乙和丙組均為不同種類的細菌，若甲、乙和丙組的濾紙片周圍都出現(xiàn)了抑菌圈，則說明真菌M可能產(chǎn)生了抑制細菌生長的物質(zhì)，B正確；C、過程②應(yīng)取平板a中的單菌落置于培養(yǎng)基b中，主要目的是擴大培養(yǎng)，獲得更多的純培養(yǎng)物，C錯誤；D、真菌M在培養(yǎng)基b中培養(yǎng)時，培養(yǎng)基b是液體培養(yǎng)基，不需要加入瓊脂，D錯誤。故選：B。【點評】本題主要考查微生物的選擇培養(yǎng)的內(nèi)容，要求考生識記相關(guān)知識，并結(jié)合所學(xué)知識準確答題。10．（2025?撫順模擬）某興趣小組欲對牛奶制品中乳酸菌的多樣性進行研究，他們采集菌種并做了相關(guān)實驗。下列敘述正確的是（）A．將分離后的乳酸菌接種到含有抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng) B．篩選菌種時，可選用牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基觀察菌落特征 C．在稀釋涂布平板法操作中，需用已滅菌冷卻的涂布器蘸取少量菌液進行接種 D．鑒定細菌種類時，除觀察菌落特征外，還可借助PCR等方法【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．【專題】正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；理解能力．【答案】D【分析】微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是純化的菌落。稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)?！窘獯稹拷猓篈、抗生素會抑制乳酸菌生長，故分離后的乳酸菌需接種到不含抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，A錯誤；B、觀察菌落特征需要選用固體培養(yǎng)基，B錯誤；C、在稀釋涂布平板法操作中，需將菌液滴在培養(yǎng)基上，再用涂布器涂布均勻，C錯誤；D、不同種類細菌的理化特性一般不同，鑒定細菌種類時，除觀察菌落特征外，還可以借助PCR等生物化學(xué)的方法進行鑒定，D正確。故選：D?！军c評】本題主要考查微生物的選擇培養(yǎng)的內(nèi)容，要求考生識記相關(guān)知識，并結(jié)合所學(xué)知識準確答題。11．（2025?項城市模擬）從傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)到發(fā)酵工程，經(jīng)歷了漫長的歷史過程。下列敘述錯誤的是（）A．自制泡菜時泡菜壇裝八成滿可防止發(fā)酵液溢出 B．發(fā)酵工程需要嚴格控制溫度、pH和罐壓等條件 C．發(fā)酵獲得的單細胞蛋白可用于生產(chǎn)微生物飼料 D．啤酒生產(chǎn)過程中，加入啤酒花可提供發(fā)酵菌種【考點】發(fā)酵工程在食品、醫(yī)藥、農(nóng)牧業(yè)等工業(yè)上的應(yīng)用；制作泡菜；果酒、果醋的制作；發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)．【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．【答案】D【分析】發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代化工程技術(shù)手段，利用微生物的某些功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術(shù)；發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面。發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，在該過程中要及時添加必需的營養(yǎng)組分，嚴格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件?！窘獯稹拷猓篈、自制泡菜時泡菜壇裝八成滿，是因為在發(fā)酵初期，由蔬菜表面帶入的大腸桿菌、酵母菌等較為活躍，它們的呼吸產(chǎn)物中有較多的二氧化碳，若泡菜壇裝得太滿，發(fā)酵液可能會溢出壇外，A正確；B、發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，該過程要及時添加必需的營養(yǎng)組分，嚴格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件，B正確；C、微生物含有豐富的蛋白質(zhì)，且細菌生長繁殖速度很快。所以許多國家以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵獲得了大量的微生物菌體，即單細胞蛋白，用單細胞蛋白制成的微生物飼料，能使家畜、家禽增重快，產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋量顯著提高，C正確；D、啤酒生產(chǎn)過程中，通過接種酵母菌提供發(fā)酵菌種，加入啤酒花不可提供發(fā)酵菌種，D錯誤。故選：D?！军c評】本題主要考查發(fā)酵的內(nèi)容，要求考生識記相關(guān)知識，并結(jié)合所學(xué)知識準確答題。12．（2025?湖北模擬）大豆發(fā)酵食品豆瓣醬是我國傳統(tǒng)發(fā)酵美食，它能讓麻婆豆腐熱辣鮮香，也能讓回鍋肉滋味醇厚，好似舌尖上的時光膠囊，封存著先輩們代代相傳的生活智慧。豆瓣醬的制作流程如圖所示，下列敘述錯誤的是（）A．保溫發(fā)酵過程中，醬豆中有機物的種類增加，有機物含量減少 B．米曲霉發(fā)酵過程中，添加面粉主要是為米曲霉的生長提供氮源 C．米曲霉發(fā)酵時需不斷翻醬，由此推測米曲霉屬于需氧型微生物 D．后期發(fā)酵中乳酸菌產(chǎn)生乳酸，能抑制雜菌生長并賦予豆瓣醬獨特酸味【考點】發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)．【專題】模式圖；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．【答案】B【分析】蠶豆中含有大量蛋白質(zhì)，主要為微生物的生長提供碳源（提供碳元素）和氮源（提供氮元素）類營養(yǎng)物質(zhì)；加入的蠶豆經(jīng)蒸熟、冷卻后使用，這樣既可以對蠶豆進行消毒，消滅蠶豆表面的雜菌，又能防止蠶豆溫度過高導(dǎo)致接種的微生物死亡。【解答】解：A、在保溫發(fā)酵過程中，米曲霉等微生物會分泌多種酶來分解有機物，復(fù)雜的有機物會被逐步分解成小分子有機物，因此有機物的種類會增加，發(fā)酵過程中微生物的呼吸作用會消耗有機物來獲取能量，導(dǎo)致有機物含量減少，A正確；B、在米曲霉發(fā)酵過程中，添加面粉主要是為米曲霉的生長提供碳源，B錯誤；C、米曲霉發(fā)酵時需不斷翻醬，其目的是讓米曲霉接觸到充足的氧氣，由此推斷米曲霉屬于需氧型微生物，C正確；D、后期發(fā)酵中乳酸菌會進行發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，降低環(huán)境的pH值，很多雜菌在酸性環(huán)境中生長會受到抑制，乳酸還能賦予豆瓣醬獨特的酸味，D正確。故選：B?！军c評】本題主要考查發(fā)酵的內(nèi)容，要求考生識記相關(guān)知識，并結(jié)合所學(xué)知識準確答題。13．（2025?石家莊模擬）蛭弧菌能使污水中的嗜水氣單胞菌（異養(yǎng)型）裂解，將其接種在長滿嗜水氣單胞菌的平板上會出現(xiàn)噬菌斑。某興趣小組將嗜水氣單胞菌接種到固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)形成薄層，再接種采集的污水用以分離蛭弧菌。下列敘述錯誤的是（）A．可用干熱滅菌法對平板進行滅菌 B．可用涂布平板法接種嗜水氣單胞菌 C．出現(xiàn)噬菌斑一定是蛭弧菌作用的結(jié)果 D．污水可為自然環(huán)境中的嗜水氣單胞菌提供碳源【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；無菌技術(shù)常用的消毒和滅菌方法．【專題】正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；理解能力．【答案】C【分析】微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！窘獯稹拷猓篈、干熱滅菌適用于能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬用具等，故可用干熱滅菌法對平板進行滅菌，A正確；B、接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，故可用涂布平板法接種嗜水氣單胞菌，B正確；C、出現(xiàn)噬菌斑說明有能分解嗜水氣單胞菌的微生物，但不一定是蛭弧菌作用的結(jié)果，C錯誤；D、污水中含有氨氮，可以為微生物提供氮源，D正確。故選：C?！军c評】本題考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識記能力和判斷能力，運用所學(xué)知識綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵。14．（2025?漳州模擬）研究人員擬篩選出優(yōu)良的酵母菌菌株用于發(fā)酵，其部分實驗流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A．圖中涂布、劃線過程需在酒精燈火焰附近進行 B．培養(yǎng)基A上的菌落可先通過菌落特征進行篩選 C．進行平板劃線時，后一次劃線應(yīng)從前一次的末端開始 D．涂布時用滅菌后的接種環(huán)將菌液均勻涂布于培養(yǎng)基A表面【考點】微生物的純培養(yǎng)．【專題】模式圖；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；理解能力．【答案】D【分析】平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點到線的劃線稀釋而獲得較多獨立分布的單個細胞，并讓其成長為單菌落的方法?！窘獯稹拷猓篈、由圖可知，培養(yǎng)基A上進行的操作是涂布平板，培養(yǎng)基B上進行的操作是平板劃線，這說明該實驗對優(yōu)良酵母菌菌株進行的篩選方法是先進行稀釋涂布平板法獲得單菌落，再用平板劃線法繼續(xù)進行純化，其接種的過程應(yīng)在酒精燈火焰附近進行，A正確；B、培養(yǎng)基A的菌落不一定只含酵母菌，可以先通過菌落的形態(tài)初步篩選酵母菌，再通過鏡檢選擇菌落，B正確；C、進行平板劃線時，后一次劃線應(yīng)從前一次的末端開始，這樣可以實現(xiàn)通過連續(xù)劃線操作獲得單菌落，C正確；C、涂布時用滅菌后的涂布器將菌液均勻涂布于培養(yǎng)基A表面，D錯誤。故選：D?！军c評】本題考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識記能力和判斷能力，運用所學(xué)知識綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵。15．（2025?長沙校級一模）野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基上生長，經(jīng)誘變獲得了兩種營養(yǎng)缺陷型的突變體M、N，且單獨培養(yǎng)時均不能在基本培養(yǎng)基上生長。若將兩種突變體在完全培養(yǎng)基（液體）中混合培養(yǎng)一段時間后，再采用稀釋涂布平板法接種在基本培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)后長出了大腸桿菌菌落。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．野生型大腸桿菌誘變時發(fā)生了基因突變或染色體變異 B．突變體M和N能相互為對方提供所缺營養(yǎng)物質(zhì) C．在混合培養(yǎng)期間突變體M和N發(fā)生了遺傳物質(zhì)的交流 D．混合培養(yǎng)獲得的大腸桿菌都能在基本培養(yǎng)基中生長【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．【專題】正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用．【答案】B【分析】基因突變是指基因中堿基對的增添、缺失或替換，這會導(dǎo)致基因堿基序列的改變，進而產(chǎn)生新基因?！窘獯稹拷猓篈、野生型大腸桿菌是原核生物，其遺傳物質(zhì)主要位于擬核的DNA上，并沒有像真核生物那樣的染色體結(jié)構(gòu)。因此，野生型大腸桿菌在誘變時不可能發(fā)生染色體變異，只能發(fā)生基因突變，A錯誤；B、根據(jù)題目描述，突變體M和N都是營養(yǎng)缺陷型，且單獨培養(yǎng)時均不能在基本培養(yǎng)基上生長。然而，當(dāng)它們在完全培養(yǎng)基中混合培養(yǎng)一段時間后，再接種到基本培養(yǎng)基上卻長出了大腸桿菌菌落。這說明在混合培養(yǎng)期間，突變體M和N能夠相互為對方提供所缺失的營養(yǎng)物質(zhì)，從而使得雙方都能在基本培養(yǎng)基上生長，B正確；C、根據(jù)題目描述，突變體M和N都是營養(yǎng)缺陷型，且單獨培養(yǎng)時均不能在基本培養(yǎng)基上生長，所以在混合培養(yǎng)期間，突變體M和N能夠相互為對方提供所缺失的營養(yǎng)物質(zhì)，并不一定是發(fā)生了遺傳物質(zhì)的交流，C錯誤；D、雖然混合培養(yǎng)后接種到基本培養(yǎng)基上長出了大腸桿菌菌落，但這并不意味著混合培養(yǎng)獲得的所有大腸桿菌都能在基本培養(yǎng)基中生長。只有那些通過相互提供缺失營養(yǎng)物質(zhì)而恢復(fù)了生長能力的突變體或重組體才能在基本培養(yǎng)基上生長，D錯誤。故選：B。【點評】本題考查學(xué)生從題中獲取相關(guān)信息，并結(jié)合所學(xué)微生物實驗室培養(yǎng)的知識作出正確判斷，屬于識記和理解層次的內(nèi)容，難度適中。二．解答題（共5小題）16．（2025?山東模擬）金黃色葡萄球菌（簡稱Sa）可引起皮膚傷口感染、敗血癥、細菌性肺炎等疾病。不規(guī)范使用抗生素易出現(xiàn)多重抗藥性Sa。（1）A、B、C、D四種抗生素均可治療由Sa引起的肺炎，為選出最佳療效的抗生素，研究者分別將含等劑量抗生素A、B、C、D的四張大小相同的濾紙片a、b、c、d置于均勻分布Sa的平板培養(yǎng)基上，在適宜條件下培養(yǎng)48h，結(jié)果如圖1。配制培養(yǎng)基時，需要加入的營養(yǎng)成分除了水和無機鹽外，還應(yīng)包括碳源、氮源；A、B、C、D四種抗生素中，抑菌效果最佳的是抗生素A。（2）Sa產(chǎn)生抗藥性可遺傳變異的來源有基因突變、基因重組、表觀遺傳（甲基化等）（答出2點）。（3）推測Sa產(chǎn)生頭孢霉素抗性與其R基因有關(guān)。為驗證該推測，以圖2中R基因的上、下游片段和質(zhì)粒1構(gòu)建質(zhì)粒2，然后通過同源重組（質(zhì)粒2中的上、下游片段分別與Sa基因組中R基因上、下游片段配對，并發(fā)生交換）敲除Sa的R基因。注1：1kb＝1000堿基對2：Y是可被脫水四環(huán)素（不作為抗生素起作用）誘導(dǎo)表達的Sa致死基因①根據(jù)圖2信息，質(zhì)粒2的構(gòu)建過程中需選擇限制酶SacⅡ和EcoRⅠ對PCR產(chǎn)物進行酶切，然后回收上、下游片段，再與SacⅡ酶切質(zhì)粒1所得大片段連接，獲得質(zhì)粒2。②用質(zhì)粒2轉(zhuǎn)化臨床分離的具有頭孢霉素抗性、對氯霉素敏感的Sa，然后涂布在含氯霉素的平板上，經(jīng)培養(yǎng)獲得含質(zhì)粒2的Sa單菌落。③將②獲得的單菌落多次傳代以增加同源重組敲除R基因的概率，隨后稀釋涂布在含脫水四環(huán)素的平板上，篩選并獲得不再含有質(zhì)粒2的菌落。從這些菌落中分別挑取少許菌體，依次接種到含頭孢霉素的平板上，若無法增殖，則對應(yīng)菌落中細菌的R基因可能被敲除。④以③獲得的菌株基因組為模板，采用不同引物組合進行PCR擴增，電泳檢測結(jié)果如圖3，表明R基因已被敲除的是D。【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；基因表達載體的構(gòu)建．【專題】圖文信息類簡答題；正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；基因工程；理解能力；解決問題能力．【答案】（1）碳源、氮源；抗生素A（2）基因重組、表觀遺傳（甲基化等）（3）SacⅡ和EcoRⅠ；脫水四環(huán)素；頭孢霉素；D【分析】可遺傳變異來源有：基因突變、基因重組、染色體變異及表觀遺傳。Sa是原核生物，沒有染色體?；虮磉_載體構(gòu)建過程，利用PCR擴增目的基因時，需要目的基因兩端的一段已知序列構(gòu)建引物，質(zhì)粒1及Sa的基因組中都含有SacII酶識別位點，還有質(zhì)粒2上含有R基因上下游片段。篩選含質(zhì)粒2的Sa菌落，用標(biāo)記基因篩選目的菌，已知質(zhì)粒2上有氯霉素抗性基因，篩選并獲得不再含有質(zhì)粒2的菌落，用標(biāo)記基因篩選目的菌質(zhì)粒2中的上、下游片段分別與Sa基因組中R基因上、下游片段配對，并發(fā)生交換，R基因被交換至質(zhì)粒2上，則Sa的基因組中沒有了R基因；Sa產(chǎn)生頭孢霉素抗性與其R基因有關(guān)，失去R基因，Sa沒有頭孢霉素抗性；質(zhì)粒2上含有的Y是可被脫水四環(huán)素誘導(dǎo)表達的Sa致死基因，則含質(zhì)粒2的Sa在含脫水四環(huán)素的培養(yǎng)基中會死亡。篩選R基因被敲除的Sa，PCR擴增目的基因時需要目的基因兩端的一段已知序列構(gòu)建引物，發(fā)生同源重組時，質(zhì)粒2中的上、下游片段分別與Sa基因組中R基因上、下游片段配對，并發(fā)生交換，敲除Sa的R基因，但R基因兩端的上、下游片段仍在Sa基因組中?！窘獯稹浚?）配制培養(yǎng)基時，需要加入的營養(yǎng)成分除了水和無機鹽外，還應(yīng)包括碳源、氮源，這是培養(yǎng)基的基本成分；在含等劑量不同抗生素的濾紙片置于均勻分布Sa的平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，抑菌圈越大，說明該抗生素的抑菌效果越好。A、B、C、D四種抗生素中，抑菌效果最佳的是抗生素A，因為濾紙片a的抑菌圈最大；（2）Sa為原核生物，沒有染色體，不能進行有性生殖，產(chǎn)生抗藥性可遺傳變異的來源有基因突變、基因重組（例如通過獲取外源DNA片段等方式發(fā)生基因重組）、表觀遺傳等；（3）①由圖1可知，質(zhì)粒2上依次接有SacⅡ、EcoRⅠ、SacⅡ三個酶切位點，而質(zhì)粒1上只有SacⅡ酶切位點，R基因的上下游依次含有SacⅡ、EcoRⅠ、EcoRⅠ、SacⅡ酶切位點，若要構(gòu)建質(zhì)粒2，可以采用引物1和4進行PCR擴增可得到整個R基因，以及上下游片段（或采用引物1和3以及引物2和4分別進行PCR擴增），用SacⅡ和EcoRⅠ對PCR產(chǎn)物進行酶切，然后回收上、下游片段，再與SacⅡ酶切質(zhì)粒1所得大片段連接，獲得質(zhì)粒2。②用質(zhì)粒2轉(zhuǎn)化臨床分離的具有頭孢霉素抗性、對氯霉素敏感的Sa，因為重組的質(zhì)粒2上含有氯霉素抗性基因，所以可以將重組后的含質(zhì)粒2的菌落涂布在含氯霉素（或氯霉素+頭孢霉素）的平板上，能生存下來的菌落就是，含質(zhì)粒2的Sa單菌落。③推測Sa產(chǎn)生頭孢霉素抗性與其R基因有關(guān)。為驗證該推測需要敲除R基因，因為質(zhì)粒2上含有Y可被脫水四環(huán)素又到表達的Sa致死基因，所以將②獲得的單菌落多次傳代以增加同源重組敲除R基因的幾率，隨后稀釋涂布在含脫水四環(huán)素的平板上，可誘導(dǎo)R基因死亡，若無法增殖，則對應(yīng)菌落中細菌的R基因疑似被敲除。④若R基因已被敲除，用引物1和3擴增，由于上、下游片段連接在一起，長度為0.7+1.2＝1.9kb；用引物2和4擴增，由于R基因被敲除，沒有對應(yīng)的模板，不會有擴增產(chǎn)物；用引物2和3擴增，也沒有對應(yīng)的模板，不會有擴增產(chǎn)物；用引物1和4擴增，長度為0.7+1.2＝1.9kb。觀察圖3，只有D選項符合上述情況，所以表明R基因已被敲除的是D。故選：D。故答案為：（1）碳源、氮源；抗生素A（2）基因重組、表觀遺傳（甲基化等）（3）SacⅡ和EcoRⅠ；脫水四環(huán)素；頭孢霉素；D【點評】本題是一道綜合性很強的實驗探究題，圍繞金黃色葡萄球菌（Sa）的抗生素抗性展開，涉及微生物培養(yǎng)、可遺傳變異來源、基因工程操作及驗證實驗設(shè)計等多方面知識。學(xué)生需牢記微生物培養(yǎng)基的基本成分，如碳源、氮源、水和無機鹽等，在分析配制培養(yǎng)基所需成分時，避免遺漏；理解通過抑菌圈大小判斷抗生素抑菌效果的原理，觀察實驗結(jié)果圖時要仔細，準確找出抑菌圈最大的抗生素，防止觀察失誤；對基因工程中限制酶的選擇、質(zhì)粒構(gòu)建、轉(zhuǎn)化等操作過程要清晰掌握。本題中根據(jù)基因片段和質(zhì)粒上的酶切位點準確選擇限制酶；理解各步驟中篩選所用試劑的作用，如氯霉素用于篩選含質(zhì)粒2的菌落，脫水四環(huán)素用于去除含質(zhì)粒2的菌落等，防止邏輯混亂。17．（2025?長沙校級一模）白色污染問題已引起全社會廣泛關(guān)注，降解塑料的研究和開發(fā)是解決白色污染的理想途徑之一。地膜的主要成分是聚乙烯[化學(xué)式為（C2H4）n]。殘留在土壤中的地膜難以被降解，為篩選出高效降解地膜的細菌，研究人員進行了如圖所示的操作。X培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，聚乙烯分解菌在該培養(yǎng)基上會形成抑菌圈?；卮鹣铝袉栴}：（1）在篩選聚乙烯分解菌過程中，應(yīng)選擇含廢舊地膜豐富的土壤，制作培養(yǎng)基時，應(yīng)將聚乙烯作為X培養(yǎng)基中的唯一碳源，并使用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌。（2）為了證明所配制X培養(yǎng)基具有選擇作用，在恒溫培養(yǎng)前，需要將接種后的X培養(yǎng)基平板和接種后的完全培養(yǎng)基平板同時進行培養(yǎng)，待兩種培養(yǎng)基平板上的菌落生長穩(wěn)定時，比較兩種平板培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。若結(jié)果為X培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)明顯少于完全培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)，則可證明上述觀點。（3）可挑選X培養(yǎng)基中的⑤（填序號）中的單菌落接種到Y(jié)培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。配制Y培養(yǎng)基時，其pH一般調(diào)至中性或弱堿性。（4）用稀釋涂布平板法對細菌進行計數(shù)時，所統(tǒng)計的菌落數(shù)往往會比活菌的實際數(shù)目偏小，原因是當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。在5個平板上各接種稀釋倍數(shù)為103的菌液樣品0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上的菌落數(shù)分別為28、50、52、54、313，則每升原菌液樣品中細菌數(shù)為5.2×108個?！究键c】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的數(shù)量測定．【專題】圖文信息類簡答題；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；理解能力．【答案】（1）含廢舊地膜豐富聚乙烯高壓蒸汽（2）X培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)明顯少于完全培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)（3）⑤；中性或弱堿性（4）當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落5.2×108【分析】微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！窘獯稹拷猓海?）篩選聚乙烯分解菌，依據(jù)題干信息，地膜的主要成分是聚乙烯，所以應(yīng)選擇含廢舊地膜豐富的土壤制作樣品，制作培養(yǎng)基時，應(yīng)該聚乙烯作為X培養(yǎng)基中的唯一碳源，并使用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌。（2）為了證明所配制X培養(yǎng)基具有選擇作用，在恒溫培養(yǎng)前，需要將接種后的X培養(yǎng)基平板和接種后的完全培養(yǎng)基平板同時進行培養(yǎng)，待兩種培養(yǎng)基平板上的菌落生長穩(wěn)定時，比較兩種平板培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。如果X培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)明顯少于完全培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)，說明該培養(yǎng)基具有選擇作用。（3）透明圈直徑/菌落直徑越大，說明該菌的降解能力越強，所以應(yīng)選擇⑤中單菌落接種到Y(jié)培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，培養(yǎng)細菌時，其pH一般調(diào)至中性或弱堿性。（4）由于當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以當(dāng)用稀釋涂布平板法對細菌進行計數(shù)時，所統(tǒng)計的菌落數(shù)往往會比活菌的實際數(shù)目偏小。平板上的菌落數(shù)應(yīng)介于30﹣300之間，故28、313數(shù)值無效，所以每升原菌液樣品中的細菌數(shù)為（50+52+54）÷3÷0.1×103×103＝5.2×108。故答案為：（1）含廢舊地膜豐富聚乙烯高壓蒸汽（2）X培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)明顯少于完全培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)（3）⑤；中性或弱堿性（4）當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落5.2×108【點評】本題考查微生物的培養(yǎng)與分離等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識記能力和判斷能力，運用所學(xué)知識綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵。18．（2025?長沙校級一模）活性黑5是一種低毒性、難褪色的含氮染料。欲利用生物酶處理染料廢水中的活性黑5，具體操作流程如圖。從染料廢水堆積池的污泥中獲得優(yōu)勢菌群，采用濃度梯度馴化法，進一步培養(yǎng)獲得具備強分解活性黑5能力的假單胞桿菌，并進行基因表達分析?；卮鹣铝袉栴}：（1）培養(yǎng)基Ⅰ和培養(yǎng)基Ⅱ均以活性黑5為唯一氮源，從用途上來看均屬于選擇培養(yǎng)基，該類培養(yǎng)基的特點是允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長。培養(yǎng)基Ⅱ是利用平板劃線法將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。（2）假單胞桿菌中，BVU5蛋白分解活性黑5的場所最可能為細胞質(zhì)基質(zhì)（填“細胞質(zhì)基質(zhì)”“溶酶體”或“核糖體”）；據(jù)題推測，馴化后的假單胞桿菌增強了BVU5基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。（3）假單胞桿菌分解活性黑5能力的強弱可能與BVU5蛋白的含量、BVU5蛋白對活性黑5的分解速率、BVU5蛋白的空間結(jié)構(gòu)（答出2點）因素有關(guān)?！究键c】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的純培養(yǎng)．【專題】圖文信息類簡答題；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；理解能力．【答案】（1）活性黑5選擇允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長平板劃線純培養(yǎng)物（2）細胞質(zhì)基質(zhì)BVU5基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯（3）BVU5蛋白的含量、BVU5蛋白對活性黑5的分解速率、BVU5蛋白的空間結(jié)構(gòu)【分析】培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求?！窘獯稹拷猓海?）培養(yǎng)基Ⅰ和培養(yǎng)基Ⅱ均為選擇培養(yǎng)基，均以活性黑5為唯一氮源；該培養(yǎng)基能篩選到能利用活性黑5的微生物，從用途上來看均屬于選擇培養(yǎng)基；選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某理化因素抗性的原理而設(shè)計的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長，而同時抑制或阻止其他微生物生長的功能；培養(yǎng)基Ⅱ是利用平板劃線法將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上；一般由單個微生物繁殖形成的一團肉眼可見的純培養(yǎng)物稱為菌落。（2）假單胞桿菌為原核生物，沒有溶酶體，核糖體是合成蛋白質(zhì)的場所，沒有分解蛋白質(zhì)的功能，細胞質(zhì)基質(zhì)中由于存在多種酶，因此最可能為BVU5蛋白分解活性黑5的場所；馴化后的假單胞桿菌增強了BVU5基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程，使得BVU5蛋白的含量大大提高。（3）BVU5蛋白的含量、BVU5蛋白對活性黑5的分解速率、BVU5蛋白的空間結(jié)構(gòu)都可能會影響到假單胞桿菌分解活性黑5的能力。故答案為：（1）活性黑5選擇允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長平板劃線純培養(yǎng)物（2）細胞質(zhì)基質(zhì)BVU5基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯（3）BVU5蛋白的含量、BVU5蛋白對活性黑5的分解速率、BVU5蛋白的空間結(jié)構(gòu)【點評】本題考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識記能力和判斷能力，運用所學(xué)知識綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵。19．（2025?馬鞍山模擬）脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）具有一定的致癌性，DON廣泛存在于谷物類原料及其制品中。為篩選具有高效降解DON能力的微生物，科研人員進行了相關(guān)實驗，部分流程為：土壤稀釋液→MSD培養(yǎng)基富集培養(yǎng)→篩選→分離→純化→鑒定?；卮鹣铝袉栴}。（1）富集培養(yǎng)時，以DON為唯一碳源的MSD培養(yǎng)基從功能上屬于選擇培養(yǎng)基?？蒲腥藛T通過平板劃線法將培養(yǎng)液中的微生物接種在固體培養(yǎng)基上，實驗操作進行連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面。（2）通過篩選獲得了由兩種微生物組成的混合菌體。為了鑒定兩種微生物，科研人員對兩者16SrDNA序列進行PCR擴增。在PCR反應(yīng)體系中加Mg2+作用是激活DNA聚合酶。對PCR擴增結(jié)果進行凝膠電泳分析，出現(xiàn)多種條帶，可能原因是引物特異性不強、引物較短、引物濃度較高、復(fù)性溫度較低等。（3）改進實驗后，結(jié)果顯示該混合菌體由Y1和S1兩種微生物組成。為明確DON被降解的原因，科研人員提出一種假設(shè)：混合菌體分泌了相關(guān)物質(zhì)將DON降解。請設(shè)計實驗驗證以上假說，寫出實驗思路。取混合微生物培養(yǎng)液添加到含有一定量的DON溶液中，一段時間后檢測溶液中DON含量。（4）實驗表明混合菌體分泌了相關(guān)物質(zhì)將DON降解。當(dāng)科研人員將Y1和S1單獨接種在DON培養(yǎng)基上時，發(fā)現(xiàn)兩者均不能很好的降解DON，推測其原因是降解DON可能需要多步反應(yīng)，Y1和S1分泌的物質(zhì)可以將對方無法分解的中間產(chǎn)物進一步分解，分解產(chǎn)物可以作為下一反應(yīng)的底物，兩者分泌的物質(zhì)起到協(xié)同作用?！究键c】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；DNA片段的擴增與電泳鑒定；微生物的純培養(yǎng)．【專題】正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；理解能力．【答案】（1）選擇培養(yǎng)基；將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面（2）激活DNA聚合酶；引物特異性不強、引物較短、引物濃度較高、復(fù)性溫度較低等（3）取混合微生物培養(yǎng)液添加到含有一定量的DON溶液中，一段時間后檢測溶液中DON含量（4）降解DON可能需要多步反應(yīng)，Y1和S1分泌的物質(zhì)可以將對方無法分解的中間產(chǎn)物進一步分解，分解產(chǎn)物可以作為下一反應(yīng)的底物，兩者分泌的物質(zhì)起到協(xié)同作用【分析】PCR原理：目的基因DNA受熱變性后解為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合；然后以單鏈DNA為模板，在DNA聚合酶作用下進行延伸，即將4種脫氧核苷酸加到引物的3'端，如此重復(fù)循環(huán)多次?！窘獯稹拷猓海?）富集培養(yǎng)時，以DON為唯一碳源的MSD培養(yǎng)基從功能上屬于選擇培養(yǎng)基；進行連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面。（2）在PCR反應(yīng)體系中加Mg^{2+}的作用是激活DNA聚合酶；對PCR擴增結(jié)果進行凝膠電泳分析，出現(xiàn)多條帶，可能原因是引物特異性不強、引物較短、引物濃度較高、復(fù)性溫度較低等。（3）實驗思路：取混合微生物培養(yǎng)液添加到含有一定量的DON溶液中，一段時間后檢測溶液中DON含量；另取等量的Y1和S1的培養(yǎng)液分別添加到含有等量DON溶液的兩組容器中，相同時間后檢測兩組容器中DON含量，并與混合微生物培養(yǎng)液組進行對比。（4）原因是降解DON可能需要多步反應(yīng)，Y1和S1分泌的物質(zhì)可以將對方無法分解的中間產(chǎn)物進一步分解，分解產(chǎn)物可以作為下一反應(yīng)的底物，兩者分泌的物質(zhì)起到協(xié)同作用。故答案為：（1）選擇培養(yǎng)基；將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面（2）激活DNA聚合酶；引物特異性不強、引物較短、引物濃度較高、復(fù)性溫度較低等（3）取混合微生物培養(yǎng)液添加到含有一定量的DON溶液中，一段時間后檢測溶液中DON含量（4）降解DON可能需要多步反應(yīng)，Y1和S1分泌的物質(zhì)可以將對方無法分解的中間產(chǎn)物進一步分解，分解產(chǎn)物可以作為下一反應(yīng)的底物，兩者分泌的物質(zhì)起到協(xié)同作用【點評】本題考查了微生物的選擇培養(yǎng)、PCR技術(shù)以及實驗設(shè)計等知識點，意在考查學(xué)生對微生物培養(yǎng)和分子生物學(xué)技術(shù)的理解，以及實驗設(shè)計和分析能力。20．（2025?天津模擬）磷是植物生長的重要元素，施入土中的磷大多數(shù)與Ca2+等離子結(jié)合形成難溶性磷酸鹽?？蒲腥藛T從貢柑果園土中選出可以將難溶性或不溶性磷轉(zhuǎn)化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程見圖1，請回答下列問題：（1）步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍。經(jīng)步驟③最后一次稀釋之后若在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，得到的結(jié)果是：39、38、37，則每克土樣中的活菌數(shù)為3.8×106個。運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值偏小，原因是一個菌落可能來自于兩個或多個細胞。（2）步驟④中待菌落長好后挑出溶磷圈直徑（D）與菌落直徑（d）比值較大的菌落。通常情況下，對獲得的純菌種可以依據(jù)菌落（的形狀、大小、顏色等）特征對細菌進行初步的鑒定和分類。（3）為進一步測定初步篩選的三種菌株實際溶解磷的能力，研究人員將它們接種到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，并在37℃、200r?min﹣1搖床培養(yǎng)，定期取上清液，測定溶液中可溶性磷含量，得到如圖2所示曲線。用搖床進行培養(yǎng)的好處增加培養(yǎng)液中的溶氧量、使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，有利于物質(zhì)交換。結(jié)果表明最優(yōu)良的解磷菌株是M﹣3﹣01。【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的數(shù)量測定．【專題】正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；實驗探究能力．【答案】（1）10003.8×106偏小一個菌落可能來自于兩個或多個細胞（2）大菌落（的形狀、大小、顏色等）特征（3）增加培養(yǎng)液中的溶氧量使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，有利于物質(zhì)交換M﹣3﹣01【分析】微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無機鹽等。篩選目的微生物必須使用選擇培養(yǎng)基。從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株常用的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法。【解答】解：（1）步驟③進行了3次稀釋，每次稀釋了10倍，則共將土壤懸浮液稀釋了1000倍。（39+38+37）÷3÷0.1×104＝3.8×106個。由于兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此該數(shù)值與活菌的實際數(shù)目相比偏低。（2）溶磷圈直徑（D）與菌落直徑（d）比值較大，說明細菌分解磷酸鹽的能力較強，所以選擇溶磷圈直徑（D）與菌落直徑（d）比值較大的菌落。不同的微生物具有特定的菌落特征，所以可通過觀察菌落的形狀、大小、顏色等特征對細菌進行初步的鑒定和分類。（3）搖床培養(yǎng)是實驗室培養(yǎng)需氧微生物的常用方法，使用搖床培養(yǎng)，不僅可以增大培養(yǎng)液中溶氧量，促進微生物的有機呼吸，而且能夠增加菌體與培養(yǎng)液的接觸，有利于物質(zhì)交換，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。根據(jù)實驗曲線圖，培養(yǎng)相同時間后，M﹣3﹣01的上清液中可溶性磷含量較高，可知M﹣3﹣01實際溶解磷能力最強。故答案為：（1）10003.8×106偏小一個菌落可能來自于兩個或多個細胞（2）大菌落（的形狀、大小、顏色等）特征（3）增加培養(yǎng)液中的溶氧量使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，有利于物質(zhì)交換M﹣3﹣01【點評】本題考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，要求學(xué)生能結(jié)合所學(xué)知識正確作答。

考點卡片1．發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)【知識點的認識】（1）發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品。它涉及菌種的選育和培養(yǎng)、產(chǎn)物的分離和提純等方面。（2）發(fā)酵是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。（3）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是直接利用原料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團、鹵汁等發(fā)酵物中的微生物進行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)?！久}方向】下列關(guān)于發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，正確的是（）A．發(fā)酵過程中有機物的干重和種類均減少B．傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)都是直接利用天然原料中的微生物C．傳統(tǒng)發(fā)酵是以混合菌種的固體發(fā)酵及液體發(fā)酵為主D．發(fā)酵是將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需的產(chǎn)物的過程分析：發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種計數(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育、培養(yǎng)基的制備、滅菌、擴大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面。解答：A、發(fā)酵過程中微生物代謝會消耗有機物，導(dǎo)致有機物的干重減少，但會有中間物質(zhì)的產(chǎn)生，有機物種類會增加，A錯誤；B、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來的發(fā)酵物中的微生物進行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)，B錯誤；C、傳統(tǒng)發(fā)酵是以混合菌種的固體發(fā)酵和半固體發(fā)酵為主，C錯誤；D、發(fā)酵是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需的產(chǎn)物的過程，D正確。故選：D。點評：本題主要考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用的內(nèi)容，要求考生識記相關(guān)知識，并結(jié)合所學(xué)知識準確答題?！窘忸}思路點撥】掌握發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識是解題的關(guān)鍵。2．制作泡菜【知識點的認識】泡菜的制作及亞硝酸鹽含量的測定1、原理（1）泡菜的制作原理泡菜的制作離不開乳酸菌．在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸．（2）測定亞硝酸鹽含量的原理在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準液進行目測對比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量．2、流程（1）泡菜的制作（2）亞硝酸鹽含量的測定操作過程3、實驗分析（1）乳酸菌的種類分析乳酸菌屬原核生物，它是能通過發(fā)酵將糖類轉(zhuǎn)化成乳酸的細菌的總稱，常見的有乳酸桿菌和乳酸鏈球菌，所以乳酸菌不是一個種群，而是一類生物．（2）泡菜在腌制過程中，乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化①發(fā)酵初期：以不抗酸的大腸桿菌和酵母菌的活動為主，同時還有一部分硝酸鹽還原菌活動．該時期利用了氧氣，產(chǎn)生了厭氧環(huán)境，乳酸菌才開始活動．此時乳酸菌和乳酸的量都比較少，而由于硝酸鹽還原菌的活動，亞硝酸鹽含量有所增加．②發(fā)酵中期：由于乳酸菌產(chǎn)生了大量乳酸，其他細菌活動受到抑制，只有乳酸菌活動增強．此時期乳酸菌數(shù)量達到最高峰，乳酸的量繼續(xù)積累．由于硝酸鹽還原菌受抑制，同時形成的亞硝酸鹽又被分解，因而亞硝酸鹽含量下降．所以在整個發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽的含量表現(xiàn)為先增加后下降的趨勢（如圖所示）．③發(fā)酵后期：由于乳酸的積累，酸度繼續(xù)增長，乳酸菌活動也受到抑制．乳酸菌數(shù)量下降，而硝酸鹽還原菌完全被抑制．提醒放置時間長的蔬菜中的硝酸鹽易被滋生的硝酸還原菌還原成亞硝酸鹽．3．果酒、果醋的制作【知識點的認識】（1）利用酵母菌制作果酒的原理是：在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O6+6O2→酶6CO2+12H2O+在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。C6H12O6→酶2CO2+2C2H5OH+（2）利用醋酸菌制作果醋的原理當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷6H12O6+2O2→酶CH3COOH（醋酸）+2H2O+2CO2+C2H5OH+O2→酶CH3COOH（醋酸）+H2O+（提示：在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的）【命題方向】下列關(guān)于果酒、果醋制作的敘述，錯誤的是（）A．糖源不足時乙醇可以作為果醋發(fā)酵的底物B．酵母菌和醋酸桿菌都屬于異養(yǎng)型微生物C．乙醇發(fā)酵后期可向培養(yǎng)液中加入無菌水進行適當(dāng)稀釋再制作果醋D．在變酸的果酒表面觀察到的菌膜是酵母菌在液面大量繁殖形成的分析：1、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細菌，只有當(dāng)氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養(yǎng)需氧型。當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃