dsc2在食管癌中的表達 功能與分子調(diào)控機制的研究

1/1dsc2在食管癌中的表達功能與分子調(diào)控機制的研究摘要迄今，作為一種常見的消化道惡性腫瘤，食管癌發(fā)生發(fā)展的分子機制在許多方面依然不甚清楚。

Desmocollin2（DSC2）是橋粒膠糖蛋白家族的成員之一，在正常上皮細胞間的粘附中發(fā)揮重要作用。

有研究報道，DSC2在結(jié)直腸癌等腫瘤組織中表達下降，推測會直接破壞細胞間的橋粒連接，有損組織結(jié)構(gòu)與功能的完整性。

關(guān)于食管癌中DSC2的表達、功能及其分子調(diào)控機制，至今未見研究報道。

本課題組在前期實驗中發(fā)現(xiàn)，在食管癌細胞，敲降Fascin基因表達，伴隨著癌細胞的移動侵襲能力減弱與粘附能力增強，DSC2的表達顯著上調(diào)。

提示DSC2在食管癌的發(fā)生發(fā)展中可能扮演著某種重要角色。

因此，有必要把該基因在食管癌中的表達、功能及其分子調(diào)控機制等重要科學問題研究清楚。

基于此，在本論文中，我們通過綜合運用組織芯片、免疫組化、免疫熒光、Westernblotting、RT-PCR、RNA干擾和真核基因表達等系列實驗技術(shù)手段，就上述科學問題展開深入研究，結(jié)果詳見下述。

首先，通過RT-PCR、免疫組化、免疫印跡等實驗技術(shù)，檢測DSC2以及橋粒鈣粘素家族其它成員在食管癌組織中的表達情況。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，①與配對的正常食管上皮組織相比，在食管癌組織中，DSC2mRNA表達明顯下調(diào)，而DSC3mRNA表達無顯著差異；對DSC1，無論食管癌組織，還是正常食管上皮組織，表達水平均很低。

②與配對的正常食管上皮組織相比，在食管癌組織中，DSC2蛋白表達水平也顯著下調(diào)，并表現(xiàn)出由胞膜異位到胞漿的特點。

統(tǒng)計分析結(jié)果顯示，DSC2蛋白表達，與食管癌組織分化顯著正相關(guān)（Plt;0.05），與臨床分期顯著負相關(guān)（Plt;0.05），與食管癌患者的生存期顯著正相關(guān)。

提示DSC2表達下調(diào)可能在食管癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著某種重要作用，檢測DSC2表達可以警示食管癌患者的預后。

其次，通過正反兩種實驗策略，探討了DSC2對食管癌細胞的分裂增殖與移動能力的影響。

①實時定量RT-PCR和細胞免疫熒光染色實驗結(jié)果表明，不同的食管癌細胞系DSC2的表達水平存在差異，SHEEC等食管癌細胞表達DSC2的水平較高，EC109和KYSE150等食管癌細胞表達DSC2的水平相對較低，因此，為后續(xù)研究DSC2功能，提供了良好的對比細胞模型。

②在EC109和KYSE150細胞，通過基因轉(zhuǎn)染建立穩(wěn)定高表達DSC2食管癌細胞株。

分裂增殖與移動能力檢測實驗結(jié)果表明，與轉(zhuǎn)染空載體的對照細胞相比，DSC2高表達的KYSE150細胞的移動能力顯著降低，但分裂增殖能力未見明顯變化；而DSC2高表達的EC109細胞的移動能力有所降低，但差異不