犬細(xì)小病毒時(shí)間分辨熒光免疫層析檢測方法征求意見稿

1犬細(xì)小病毒時(shí)間分辨熒光免疫層析檢測方法本文件規(guī)定了犬細(xì)小病毒（Canineparvovirus,CPV）時(shí)間分辨熒光免疫層析抗原檢測方法的試本文件適用于檢測犬糞便的CPV抗原，可用于CPV的免疫篩查、輔助診斷等。時(shí)間分辨熒光免疫層析技術(shù)TimeResolvedFluorescenceImmunochrom犬細(xì)小病毒Canineparvovirus（CPV）是細(xì)小病毒科（Parvoviridae）、細(xì)小病毒亞科（Parvovirinae）、原型細(xì)小病毒屬（Protoparvovirus）、食肉動物細(xì)小病毒1（CarnivoreProtoparvovirus1）的成員，是一種單鏈脫氧核CPV：犬細(xì)小病毒（Canineparvovirus）26.1.2單道可調(diào)移液器，量程（規(guī)格）為20）：行梯度試驗(yàn)確定），用于捕獲樣本中與高敏熒光納米微球標(biāo)記CPV抗體特異性結(jié)合的CP3便攜式熒光免疫分析儀通過365/610nm光波激發(fā)和收集檢測線T/C值即為樣本中CPV抗原的檢測值（軟件自帶計(jì)如果檢測值顯示數(shù)值，說明質(zhì)控線和檢測線熒光4A.1熒光微球墊的制備A.1.1熒光微球標(biāo)記抗體的制備），CPV抗體，室溫（15℃~25℃)避光震蕩4h，加入封閉液，4℃避光震蕩8h～12h，12000rpm2℃~8℃保存?zhèn)溆?。同上述步驟制備熒光微球標(biāo)記羊抗兔二抗溶液，將熒光微球標(biāo)記的CPV抗體溶液和熒光微球標(biāo)記的羊抗兔二抗溶液以體積比為10:1進(jìn)行混合，2℃~8℃保存?zhèn)溆谩.1.2熒光微球質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1）鑭系熒光微球液體避光保存，在2℃~8℃中呈乳白色，熒光顏色為橙色。2）納米粒度儀檢測鑭系熒光微球粒徑200nm～320nm，單分散系數(shù)PDI為＜0.1。A.1.3熒光微球墊的制備將熒光微球標(biāo)記CPV抗體溶液，用噴金點(diǎn)膜儀設(shè)置噴量為cm×30cm）以7mm間隔噴涂，將噴好的熒光微球墊放置在干燥架上，置37℃(±2℃)干燥4h~5h，烘干后于切成7mm于4℃~30℃密封保存?zhèn)溆?。A.2包被片材的制備A.2.1包被溶液的制備A.2.1.1質(zhì)控線（C線）包被溶液線）包被膜溶液，2℃~8℃保存?zhèn)溆?。A.2.1.2檢測線（T線）包被溶液5線）包被膜溶液，2℃~8℃保存?zhèn)溆?。A.2.2包被片材放入裝有干燥劑的鋁箔袋內(nèi)，封口，貼上標(biāo)簽，于4℃~30℃密封保存?zhèn)溆?。A.3樣品墊的制備纖維素膜中央，用滾輪鋪勻，37℃(±2℃)過夜干燥，用切條機(jī)將其裁切為2.5cm×30cm，于4℃~A.4檢測卡的制備在室溫（15℃~25℃)及濕度≤30%RH條件下，依次按NC膜、吸水墊、熒光微球墊、樣品疊，使NC膜的檢測線（T線）靠近樣在室溫（15℃~25℃)及濕度≤30%RH條件下，將已組裝好的熒光微球大板修剪整齊后，用的NaH2PO4·2H2O溶于1000mL純化水中，配制出0.2M