實(shí)驗(yàn)一抗原抗體反應(yīng)-凝集反應(yīng)課件

抗原抗體反應(yīng)免疫學(xué)抗原與相應(yīng)抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)稱為抗原抗體反應(yīng)(antigen-antibodyreaction)。

抗原抗體反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)原理

抗原抗體結(jié)合反應(yīng)是抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間的相互作用，是一種分子表面的特異的可逆的弱結(jié)合力。這些弱結(jié)合力只能在極短距離內(nèi)才能發(fā)生效應(yīng)?？乖贵w結(jié)合力抗原和抗體的結(jié)合雖然是互補(bǔ)性，非共價(jià)鍵，特異性結(jié)合，抗原與抗體這種弱的結(jié)合力涉及下列幾種分子間的作用力。l.靜電引力2.范德華引力3.氫鍵結(jié)合力4.疏水作用力

親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體轉(zhuǎn)化NaCl可見(jiàn)反應(yīng)比例性示意圖抗體過(guò)量比例合適抗原的量抗原過(guò)量抗體沉淀的量前帶等價(jià)帶后帶抗原抗體反應(yīng)比例性的機(jī)制，可用網(wǎng)格學(xué)說(shuō)加以說(shuō)明。因?yàn)樘烊豢乖蠖嗍嵌鄡r(jià)的，抗體至少為兩價(jià)，當(dāng)抗原與抗體在等價(jià)帶結(jié)合時(shí)，相互交叉連接成具有立體結(jié)構(gòu)的網(wǎng)格狀復(fù)合體，形成肉眼可見(jiàn)的沉淀物。當(dāng)抗原或抗體過(guò)剩時(shí)，由于過(guò)剩方的結(jié)合價(jià)得不到飽和，只能形成小網(wǎng)格復(fù)合物。但是，當(dāng)抗原或抗體為單價(jià)，不管抗原與抗體的量比關(guān)系是否合適，均不能出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)現(xiàn)象?？贵w混有SPAg抗體-SPAg抗體-SPAg分離劑一、抗原抗體結(jié)合二、分離抗體

可逆性示意圖抗體抗原抗體反應(yīng)影響因素

1.抗原、抗體的自身因素的影響;2.電解質(zhì)、酸堿度、溫度及時(shí)間等實(shí)驗(yàn)環(huán)境因素的影響。第四節(jié)抗原抗體類型1.可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所產(chǎn)生的沉淀反應(yīng)2.顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所發(fā)生的凝集反應(yīng)3.抗原抗體結(jié)合后激活補(bǔ)體所致的細(xì)胞溶解反應(yīng)

4.細(xì)菌外毒素或病毒與相應(yīng)抗體結(jié)合所致的中和反應(yīng)

5.免疫標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)。凝集反應(yīng)

類型：★直接凝集反應(yīng)★間接凝集反應(yīng)★間接凝集抑制試驗(yàn)★協(xié)同凝集試驗(yàn)1.凝集反應(yīng)直接凝集試驗(yàn)：顆粒性抗原在有電解質(zhì)的參與下，直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。間接凝集試驗(yàn)：用人工方法將可溶性抗原(或

抗體）吸附或偶聯(lián)于載體上，使之成為致敏

載體顆粒，再與相應(yīng)抗體（或抗原）作用，

在適宜電解質(zhì)的參與下，出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。載體可溶性抗原致敏致敏顆粒NS凝集顆粒

（正向）間接凝集試驗(yàn)用特異性抗原致敏載體，檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗體的方法。待測(cè)抗體

反向間接凝集試驗(yàn)＋用特異性抗體致敏載體，檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗原的方法。載體已知抗體致敏致敏顆粒NS凝集顆粒待測(cè)抗原

間接凝集抑制試驗(yàn)待測(cè)抗原已知抗體特異結(jié)合抗原抗體復(fù)合物NS＋致敏顆粒用抗原致敏載體及相應(yīng)抗體作為診斷試劑，用于檢測(cè)標(biāo)本中是否存在與致敏載體相同的抗原。無(wú)凝集顆粒為陽(yáng)性

間接凝集抑制試驗(yàn)待測(cè)抗原已知抗體無(wú)結(jié)合抗原抗體分散NS＋致敏顆粒有凝集顆粒為陰性原理抗球蛋白試驗(yàn)(Coombs試驗(yàn))機(jī)體受某些抗原刺激后產(chǎn)生“不完全抗體”，其與相應(yīng)抗原結(jié)合后不出現(xiàn)可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象，但能封閉抗原決定簇，使其不能再與完全抗體結(jié)合。類型原理協(xié)同凝集試驗(yàn)SPA能與血清中的IgG類抗體的Fc段非特異性結(jié)合，而兩個(gè)Fab段暴露在葡萄球菌菌體表面，仍然保持正常的抗體活性，與特異性抗原相遇時(shí)，能出現(xiàn)特異的凝集現(xiàn)象。

原理圖IgGSPASPA-IgG

待測(cè)抗原SPA-IgG-待測(cè)抗原凝集顆?；旌霞尤雽?shí)驗(yàn)材料1.待測(cè)血清樣品2