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文檔簡介

無論原發(fā)性腫瘤還是繼發(fā)性腫瘤，一旦生長直徑超過1~2

mm，都會有血管生成。這是由于腫瘤細(xì)胞自身可分泌多種生長因子，誘導(dǎo)血管生成。多數(shù)惡性腫瘤的血管生成密集且生長迅速。因此，血管生成在腫瘤的發(fā)展轉(zhuǎn)移過程中起到重要作用，抑制這一過程將能明顯阻止腫瘤組織的發(fā)展和擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。于是體外的血管生成實(shí)驗(yàn)就能很好的模擬腫瘤的血管發(fā)生過程，并且適合研究藥物對這一過程的影響實(shí)驗(yàn)。

圖一

血管生成鏡檢圖

一.實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法

1.實(shí)驗(yàn)材料2.實(shí)驗(yàn)方法：2.1實(shí)驗(yàn)流程介紹圖二

實(shí)驗(yàn)流程圖（提前將Matrigel融化，鋪于ibidi血管生成載玻片的下孔中，待膠凝后，將細(xì)胞懸液加入血管生成載玻片上孔中，成管后使用顯微鏡觀察。）

2.2耗材結(jié)構(gòu)介紹

圖三

血管生成載玻片縱截面示意圖（Matrigel鋪在下孔，細(xì)胞鋪在Matrigel上，上孔充滿培養(yǎng)基）2.3數(shù)據(jù)分析流程介紹圖四

實(shí)驗(yàn)結(jié)果收集和分析流程圖（在特定的時間點(diǎn)采集圖片，并且進(jìn)行圖像分析（Wimasis全自動分析）測量小管長度，成環(huán)數(shù)，細(xì)胞覆蓋面積和結(jié)點(diǎn)。之后在對測量結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析以說明實(shí)驗(yàn)結(jié)果。）

一.實(shí)驗(yàn)步驟1、準(zhǔn)備基質(zhì)膠1.實(shí)驗(yàn)前一天將Matrigel置于冰盒中，放入4。C冰箱，使膠能過夜緩慢融化。（注意：同樣要準(zhǔn)備一些4。C預(yù)冷的槍頭用于吸取Matrigel）2.開始實(shí)驗(yàn)前，將Matrigel始終保持放在冰盒中。實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢1.這個實(shí)驗(yàn)方法能節(jié)省更多基質(zhì)膠，降低實(shí)驗(yàn)成本；2.分上下孔的ibidi血管生成載玻片能去除凹液面，使成像效果更好。圖五

成像對比

（左側(cè)ibidi血管生成載玻

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