主稿空氣微生物檢測培訓教材-課件

主稿空氣微生物檢測培訓教材中國疾病預防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所主稿空氣微生物檢測培訓教材《公共場所集中空調(diào)通風系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范》

涉及到衛(wèi)生微生物指標的條款包括：1、嗜肺軍團菌（集中空調(diào)通風系統(tǒng)冷卻水和冷凝水）2、細菌總數(shù)≦500cfu/m3

真菌總數(shù)≦500cfu/m3

β－溶血性鏈球菌等致病性微生物（集中空調(diào)通風系統(tǒng)送風）3、細菌總數(shù)≦100cfu/cm2

真菌總數(shù)≦100cfu/cm2致病微生物（集中空調(diào)通風系統(tǒng)風管內(nèi)表面）集中空調(diào)通風系統(tǒng)送風嗜肺軍團菌的檢測（——液體采樣法）主稿空氣微生物檢測培訓教材控制由于空調(diào)通風系統(tǒng)造成生物致病因子經(jīng)空氣播散；預防危害人體健康，疾病傳播的公共衛(wèi)生問題發(fā)生；規(guī)范現(xiàn)場與實驗室操作，為監(jiān)督執(zhí)法、預警預報提供準確的數(shù)據(jù)。主稿空氣微生物檢測培訓教材1、采樣設備、器材、試劑與培養(yǎng)基準備2、現(xiàn)場調(diào)研、現(xiàn)場記錄3、采樣人員無菌操作與個人防護4、采樣點的選擇5、采樣無菌操作6、氣溶膠樣品的采集（六級采樣器）7、水樣品的采集8、塵樣品的采集9、樣品采集后的現(xiàn)場整理10、樣品采集過程中，人員的一般安全防護?

Inadequateventilation（通風不當）52%?

Contaminationfrominsidebuilding（建筑物內(nèi)部污染）16%?

Contaminationfromoutsidebuilding（建筑物外部污染）10%?

Microbialcontamination(微生物污染）

5%?

Contaminationfrombuildingfabric（紡織品的污染）

4%?

Unknownsources（來源不明）13%主稿空氣微生物檢測培訓教材主稿空氣微生物檢測培訓教材新風量大室內(nèi)空氣質(zhì)量高新設備運行時空氣質(zhì)量優(yōu)于老設備清潔設備運行時空氣質(zhì)量優(yōu)于污染設備檢測生物性污染物對空調(diào)系統(tǒng)的污染與對室內(nèi)空氣質(zhì)量的影響具有衛(wèi)生學意義。空調(diào)系統(tǒng)的衛(wèi)生微生物學檢測不可能擺脫室內(nèi)空氣污染的規(guī)律與概念。主稿空氣微生物檢測培訓教材1、室內(nèi)污染來源占的份額高于室外。2、上述因素與空調(diào)系統(tǒng)均相關(guān)；但并不是說空調(diào)設備自身造成了室內(nèi)空氣污染；其危險與潛在的危害，是由于空調(diào)通風系統(tǒng)把人類的活動（工作、生活、愛好與環(huán)境等）造成的空氣質(zhì)量狀態(tài)，進行了輸送、轉(zhuǎn)移、傳播?？照{(diào)給于了微生物一定的生存條件。3、空調(diào)系統(tǒng)的生物性污染除嗜肺軍團菌外還有許多成員。如：目前國外有關(guān)室內(nèi)空氣真菌、空調(diào)系統(tǒng)所致真菌污染方面的研究日漸增多。4、環(huán)境對室內(nèi)空氣微生物存在極大影響（記錄重要）。5、我們現(xiàn)行的規(guī)范要求包括了我們目前遇到的、可能遇到的生物性致病因子。主稿空氣微生物檢測培訓教材主稿空氣微生物檢測培訓教材名詞解釋：氣溶膠（aerosol）：是固態(tài)或液態(tài)微粒懸浮在氣體介質(zhì)中的分散體系。其微粒為微生物時，稱之為微生物氣溶膠。液態(tài)粒子稱霧；小于1μm的固態(tài)粒子稱煙；大于1μm的粒子稱塵。主稿空氣微生物檢測培訓教材氣溶膠粒子大?。簹馊苣z粒子大小分布從0.001~100μm微生物氣溶膠粒子大小，從0.002~30μm。主稿空氣微生物檢測培訓教材凡是在室內(nèi)空氣環(huán)境存在的致病性生物因子，都有可能通過空調(diào)系統(tǒng)播散，以致可能由于污染環(huán)境給人帶來危險或潛在的危害。室內(nèi)空氣環(huán)境存在的致病性生物因子主要有如下幾類室內(nèi)空氣環(huán)境存在的致病性生物因子：

主稿空氣微生物檢測培訓教材1、1~5的空氣帶菌粒子可直接侵入肺泡2、6~10的空氣帶菌粒子易沉著在小支氣管3、10~30的空氣帶菌粒子會沉積在支氣管主稿空氣微生物檢測培訓教材1、空氣中與疾病有關(guān)的帶菌粒子直徑一般為4~20μm。2、來自人體的微生物主要附著在12~15μm的塵粒上。3、許多真菌以單個孢子的形式存在。主稿空氣微生物檢測培訓教材1、細菌類：結(jié)核桿菌、非結(jié)核桿菌、肺炎雙球菌、嗜肺軍團桿菌等160余種。2、真菌類：球孢子菌、假絲酵母（念珠菌）、曲霉、毛霉、青霉等600余種。3、病毒類：流感、水痘、風疹、腺病毒等約幾百種。4、其他：支原體、衣原體等。主稿空氣微生物檢測培訓教材空氣中的微生物的存在和生存時間（存活力viability）與水環(huán)境、土壤環(huán)境的狀況緊密相關(guān)，微生物本身的特征起主導作用。研究微生物的生境是重要的工作內(nèi)容。主稿空氣微生物檢測培訓教材

依據(jù)實驗研究，空氣中的微生物如果不能回到有利于其生活和繁殖的環(huán)境中，遲早是要死亡的。微生物幾乎全部是附著在塵埃上，塵埃并不全部有微生物的附著；灰塵量與菌數(shù)并不呈現(xiàn)線性正相關(guān)。不同的采樣方法所捕獲的帶菌粒子也不相同。主稿空氣微生物檢測培訓教材強毒力、高傳染性微生物氣溶膠的研究兔熱桿菌：志愿者15個左右的菌即可；軍團菌：氣溶膠中檢出即對人有感染。

日本乙型腦炎病毒、裂谷熱病毒、拉沙熱病毒、出血熱病毒、與畜牧業(yè)新城疫、流感等。真菌、真菌毒素。主稿空氣微生物檢測培訓教材

1、空調(diào)系統(tǒng)與室內(nèi)空氣質(zhì)量的相關(guān)性

2、不同的采樣方法所獲得的結(jié)果有差異

3、樣品處理方式、操作不一致影響結(jié)果的一致性4、注意樣品處理過程的一致性

主稿空氣微生物檢測培訓教材腸道指示生物為例（N條）：腸道獨有，代表性強數(shù)量多存活時間比致病菌稍長對消毒劑的耐受性比致病菌稍高對人危害無或很小檢測方便，程序簡單主稿空氣微生物檢測培訓教材

大腸桿菌作為水污染與否的衛(wèi)生指示生物應用多年，行之有效，各界公認，基本符合指示生物的多項要求。對于室內(nèi)空氣而言，指示生物則難以被選出。大腸桿菌作為糞便污染的指示生物，與腸道傳染病的病原體不僅同原，還存在諸多共性，有代表性?？諝鈩t無法找到這么一個指示生物。所以對空氣質(zhì)量的認同，我們選擇了指示生物與致病生物監(jiān)測兩個途徑。

主稿空氣微生物檢測培訓教材細菌總數(shù)、真菌總數(shù)、溶血性鏈球菌、嗜肺軍團桿菌等等

主稿空氣微生物檢測培訓教材主稿空氣微生物檢測培訓教材1、帶培養(yǎng)基的樣品2、一般水、土樣品3、分離軍團菌的樣品4、培養(yǎng)基的運輸與保存（時間、溫度、避光）（防污染、防增殖、防消亡、防破損、防亂號）主稿空氣微生物檢測培訓教材1、采樣：氣體：（以時間確定）儀器法。塵量：適時評估確定方法（擦拭、刮拭）。2、培養(yǎng)基檢查有無污染3、培養(yǎng)時間相關(guān)的問題（菌數(shù)多少、濕度保證、溫度控制）4、采樣點的選擇5、關(guān)注采樣環(huán)境主稿空氣微生物檢測培訓教材1、對室內(nèi)空氣常用的采樣方法有：自然沉降法（曝皿法）（本稿不采納）空氣微生物采樣器法：推薦撞擊式

6級空氣微生物采樣器2、液體過濾、沖擊采樣：采集室內(nèi)空氣軍團菌時應用

3、管道：擦拭法、刮拭法主稿空氣微生物檢測培訓教材擦（棉）拭法：布、棉花或其他材料，通常用滅菌鹽水潤濕，通過擦拭采取通風管道表面的微生物；然后在同樣的溶液洗脫微生物，并涂平板培養(yǎng)與計數(shù)菌落形成單位以供分析，涂板方法可用濕拭子直接涂布，也可以用洗脫液涂布。在無法進行機械采樣的風管中應用。刮拭法：塵量多、板結(jié)、粘稠時使用

主稿空氣微生物檢測培訓教材人工采樣受到多方面的影響，一致性不高，難完成規(guī)范要求的任務；機器人采樣同一性高；能滿足規(guī)范要求的工作內(nèi)容；目前品種較少，通風管道沒有標化：符合規(guī)范要求按產(chǎn)品說明書的要求操作注意質(zhì)控主稿空氣微生物檢測培訓教材直接的灰塵培養(yǎng)：從空調(diào)通風管道表面取得灰塵，直接懸浮于0.01%吐溫80（PBS或生理鹽水）溶液中，然后稀釋并選擇適宜稀釋度，取1mL按傾注法操作，培養(yǎng)與計數(shù)菌落形成單位以供分析。

塵量大需要秤量。主稿空氣微生物檢測培訓教材細菌總數(shù)主稿空氣微生物檢測培訓教材細菌總數(shù)定義：儀器法采集室內(nèi)空氣，計數(shù)在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)37℃48小時培養(yǎng)所形成的菌落數(shù)，換算為每立方米室內(nèi)空氣中菌落總數(shù)，以cfu/m3（colonyformingunits/m3）每立方米室內(nèi)空氣菌落形成單位報告。管道塵的稀釋傾注法：檢測管道塵中的細菌總數(shù)依Xcfu/cm2報告。主稿空氣微生物檢測培訓教材主稿空氣微生物檢測培訓教材主稿空氣微生物檢測培訓教材主稿空氣微生物檢測培訓教材空氣沒有提供作為細菌和它種微生物生長所需要足夠的水分與營養(yǎng)物質(zhì)，所以空氣不是微生物產(chǎn)生與繁殖的場所，檢測出空氣中存在微生物，主要來源于外環(huán)境（包括植物在內(nèi)）與人、動物的活動。某一種或幾種致病性微生物存在的內(nèi)在原因，即是人、畜污染所致，致病微生物的存在，對生活之中的人們就可能構(gòu)成了潛在的危險，在條件適宜的情況下造成疾病的傳播。一般說，室內(nèi)空氣質(zhì)量在適宜微生物貯留與生長繁殖的場所，與換氣量不足、通風不良、人員較多時，就造成微生物數(shù)量的增加。雖然單純微生物種類與數(shù)量的多寡，不能說就一定引起人們的疾病，卻可以有不舒適的感覺。

主稿空氣微生物檢測培訓教材蘇聯(lián)：規(guī)定夏季清潔空氣為細菌總數(shù)＜1500cfu/m3、污染空氣為細菌總數(shù)＞2500cfu/m3；而冬季清潔空氣細菌總數(shù)＜4500cfu/m3、污染空氣為細菌總數(shù)＞7000cfu/m3。

主稿空氣微生物檢測培訓教材日本：日本采用自然沉降法統(tǒng)一用直徑9cm平皿:將室內(nèi)空氣分為5級：清潔＜29、普通30－74、可接收界限75－149、輕污染150－299、重污染＞300。

主稿空氣微生物檢測培訓教材我國：醫(yī)院：撞擊法＜2500cfu/m3

沉降法＜30cfu/皿。公共場所撞擊法<4000cfu/m3；沉降法<45cfu/皿。香港特別行政區(qū)（制訂“辦公室及公眾場所室內(nèi)空氣質(zhì)素管理指引”，指明微生物污染物包括三大類，細菌、真菌、過濾性病毒。）空氣中細菌標準是，一類＜500cfu/m3，二類＜1000cfu/m3。

主稿空氣微生物檢測培訓教材在空調(diào)通風管道表面細菌濃度，在3.2×105～1.5×106cfu/g之間。一般情況下，微生物濃度增加的一些因子包括潮濕條件與空氣回流。在空調(diào)通風管道表面細菌污染一般情況下低于旋轉(zhuǎn)熱交換器（107cfu/m2）、冷卻管或加濕器（107cfu/m2）。有資料表明，灰塵表面濃度對可生存的微生物濃度影響小，沉積于空調(diào)通風管道表面后再形成生物氣溶膠的菌存活時間一般較短，有待于更多的實驗與檢測數(shù)據(jù)證實。主稿空氣微生物檢測培訓教材實驗資料：人群聚集80min空氣中細菌數(shù)，沉降法44cfu/皿，撞擊法4300cfu/m3。在撞擊法細菌總數(shù)4000cfu/m3，沉降法33cfu/皿，CO20.08％濃度時，有異臭感和不適感者為24.1％；在撞擊法細菌總數(shù)6000cfu/m3，沉降法75cfu/皿，CO20.15％濃度時，有異臭感和不適感者出現(xiàn)率為55％。主稿空氣微生物檢測培訓教材采樣時必須在空調(diào)系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)條件下，關(guān)閉門窗（參考時間30分鐘），盡量減少人、畜的活動幅度與頻率，記錄采樣位置、室內(nèi)人員數(shù)量、溫濕度與天氣狀況等。主稿空氣微生物檢測培訓教材采樣應用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，37±2℃培養(yǎng)48±4小時，觀查并記錄結(jié)果（37℃培養(yǎng)24h時應進行觀查，不必記錄結(jié)果）。

主稿空氣微生物檢測培訓教材空調(diào)系統(tǒng)管道：無菌操作準確稱取管道塵（記錄數(shù)量），加入到含有0.01%Tween-80的0.03mol/LPBS中，作10倍梯級稀釋，視灰塵含菌量多少選三個數(shù)量級的稀釋液，各取1mL稀釋液直接加入平皿中，用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基作混碟培養(yǎng)。37±2℃培養(yǎng)48±4小時，觀查并記錄結(jié)果（37℃培養(yǎng)24h時應進行觀查，不必記錄結(jié)果），其所得菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，換算cfu/cm2細菌總數(shù)。

主稿空氣微生物檢測培訓教材

空調(diào)送風：依監(jiān)測目的和應用方法確定采樣點，選擇儀器法采樣一般在送風口下方15～20cm距離50～100cm處；室內(nèi)空氣：采樣點的高度為1.2m。不同采樣方法所獲得的結(jié)果不一致，報告結(jié)果時應注明采樣方法。主稿空氣微生物檢測培訓教材成分：蛋白胨10g

氯化鈉5g

肉膏5g

瓊脂20g

蒸餾水1,000ml制法：將上述成分加熱溶化于蒸餾水中，校正pH值為7.4~7.6。加入瓊脂，121℃20min滅菌。用途：供空氣細菌總數(shù)檢測用。主稿空氣微生物檢測培訓教材磷酸氫二鈉2.83g磷酸二氫鉀1.36g蒸餾水至990mLTween-80最終濃度0.01%方法：將磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀溶于少量蒸餾水中，溶解混勻加水至990mL，按比例加入1%Tween-80液10mL，使最終濃度0.01%，121℃蒸汽滅菌20min。

主稿空氣微生物檢測培訓教材1、采塵樣條要浸泡在轉(zhuǎn)運液體中。2、稀釋與取樣時充分洗脫，操作一致3、進口安德森采樣器的應用：注意平皿中瓊脂的厚度主稿空氣微生物檢測培訓教材真菌總數(shù)：儀器法采集室內(nèi)空氣，計數(shù)在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)28±2℃培養(yǎng)5天培養(yǎng)所形成的菌落數(shù)，換算為每立方米室內(nèi)空氣中菌落總數(shù)，以cfu/m3（colonyformingunits/m3）每立方米室內(nèi)空氣菌落形成單位報告。管道塵的稀釋傾注法：檢測管道塵中的真菌總數(shù)依Xcfu/cm2報告。主稿空氣微生物檢測培訓教材病態(tài)建筑綜合癥的典型癥狀包括：眼刺激，鼻刺激和鼻充血，咽刺激和咳嗽、呼吸困難、嘶啞、皮膚刺激、頭痛、嘔吐、疲勞、精神疲憊和對味的感知問題等。確定引起上述癥狀的原因很難。性別、社會心理因素、從事的職業(yè)等主觀因素影響作用雖小，卻難斷然排除。主稿空氣微生物檢測培訓教材我國目前的衛(wèi)生標準尚無對真菌總數(shù)的具體要求，但是該指標受到國際社會日益關(guān)注。在某些居室建筑、辦公場所中真菌總數(shù)每立方米可達數(shù)百至千，在有霉變氣味的室內(nèi)真菌總數(shù)則更高。污染真菌絕大多數(shù)是在土壤中或其他基物上生長、繁殖，真菌孢子體積小、質(zhì)量輕、數(shù)量大，易隨氣流的運動而被傳播，故有“氣傳真菌”之稱。

主稿空氣微生物檢測培訓教材空氣中真菌的含量有明顯的季節(jié)性，與溫度、濕度、地理位置等因素密切相關(guān)。巴黎6月時空氣中真菌濃度n×104/m3，冬季則僅為100/m3；國內(nèi)某坑道的監(jiān)測顯示空氣濕度增加真菌數(shù)也增加，為此我們對南北方以維持高濕度天氣的長短，分別給予了不同的要求；室內(nèi)鋪有地毯的一般比沒有鋪地毯的真菌數(shù)高；人的活動、清掃衛(wèi)生、換衣鋪床等空氣中的真菌數(shù)增加。

主稿空氣微生物檢測培訓教材WHO的要求：<150cfu/m3（采樣方法：離心式采樣器）；芬蘭：<200cfu/m3（采樣方法：Anderson采樣器）；美國：<1,000cfu/m3（采樣方法：未說明）主稿空氣微生物檢測培訓教材

我國目前的衛(wèi)生標準尚無對真菌總數(shù)的具體要求，但是該指標受到國際社會日益關(guān)注。在某些居室建筑、辦公場所中真菌總數(shù)每立方米可達數(shù)百至千，在有霉變氣味的室內(nèi)真菌總數(shù)則更高。

主稿空氣微生物檢測培訓教材空調(diào)送風：依監(jiān)測目的和應用方法確定采樣點，選擇儀器法采樣一般在送風口下方15～20cm距離50～100cm處；室內(nèi)空氣采樣點的高度為1.2m。報告結(jié)果時應注明采樣方法。管道塵：機器人采樣與刮拭法采樣主稿空氣微生物檢測培訓教材

采樣時必須在空調(diào)系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)條件下，關(guān)閉門窗（參考時間30分鐘），盡量減少人、畜的活動幅度與頻率，記錄采樣位置、室內(nèi)裝修狀況（織物包廂、地毯鋪置、花草養(yǎng)殖）與人員數(shù)量、溫濕度與天氣狀況等。主稿空氣微生物檢測培訓教材

應用沙氏瓊脂培養(yǎng)基，28±2℃培養(yǎng)5～7d，需逐日觀查并及時記錄結(jié)果（如培養(yǎng)至5日時，霉菌或放線菌的菌絲生長掩蓋周圍菌落或菌絲長至滿皿，可停止觀查并記錄結(jié)果，但在報告時需注明）

主稿空氣微生物檢測培訓教材空調(diào)系統(tǒng)管道塵：無菌操作準確稱取管道塵，加入到含有0.01%Tween-80的自來水中，作10倍梯級稀釋，視灰塵含菌量多少選三個數(shù)量級的稀釋液，各取0.3mL稀釋液直接涂沙氏瓊脂培養(yǎng)基平皿，28±2℃培養(yǎng)，其所得菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，換算成cfu/cm2真菌總數(shù)。

主稿空氣微生物檢測培訓教材1、沙氏（Sabourand’sagar）瓊脂培養(yǎng)基：成分：蛋白胨10g

葡萄糖40g

瓊脂20g

蒸餾水1,000ml制法：將蛋白胨、葡萄糖溶解于蒸餾水中，校正

pH值為5.5～6.0，加入瓊脂，115℃

15min滅菌備用。用途：供空氣真菌總數(shù)檢測用。主稿空氣微生物檢測培訓教材此培養(yǎng)基是國際上培養(yǎng)真菌的標準培養(yǎng)基，應用廣泛。培養(yǎng)基的pH值為5.5～6.0，除真菌外一般菌不易在此酸性培養(yǎng)基中生長，在配制時一般不需調(diào)整pH，其值即與此接近。瓊脂在酸性條件下多次加熱，降低或喪失瓊脂的凝固性，需注意。為抑制細菌與放線菌的生長，可在1L沙氏瓊脂培養(yǎng)基中加入40~50mg氯霉素和500mg放線菌酮，兩種抗菌素均耐熱，在高壓蒸汽滅菌前加入。

主稿空氣微生物檢測培訓教材

與自來水中加入Tween-80，使最終濃度為0.01%，121℃20min滅菌備用。

主稿空氣微生物檢測培訓教材β－溶血性鏈球菌主稿空氣微生物檢測培訓教材溶血性鏈球菌（HS）定義：經(jīng)35～37℃，24～48小時培養(yǎng)，在血平皿平板上形成呈灰白色，表面突起直徑0.5~0.7mm的細小菌落，菌落透明或半透明，表面光滑有乳光；鏡檢為革藍氏陽性無芽孢球菌，圓形或卵圓形，呈鏈狀排列（視培養(yǎng)與操作條件影響鏈可短可長4~8個細胞至幾十個細胞）；菌落周圍有明顯的2～4mm界限分明、完全透明的無色溶血環(huán)。符合上述特征的菌量稱為溶血性鏈球菌。以cfu/m3（colonyformingunits/m3）每立方米室內(nèi)空氣菌落形成單位報告。

主稿空氣微生物檢測培訓教材

主稿空氣微生物檢測培訓教材溶血性鏈球菌與細菌總數(shù)的相關(guān)性：溶血性鏈球菌與細菌總數(shù)并沒有相關(guān)性，陶曉燕在空調(diào)環(huán)境中三家證券交易所的調(diào)查報告結(jié)果顯示，在細菌總數(shù)并沒有顯示嚴重污染時，溶血性鏈球菌的數(shù)量表明空氣污染的程度已很嚴重。

主稿空氣微生物檢測培訓教材因此確認空調(diào)覆蓋面積大?。〒Q氣量大小）與人員數(shù)量的關(guān)系密切，人員增加必定會使致病性污染的幾率增加。另外鏈球菌是一個大家族，包括6個群30個種，