梅毒的血清學(xué)試驗(yàn)

梅毒的血清學(xué)試驗(yàn)第1頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一梅毒的病原學(xué)蒼白螺旋體：細(xì)長螺旋形，原核微生物，長7-14微米，不易著色，普通顯微鏡不易看到，可用暗示野顯微鏡觀測到。第2頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一人體的免疫學(xué)反應(yīng)非特異性抗心脂質(zhì)抗體可用牛心脂質(zhì)檢測出抗梅毒螺旋體抗體可用梅毒螺旋體檢出第3頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一梅毒的血清學(xué)試驗(yàn)非螺旋體抗原血清試驗(yàn)（抗原：心磷脂膽固醇卵磷脂）臨床意義：初篩療效評價(jià)復(fù)發(fā)及再感染的判斷螺旋體抗原血清試驗(yàn)（抗原：精選的梅毒螺旋體抗原片段）臨床意義：診斷試驗(yàn)是否感染過梅毒無法評價(jià)療效第4頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一非螺旋體抗原血清試驗(yàn)

鏡下判讀結(jié)果性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（VDRL）VenerealDiseaseResearchLaboratory非加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（USR）UnheatedSerumReaging

肉眼判讀結(jié)果快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)(RPR)RapidPlasmaReaging甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)ToludineRedUnheatedSerumTest第5頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一試驗(yàn)方法（TRUST)試劑復(fù)溫（23℃-29℃）試劑與血清等量混勻，水平轉(zhuǎn)動8分鐘。結(jié)果判斷：中等或大的紅色凝聚物為陽性反應(yīng)；較小的紅色凝聚物為弱陽性反應(yīng)；無凝聚物為陰性反應(yīng)。第6頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一存在的問題◆假陽性

1、生物學(xué)假陽性：見于瘤型麻風(fēng)、瘧疾、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、雅司病、回歸熱、鉤端螺旋體病、血吸蟲病、包蟲病、旋毛蟲病、支原體肺炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥、結(jié)核病等疾

2、人為因素：試劑與血清反應(yīng)后放置時(shí)間過長，因干燥在紙片上留下假性凝集；沒有做陰性對照，肉眼判定錯(cuò)誤；標(biāo)本錯(cuò)誤?！艏訇幮苑磻?yīng)時(shí)間不足、反應(yīng)方式不正確、反應(yīng)溫度不夠、前帶現(xiàn)象。

第7頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一第8頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一第9頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一螺旋體抗原血清試驗(yàn)熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTA-ABS)梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（TPHA)梅毒螺旋體被動微粒凝集試驗(yàn)(TPPA)ELISA法梅毒抗體檢測膠體金法梅毒抗體檢測第10頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一ELISA法梅毒抗體檢測全自動酶免儀、全自動洗板機(jī)半自動酶免儀、半自動洗板機(jī)手工法操作步驟及原理同其它免疫項(xiàng)目第11頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一注意的問題實(shí)驗(yàn)器材的計(jì)量（酶免儀、洗板機(jī)、恒溫箱、冰箱、空調(diào)、生物安全柜、精確移液器、量筒、振蕩器、溫度計(jì)）環(huán)境溫度：室溫（18℃-23℃）人員培訓(xùn)樣本的要求實(shí)驗(yàn)前試劑的復(fù)溫精確的加樣：移液器的正確使用第12頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一續(xù)移液器的使用吸液的操作:

1、連接恰當(dāng)?shù)奈欤?/p>

2、按下控制鈕至第一檔；

3、將移液器吸嘴垂直進(jìn)入液面下1-6mm（視移液器容量大小而定）；

0.1-10ul容量的移液器進(jìn)入液面下1-2mm

2-200ul容量的移液器進(jìn)入液面下2-3mm

1-5ml容量的移液器進(jìn)入液面下3-6mm

注：為使測量準(zhǔn)確可將吸嘴預(yù)洗3次，即反復(fù)吸排液體3次。

4、使控制鈕緩慢滑回原位；---?。?！

5、移液器移出液面前略等待1-3秒；

1000ul以下停頓1秒

5-10ml停頓2-3秒.

6、緩慢取出吸嘴，確保吸嘴外壁無液體。

第13頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一續(xù)移液器的使用排液的操作

:

1、將吸嘴以一定角度抵住容量內(nèi)壁；

2、緩慢將控制鈕按至第一檔并等待約1－3秒；

3、將控制鈕按至第二檔過程中，吸嘴將剩余液體排凈；

4、慢放控制鈕；

5、按壓彈射鍵彈射出吸嘴。

第14頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一續(xù)移液器的使用養(yǎng)護(hù)：

1、如液體不小心進(jìn)入活塞室應(yīng)及時(shí)清除污染物；

2、移液器使用完畢后，把移液器量程調(diào)至最大值，且將移液器垂直放置在移液器架上；

3、根據(jù)使用頻率所有的移液器應(yīng)定期用肥皂水清洗或用60％的異丙醇消毒，再用雙

蒸水清洗并晾干；

4、避免放在溫度較高處以防變形致漏液或不準(zhǔn)；

5、發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)找專業(yè)人員處理。

第15頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一注意的問題加樣：加酶標(biāo)液：加底物：加終止液：震蕩：蓋膜：洗板：洗滌液的要求握板的要求第16頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一注意的問題比色：孵育時(shí)間：操作時(shí)差的問題：質(zhì)控問題：內(nèi)部質(zhì)控、外部質(zhì)控影響ELISA測定結(jié)果的干擾因素外源性干擾因素：溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本保存不當(dāng)、標(biāo)本凝集不全、添加劑內(nèi)源性干擾因素：RF、補(bǔ)體、嗜異性抗體等第17頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一結(jié)果解釋圖標(biāo)演示第18頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一第19頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一第20頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一第21頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一三種梅毒血清學(xué)試驗(yàn)的結(jié)果解釋試驗(yàn)結(jié)果意義RPR+FTA-ABS+TPPA+梅毒RPR+FTA-ABS-TPPA-生物學(xué)假陽性RPR-FTA-ABS+TPPA-極早期梅毒RPR-FTA-ABS+TPPA+治愈梅毒RPR-FTA-ABS-TPPA-排除梅毒、AIDS合倂感染第22頁，共25頁，2023年，2月20日，星期一先天性梅毒的確證指標(biāo)暗示野查到梅毒螺旋體患兒RPR滴度持續(xù)上升（出生后6個(gè)月內(nèi)每隔1個(gè)月查1次滴度）RPR滴度高于其母親患兒檢出抗梅毒19s-IgM具