分子生物學(xué)試題及答案3

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?分子生物學(xué)試題及答案

分子生物學(xué)試題及答案一、名詞解釋

1．cDNA與cccDNA：cDNA是由mRNA通過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA；cccDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。

2．標(biāo)準(zhǔn)折疊單位：蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元α－螺旋與β－折疊通過各種連接多肽可以組成特別幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類型尋常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來予以描述，因此又將其稱為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。

3．CAP：環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白CRP（cAMPreceptorprotein），cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（cAMPactivatedprotein）

4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列，常是限制性酶切位點(diǎn)。5．micRNA：互補(bǔ)干擾RNA或稱反義RNA，與mRNA序列互補(bǔ)，可抑制mRNA的翻譯。6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7．模體：蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8．信號(hào)肽：在蛋白質(zhì)合成過程中N端有15~36個(gè)氨基酸殘基的肽段，引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。9．弱化子：在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。

10．魔斑：當(dāng)細(xì)菌生長過程中，遇到氨基酸全面缺乏時(shí)，細(xì)菌將會(huì)產(chǎn)生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng)，中止全部基因的表達(dá)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp與pppGpp的作用不只是一個(gè)或幾個(gè)操縱子，而是影響一大批，所以稱他們是超級(jí)調(diào)控子或稱為魔斑。

11．上游啟動(dòng)子元件：是指對(duì)啟動(dòng)子的活性起到一種調(diào)理作用的DNA序列，-10區(qū)的TATA、-35區(qū)的TGACA及加強(qiáng)子，弱化子等。

12．DNA探針：是帶有標(biāo)記的一段已知序列DNA，用以檢測(cè)未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。

13．SD序列：是核糖體與mRNA結(jié)合序列，對(duì)翻譯起到調(diào)控作用。14．單克隆抗體：只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。

15．考斯質(zhì)粒：是經(jīng)過人工構(gòu)建的一種外源DNA載體，保存噬菌體兩端的COS區(qū)，與質(zhì)粒連接構(gòu)成。

16．藍(lán)-白斑篩選：含LacZ基因（編碼β半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)產(chǎn)生藍(lán)色，從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后，LacZ基因不能表達(dá)，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。稱之為藍(lán)-白斑篩選。

17．順式作用元件：在DNA中一段特別的堿基序列，對(duì)基因的表達(dá)起到調(diào)控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是從DNA聚合酶I全酶中去除了5’3’外切酶活性19．錨定PCR：用于擴(kuò)增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分別用多聚dC和已知的序列作為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

20．融合蛋白：真核蛋白的基因與外源基因連接，同時(shí)表達(dá)翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。二、填空選擇題（每題

1分，共20分）

1．以下哪個(gè)是核蛋白（）

A．角蛋白B．染色質(zhì)C．組蛋白D．蛋白聚糖

2．DNA中的一段5''-AGTCTGACT-3''序列等同于RNA中的哪一段（）A．5''-AGUCUGACU-3''B．5''-UGTCTGUTC-3''C．5''-UCAGUCUGA-3''D．5''-AGUCAGACU-3''

3．1953年Watson和Crick提出（）

A．多核苷酸DNA鏈通過氫鍵連接成一個(gè)雙螺旋

B．DNA的復(fù)制是半保存的，往往形成親本－子代雙螺旋雜合鏈C．三個(gè)連續(xù)的核苷酸代表一個(gè)遺傳密碼D．遺傳物資尋常是DNA而非RNA

4．以下哪一個(gè)是大腸桿菌和真核生物染色體的共同之處（）A．DNA是環(huán)狀的

B．DNA被包裝成核小體C．DNA位于核中D．DNA是負(fù)超螺旋

5．.原核生物啟動(dòng)序列－10區(qū)的共有序列稱()A．TATA盒B．CAAT盒C．Pribnow盒D．GC盒

6．原核生物的起始氨基酸是（）A．甲酰甲硫氨酸B．甲硫氨酸C．組氨酸D．色氨酸

7．下面哪個(gè)結(jié)構(gòu)域是DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（）A．螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋結(jié)構(gòu)域B．螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)域C．亮氨酸拉鏈D．酸性激活結(jié)構(gòu)域

8．DNA光復(fù)活修復(fù)中哪種酶起關(guān)鍵作用（）A．DNA光解酶B．烷基轉(zhuǎn)移酶

C．DNA糖基化酶

D．AP內(nèi)切核酸酶9．轉(zhuǎn)化是（）A．細(xì)菌吸收一個(gè)質(zhì)粒B．細(xì)菌表達(dá)一個(gè)基因C．細(xì)菌吸收一個(gè)噬菌體D．從細(xì)菌中分開一個(gè)質(zhì)粒

10．真核生物hnRNA內(nèi)含子翦切依靠（）A．SnRNP

B．限制性內(nèi)切酶C．核酶

D．蛋白酶

11．一段線性DNA片段的5’端用放射性同位素進(jìn)行標(biāo)記，且100%被標(biāo)記上。這個(gè)片段有3個(gè)BamHI酶切位點(diǎn)，如用BamHI對(duì)這個(gè)片段進(jìn)行部分酶解時(shí)，共會(huì)產(chǎn)生多少個(gè)標(biāo)記片段（）A．1個(gè)標(biāo)記片段，B．3個(gè)標(biāo)記片段，C．4個(gè)標(biāo)記片段，B．6個(gè)標(biāo)記片段，

12．以下哪些方法可有效標(biāo)記DNA（）

A．多聚核苷酸激酶對(duì)DNA5’端進(jìn)行標(biāo)記B．多聚核苷酸激酶對(duì)DNA3’端進(jìn)行標(biāo)記C．末端轉(zhuǎn)移酶對(duì)DNA5’端進(jìn)行標(biāo)記D．末端轉(zhuǎn)移酶對(duì)DNA3’端進(jìn)行標(biāo)記E．缺口平移標(biāo)記DNA鏈

13．λ阻遏蛋白是一種DNA結(jié)合蛋白，它具有以下哪種基序?()A．螺旋—環(huán)-螺旋蛋白B．螺旋-轉(zhuǎn)角—螺旋蛋白C．鋅指蛋白

D．亮氨酸拉鏈蛋白

14．下面哪些真正是乳糖操縱子的誘導(dǎo)物?()A．乳糖B．蜜二糖C．半乳糖D．異乳糖

15．以下哪些轉(zhuǎn)錄因子不含有TBP?()A．SL1B．UBF

C．TFIIIB

D．TFIID

16．核糖體的E位點(diǎn)是:()A．真核mRNA加工位點(diǎn)

B．tRNA離開原核生物核糖體的位點(diǎn)C．核糖體中受E.coRI限制的位點(diǎn)D．電化學(xué)電勢(shì)驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的位點(diǎn)17．組蛋白的凈電荷是：()(a)正(b)中性(c)負(fù)

18．真核基因經(jīng)常被斷開：()

(a)反映了真核生物的mRNA是多順反子

(b)由于編碼序列“外顯子〞被非編碼序列“內(nèi)含子〞所分隔

(c)由于真核生物的DNA為線性而且被分開在各個(gè)染色體上，所以同一個(gè)基因的不同部分可能分布于不同的染色體上19．TATA框存在于()(a)聚合酶Ⅱ識(shí)別的啟動(dòng)子中

(b)聚合酶Ⅲ識(shí)別的所有啟動(dòng)子中(c)聚合酶Ⅲ識(shí)別的大部分啟動(dòng)子中(d)聚合酶Ⅲ識(shí)別的極少數(shù)啟動(dòng)子中

20．哪些有關(guān)剪接位點(diǎn)的表達(dá)是正確的?()(a)剪接位點(diǎn)含有長的保守序列(b)5’與3’剪接位點(diǎn)是互補(bǔ)的

(c)幾乎所有的剪接位點(diǎn)都遵從GT—AG規(guī)律(d)剪接位點(diǎn)全部被保存在成熟的mRNA中

三、簡答

1．分別說出5種以上RNA的功能？

轉(zhuǎn)運(yùn)RNAtRNA轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸核蛋白體RNArRNA核蛋白體組成成信使RNAmRNA蛋白質(zhì)合成模板不均一核RNAhnRNA成熟mRNA的前體小核RNAsnRNA參與hnRNA的剪接

小胞漿RNAscRNA/7SL-RNA蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號(hào)識(shí)別體的組成成分

反義RNAanRNA/micRNA對(duì)基因的表達(dá)起調(diào)理作用

核酶RibozymeRNA有酶活性的RNA2．原核生物與真核生物啟動(dòng)子的主要區(qū)別？原核生物

TTGACATATAAT起始位點(diǎn)-35-10真核生物

加強(qiáng)子GCCAATTATAA—5mGpp—起始位點(diǎn)-110-70-25

3．對(duì)自然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面？

自然質(zhì)粒往往存在著缺陷，因而不適合用作基因工程的載體，必需對(duì)之進(jìn)行改造構(gòu)建：

a、參與適合的選擇標(biāo)記基因，如兩個(gè)以上，易于用作選擇,尋常是抗生素基因。b、增加或減少適合的酶切位點(diǎn)，便于重組。c、縮短長度，切去不必要的片段，提高導(dǎo)入效率，增加裝載量。d、改變復(fù)制子，變嚴(yán)緊為松弛，變少拷貝為多拷貝。

e、根據(jù)基因工程的特別要求加裝特別的基因元件4．舉例說明差示篩選組織特異cDNA的方法？

制備兩種細(xì)胞群體，目的基因在其中一種細(xì)胞中表達(dá)或高表達(dá)，在另一種細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)，然后通過雜交對(duì)比找到目的基因。例如：在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中，腫瘤細(xì)胞會(huì)浮現(xiàn)與正常細(xì)胞表達(dá)水平不同的mRNA，因此，可以通過差示雜交篩選出與腫瘤相關(guān)的基因。也可利用誘導(dǎo)的方法，篩選出誘導(dǎo)表達(dá)的基因。

5．雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選？

脾B細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞，加聚乙二醇（PEG）促進(jìn)細(xì)胞融合，HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)（內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T）生長出來的脾B-骨髓瘤融合細(xì)胞繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。細(xì)胞融合物中包含：

脾-脾融合細(xì)胞：不能生長，脾細(xì)胞不能體外培養(yǎng)。

骨-骨融合細(xì)胞：不能利用次黃嘌呤，但可通過其次途徑利用葉酸還原酶合成嘌呤。氨基蝶呤對(duì)葉酸還原酶有抑制作用，因此不能生長。

骨-脾融合細(xì)胞：在HAT中能生長，脾細(xì)胞可以利用次黃嘌呤，骨細(xì)胞提供細(xì)胞分裂功能。

6、利用雙脫氧末端終止法（Sanger法）測(cè)定DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的原理與方法？原理是采用核苷酸鏈終止劑—2，，3，-雙脫氧核苷酸終止DNA的延長。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂鍵所需要的3-OH，一旦參入到DNA鏈中，此DNA鏈就不能進(jìn)一步延長。根據(jù)堿基配對(duì)原則，每當(dāng)DNA聚合酶需要dNMP參入到正常延長的DNA鏈中時(shí)，就有兩種可能性，一是參入ddNTP,結(jié)果導(dǎo)致脫氧核苷酸鏈延長的終止；二是參入dNTP,使DNA鏈仍可繼續(xù)延長，直至參入下一個(gè)ddNTP。根據(jù)這一方法，就可得到一組以ddNTP結(jié)尾的長短不一的DNA片段。

方法是分成四組分別為ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反應(yīng)后，聚丙烯酰胺凝膠電泳按泳帶可讀出DNA序列。7、激活蛋白（CAP）對(duì)轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用？

環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白CRP（cAMPreceptorprotein），cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（cAMPactivatedprotein）。當(dāng)大腸桿菌生長在缺乏葡萄糖的培養(yǎng)基中時(shí)，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等啟動(dòng)子的功能。一些依靠于CRP的啟動(dòng)子缺乏一般啟動(dòng)子所具有的典型的-35區(qū)序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶難以與其結(jié)合。

CAP的存在（功能）：能顯著提高酶與啟動(dòng)子結(jié)合常數(shù)。主要表現(xiàn)以下二方面：①CAP通過改變啟動(dòng)子的構(gòu)象以及與酶的相互作用幫助酶分子正確定向,以便與-10區(qū)結(jié)合，起到取代-35區(qū)功能的作用。

②CAP還能抑制RNA聚合酶與DNA中其它位點(diǎn)的結(jié)合，從而提高與其特定啟動(dòng)子結(jié)合的概率。

8、典型的DNA重組試驗(yàn)尋常包括哪些步驟？

a、提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個(gè)新的重組DNA分子。b、將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存，這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)

化。

c、對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。d、對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)，檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。

9、基因文庫的構(gòu)建對(duì)重組子的篩選舉出3種