人C反應蛋白CRPELISA試劑盒使用說明書

人反蛋(CRP)ELISA試劑盒用明南京森貝伽現(xiàn)貨供應，質(zhì)量保證，價格優(yōu)惠，試劑盒首選森貝伽。本試劑僅供研究使用目的本試劑盒用于測定人血清血漿及相關液體樣本中人C-反應蛋白CRP)的含量。實原：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人C-反應蛋白CRP)平。用純化的人C-反應蛋白CRP)體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入C-應蛋白CRP)，再與HRP標的C-反應蛋白CRP)體結(jié)合成抗體抗原-酶標抗體復合物經(jīng)過徹洗滌后加底物顯。在酶催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C-應蛋白呈相關。用酶儀在波長下測定吸光度（OD值過標準曲線計算樣品中人C-應蛋(CRP)含量。試盒成試劑盒組成說明書封板膜密封袋酶標包被板標準品：g/L標準品稀釋液酶標試劑樣品稀釋液顯色劑A液顯色劑液終止液濃縮洗滌液

孔置（）×480.5ml11.5ml1ml×1瓶ml×1瓶ml×1瓶ml×1瓶3ml×1瓶（20ml×20倍×瓶

孔置（）10.5ml1.5ml×1×1×1×1×1瓶（20ml×）

保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存樣處及求血室溫血液自然凝固分離分左2000-3000轉(zhuǎn)分細集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。血：應根據(jù)標本的要求選擇檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分后，離心分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)分細集上清，保存過程中如有淀形成，應該再次離心。尿：用無菌管收集，離心分左右2000-3000轉(zhuǎn)/分細集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。細培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分細集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞1

濃度達到萬/左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出胞內(nèi)成份。離心2分鐘左右（轉(zhuǎn)分細集上清。保存過中如有沉淀形成，應再次離心。組標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的手或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)分細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。標采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.不檢測含的樣品，因抑制辣根過氧化物酶的（）性。操步：標品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品μl，然后第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混；然后從第一孔、第二孔中各取100l分加到第三孔和第四孔第四孔分別加標準品稀釋液50l，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取l棄，再各取μl分加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋50ul，混勻；混勻后從第五、第六中各取50l分別加到第七、第孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50l，混勻后從第七、第八孔中分別取50l加第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50l，混勻后從第九第十孔中各取50l棄釋各孔加樣量都為μl濃度分別為μg/L，1200g/L，600，g/Lμg/L加：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，余各步操作相同樣品孔在酶標包被板上待測樣品中先加樣品稀釋液μl后再加待測樣品10μ樣品最終稀釋度為5樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫：用封板膜封板后置℃溫育3鐘。配：將（的20倍倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的倍倍稀釋備用。洗：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌，靜置30后棄去，如此重復次，拍干。加：每孔加入酶標試劑μl，空白孔除外。溫：操作同3。洗：操作同5。顯：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，℃避光顯色15分.10.終：孔加終止液50，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色11.測：空白空調(diào)零450nm長依序測量各孔的吸光度OD值測應在加終止液后15分以內(nèi)進行。注事：．試盒從冷藏環(huán)中取出應在室溫平衡分后方可使用，酶標包被板開封如未用完，板條應裝入密封袋中保存。．濃滌液可能會結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。．各加樣均應使加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。．請次測定的同做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣D2

大于標準品孔第一孔的OD值先樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（n．封膜只限一次使用，以避免交叉污染。．底請避光保存．嚴按照說明書操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為．所樣品，洗滌和各種廢棄物都應按傳染物處理。．本劑不同批號分不得混用。10.如英說明書有異，以英文說明書為準。計：以標準物的濃度為橫坐標OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值算出標準曲線的直線回歸方程式，