CDE注射劑無(wú)菌保證工藝研究與驗(yàn)證常見(jiàn)技術(shù)問(wèn)題解答匯總剖析

CDE常見(jiàn)技術(shù)問(wèn)題解答匯總2008年度第一期講習(xí)班（術(shù)要求認(rèn)真梳理、分析、總結(jié)后，現(xiàn)予以發(fā)布，并就相關(guān)問(wèn)題進(jìn)行討論與交流。1121℃，15F0≥81211210108F0≥8的情況。答：從微生物殺滅的數(shù)學(xué)模型可知，在初始污染相同的情況下，滅菌F0值越大，無(wú)菌保證水平越高。因此，顯然為降低產(chǎn)品殘留微生物的風(fēng)險(xiǎn)，盡量選擇高的F0值是順理成章的。2121℃，8哪個(gè)條件應(yīng)該優(yōu)先選擇呢？F0F0F0的差F0值差異較小的滅菌工藝。3、申報(bào)資料中的滅菌條件為“101℃ ℃，滅菌30分鐘，這種表示法否規(guī)范？答暫不說(shuō)滅菌條件“101℃ ℃滅菌30分鐘是否規(guī)范“101℃ ℃，滅菌30分鐘”本身不能稱(chēng)為終端滅菌，因℃，滅菌30分鐘”幾乎不能計(jì)算F0值滅菌條件的表示可以參照中國(guó)藥典2005年版二部附錄168滅菌法121℃ 或。4、同品種10ml、20ml注射劑，采取相同的滅菌方式是否合適？答：10ml、20ml保證大體積產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平。5水平高的劑型。6F0≥12F0≥8F0≥8即可？答：可參考?xì)W盟滅菌工藝選擇的決策樹(shù)。7、決策樹(shù)中殘存概率法是否亦優(yōu)先選擇121℃的溫度條件？產(chǎn)品不能耐受121℃的高溫，則可以降低溫度，并保證微生物的殘存概率小于10-6。8、對(duì)熱不穩(wěn)定藥品（如蛋白質(zhì)類(lèi)、生物制品等藝的驗(yàn)證。答：對(duì)熱不穩(wěn)定藥品（如蛋白質(zhì)類(lèi)、生物制品等藝進(jìn)行研究，是采用除菌過(guò)濾+對(duì)無(wú)菌工藝進(jìn)行驗(yàn)證。9、是否在產(chǎn)品注冊(cè)申報(bào)時(shí)就已形成本產(chǎn)品的完整的工藝規(guī)程中規(guī)定的各項(xiàng)參數(shù)的驗(yàn)證？1GMP要求。由此可見(jiàn)，申報(bào)產(chǎn)品注冊(cè)時(shí)，應(yīng)對(duì)用于正式上市產(chǎn)品10的偏差？答：一般來(lái)說(shuō):a后對(duì)存在的偏差作修正；bc：驗(yàn)證本身的作用之一是對(duì)滅菌器自帶的監(jiān)控探頭和記錄探頭進(jìn)行修正，以便正常使用時(shí)達(dá)到較為準(zhǔn)確的溫度值。目前沒(méi)有找到“只允許±0.5℃的偏差”的說(shuō)法。格產(chǎn)品（250ml,100ml）以及不同滅菌參數(shù)產(chǎn)品（比如滅菌溫度和時(shí)間不同）答：一般來(lái)說(shuō)，各種規(guī)格、各種滅菌條件均需分別進(jìn)行驗(yàn)證。1212163中可能不同，如果出現(xiàn)這種情況該如何處理？設(shè)備、壓力、空氣置換不完全、蒸汽質(zhì)量等原因引起。對(duì)于裝載熱穿透，大容量注射劑可辨別的冷點(diǎn)。如果裝載不變，容量相同，蒸汽穿透不存在阻隔等，冷點(diǎn)仍然無(wú)法重現(xiàn)，則應(yīng)檢查設(shè)備、工藝、壓力、蒸汽質(zhì)量等方面可能存在的不確定性。13、滿(mǎn)載熱分布和空載熱分布對(duì)于滅菌效果上體現(xiàn)出的意義有何不同？14答：滿(mǎn)載熱分布試驗(yàn)是用模擬樣品進(jìn)行。15的是否需要驗(yàn)證？滿(mǎn)載，從而確保生產(chǎn)時(shí)的裝載方式與驗(yàn)證時(shí)一致。16、熱穿透試驗(yàn)怎么做？10-6及各檢測(cè)點(diǎn)溫度與2.5℃。對(duì)于可能影響滅菌效果的操作情況的變更應(yīng)（溶液2217、熱穿透試驗(yàn)中的模擬樣品是什么概念，是指實(shí)驗(yàn)室小批量樣品嗎？實(shí)驗(yàn)室小批量樣品。182005版二部附錄169滅菌法。19、滅菌前微生物污染水平的測(cè)定方法？答：濾膜過(guò)濾法是最常用的方法。使用前應(yīng)通過(guò)驗(yàn)證。200CFUD值稍低的枯草芽孢桿菌作為生物指示劑進(jìn)行驗(yàn)證？答：1D指示劑之間不存在因果關(guān)系。2N04的滅菌前后微生物限度測(cè)試（若必需，對(duì)不同滅菌時(shí)間也要進(jìn)行測(cè)試，尋找并6F08~12D值。21、請(qǐng)問(wèn)滅菌前微生物污染水平和耐熱性（D值）的測(cè)試方法？（足量的過(guò)濾量（截留的微生物太多就沒(méi)法計(jì)數(shù)了D15分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，對(duì)該藥液進(jìn)行無(wú)菌檢查，如陰性則通過(guò)，呈陽(yáng)性，說(shuō)明污D值。99%以上的檢品是非耐熱菌。D值測(cè)定相當(dāng)復(fù)雜，請(qǐng)參考《藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南（藍(lán)皮書(shū)，國(guó)家藥監(jiān)局編第三篇第三章第一節(jié)，有詳細(xì)介紹。22D答：芽孢接種量的計(jì)算：Ni＝10Do(lgNo+6)/Di其中Ni為生物指示劑耐熱孢子接種數(shù)量No為預(yù)定產(chǎn)品中滅菌前污染微生物的限度Do為污染微生物允許的最大D值Di為生物指示劑耐熱孢子在產(chǎn)品中的D值23而微生物限度檢測(cè)時(shí)間為7272其檢測(cè)結(jié)果僅是對(duì)滅菌后產(chǎn)品無(wú)菌保證水平的參考嗎？于對(duì)當(dāng)批產(chǎn)品的中間控制。24方法進(jìn)行；微生物的種類(lèi)即鑒別可以從以下幾方面依次展開(kāi)：1）通過(guò)肉眼觀察菌落形態(tài)；2）3）一般生化試驗(yàn)：革蘭氏染色或3％KOH試驗(yàn)；4）生化鑒定（API試驗(yàn)）鑒別到種。沸試驗(yàn)（100℃，15分鐘）和微生物計(jì)數(shù)。。有條件的實(shí)驗(yàn)室還可開(kāi)展以下工作：微生物的鑒別試驗(yàn)（建議企業(yè)集團(tuán)的中心實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展API鑒定（D25.對(duì)于過(guò)度殺滅法是否需要進(jìn)行滅菌工藝驗(yàn)證？殘存概率法的產(chǎn)品研發(fā)工藝研究與實(shí)際生產(chǎn)中驗(yàn)證有何區(qū)別？CGMP83條:殘存概率法是滅菌工藝的設(shè)計(jì)，本身就需要驗(yàn)證確認(rèn)。26、過(guò)度殺滅法是否確定不需進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)？12是證明微生物的殘存概率不大于10-6，故過(guò)度殺滅法可以不進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)。27證資料中，只作為存檔備查？驗(yàn)證；針對(duì)品種滅菌條件的設(shè)備驗(yàn)證資料也應(yīng)附在品種的驗(yàn)證資料中。28F0SAL嗎？具體規(guī)定是多少？F0SAL，具體可參考?xì)W盟滅菌工藝選擇的決策樹(shù)。29、關(guān)于培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)，是針對(duì)生產(chǎn)線(xiàn)驗(yàn)證的，還是針對(duì)申報(bào)產(chǎn)品進(jìn)行的（每個(gè)產(chǎn)品都要灌裝三批驗(yàn)證（1）生產(chǎn)線(xiàn)驗(yàn)證能否代替申報(bào)產(chǎn)品的灌裝試驗(yàn)（同類(lèi)品種）？（2）采用何種培養(yǎng)基，硫乙醇酸鹽和改良馬丁兩種培養(yǎng)檢查中不同包裝規(guī)格是否都需要進(jìn)行三批次的灌裝試驗(yàn)？（1）培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品、包裝規(guī)格、包裝形式的不同而分如PEG無(wú)菌粉2ml5ml10ml幾，因采用不同生產(chǎn)線(xiàn)需要分別進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)。一般采用廣譜的培養(yǎng)基，能促進(jìn)革蘭氏陽(yáng)性、陰性、酵母菌和霉菌的生長(zhǎng)，如大豆胰蛋白胨培養(yǎng)基，厭氧培養(yǎng)基只在特殊情況下使用。321批次培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)即可。30、培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)中，培養(yǎng)基滅菌后、灌裝前，再經(jīng)濾膜除菌過(guò)濾，以觀察濾器在消毒安裝過(guò)程中的無(wú)菌效果，是否可行？意防止不溶性顆粒堵塞濾器。31、培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)?zāi)甓仍衮?yàn)證每年兩次，每次幾批？驗(yàn)，每次一批。32200514個(gè)溫度的培養(yǎng)試驗(yàn)是否也需延長(zhǎng)？14天，可以分成兩個(gè)溫度32.5度）7天，也可以一個(gè)溫度（22.5度）直接培養(yǎng)。3395%0.1%一下使用哪個(gè)統(tǒng)計(jì)方法，如何計(jì)算查表得出。（2003（版社）258頁(yè)。有兩種計(jì)算方法。一種是采用泊松分布的近似值計(jì)算公式，即P（X>0）=1－e-Np>0.95其中，P為置信限，N為模擬分裝瓶數(shù)或批量，p＝0.1％（污染概率）另一種計(jì)算方法是更為精確的二項(xiàng)式計(jì)算公式，即P(X>0)=1－（1－X）N其中，P為置信限，N為模擬分裝瓶數(shù)或批量，X=0.1％（污染概率）25995%347259里，從哪里開(kāi)始到哪里結(jié)束？程度。35、如何進(jìn)行容器密封性驗(yàn)證？如靈敏度較高、使用方便、檢測(cè)迅速及低成本等。在產(chǎn)品有效期內(nèi)，均可使用物3637、密封性驗(yàn)證中，如鋁桶的驗(yàn)證，用培養(yǎng)基驗(yàn)證無(wú)法觀察結(jié)果，是否有其他方法？答：對(duì)于無(wú)菌原料的容器，建議嘗試物理的方法，如鹽水滲入法。38、密封性驗(yàn)證一般每次取樣量是多少，再驗(yàn)證的周期是多少？10證應(yīng)考察有效期內(nèi)不同時(shí)間的密閉性，再驗(yàn)證一般一年可進(jìn)行一次。39產(chǎn)品無(wú)要求，是否不需進(jìn)行密封性驗(yàn)證？答：對(duì)大容量注射劑、小容量注射劑、粉針劑均應(yīng)進(jìn)行容器密封性驗(yàn)證。40、容器密封性測(cè)試是否在安瓿、西林瓶等所有注射劑型中都必須完成？測(cè)方法。41、無(wú)菌過(guò)濾驗(yàn)證目前國(guó)內(nèi)廠家能夠做到什么水平？哪種水平是國(guó)家認(rèn)可的？2008110（二）制備工藝第4點(diǎn)有關(guān)凍干粉針劑的要求，除菌過(guò)必要時(shí)尚需要進(jìn)行濾膜的微生物截留量測(cè)試。出的階段性的要求，還將隨著對(duì)此問(wèn)題的認(rèn)知而不斷完善。42的檢測(cè)報(bào)告是有效的？不同，應(yīng)該對(duì)分別進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)，反之則不需要。才能判定供應(yīng)商檢測(cè)報(bào)告的有效性。計(jì)，這也有助于增強(qiáng)判斷的準(zhǔn)確性。43何解決？濾芯是不同生產(chǎn)批號(hào)的，就更好。質(zhì)的濾膜，使其對(duì)主藥成分沒(méi)有影響。44確定的壓力，專(zhuān)用儀器會(huì)自動(dòng)打印出測(cè)試結(jié)果，表明試驗(yàn)通過(guò)還是不通過(guò)。45、過(guò)濾器驗(yàn)證哪些是生產(chǎn)企業(yè)必須進(jìn)行的？哪些是供應(yīng)商提供的？如何理解？如何進(jìn)行此項(xiàng)試驗(yàn)更能保證驗(yàn)證的科學(xué)價(jià)值？答：兩者并不矛盾。過(guò)濾器生產(chǎn)廠家都應(yīng)有自己的實(shí)驗(yàn)室，如Pall和Millipore，可以利用藥品生產(chǎn)企業(yè)提供的藥液，選擇合適的過(guò)濾器并確定實(shí)際生產(chǎn)中的過(guò)濾參數(shù)，并在這些參數(shù)范圍內(nèi)進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)。46、過(guò)濾器使用前后起泡點(diǎn)測(cè)試中，使用以后是用注射用水沖洗后測(cè)試好，還是直接測(cè)試好？定潤(rùn)濕的介質(zhì)。47還是必須兩種都作？標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。48、如何補(bǔ)救吐溫使濾膜孔徑變大，以保證藥品的安全性？根據(jù)產(chǎn)品特性選擇合適的過(guò)濾材質(zhì)并進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾驗(yàn)證。494－5定是否可以進(jìn)入下道工序。終方行，如中間產(chǎn)品的檢驗(yàn)結(jié)果不合格，則產(chǎn)品不能放行。50、生產(chǎn)環(huán)境的控制（1）應(yīng)在所用操作開(kāi)始前完成？（2）沉降碟需要暴露多長(zhǎng)時(shí)間？（3）在講義60（4）動(dòng)態(tài)沉降菌檢2-3（5）壓縮空氣的微生物檢測(cè)如何很好的進(jìn)行？（1）（2）歐盟、FDA的要求是不超430GMP修訂時(shí)可能會(huì)考慮采用國(guó)際（3）微生物狀態(tài)，一般采用接觸碟或棉拭子的方法，相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)請(qǐng)參照歐盟GMP附1FDA（4）由于微生物培養(yǎng)的特點(diǎn)，批生產(chǎn)時(shí)2-3天的時(shí)間，一旦發(fā)生超標(biāo)，需要現(xiàn)已有商品化的壓縮氣體浮游菌采樣儀。51、請(qǐng)問(wèn)如何建立警戒限或糾偏限？有無(wú)相關(guān)的計(jì)算公式或技術(shù)要求？23為行動(dòng)限度，限度設(shè)定以后，應(yīng)定期回顧評(píng)價(jià)，如每年一次。52能的原因是什么？監(jiān)測(cè)結(jié)果作出綜合的分析判斷。53的重點(diǎn)，方法和標(biāo)準(zhǔn)需要根據(jù)自己產(chǎn)品的工藝特點(diǎn)確定。54下的局百，是指在凍干過(guò)程中嗎？答：局部保護(hù)就是在軋蓋機(jī)的正上方有高效空氣過(guò)濾器，提供單向流保護(hù)，這里所說(shuō)的萬(wàn)級(jí)實(shí)際是歐盟無(wú)菌藥品附錄中的C級(jí)。98GMP產(chǎn)品。55、凍干機(jī)的濕熱滅菌怎么進(jìn)行？臭氧或甲醛熏蒸不行嗎？56（98版批號(hào)如何確定？98GM5條第3）劑以同一批藥液使用同一臺(tái)凍干設(shè)備在同一生產(chǎn)周期內(nèi)生產(chǎn)的均質(zhì)產(chǎn)品為一的生產(chǎn)批號(hào)。57QC測(cè)定？所用方法與檢測(cè)設(shè)備？線(xiàn)和離線(xiàn)（實(shí)驗(yàn)室）OrbispherePBI－Dansensor和離線(xiàn)的型號(hào)。58好？品特性，應(yīng)通過(guò)試驗(yàn)比較、確定。59法有隱患嗎（與環(huán)氧乙烷消毒比較）？答：新潔爾滅對(duì)空間消毒是無(wú)效的，而且殘留固體微粒，并不可取。生產(chǎn)空（福爾馬林兩種方法的效果取決于空氣中活性成分的濃度和存留的時(shí)間。60藝驗(yàn)證資料，若考察后可以終端滅菌，是否需更改工藝？八月十日國(guó)食藥監(jiān)辦[2007]504工作的通知”的要求。61應(yīng)的驗(yàn)證？制。62、現(xiàn)有的大部分小容量注射劑的滅菌工藝的F0值均不能達(dá)到8，對(duì)此中心有何措施或規(guī)定？答：國(guó)食藥監(jiān)[2008]71：化學(xué)藥品注射劑基本技術(shù)要求（試行F08的小容量注射劑提出了相應(yīng)的技術(shù)要求，可參照?qǐng)?zhí)行。63（瓶?jī)觯〤DE對(duì)這類(lèi)工藝變更的審評(píng)要求？4CDE對(duì)這類(lèi)工藝變更的審評(píng)與其他變更申請(qǐng)對(duì)無(wú)菌產(chǎn)品還應(yīng)關(guān)注無(wú)菌保證水平不能降低。64階段對(duì)滅菌工藝的驗(yàn)證的要求是否不同？報(bào)臨床階段不需進(jìn)行滅菌工藝驗(yàn)證，但需進(jìn)行滅菌工藝研究，并在GMP要求進(jìn)行滅菌工藝驗(yàn)證，提交相應(yīng)的驗(yàn)證資料。65、如整個(gè)生產(chǎn)系統(tǒng)的無(wú)菌驗(yàn)證已通過(guò)GMP答：生產(chǎn)系統(tǒng)的GMP668號(hào)資料重新附上，還是可以單獨(dú)報(bào)驗(yàn)證資料？8號(hào)資料的工藝研究?jī)?nèi)容可以不以及工藝驗(yàn)證資料，包括生