小白菜對(duì)缺鈣脅迫的反應(yīng)

小白菜對(duì)缺鈣脅迫的反應(yīng)摘要：通過(guò)研究缺鈣營(yíng)養(yǎng)液處理對(duì)小白菜生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明，在缺鈣脅迫下，小白菜的生長(zhǎng)受到抑制，提高了POD的活性，降低了….關(guān)鍵詞：小白菜、缺鈣、生長(zhǎng)狀況鈣是植物生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)元素之一。蔬菜對(duì)鈣的需求量不僅高，而且在整個(gè)生長(zhǎng)過(guò)程中的任何期都需要。在鈣不足的情況下，會(huì)引起作物生理失調(diào)，植株生長(zhǎng)受阻，導(dǎo)致不結(jié)實(shí)或很少結(jié)實(shí)等，同時(shí)也會(huì)引起其他生理病害的發(fā)生，嚴(yán)重地影響了蔬菜的生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)對(duì)小白菜在缺鈣脅迫后其生長(zhǎng)及膜質(zhì)氧化系統(tǒng)的影響，探討鈣在植物生長(zhǎng)中的作用。1材料與方法1.1材料培養(yǎng)及處理實(shí)驗(yàn)于2010年10月在廣西師范大學(xué)生理實(shí)驗(yàn)室舉行，分別取6六個(gè)培養(yǎng)盆，洗凈，做好標(biāo)記，每個(gè)培養(yǎng)盆中培養(yǎng)3株小白菜幼苗，實(shí)驗(yàn)組澆缺鈣培養(yǎng)液，對(duì)照組澆完全培養(yǎng)液，培養(yǎng)三個(gè)星期后對(duì)其各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。1.2測(cè)定方法1.2.1植物生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定培養(yǎng)三個(gè)星期之后，取缺鈣組和對(duì)照組的三株長(zhǎng)勢(shì)最好的小白菜進(jìn)行測(cè)定，分別測(cè)量其株高、葉寬和葉長(zhǎng)，并做好記錄。1.2.2細(xì)胞膜透性的測(cè)定選取葉齡相似的植物葉片，用自來(lái)水將供試葉片沖洗，除去表面沾污物，再用蒸餾水沖洗1?2次，用干凈紗布輕輕吸干葉片表面水分，然后剪成約1cm的小葉片，注意除掉大葉脈。將剪下的小葉片混合均勻，快速稱取鮮樣三份，每份1g，分別放入編號(hào)為A、B、C的三個(gè)燒杯中，然后分別在燒杯中加入50ml蒸餾水。用電導(dǎo)儀分別測(cè)定A、B、C三杯的電導(dǎo)率，同時(shí)測(cè)定蒸餾水（空白）的電導(dǎo)率。接著把A、B、C三杯放入沸水浴中煮沸10min中，冷卻后至室溫后再次測(cè)定電導(dǎo)率值，所測(cè)得的結(jié)果記入表格中。1.2.3丙二醛的含量測(cè)定MDA的提取稱2g葉片，加入10%三氯乙酸（TCA）2ml及少量石英砂，研磨；進(jìn)一步加入8mlTCA充分研磨，接著把勻漿液以4000r/min離心10min，其上清液即為MDA提取液。MDA顯色反應(yīng)及測(cè)定取2mlMDA提取液（對(duì)照組取2ml蒸餾水），在加2ml0.6%TBA混勻，在試管上加棉塞，置沸水中加熱15min，迅速拿出水浴鍋冷卻，以4000r/min離心15min，于波長(zhǎng)532nm和450nm下測(cè)定OD值。1.2.4過(guò)氧化物酶（POD）活性的測(cè)定POD酶液提取稱取適量植物材料剪碎（0.5?1g），加2mL酶提取緩沖液冰浴研磨成勻漿轉(zhuǎn)移到離心管（磷酸緩沖液PH為7.2，含PVP1%），3mL酶提取緩沖液沖洗研缽后一并倒入離心管，4000r/min離心15min，收集上清液，測(cè)量提取液體積（低溫分裝保存?zhèn)溆茫?。POD酶活性測(cè)定取試管1做對(duì)照組，加POD反應(yīng)混合液3mL和1mL提取緩沖液混勻在470nm下調(diào)零，試管2加POD反應(yīng)混合液3mL和1mLPOD酶液混勻每隔一分鐘測(cè)470nm下OD值并記錄。1.2.5超氧化物岐化酶（SOD）的活性測(cè)定SOD酶液提取同POD酶提取方法一樣SOD酶活性測(cè)定1.2.5.2.1顯色反應(yīng)取5支試管，分別編號(hào),（3支測(cè)定管,2支對(duì)照管）按照實(shí)驗(yàn)課本P99頁(yè)表格按順序加入試劑（3支測(cè)定管加酶液,2支對(duì)照管加緩沖液）.混勻后將1支對(duì)照管置暗處，其他各管于4000lx日光下反應(yīng)15min（要求各管受光情況一致，溫度高，時(shí)間縮短，低時(shí)延長(zhǎng)）。1.2.5.2.2SOD活性測(cè)定與計(jì)算反應(yīng)結(jié)束后，以不照光的對(duì)照管作空白進(jìn)行調(diào)零，分別測(cè)定其他各管的OD560nm吸光度。并記錄好照光對(duì)照管的吸光度（ODC）和3支測(cè)定管的吸光度（ODS）SOD活性單位：以抑制制氮藍(lán)四唑（NBT）光化還原的50%為一個(gè)酶活性單位（U）表示，課本P100頁(yè)公式計(jì)算SOD活性SOD活性（U/g.Fw.min）= （ODC-ODS）XV/0.5XODCXVSXtXm3結(jié)果與分析3.1缺鈣脅迫對(duì)小白菜生長(zhǎng)的影響小白菜在培養(yǎng)三周后的生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果來(lái)看（表1），對(duì)照組的長(zhǎng)勢(shì)比缺鈣組的長(zhǎng)勢(shì)較好。說(shuō)明了缺鈣脅迫對(duì)小白菜的生長(zhǎng)有了一定的影響，抑制了小白菜的正常生長(zhǎng)。在外表看來(lái)，兩組并沒有明顯的異同，導(dǎo)致這種現(xiàn)象的原因可能是由于培養(yǎng)的時(shí)間比較短，所以現(xiàn)象還不明顯。表1小白菜生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定\組\別指、標(biāo)\對(duì)照組平均值缺鈣組平均值株高16cm15cm14cm15cm14cm16cm12cm14cm葉寬5cm4.5cm4cm4.5cm5.5cm4cm3.2cm4.2cm葉長(zhǎng)8cm10cm9cm9cm8.5cm7.8cm6cm7.4cm3.2細(xì)胞膜透性的測(cè)定、組常溫沸水后吸光值_別空白60uQ60uQ對(duì)照組70uQ1.94mQ缺鈣組82uQ2.04mQ3.3丙二醛的含量測(cè)定波?一組對(duì)照組缺鈣組一、別532nm0.2060.131

450nm0.6760.3513.4過(guò)氧化氫酶(POD)的檢測(cè)時(shí)間OD4701min2min3minAOD470缺鈣組1.5232.0972.1550.316對(duì)照組1.0270.7961.9590.466I ，八r AOD470*VtPOD成每*舌力(U/g.Fw.min)=0.01*w*Vs*t缺鈣組POD酶活力=0.316*5/(0.01*0.5*1*3)=105.33U/g.Fw.min對(duì)照組POD酶活力=0.466*5/(0.01*0.5*1*3)=155.33U/g.Fw.min3.5超氧化物歧化酶(SOD)活性的測(cè)定\\吸光光組7、一值別ODcODs平均值缺鈣組0.6580.2960.2950.2980.290對(duì)照組1.6991.2600.9830.8420.848(ODC-ODS)*VSOD活性(U/g.Fw.min)= 0.5*ODc*Vs*t*m實(shí)驗(yàn)組SOD活性=(0.658-0.295)*/(0.5*0.658*1*15*0.5)=0.736U/g.Fw.min對(duì)照組SOD活性=(1.699-0.983)*/(0.5*1.699*1*15*0.5)=4.562U/g.Fw.min4討論4.1數(shù)據(jù)分析：4.1.1兩組數(shù)據(jù)比較缺鈣脅迫處理的白菜各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)(株高、葉寬、葉長(zhǎng))比對(duì)照組的小。其中對(duì)植株葉長(zhǎng)的差距n最為明顯。4.12在細(xì)胞膜透性結(jié)果：無(wú)論在常溫或者煮沸條件下測(cè)量，對(duì)照組的透性比