動物微生物學(xué)及免疫學(xué)第二章-細(xì)菌生理-課件

第二章細(xì)菌生理細(xì)菌的化學(xué)組成細(xì)菌的物理性狀細(xì)菌的營養(yǎng)細(xì)菌的新陳代謝細(xì)菌的生長繁殖第二章細(xì)菌生理細(xì)菌的化學(xué)組成1第一節(jié)細(xì)菌的化學(xué)組成

結(jié)合水水份（75-85%）自由水無機物干物質(zhì)

（15-25%）有機物第一節(jié)細(xì)菌的化學(xué)組成2第二節(jié)細(xì)菌的物理特性比面積大光學(xué)性質(zhì)多相膠體性質(zhì)滲透壓帶電現(xiàn)象布朗氏運動第二節(jié)細(xì)菌的物理特性比面積大3第三節(jié)細(xì)菌的營養(yǎng)一、營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與運轉(zhuǎn)擴散：物質(zhì)由高濃度向低濃度方向的運輸方式。分為：單純擴散易化擴散第三節(jié)細(xì)菌的營養(yǎng)一、營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與運轉(zhuǎn)4主動運輸：物質(zhì)由低濃度向高濃度方向的運輸方式。它需要酶的作用，如滲透酶各周圍間隙蛋白，在運輸大分子物質(zhì)（糖、氨基酸、無機離子）中起著重要作用。運輸示意圖為：主動運輸：物質(zhì)由低濃度向高濃度5

主支運輸轉(zhuǎn)動方式

營養(yǎng)物質(zhì)釋放營養(yǎng)物質(zhì)滲透酶載體復(fù)合物細(xì)胞內(nèi)周圍間隙蛋白載體回位主支運輸轉(zhuǎn)動方式6二、細(xì)菌的營養(yǎng)需要水分—新陳代謝所需媒介。含碳化合物—用來合成菌體的糖、蛋白質(zhì)、核酸等，亦作為能量來源。含氮化合物—用來合成菌體的各種含氮化合物。二、細(xì)菌的營養(yǎng)需要水分—新陳代謝所需媒介。7礦物質(zhì)—在細(xì)菌代謝中起著酶激活物的作用，用來構(gòu)成酶的輔基，對于維持原生質(zhì)膠體狀態(tài)和細(xì)胞滲透性具有較大作用。Vit—在代謝中起重要作用（如B簇Vit起著輔酶或輔基的作用。礦物質(zhì)—在細(xì)菌代謝中起著酶激活物的作用，用來構(gòu)成酶的輔基，對8三、細(xì)菌的營養(yǎng)類型自養(yǎng)型這類細(xì)菌酶系統(tǒng)完善，能利用無機碳（CO2、C、H2CO3）合成菌體有機碳。分為光能和化能自養(yǎng)型兩類。異養(yǎng)型這類細(xì)菌酶系統(tǒng)不完善，只能利用有機碳作為養(yǎng)料。分為光能異養(yǎng)菌和化能異養(yǎng)菌兩大類。絕大多數(shù)病原菌都屬于化能異養(yǎng)菌。三、細(xì)菌的營養(yǎng)類型自養(yǎng)型這類細(xì)菌酶系統(tǒng)完善，能利用無機9第四節(jié)細(xì)菌的新陳代謝一、細(xì)菌的酶胞外酶、胞膜酶、固有酶、適應(yīng)酶與醫(yī)學(xué)有關(guān)的酶類：卵磷脂酶、透明質(zhì)酸酶、膠原酶、溶纖蛋白酶、凝血漿酶、溶血素、尿素酶第四節(jié)細(xì)菌的新陳代謝一、細(xì)菌的酶10二、細(xì)菌的呼吸1、細(xì)菌呼吸的概念：細(xì)菌借助于體內(nèi)的酶類，從物質(zhì)的氧化還原過程中獲得它所需要的能量的過程，稱細(xì)菌的呼吸。ATP二、細(xì)菌的呼吸1、細(xì)菌呼吸的概念：ATP112、細(xì)菌呼吸類型：專性需氧菌微需氧菌兼性厭氧菌厭氧菌專性厭氧菌2、細(xì)菌呼吸類型：專性需氧菌12各型細(xì)菌呼吸特點專性需氧菌：需充足O2，生長于表面.。微需氧菌：需低濃度O2，生長于表面以下數(shù)mm處。兼性厭氧菌：生長于整個培養(yǎng)基中。厭氧菌和專性厭氧菌：生長于培養(yǎng)基底部。各型細(xì)菌呼吸特點專性需氧菌：需充足O2，生長于表面.。133、厭氧菌培養(yǎng)的原理1、厭氧菌缺乏細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶二者具有較高的氧化還原電勢，能氧化高電勢的化合物產(chǎn)生能量。在有氧環(huán)境中，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)多為氧化型狀態(tài)，氧化還原電勢隨之升高。故厭氧菌不能利用這些營養(yǎng)物質(zhì)，造成能量不足而不能生長。3、厭氧菌培養(yǎng)的原理1、厭氧菌缺乏細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶142、缺乏過氧化氫酶和過氧化物酶

細(xì)菌在有氧環(huán)境的代謝中常產(chǎn)生H2O2，這是一種氧化劑，有殺菌作用，缺乏二酶，故厭氧菌不能分解H2O2，而不能生長。3、有氧環(huán)境中－SH被氧化－SH是菌體許多酶類的輔酶（如CoA、琥珀酸脫氫酶、氨基酸轉(zhuǎn)移酶等），故厭氧菌不能生長。2、缺乏過氧化氫酶和過氧化物酶細(xì)菌在有氧環(huán)境的代謝中常產(chǎn)15三、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物（一）分解產(chǎn)物的檢測1．糖代謝測定糖發(fā)酵試驗：多糖經(jīng)胞外酶分解為雙糖單糖再經(jīng)胞內(nèi)酶分解為有機酸、醇、CO2和H2O。細(xì)菌分解糖的能力是不同的。三、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物（一）分解產(chǎn)物的檢測16

⊕—產(chǎn)酸不產(chǎn)氣

—產(chǎn)酸產(chǎn)氣

－—陰性動物微生物學(xué)及免疫學(xué)第二章-細(xì)菌生理-課件17VP試驗：大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖⊕，為區(qū)分兩菌可采用VP試驗及甲基紅試驗。產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫羧、氧化（在堿性溶液中）生成二乙酰，后者可與含胍基的化合物反應(yīng)，生成紅色化合物，稱VP陽性。VP試驗：大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖⊕，為區(qū)分兩菌可采用18甲基紅試驗：產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后形成中性產(chǎn)物，培養(yǎng)液pH＞5.4，甲基紅指示劑呈桔黃色，為甲基紅試驗陰性，大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，培養(yǎng)液呈酸性pH＜5.4，指示劑甲基紅呈紅色，稱甲基紅試驗陽性。甲基紅試驗：產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后形成中性產(chǎn)物，培養(yǎng)液pH＞19枸櫞酸鹽利用試驗：能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌，分解枸櫞酸鹽生成碳酸鹽，同時分解培養(yǎng)基的銨鹽生成氨，由此使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，使指示劑溴麝香草酚藍(lán)（BTB）由淡綠轉(zhuǎn)為深藍(lán)，此為枸櫞酸鹽利用試驗陽性。枸櫞酸鹽利用試驗：能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌202、蛋白質(zhì)代謝測定H2S試驗：含S氨基酸菌產(chǎn)生H2S與基中醋酸鉛PbS黑色沉淀物。吲哚試驗：色氨酸菌吲哚明膠試驗：明膠菌液化紫乳試驗：酪蛋白菌胨化2、蛋白質(zhì)代謝測定H2S試驗：21（二）合成代謝產(chǎn)物及臨床意義熱原質(zhì)毒素與酶色素抗生素細(xì)菌素（二）合成代謝產(chǎn)物及臨床意義熱原質(zhì)22第五節(jié)細(xì)菌的生長繁殖一、細(xì)菌生長繁殖的條件1、營養(yǎng)物質(zhì)供給細(xì)菌適量的H2O、糖類、蛋白質(zhì)或氨基酸、無機鹽及Vit等。2、溫度細(xì)菌生長的最適溫度隨菌種不同而異，一般病原菌要求與體溫相同，如牛羊病原菌需37℃，魚類病原菌則要求22℃。第五節(jié)細(xì)菌的生長繁殖一、細(xì)菌生長繁殖的條件233、酸堿度（PH）PH對細(xì)菌發(fā)育影響很大，大多數(shù)病原菌最適酸堿度為PH7.2-7.6，少數(shù)細(xì)菌可在特殊PH條件下生長，如霍亂弧菌在PH6.4-9.6時均能生長（最適為7.8-8.0），乳酸桿菌在PH3.4-4.5時可生長，霉菌則在PH3.0-6,0生長良好。4、滲透壓細(xì)菌只有在等滲環(huán)境中才能生存。若環(huán)境滲透壓過高，則菌體被脫水造成質(zhì)壁分離；若環(huán)境滲透壓過低，則細(xì)菌臌脹破裂。5、氣體O2、CO2、N3、酸堿度（PH）PH對細(xì)菌發(fā)育影響很大，大多數(shù)病原菌24二、細(xì)菌的繁殖方式和速度多數(shù)細(xì)菌為橫分裂式繁殖（1→2→22→23→2?）。少數(shù)細(xì)菌如酵母進行出芽繁殖。近年來，電子顯微鏡觀察可見，某些細(xì)菌也存在有性結(jié)合。絕大多數(shù)細(xì)菌繁殖速度為15-30min一代。但菌種不同其繁殖速度亦不同，如大腸桿菌20min繁殖一代，結(jié)核桿菌較慢，需0.5-18h才能繁殖一代。二、細(xì)菌的繁殖方式和速度多數(shù)細(xì)菌為橫分裂式繁殖（1→2→225三、細(xì)菌群體的人工培養(yǎng)用人工的方法，將細(xì)菌從自然界、動物體或病料中分離出來，其目的是為了研究細(xì)菌的形態(tài)、生理特性、生物學(xué)特性或制取細(xì)菌的某種代謝產(chǎn)物等。這對于傳染病的診斷、流行病學(xué)調(diào)查、菌苗制備、微生物的工業(yè)生產(chǎn)都具有重要意義。為此，了解和掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的有關(guān)基礎(chǔ)知識是十分必要的。三、細(xì)菌群體的人工培養(yǎng)用人工的方法，將細(xì)菌從自然界、動物體或26（一）培養(yǎng)基的種類和常用培養(yǎng)基培養(yǎng)基的概念：將細(xì)菌所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)按一定比例混合在一起，并調(diào)節(jié)到適宜的PH，這種人工配制的適合細(xì)菌生長繁殖的細(xì)菌營養(yǎng)物，稱為培養(yǎng)基。培養(yǎng)基必需符合以下條件：營養(yǎng)物適宜的PH環(huán)境溫度和滲透壓無菌（一）培養(yǎng)基的種類和常用培養(yǎng)基培養(yǎng)基的概念：培養(yǎng)基必需符合以27培養(yǎng)基種類

1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有培養(yǎng)一般細(xì)菌的最基本成分。又分為：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三種。在液體（肉湯）培養(yǎng)基中，加入2-3%瓊脂即為固體培養(yǎng)基，加入0.2-0.5%瓊脂即為半固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基種類1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基282、營養(yǎng)培養(yǎng)基于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入高營養(yǎng)物質(zhì)如葡萄糖、血液、血清、腹水、生長因子等，以滿足營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長需要。有的細(xì)菌還需加入特殊物質(zhì)，如結(jié)核桿菌需加入雞蛋清、馬鈴薯、甘油等才能良好生長2、營養(yǎng)培養(yǎng)基于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入高營養(yǎng)物質(zhì)如葡萄293、選擇培養(yǎng)基利用細(xì)菌對某種物質(zhì)敏感程度的不同，可在培養(yǎng)基中加入抑制某些細(xì)菌生長的藥物，而選擇性地讓欲分離的細(xì)菌旺盛生長的培養(yǎng)基如膽鹽和薔薇色酸可以選擇性地抑制G+菌的生長，而不影響Gˉ菌的生長。在培養(yǎng)基中加入二藥后可選擇性地分離出腸道桿菌。3、選擇培養(yǎng)基利用細(xì)菌對某種物質(zhì)敏感程度的不同，可30

4、鑒別培養(yǎng)基

利用細(xì)菌分解底物及其代謝產(chǎn)物的不同，可在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)和指示劑，即制為鑒別培養(yǎng)基，以測定不同細(xì)菌的生化反應(yīng)。5、厭氣培養(yǎng)基將培養(yǎng)基與空氣及氧隔離，或降低培養(yǎng)基中的氧化還原電勢，供厭氧菌生長。4、鑒別培養(yǎng)基31除去培養(yǎng)基中氧的方法：a、降低培養(yǎng)基中氧化還原電勢：如肝湯或加入谷胱甘肽、硫基醋酸鹽等。b、化合去氧法：如焦性沒石子酸、好氧厭氧菌混合、種子發(fā)芽等。

c、隔絕阻氧法：如液體石臘等。除去培養(yǎng)基中氧的方法：a、降低培養(yǎng)基中氧化還原電勢：如肝湯32（二）細(xì)菌群體的生長現(xiàn)象劃線接種分點接種涂抹接種液體接種穿剌接種傾注接種注射接種活體接種細(xì)菌的接種方法（二）細(xì)菌群體的生長現(xiàn)象細(xì)菌的接種方法33動物微生物學(xué)及免疫學(xué)第二章-細(xì)菌生理-課件341、細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象：

觀察細(xì)菌在平板上的菌落特征：形態(tài)、大小、邊緣、表面構(gòu)造（濕潤度和光滑度）、隆起度、透明度、顏色等，及在血平板上的溶血現(xiàn)象（β溶血、α溶血）。1、細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象：35菌落特征菌落特征362、細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有鞭毛的細(xì)菌，沿穿剌線呈模糊羽毛狀生長。無鞭毛的細(xì)菌，沿穿剌線呈清晰的線狀生長。2、細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有鞭毛的細(xì)菌，沿穿剌線呈模373、細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象觀察肉湯培養(yǎng)物的混濁度、管底沉淀、肉湯表面菌膜或菌環(huán)，以及有無汽泡等。⑸⑹⑺⑻⑴⑵⑶⑷3、細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象觀察肉湯培養(yǎng)物的混濁度、管底383、細(xì)菌群體的生長曲線將一定數(shù)量的細(xì)菌接種在適宜的液體培養(yǎng)基中，在適宜溫度下孵育，每隔一定的時間取樣計算，如以時間為橫坐標(biāo)，細(xì)菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo)，則可繪制出一條曲線，稱細(xì)菌生長曲線。細(xì)菌生長曲線由四個時期組成：3、細(xì)菌群體的生長曲線將一定數(shù)量的細(xì)菌接種在適宜的液體培養(yǎng)基39：遲緩期：細(xì)菌進入新環(huán)境，數(shù)目不增加，一般需2-6h。對數(shù)生長期：細(xì)菌代謝最旺盛繁殖快，細(xì)菌數(shù)以對數(shù)的速度增加，細(xì)菌抵抗力最強病原菌毒力最強，形態(tài)染色特征典型。此期需6-10h。穩(wěn)定期：細(xì)菌數(shù)目保持恒定不變，G?菌可變?yōu)镚ˉ菌。此期持續(xù)8h。衰退期：活菌數(shù)下降。

：遲緩期：細(xì)菌進入新環(huán)境，40第二章細(xì)菌生理細(xì)菌的化學(xué)組成細(xì)菌的物理性狀細(xì)菌的營養(yǎng)細(xì)菌的新陳代謝細(xì)菌的生長繁殖第二章細(xì)菌生理細(xì)菌的化學(xué)組成41第一節(jié)細(xì)菌的化學(xué)組成

結(jié)合水水份（75-85%）自由水無機物干物質(zhì)

（15-25%）有機物第一節(jié)細(xì)菌的化學(xué)組成42第二節(jié)細(xì)菌的物理特性比面積大光學(xué)性質(zhì)多相膠體性質(zhì)滲透壓帶電現(xiàn)象布朗氏運動第二節(jié)細(xì)菌的物理特性比面積大43第三節(jié)細(xì)菌的營養(yǎng)一、營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與運轉(zhuǎn)擴散：物質(zhì)由高濃度向低濃度方向的運輸方式。分為：單純擴散易化擴散第三節(jié)細(xì)菌的營養(yǎng)一、營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與運轉(zhuǎn)44主動運輸：物質(zhì)由低濃度向高濃度方向的運輸方式。它需要酶的作用，如滲透酶各周圍間隙蛋白，在運輸大分子物質(zhì)（糖、氨基酸、無機離子）中起著重要作用。運輸示意圖為：主動運輸：物質(zhì)由低濃度向高濃度45

主支運輸轉(zhuǎn)動方式

營養(yǎng)物質(zhì)釋放營養(yǎng)物質(zhì)滲透酶載體復(fù)合物細(xì)胞內(nèi)周圍間隙蛋白載體回位主支運輸轉(zhuǎn)動方式46二、細(xì)菌的營養(yǎng)需要水分—新陳代謝所需媒介。含碳化合物—用來合成菌體的糖、蛋白質(zhì)、核酸等，亦作為能量來源。含氮化合物—用來合成菌體的各種含氮化合物。二、細(xì)菌的營養(yǎng)需要水分—新陳代謝所需媒介。47礦物質(zhì)—在細(xì)菌代謝中起著酶激活物的作用，用來構(gòu)成酶的輔基，對于維持原生質(zhì)膠體狀態(tài)和細(xì)胞滲透性具有較大作用。Vit—在代謝中起重要作用（如B簇Vit起著輔酶或輔基的作用。礦物質(zhì)—在細(xì)菌代謝中起著酶激活物的作用，用來構(gòu)成酶的輔基，對48三、細(xì)菌的營養(yǎng)類型自養(yǎng)型這類細(xì)菌酶系統(tǒng)完善，能利用無機碳（CO2、C、H2CO3）合成菌體有機碳。分為光能和化能自養(yǎng)型兩類。異養(yǎng)型這類細(xì)菌酶系統(tǒng)不完善，只能利用有機碳作為養(yǎng)料。分為光能異養(yǎng)菌和化能異養(yǎng)菌兩大類。絕大多數(shù)病原菌都屬于化能異養(yǎng)菌。三、細(xì)菌的營養(yǎng)類型自養(yǎng)型這類細(xì)菌酶系統(tǒng)完善，能利用無機49第四節(jié)細(xì)菌的新陳代謝一、細(xì)菌的酶胞外酶、胞膜酶、固有酶、適應(yīng)酶與醫(yī)學(xué)有關(guān)的酶類：卵磷脂酶、透明質(zhì)酸酶、膠原酶、溶纖蛋白酶、凝血漿酶、溶血素、尿素酶第四節(jié)細(xì)菌的新陳代謝一、細(xì)菌的酶50二、細(xì)菌的呼吸1、細(xì)菌呼吸的概念：細(xì)菌借助于體內(nèi)的酶類，從物質(zhì)的氧化還原過程中獲得它所需要的能量的過程，稱細(xì)菌的呼吸。ATP二、細(xì)菌的呼吸1、細(xì)菌呼吸的概念：ATP512、細(xì)菌呼吸類型：專性需氧菌微需氧菌兼性厭氧菌厭氧菌專性厭氧菌2、細(xì)菌呼吸類型：專性需氧菌52各型細(xì)菌呼吸特點專性需氧菌：需充足O2，生長于表面.。微需氧菌：需低濃度O2，生長于表面以下數(shù)mm處。兼性厭氧菌：生長于整個培養(yǎng)基中。厭氧菌和專性厭氧菌：生長于培養(yǎng)基底部。各型細(xì)菌呼吸特點專性需氧菌：需充足O2，生長于表面.。533、厭氧菌培養(yǎng)的原理1、厭氧菌缺乏細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶二者具有較高的氧化還原電勢，能氧化高電勢的化合物產(chǎn)生能量。在有氧環(huán)境中，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)多為氧化型狀態(tài)，氧化還原電勢隨之升高。故厭氧菌不能利用這些營養(yǎng)物質(zhì)，造成能量不足而不能生長。3、厭氧菌培養(yǎng)的原理1、厭氧菌缺乏細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶542、缺乏過氧化氫酶和過氧化物酶

細(xì)菌在有氧環(huán)境的代謝中常產(chǎn)生H2O2，這是一種氧化劑，有殺菌作用，缺乏二酶，故厭氧菌不能分解H2O2，而不能生長。3、有氧環(huán)境中－SH被氧化－SH是菌體許多酶類的輔酶（如CoA、琥珀酸脫氫酶、氨基酸轉(zhuǎn)移酶等），故厭氧菌不能生長。2、缺乏過氧化氫酶和過氧化物酶細(xì)菌在有氧環(huán)境的代謝中常產(chǎn)55三、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物（一）分解產(chǎn)物的檢測1．糖代謝測定糖發(fā)酵試驗：多糖經(jīng)胞外酶分解為雙糖單糖再經(jīng)胞內(nèi)酶分解為有機酸、醇、CO2和H2O。細(xì)菌分解糖的能力是不同的。三、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物（一）分解產(chǎn)物的檢測56

⊕—產(chǎn)酸不產(chǎn)氣

—產(chǎn)酸產(chǎn)氣

－—陰性動物微生物學(xué)及免疫學(xué)第二章-細(xì)菌生理-課件57VP試驗：大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖⊕，為區(qū)分兩菌可采用VP試驗及甲基紅試驗。產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫羧、氧化（在堿性溶液中）生成二乙酰，后者可與含胍基的化合物反應(yīng)，生成紅色化合物，稱VP陽性。VP試驗：大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖⊕，為區(qū)分兩菌可采用58甲基紅試驗：產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后形成中性產(chǎn)物，培養(yǎng)液pH＞5.4，甲基紅指示劑呈桔黃色，為甲基紅試驗陰性，大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，培養(yǎng)液呈酸性pH＜5.4，指示劑甲基紅呈紅色，稱甲基紅試驗陽性。甲基紅試驗：產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后形成中性產(chǎn)物，培養(yǎng)液pH＞59枸櫞酸鹽利用試驗：能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌，分解枸櫞酸鹽生成碳酸鹽，同時分解培養(yǎng)基的銨鹽生成氨，由此使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，使指示劑溴麝香草酚藍(lán)（BTB）由淡綠轉(zhuǎn)為深藍(lán)，此為枸櫞酸鹽利用試驗陽性。枸櫞酸鹽利用試驗：能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌602、蛋白質(zhì)代謝測定H2S試驗：含S氨基酸菌產(chǎn)生H2S與基中醋酸鉛PbS黑色沉淀物。吲哚試驗：色氨酸菌吲哚明膠試驗：明膠菌液化紫乳試驗：酪蛋白菌胨化2、蛋白質(zhì)代謝測定H2S試驗：61（二）合成代謝產(chǎn)物及臨床意義熱原質(zhì)毒素與酶色素抗生素細(xì)菌素（二）合成代謝產(chǎn)物及臨床意義熱原質(zhì)62第五節(jié)細(xì)菌的生長繁殖一、細(xì)菌生長繁殖的條件1、營養(yǎng)物質(zhì)供給細(xì)菌適量的H2O、糖類、蛋白質(zhì)或氨基酸、無機鹽及Vit等。2、溫度細(xì)菌生長的最適溫度隨菌種不同而異，一般病原菌要求與體溫相同，如牛羊病原菌需37℃，魚類病原菌則要求22℃。第五節(jié)細(xì)菌的生長繁殖一、細(xì)菌生長繁殖的條件633、酸堿度（PH）PH對細(xì)菌發(fā)育影響很大，大多數(shù)病原菌最適酸堿度為PH7.2-7.6，少數(shù)細(xì)菌可在特殊PH條件下生長，如霍亂弧菌在PH6.4-9.6時均能生長（最適為7.8-8.0），乳酸桿菌在PH3.4-4.5時可生長，霉菌則在PH3.0-6,0生長良好。4、滲透壓細(xì)菌只有在等滲環(huán)境中才能生存。若環(huán)境滲透壓過高，則菌體被脫水造成質(zhì)壁分離；若環(huán)境滲透壓過低，則細(xì)菌臌脹破裂。5、氣體O2、CO2、N3、酸堿度（PH）PH對細(xì)菌發(fā)育影響很大，大多數(shù)病原菌64二、細(xì)菌的繁殖方式和速度多數(shù)細(xì)菌為橫分裂式繁殖（1→2→22→23→2?）。少數(shù)細(xì)菌如酵母進行出芽繁殖。近年來，電子顯微鏡觀察可見，某些細(xì)菌也存在有性結(jié)合。絕大多數(shù)細(xì)菌繁殖速度為15-30min一代。但菌種不同其繁殖速度亦不同，如大腸桿菌20min繁殖一代，結(jié)核桿菌較慢，需0.5-18h才能繁殖一代。二、細(xì)菌的繁殖方式和速度多數(shù)細(xì)菌為橫分裂式繁殖（1→2→265三、細(xì)菌群體的人工培養(yǎng)用人工的方法，將細(xì)菌從自然界、動物體或病料中分離出來，其目的是為了研究細(xì)菌的形態(tài)、生理特性、生物學(xué)特性或制取細(xì)菌的某種代謝產(chǎn)物等。這對于傳染病的診斷、流行病學(xué)調(diào)查、菌苗制備、微生物的工業(yè)生產(chǎn)都具有重要意義。為此，了解和掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的有關(guān)基礎(chǔ)知識是十分必要的。三、細(xì)菌群體的人工培養(yǎng)用人工的方法，將細(xì)菌從自然界、動物體或66（一）培養(yǎng)基的種類和常用培養(yǎng)基培養(yǎng)基的概念：將細(xì)菌所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)按一定比例混合在一起，并調(diào)節(jié)到適宜的PH，這種人工配制的適合細(xì)菌生長繁殖的細(xì)菌營養(yǎng)物，稱為培養(yǎng)基。培養(yǎng)基必需符合以下條件：營養(yǎng)物適宜的PH環(huán)境溫度和滲透壓無菌（一）培養(yǎng)基的種類和常用培養(yǎng)基培養(yǎng)基的概念：培養(yǎng)基必需符合以67培養(yǎng)基種類

1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有培養(yǎng)一般細(xì)菌的最基本成分。又分為：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三種。在液體（肉湯）培養(yǎng)基中，加入2-3%瓊脂即為固體培養(yǎng)基，加入0.2-0.5%瓊脂即為半固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基種類1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基682、營養(yǎng)培養(yǎng)基于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入高營養(yǎng)物質(zhì)如葡萄糖、血液、血清、腹水、生長因子等，以滿足營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長需要。有的細(xì)菌還需加入特殊物質(zhì)，如結(jié)核桿菌需加入雞蛋清、馬鈴薯、甘油等才能良好生長2、營養(yǎng)培養(yǎng)基于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入高營養(yǎng)物質(zhì)如葡萄693、選擇培養(yǎng)基利用細(xì)菌對某種物質(zhì)敏感程度的不同，可在培養(yǎng)基中加入抑制某些細(xì)菌生長的藥物，而選擇性地讓欲分離的細(xì)菌旺盛生長的培養(yǎng)基如膽鹽和薔薇色酸可以選擇性地抑制G+菌的生長，而不影響Gˉ菌的生長。在培養(yǎng)基中加入二藥后可選擇性地分離出腸道桿菌。3、選擇培養(yǎng)基利用細(xì)菌對某種物質(zhì)敏感程度的不同，可70

4、鑒別培養(yǎng)基

利用細(xì)菌分解底物及其代謝產(chǎn)物的不同，可在培養(yǎng)基