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文檔簡介
動物基因組DNA的分離實驗目的:通過本實驗了解并掌握提取基因組DNA的原理和步驟。分離純化核酸總的原則:①應保證核酸一級結(jié)構(gòu)的完整性②排除其它分子的污染。核酸純化應達到的要求:①核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子;②排除其它核酸分子的污染;③其它生物大分子的污染應降低到最低程度。DNA提取的基本步驟1.材料準備2.破碎細胞或包膜-內(nèi)容物釋放3.核酸分離、純化4.沉淀或吸附核酸,并進一步去除雜質(zhì)5.核酸溶解在適量緩沖液或水中實驗原理ⅠSDS能裂解質(zhì)膜,使染色體離析,蛋白變性,釋放出核酸。EDTA可抑制DNA酶的活性。蛋白酶K具有廣泛的切割活性,可消化細胞,降解蛋白質(zhì)。
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